微生物发酵工艺优化技师考试试卷及答案

微生物发酵工艺优化技师考试试卷及答案一、填空题（每题1分，共10分）1.微生物发酵常用碳源分为速效碳源和______碳源。2.培养基灭菌常用方法是______灭菌和过滤除菌。3.发酵液溶解氧浓度通常用______表示。4.菌种保藏常用方法有斜面保藏、______保藏和冷冻干燥保藏。5.发酵pH调节常用酸碱物质有______和氨水。6.发酵搅拌主要作用是增加______传递。7.微生物生长最适温度比产物合成最适温度______（填“高”或“低”）。8.发酵罐主要部件包括搅拌器、______和冷却装置。9.培养基生长因子通常含维生素、氨基酸和______。10.发酵终点判断主要依据是______浓度和菌体生长情况。答案：1.迟效2.高压蒸汽3.DO4.甘油5.硫酸（或氢氧化钠）6.溶解氧7.高8.通气装置9.核苷酸（或微量元素）10.产物二、单项选择题（每题2分，共20分）1.下列属于迟效碳源的是？A.葡萄糖B.蔗糖C.淀粉D.果糖2.高压蒸汽灭菌温度时间通常是？A.100℃/30minB.121℃/15-30minC.115℃/20minD.130℃/10min3.溶解氧不足时，无效措施是？A.增搅拌转速B.提通气量C.降罐压D.控补料速率4.保藏时间最长的菌种方法是？A.斜面B.甘油C.冷冻干燥D.液体石蜡5.发酵pH下降时常用调节物质是？A.盐酸B.硫酸C.氨水D.磷酸6.微生物对数期特点是？A.生长速率0B.速率恒定C.产物大量合成D.菌体死亡7.发酵罐冷却装置常用？A.夹套B.盘管C.喷淋D.以上都是8.属于生长因子的是？A.葡萄糖B.尿素C.维生素B1D.氯化钠9.产物浓度不再增加时应？A.继续发酵B.终止发酵C.增补料D.提温度10.培养基无菌检查方法是？A.平板划线B.稀释涂布C.显微镜观察D.以上都是答案：1.C2.B3.C4.C5.C6.B7.D8.C9.B10.D三、多项选择题（每题2分，共20分）1.发酵培养基组成包括？A.碳源B.氮源C.生长因子D.无机盐2.发酵关键环境因素有？A.温度B.pHC.溶解氧D.搅拌转速3.菌种选育常用方法有？A.自然选育B.诱变育种C.基因工程D.细胞融合4.补料发酵的作用是？A.延长周期B.提产物产量C.避代谢阻遏D.调pH5.速效碳源包括？A.葡萄糖B.蔗糖C.淀粉D.麦芽糖6.发酵通气装置包括？A.空气分布器B.搅拌器C.消泡器D.过滤器7.菌种保藏原则是？A.保活力B.防污染C.减变异D.增产物8.发酵pH变化原因有？A.碳源产酸B.氮源产氨C.菌体自溶D.产物合成9.溶解氧检测方法有？A.极谱法B.荧光法C.化学法D.显微镜观察10.发酵终点判断指标有？A.产物浓度B.残糖量C.菌体浓度D.pH答案：1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.ABCD5.ABD6.AD7.ABC8.ABCD9.AB10.ABCD四、判断题（每题2分，共20分）1.葡萄糖属于迟效碳源。（×）2.高压蒸汽灭菌需排尽冷空气。（√）3.发酵溶解氧越高越好。（×）4.甘油保藏菌种温度通常-20℃。（√）5.发酵pH调节只能用酸碱物质。（×）6.稳定期菌体产物大量合成。（√）7.搅拌器仅起混合作用。（×）8.生长因子微生物自身不能合成。（√）9.发酵终点仅看产物浓度。（×）10.培养基灭菌后需无菌检查。（√）五、简答题（每题5分，共20分）1.简述发酵培养基设计基本原则。答案：需遵循5原则：①满足生长需求，提供碳氮源、无机盐、生长因子；②利于产物合成，避免葡萄糖效应等代谢阻遏；③经济合理，选玉米粉、豆粕等廉价原料；④便于下游分离，减少杂质；⑤适配工艺，黏度适中利于通气搅拌。2.简述溶解氧的影响及调控措施。答案：DO不足会抑制菌体呼吸和产物合成，过高损伤菌体。调控：①通气：增通气量、流速；②搅拌：提转速、优化搅拌器；③罐压：适当提高增加氧溶解度；④补料：控碳源速率避免耗氧过快；⑤消泡：减少消泡剂用量。3.简述菌种保藏常用方法及适用范围。答案：①斜面保藏：短期（1-6月），4℃保存；②甘油保藏：中短期（6-12月），-20℃；③冷冻干燥：长期（数年），真空密封；④液体石蜡：需氧菌短期，4℃隔绝空气。4.简述发酵终点判断主要依据。答案：综合5指标：①产物浓度达工艺要求且稳定；②残糖基本耗尽；③菌体浓度稳定或下降；④pH稳定或出现变化；⑤副产物不再增加。六、讨论题（每题5分，共10分）1.讨论如何通过补料优化发酵产物产量？答案：补料优化需抓3点：①时机：对数期后期或产物合成前期开始；②种类：补前体（如抗生素前体）、生长因子，避速效碳源阻遏；③速率：流加（恒定/指数速率）维持关键成分稳定。例：青霉素发酵补苯乙酸前体，产量提升30%以上。2.讨论发酵pH波动原因及综合调控策略