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第一章发酵工程第二周·周末小测卷第一章发酵工程第二周·周末小测卷考查范围:无菌技术、微生物的分离、纯化和培养一、选择题:本题共15小题,每小题3分,共45分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的。1.在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中加入琼脂这一理想的凝固剂,下列关于琼脂的说法错误的是()A.不被所培养的微生物分解利用,对所培养的微生物无毒害作用B.在微生物生长温度范围内保持固体状态C.琼脂凝固点低,利于微生物的生长D.琼脂在灭菌过程中不会被破坏,透明度好,凝固力强2.无菌技术是微生物培养中的关键技术之一,主要包括消毒和灭菌。下列关于无菌技术的叙述,错误的是()A.生物消毒法可以杀死物体内部包括芽孢和孢子在内的所有微生物B.常用的消毒方法有加热消毒、化学药物消毒、紫外线消毒等C.常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌等D.为避免周围环境中微生物的污染,消毒、灭菌后的操作应在超净工作台内进行3.泡菜汁中乳酸菌的分离与计数可采用稀释涂布平板法。下列叙述错误的是()A.培养基要维持正常的pH,一般应在灭菌前调pHB.完成接种后,培养乳酸菌的平板需要放置在无氧环境下培养C.用稀释涂布平板法计数时,需将泡菜汁中的乳酸菌稀释至30~300个/mLD.用稀释涂布平板法统计的活菌数目可能会比用细菌计数板统计的数目少4.从种植草莓的土壤中分离致病菌,简易流程如下:制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是()A.制备的培养基可用紫外线照射进行灭菌B.将土样加入无菌水混匀,梯度稀释后取悬液加入平板并涂布C.连续划线时,接上次划线的起始端开始划线D.鉴定后的致病菌,可接种在斜面培养基上,并在室温下长期保存5.灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是()A.动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染C.为防止蛋白质变性,不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌D.可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌6.在微生物的培养过程中,下列实验操作规范的是()A.制作培养基的过程中先灭菌再调整pHB.微生物培养过程中可以使用平板划线法进行计数C.使用刚果红培养基选择性培养土壤中分解纤维素的微生物D.待培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰附近倒平板制备培养基7.无菌技术是获得纯净的微生物培养物的关键。下列相关叙述正确的是()A.实验过程中所有器皿、培养基及生物材料均需进行灭菌处理B.酒精能使细胞中的蛋白质变性失活,体积分数为70%的酒精用来灭菌效果最好C.试管口、瓶口等易被污染的部位,接种时可通过火焰灼烧来灭菌D.不耐高温的牛奶可使用巴氏消毒法,其优点是能够杀死全部微生物,保留牛奶风味8.纤维素、半纤维素、木质素参与构成植物细胞壁。可从白蚁的肠道中分离木质素分解菌来降解利用木质素,已知木质素降解过程使苯胺蓝培养基脱色。以下说法错误的是()A.以木质素为唯一碳源,用稀释涂布平板法分离木质素分解菌B.脱色圈直径与菌落直径比值越小,木质素分解菌分解效果越好C.在选择培养基上挑选出菌落后,再通过平板划线法进一步纯化D.除了白蚁肠道,还可从腐烂的树皮表面分离出木质素分解菌9.消毒和灭菌在作用强度和作用效果方面差异显著,下列关于消毒和灭菌的说法错误的是()A.煮沸消毒、巴氏消毒、紫外线消毒是常用的消毒方法B.消毒和灭菌均可消灭芽孢和孢子C.湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌是常用的灭菌方法D.培养皿和金属器械的灭菌常采用干热灭菌10.无菌技术是获得纯净微生物培养物的关键。下列相关叙述正确的是()A.实验过程中所有器皿、培养基及生物材料均需进行灭菌处理B.酒精能使细胞中的蛋白质变性失活,无水乙醇比70%乙醇消毒效果更好C.试管口、瓶口等易被污染的部位,接种时可通过火焰灼烧来灭菌D.不耐高温的牛奶可使用巴氏消毒法,其优点是能够杀死全部微生物,保留牛奶风味11.纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,对于人类食物来源和能源开发有重要意义。土壤中含有具有分解纤维素能力的真菌、细菌和放线菌等,某研究小组为了从富含纤维素的土壤中筛选出高效分解纤维素的菌株,进行了如下实验。相关叙述中正确的是()A.该实验配制的培养基需要以纤维素为唯一碳源,且后续需要对菌株进行进一步鉴定B.若每次稀释10倍,图中的a为18,图中将土壤稀释了103倍C.为筛选高效分解纤维素的菌株,应进行刚果红染色实验,挑选出透明圈直径与菌落直径比值较小的菌落D.如果采用平板划线法统计得到的菌落数,应至少选择3个菌落数在30~300之间的平板进行重复计数,并求平均值12.研究人员发现某除草剂(含氮有机物)不易被降解,且长期使用会导致土壤污染。为修复被该除草剂污染的土壤,科研人员按图示程序选育能降解该除草剂的细菌,已知含该除草剂的培养基不透明。下列叙述正确的是()A.操作Ⅱ应该将接种环灼烧灭菌5次B.经过一段时间的培养,培养皿中应该只存在有透明圈的菌落C.图中操作Ⅰ的接种方法为平板划线法,该方法可用于细菌计数D.筛选能降解该除草剂的细菌的培养基中该除草剂是唯一的氮源13.一次性口罩主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维。研究人员欲从合适的土壤样品中筛选出能高效降解一次性口罩的细菌,设计了如图所示的流程。下列说法正确的是()A.图中甲是指选择培养,应以聚丙烯纤维为培养基的唯一碳源B.为增大菌体与培养基的接触面积,“甲”使用的培养基是固体培养基C.培养皿和培养基等材料都需要在使用前后进行消毒处理D.可用平板划线法对筛选得到的目的菌进行纯化和计数14.尿素是一种重要的农业氮肥,但尿素并不能直接被农作物吸收,只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后,才能被植物利用。某课题小组从土壤中分离能够分解尿素的细菌并进行计数,过程如图所示。下列相关叙述正确的是()A.①~⑤的操作称为梯度稀释,②~⑤应各加10mL无菌水B.接种的培养基应以尿素为唯一氮源,该培养基属于鉴别培养基C.图示所用培养基需先用干热灭菌法进行灭菌后,再调节pHD.若接种的三个平板平均菌落数为62个,则1g土样中约有菌落6.2×108个15.微生物分离与筛选过程中使用的方法有抑菌圈法、透明圈法和变色圈法,其结果呈现如图所示。下列有关说法正确的是()方法抑菌圈法透明圈法变色圈法结果呈现A.利用抗生素抑制细菌生长能形成清晰的抑菌圈,抑菌圈大小与抗生素抗性呈负相关B.纤维素分解菌会在含有刚果红染料的培养基上形成透明圈C.菌落代谢产物发生特定的颜色变化形成变色圈,变色圈的大小与代谢产物的量无关D.三种方法都需要在培养基中添加特定的指示剂,且所用培养基都是固体培养基二、非选择题:本题共3小题,共55分。16.科研人员尝试利用某种细菌限制蓝细菌(蓝藻)的数量,相关实验如下图,图中①~⑥表示实验步骤。回答下列问题:(1)从生态系统的组成成分上看,蓝细菌属于_____;蓝细菌的代谢类型是_____。(2)本实验涉及微生物接种技术,微生物的接种技术有稀释涂布平板法和______法,该实验步骤②和⑤采用的接种方法为_____。(3)实验步骤①和④均需振荡培养,步骤①振荡培养的目的是增加培养液中____的含量,以及增大蓝细菌与培养液的接触面积,利于蓝细菌繁殖。(4)本实验操作中需要配制固体培养基,即平板。待平板冷凝后,将平板倒置,既可以防止_____,又可以避免培养基中的水分快速挥发。培养基的灭菌方法一般为____。(5)图中⑤实验组在每个培养皿中,如果做三个重复实验,可采取的做法是______。为完善实验设计方案,应增设对照组,设计对照组的目的是_____。17.为了检测牛奶中是否含有某种微生物,配制的培养基的配方如下,请分析回答下列问题(注:伊红—亚甲蓝是由两种染色剂组成的细胞染料):(1)根据配方,该培养基可用来培养_____(填“细菌”“霉菌”或“细菌与霉菌”),其所含氮源的功能是主要用于合成_____和_____。(2)该微生物在同化作用上的代谢类型是_____型,其在培养基上产生的单个菌落在生态学中被称为_____。(3)接种好的培养皿在恒温箱中培养时要倒置,目的是_____和_____。(4)有同学为统计消毒后的牛奶中该微生物的含量,取5mL牛奶样液进行了下图操作,每个平板中的统计结果为87、83、85,则经过消毒后的牛奶中该微生物的含量大约是_____个·mL-1。用该方法统计样本菌落数时_____(填“是”或“否”)需要设置空白对照组,目的是_____。18.石油对土壤的污染不仅给周边生态环境带来严重的损害,还严重影响居民的健康生活,且污染物含量越多。降解难度越大。为解决石油污染问题。某科研小组用了将近1年的时间,从长庆油田中被石油污染最严重的土壤中分离出了高效分解石油的细菌。如图所示。回答下列问题∶(1)配制好的培养基通常可以使用____________法灭菌。步骤③的培养基成分与普通液体培养基相比,最大的区别是步骤③培养基中以____________为唯一碳源。在微生物学中,将____________的培养基称为选择培养基。(2)倒平板冷却后,需要倒置,目的是____________。(3)进行过程④之前,常需要检验培养基平板灭菌是否合格,方法是____________。(4)常采用____________法对石油分解菌进行分离和计数。该接种方法可计数的原理是____________。

参考答案参考答案1.答案:C解析:理想的凝固剂应具备以下条件:不被所培养的微生物分解利用,在微生物生长的温度范围内保持固体状态,凝固剂凝固点不能太低,否则不利于微生物的生长,如琼脂凝固点为40℃,对所培养的微生物无毒害作用,并且在灭菌时不会被破坏,透明度好,凝固力强,配制方便,价格低廉。常用凝固剂有琼脂、明胶。2.答案:A解析:生物消毒法比较温和,只能除去部分微生物,A错误。3.答案:C解析:不同微生物生长所需的pH不同,培养基在配制完成后需先调pH再进行灭菌,以防止培养基污染,A正确。乳酸菌是厌氧菌,培养乳酸菌的平板需要放置在无氧环境下培养,B正确。涂布时所用菌液体积通常为0.1mL,为保证结果准确,平板上的菌落数应控制在30~300个,则涂布用的泡菜汁中的乳酸菌浓度应控制在300~3000个/mL,C错误。用细菌计数板统计细菌数目时不能区分活菌和死菌,计数结果可能偏大;而用稀释涂布平板法计数时,当两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落,计数结果可能偏小,D正确。4.答案:B解析:培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌,紫外线用于表面灭菌,A错误;土壤悬液梯度稀释后涂布平板可分离菌种,B正确;连续划线应从上次划线的末端开始,C错误;斜面培养基保存菌种需在低温下,室温下易污染或变异,D错误。故选B。5.答案:D解析:动、植物细胞DNA的提取不需要在无菌条件下进行,A错误;动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染,保证无菌环境,而微生物培养基中一般不能加入抗生素,B错误;一般用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌,以防止杂菌污染,C错误;可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌,以防止杂菌污染,D正确。6.答案:D解析:微生物培养。制作培养基时应先调整pH,再进行灭菌,A错误;平板划线法不能用于微生物计数,B错误;刚果红能与纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后,红色复合物无法形成,会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,所以刚果红培养基可用于鉴别土壤中分解纤维素的微生物,其不是用以选择性培养,C错误;待培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰附近倒平板制备培养基,这样既可以防止培养基温度过高导致培养皿炸裂,又能减少杂菌污染,D正确。7.答案:C解析:微生物培养所需的器皿、接种用具和培养基等均需要灭菌,生物材料则需依据情况进行消毒或灭菌,A错误;酒精能使细胞中的蛋白质变性失活,体积分数为70%的酒精用于消毒,而非灭菌,B错误;将微生物的接种工具,如接种环、接种针或其他金属工具,直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌,此外,在接种过程中,试管口或瓶口等容易被污染的部位,可以通过火焰灼烧来灭菌,C正确;消毒是指用较温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物,巴氏消毒法不会杀死全部微生物,D错误。8.答案:B解析:A、在筛选菌株的时候,常用到选择培养基,以木质素为唯一碳源,用稀释涂布平板法分离木质素分解菌,A正确;B、木质素降解过程使苯胺蓝培养基脱色,脱色圈直径与菌落直径比值越大,说明菌落周围的木质素被分解得越多,分解效果越好,B错误;C、平板划线法是一种常用的微生物纯化方法,通过连续划线的方式,可以逐步稀释并分离出单个微生物,最终得到纯种的菌落,因此在选择培养基上挑选出菌落后,再通过平板划线法进一步纯化,C正确;D、木质素是植物细胞壁的主要成分之一,因此,在植物组织分解的过程中,木质素分解菌起着重要的作用,除了白蚁肠道这种特定的环境外,腐烂的树皮等植物残骸也是木质素分解菌的重要栖息地,所以,我们可以从这些环境中分离出木质素分解菌,D正确。故选B。9.答案:B解析:A、消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程,煮沸消毒、巴氏消毒、紫外线消毒是常用的消毒方法,A正确;B、灭菌才能杀死一切的微生物,包括芽孢和孢子,消毒不能杀灭芽孢和孢子,B错误;C、灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程,湿热灭菌(如高压蒸汽灭菌)、干热灭菌、灼烧灭菌是常用的灭菌方法,C正确;D、能耐高温的,需要保持干燥的物品,如玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等,可以采用这种方法灭菌,都可用干热灭菌,D正确。故选B。10.答案:C解析:A、微生物培养的器皿、接种用具和培养基等均需要灭菌,生物材料依据情况消毒或灭菌,A错误;B、酒精能使细胞中的蛋白质变性失活,70%的酒精效果更好,B错误;C、将微生物的接种工具,如接种环、接种针或其他金属工具,直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌,此外,在接种过程中,试管口或瓶口等容易被污染的部位,也可以通过火焰燃烧来灭菌,C正确;D、消毒是指用比较温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程,不耐高温的牛奶使用巴氏消毒法可以避免牛奶中营养物质丢失过多,D错误。故选C。11.答案:A解析:为确保能够分离得到高效分解纤维素的微生物,常将土壤稀释液先进行选择培养,该培养基应以纤维素为唯一碳源,且后续需要对菌株进行进一步鉴定,A正确;分离、纯化培养时,采用稀释涂布平板法接种,先进行等浓度梯度稀释,如果每次稀释10倍,则取2mL菌液时需要添加18mL无菌水,题图中一共稀释了4次,因此总共稀释了104倍,B错误;刚果红可以与纤维素形成红色复合物,纤维素分解菌产生的纤维素酶可以水解纤维素而使菌落周围出现透明圈,透明圈直径与菌落直径比值较大的菌落,其中微生物分解纤维素的效率较高,C错误;采用平板划线法能将微生物分散在固体培养基上,但没法进行计数,D错误。12.答案:D解析:接种环在接种前和每次划线后都要进行灼烧,因此操作Ⅱ应该将接种环灼烧灭菌6次,A错误。经过一段时间的培养,培养皿中应仍存在无透明圈的菌落,B错误。图中操作Ⅰ的接种方法为平板划线法,平板划线法可用于获取单菌落,但不能用于细菌计数,C错误。该除草剂为含氮有机物,含该除草剂的培养基不透明,除草剂被分解后培养基变透明,若要选育能降解该除草剂的细菌,培养基中应将该除草剂作为唯一氮源,D正确。13.答案:A解析:A、本实验目的是筛选出能高效降解一次性口罩的细菌,一次性口罩主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维,故在选择培养时培养基中应以聚丙烯纤维为唯一碳源,为了提高聚丙烯纤维降解菌的比例和密度,图中“X”指的是选择培养,A正确;B、采集的样品中目的菌数量可能较少,所以需要经过X步骤,即扩大培养(选择培养)以增加目的菌的比例和浓度,为增大菌体与培养基的接触面积,培养基应是液体培养基,B错误;C、微生物培养前,需对培养基和培养皿进行灭菌处理,防止其他微生物污染,C错误;D、目的菌的纯化和计数可以使用稀释涂布平板法,平板划线法只能用于目的菌的纯化,不能计数,D错误。故选A。14.答案:D解析:①~⑤的操作称为梯度稀释,②~⑤应各加9mL无菌水稀释10倍,A错误;该培养基应以尿素为唯一氮源,属于选择培养基,B错误;图示所用培养基需先调节pH,再用湿热灭菌法(如高压蒸汽灭菌法)进行灭菌,C错误;据图可知,对菌液共稀释了106倍,取0.1mL接种,若接种的三个平板平均菌落数为62个,则1g土样中约有菌落62÷0.1×106=6.2×108个,D正确。15.答案:B解析:本题考查微生物分离与筛选的方法。抗生素能抑制细菌生长,从而形成抑菌圈,抗生素抗性越大抑制细菌生长能力越强,即抑菌圈越大,A错误。刚果红是一种染料,能与纤维素等结合形成红色复合物,但不能与纤维素分解产生的葡萄糖、纤维二糖等发生这种反应,因此纤维素分解菌会在含有刚果红染料的培养基上形成透明圈,B正确。菌落代谢产物发生特定的颜色反应形成变色圈,变色圈的大小与代谢产物的量有关,C错误。抑菌圈法不需要加入特定的指示剂,D错误。16.答案:(1)生产者;自养需氧型(2)平板划线;稀释涂布平板法(3)CO2(4)培养皿盖上的水珠滴入培养基;高压蒸汽灭菌法(5)在每个培养皿中,选择三个不同位置,各滴加等量菌液排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度解析:(1)生态系统的组成成分包括生产者、消费者、分解者和非生物的物质和能量。蓝细菌是自养生物,属于生产者,处于第一营养级。蓝细菌的生存需要氧气,其代谢类型是自养需氧型。(2)微生物接种常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。步骤②和⑤后,培养皿中都形成分布较均匀的菌落,是稀释涂布平板法接种的结果。(3)步骤①在培养液中培养蓝细菌,蓝细菌进行光合作用,消耗CO2,振荡培养的目的是增加培养液中CO2的含量和增大蓝细菌与培养液的接触面积,以利于蓝细菌繁殖。(4)培养时,一般将接种后的培养皿倒置,以防止皿盖上的水珠滴人培养基影响菌落生长及形态,同时也可避免培养基中的水分快速挥发。培养基含有水分,一般用高压蒸汽灭菌法灭菌。(5)图中⑤实验组如果在每个培养皿中做三个重复实验,使实验结果更准确,可在同一培养皿里选择三个不同位置,各滴加等量菌液,进行培养。设计对照组的目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。17.答案:(1)细菌;蛋白质;核酸(2)异养;种群(3)避免水分过快蒸发;防止污染(4)8.5×104;是;用于判断培养基是否被污染解析:(1)根据培养基的pH调至7.2左右,则可用于培养细菌。该培养基所含有的氮源是蛋白胨,主要用于

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