T∕CHATA 055-2026 肺结核痰标本病原学检测质量指标

ICS11.020CCSC05肺结核痰标本病原学检测质量指标Qualityindicatorsforbacteriologicaltestingofsputumspecimensforpulmonarytuberculosis2026-02-12发布中国防痨协会发布2 3 42规范性引用文件 43术语和定义 44质量指标 54.1痰标本合格率 54.2抗酸染色镜检质量指标 54.3分枝杆菌培养质量指标 64.4分枝杆菌菌种鉴定质量指标 64.5结核分枝杆菌表型药物敏感性试验质量指标 74.6结核分枝杆菌复合群核酸检测质量指标 84.7结核分枝杆菌耐药基因检测质量指标 84.8质量保证质量指标 95质量指标的监测和应用 附录A（资料性）质量指标异常原因分析与改进措施 附录B（资料性）质量保证重点内容汇总表 3本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》给出的规则起草。本文件由中国疾病预防控制中心、首都医科大学附属北京胸科医院、首都医科大学附属北京同仁医院共同提出。本文件由中国防痨协会归口。本文件起草单位:中国疾病预防控制中心、首都医科大学附属北京胸科医院、首都医科大学附属北京同仁医院、北京市结核病控制研究所、广州胸科医院、黑龙江省传染病防治院、甘肃省疾病预防控制中心、重庆市结核病防治所。本文件主要起草人:夏辉、姜广路、鲁辛辛、黄海荣、丁北川、王庆、谭耀驹、侯艳杰、司红艳、胡彦、宋媛媛、郑扬、赵雁林、欧喜超、徐彩红。4肺结核痰标本病原学检测质量指标本文件规定了以痰标本为检测对象的常用肺结核病原学检测方法在开展时宜监测和分析的指标，用以监控质量。宏基因组测序、靶向测序等高通量测序技术不列入本文件范围。本文件适用于开展肺结核病原学检测的医疗机构、疾控机构。2规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1分枝杆菌mycobacteria一大类革兰氏阳性、杆状、抗酸染色阳性的细菌,属于陆生细菌放线菌门、放线菌纲、棒状杆菌目、分枝杆菌科，分为结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌。3.2结核分枝杆菌复合群Mycobacteriumtuberculosiscomplex（MTBC）一组密切相关的分枝杆菌，可导致结核分枝杆菌潜伏感染和活动性结核病，包括人类结核病的主要致病菌结核分枝杆菌及其他相关菌种（如牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌、山羊分枝杆菌、田鼠分枝杆菌、海豹分枝杆菌、羚羊分枝杆菌等）。这些菌种基因序列高度相似，但宿主范围和致病性略有差异。3.3非结核分枝杆菌nontuberculousmycobacteria(NTM)指除结核分枝杆菌复合群与麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌，部分可引起人类感染和疾5病。常见的非结核分枝杆菌包括鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌、龟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、偶发分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌等。3.4病原学检测bacteriologicaltesting通过检测肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌（或结核分枝杆菌复合群）的形态、结构、核酸等，以明确结核病致病菌是否存在及其耐药性，主要包括：抗酸染色镜检、分枝杆菌培养、分枝杆菌菌种鉴定、结核分枝杆菌表型药物敏感性试验、结核分枝杆菌复合群核酸检测、结核分枝杆菌耐药基因检测。3.5质量指标qualityindicator一组内在特征满足要求程度的度量，是衡量检测质量的标准和指标，可从多个角度评估检测的准确性、可靠性和有效性。4质量指标4.1痰标本合格率定义：初诊患者合格的咳痰标本数/实验室收到的初诊患者咳痰标本总数×100%参考范围：≥90%。合格痰标本应满足以下条件：使用透明、螺旋盖容器采集且无泄漏；标识清晰且符合要求；采集时间符合规定时限；肉眼判断性状为干酪痰、血痰、粘液痰，非唾液；痰标本体积应≥3mL；显微镜下每低倍视野鳞状上皮细胞应<10个。4.2抗酸染色镜检质量指标4.2.1初诊患者痰标本抗酸染色镜检阳性率定义：初诊患者痰标本抗酸染色镜检阳性数/同一时间内初诊患者痰标本抗酸染色镜检总数参考范围：该指标在不同地区、不同检测人群存在差异，不适宜确定参考范围，各实验室应建立自己的目标值，按照使用的抗酸染色镜检方法（萋-尼式染色、荧光染色）分别统计。4.2.2初诊患者痰标本抗酸染色镜检弱阳性结果占比定义：初诊患者痰标本抗酸染色镜检弱阳性结果的涂片数/初诊患者痰标本抗酸染色镜检阳性结果涂片总数×100%6参考范围：30-50%，萋-尼式染色弱阳性包括1～8条/300视野和1+，荧光染色弱阳性包括1～9条/50视野和1+，按照使用的抗酸染色镜检方法分别统计。4.2.3抗酸染色镜检实验室内周转时间定义：自实验室接收标本至报告抗酸染色镜检结果的时间间隔参考范围：<1个工作日，计算中位数和第90百分位数；按照使用的抗酸染色镜检方法分别统计。4.3分枝杆菌培养质量指标4.3.1分枝杆菌培养污染率定义：分枝杆菌培养时发生污染的培养基数/同一时间内接种的培养基总数×100%参考范围：使用固体分枝杆菌培养参考范围为2-5%，液体分枝杆菌培养参考范围为8-10%。按照使用的培养方法分别统计。4.3.2初诊患者痰标本分枝杆菌培养阳性率定义：初诊患者痰标本分枝杆菌培养阳性数/同一时间内初诊患者痰标本分枝杆菌培养总数参考范围：该指标在不同地区、不同检测人群存在差异，不适宜确定参考范围，各实验室应建立自己的目标值。按照使用的培养方法分别统计。4.3.3初诊患者痰标本抗酸染色镜检阳性且分枝杆菌培养阳性率定义：初诊患者痰标本抗酸染色镜检阳性且分枝杆菌培养阳性数/同一时间内初诊患者痰标本抗酸染色镜检阳性且已报告分枝杆菌培养结果数×100%参考范围：使用固体分枝杆菌培养参考范围为≥85-90%，液体分枝杆菌培养参考范围为≥90-95%。按照使用的培养方法分别统计。4.3.4分枝杆菌培养实验室内周转时间定义：自实验室接收标本至报告分枝杆菌培养结果的时间间隔参考范围：使用固体分枝杆菌培养参考值为8周，液体分枝杆菌培养参考值为6周。计算中位数和第90百分位数。按照使用的培养方法分别统计。4.4分枝杆菌菌种鉴定质量指标4.4.1分枝杆菌菌种鉴定结果为结核分枝杆菌复合群百分率定义：经菌种鉴定为结核分枝杆菌复合群的标本（菌株）数/开展菌种鉴定的标本（菌株）总数×100%œ7参考范围：该指标在不同地区存在差异，不适宜确定参考范围，各实验室宜参考本省、本地区、临近地区的结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌比例建立自己的目标值。按照使用的菌种鉴定方法分别统计。4.4.2分枝杆菌菌种鉴定结果为常见非结核分枝杆菌百分率定义：经菌种鉴定为某种非结核分枝杆菌的标本（菌株）数/开展菌种鉴定的标本（菌株）总数×100%œ参考范围：该指标在不同地区存在差异，不适宜确定参考范围，各实验室宜参考本省、本地区及临近地区的非结核分枝杆菌菌种分离情况建立自己的目标值。按照使用的菌种鉴定方法分别统计。4.4.3分枝杆菌菌种鉴定实验室内周转时间定义：自实验室接收标本（或分枝杆菌培养报告阳性）至报告菌种鉴定结果的时间间隔参考范围：该指标使用不同检测方法和流程会有较大差异，对临床痰标本或分枝杆菌菌株使用分子生物学菌种鉴定方法参考值为<2个工作日（如果送检样本量过少，可适当延长目标值对分枝杆菌菌株使用对硝基苯甲酸生长试验参考值为4-5周，检测MPB64/MPT64抗原检测一般为数小时内完成。计算中位数和第90百分位数。按照使用的菌种鉴定方法分别统计。4.5结核分枝杆菌表型药物敏感性试验质量指标4.5.1表型药物敏感性试验抗结核药物耐药检出率定义：某种抗结核药物耐药检出数/该种药物表型药物敏感性试验总数×100%参考范围：该指标在不同地区、不同人群存在差异，不适宜确定参考范围，各实验室宜参考本省、本地区及临近地区耐药监测数据建立自己的目标值。按照使用的表型药敏试验方法针对每种药物（如利福平、异烟肼、左氧氟沙星、莫西沙星等）分别统计。4.5.2因污染而缺失表型药物敏感性试验结果百分率定义：因污染而缺失表型药物敏感性试验结果的菌株数/开展表型药物敏感性试验的菌株总数×100%参考范围：<3%，按照使用的表型药敏试验方法分别统计。4.5.3因对照培养基菌落生长不足或未生长而缺失表型药物敏感性试验结果率定义：因对照培养基菌落生长不足或未生长而缺失表型药物敏感性试验结果的菌株数/开展表型药物敏感性试验的菌株总数×100%8参考范围：<3%，按照使用的表型药敏试验方法分别统计。4.5.4结核分枝杆菌表型药物敏感性试验实验室内周转时间定义：自分枝杆菌培养报告阳性至报告表型药物敏感性试验结果的时间间隔参考范围：固体表型药敏试验参考范围为4-5周；液体表型药敏试验参考范围≤2周（吡嗪酰胺≤3周微孔板肉汤稀释法参考范围≤3周。计算中位数和第90百分位数。按照使用的表型药物敏试验方法分别统计。4.6结核分枝杆菌复合群核酸检测质量指标4.6.1结核分枝杆菌复合群核酸检测阳性率š定义：结核分枝杆菌复合群核酸检测阳性标本数/开展结核分枝杆菌复合群核酸检测标本总数×100%参考范围：该指标在不同地区、不同人群存在差异，不适宜确定参考范围，各实验室应建立自己的目标值，按照使用的结核分枝杆菌复合群核酸检测方法分别统计。4.6.2结核分枝杆菌复合群核酸检测失败率定义：结核分枝杆菌复合群核酸检测失败标本数/开展结核分枝杆菌复合群核酸检测标本总数×100%参考范围：多色半巢氏实时荧光定量PCR扩增方法错误率<3%，无效率<1%，无结果率<1%；环介导等温扩增检测方法失败率<1%；其他检测方法失败率<3%。按照使用的结核分枝杆菌复合群核酸检测方法分别统计。4.6.3结核分枝杆菌复合群核酸检测实验室内周转时间定义：自实验室接收标本至报告结核分枝杆菌复合群核酸检测结果的时间间隔参考范围：<2个工作日，若送检标本量过少，可适当延长目标值。计算中位数和第90百分位数。按照使用的结核分枝杆菌复合群核酸检测方法分别统计。4.7结核分枝杆菌耐药基因检测质量指标4.7.1耐药基因抗结核药物耐药检出率定义：某药物耐药基因检测结果报告为耐药的标本数/该药物耐药基因检测标本总数×100%参考范围：该指标在不同地区、不同人群存在差异，不适宜确定参考范围，各实验室宜参考本省、本地区及临近地区耐药监测数据建立自己的目标值。按照使用的耐药基因检测方法针对每种药物（如利福平、异烟肼、氟喹诺酮类等）分别统计。4.7.2结核分枝杆菌耐药基因检测不确定结果百分率9定义：某药物耐药基因检测结果报告不确定的标本数/该药物耐药基因检测标本总数×100%参考范围：<5%，该指标主要受到使用方法及检测标本中低含菌量影响。按照使用的耐药基因检测方法分别统计。4.7.3结核分枝杆菌耐药基因检测失败率定义：耐药基因检测失败的标本数/耐药基因检测标本总数×100%参考范围：多色半巢氏实时荧光定量PCR扩增检测方法错误率<3%，无效率<1%，无结果率<1%；其他检测方法失败率<3%。按照使用的耐药基因检测方法分别统计。4.7.4结核分枝杆菌耐药基因检测实验室内周转时间定义：实验室自接收痰标本时间至报告耐药基因检测结果的时间间隔参考范围：<2个工作日，若送检标本量过少，可适当延长目标值。计算中位数和第90百分位数。按照使用的耐药基因检测方法分别统计。4.8质量保证质量指标4.8.1室内质量控制规范开展率定义：规范开展室内质量控制的肺结核病原学检测项目数量/实验室开展的肺结核病原学检测项目数量×100%监测频率：每半年或每年一次。参考范围：≥80%。规范开展室内质量控制指实验室按照某一检测项目的质量控制程序规定的方法和频率开展了室内质量控制。实验室应为每个检测项目制定明确的质量控制程序。4.8.2室间质量评价参加率定义：参加肺结核病原学检测室间质量评价项目数/开展肺结核病原学检测项目数×100%监测频率：每半年或每年一次。参考范围：≥80%。4.8.3室间质量评价合格率定义：参加肺结核病原学检测室间质量评价且结果为合格项目数/参加肺结核病原学检测室间质量评价项目数×100%监测频率：每半年或每年一次。参考范围：≥90%。4.8.4因试剂库存不足致检测服务中断或报告延迟的次数定义：一定时期内因试剂库存不足致检测服务中断或报告延迟的次数监测频率：每半年或每年一次。参考范围：原则上实验室不应发生服务中断，按照使用的检测方法分别统计。4.8.5因设备故障致检测服务中断或报告延迟的次数定义：一定时期内因设备故障致检测服务中断或报告延迟的次数监测频率：每半年或每年一次。参考范围：原则上实验室不应发生服务中断，按照使用的检测方法分别统计。5质量指标的监测和应用5.1本文件列出的检测项目相关质量指标分为两大类，一类为与实验室内部检测质量直接相关的指标，有明确的参考范围，不同实验室间可横向比较，另一类为间接反映检测项目质量的指标，如阳性率、耐药率指标，这些指标同时受实验室外部因素影响，如检测对象、结核病及耐药结核病流行病学特征等，在排除一些特殊情况如主动筛查、聚集性疫情检查时，在某一实验室监测的指标值应处于比较稳定的范围，但不同实验室间不宜横向比较。本文件中部分指标针对初诊患者（指到某一机构首次就诊的患者）痰标本计算，其在初诊时一般未接受抗结核治疗，如在其他机构已接受过较长时间抗结核治疗，会影响相关质量指标，在分析时应注意区分。5.2实验室应制定程序规定指标监测计划，包括但不限于指标选择、频率、数据来源、采集方法、应用、审核等。质量指标收集和监测宜纳入实验室信息管理系统。目标值设定应结合当前检测项目使用的方法本身性能、医院管理要求、实验室所在地区结核病/耐药结核病流行病学等数据。质量保证指标每半年或每年监测一次，其他指标宜每月监测一次。5.3按照监测频率重点分析质量指标值偏离目标值情况，若偏离较多应迅速启动调查程序，分析原因并制定和实施纠正和预防措施（附录A），并持续监测和改进直至问题解决。同时应记录调查过程及所采取的措施，包括但不限于：问题及发生时间描述、根本原因、采取的纠正措施及预期的解决日期、预防措施、采取措施的有效性及评估方法、相关人员签名。5.4实验室管理人员应定期审查质量指标并告知其他人员监测结果，结合室内质量控制、室间质评结果（附录B）优化操作方法和流程、引进新技术、强化人员培训等，提升实验室检测服务水平。（资料性）质量指标异常原因分析与改进措施痰标本合未对患者进行痰标本采集方法及合格标未采用实验室提供的留痰容器留取或标实验室收到标本后未按照规定的储存条使用专用容器，并在标本采集手册中明确及时将痰标本的不合格情况反馈负责采集初诊患者痰标本抗酸染色镜（如使用加热固定装置时温度和时由于标本质量问题导致，参考前述改进措质量控制，确保使用的试剂在效期内，荧8)加强人员培训，并定期对人员能力进行评初诊患者痰标本抗酸染色镜检弱阳性显著低于目标值提示弱阳性级别结果漏质量控制，确保使用的试剂在效期内，荧4)加强对人员培训，并定期对人员能力进行分枝杆菌培养污染率l前处理过程不充分如加入前处理试用含有N-乙酰-L-半胱氨酸的前处更换试剂或使用新批号试剂前未进）；指标分析：如果培养阳性率明显低于或高于目标值，应审查前处理程序和操作。如果开展的固体和液体培养只有一种培养方法的阳性率显著降低或升高，则重点检查使用的培养基质量控制程序及培养基无菌标本的性状合理加入前处理试剂的量，如干酪痰、脓性痰时适当增加前处理液的体积，但不要随意延长处理时间；考虑被假单胞菌污染的标本或来自肺囊性纤维化患或垫巾，减少气溶胶对于其他物品或表面的污染，避免同时打开多个标本的容器盖8)加强对人员培训，并定期对人员能力进行初诊患者痰标本分枝杆菌培l标本采集前患者接受过抗结核药物）；一批次实验结果报告几个菌落的标结合分枝杆菌培养污染率分析：如果污染率低于目标值，且分枝杆菌培养阳性率显著低于目标值，应审查标本采集和保存、前处理程序和试剂，改进前处理过强的环节；如果污染4)更换或使用新批号培养基在使用前进行质量控制，确保培养基的敏感性满足要求，按照规定温度保存培养基，并在效期内使护程序进行清洁、维护、校准管更换等，6)对于考虑发生交叉污染的标本，查询是否发生在同一操作批次，借助于基因分型等8)加强对人员培训，并定期对人员能力进行初诊患者痰标本抗酸染色镜检阳性且分枝杆菌培养阳性率l一般考虑分枝杆菌培养质量存在问l标本采集前患者接受过抗结核药物l开展分枝杆菌培养和抗酸染色镜检l考虑抗酸染色镜检质量可能存在问性率、初诊患者中痰标本抗酸染色镜检阳分枝杆菌菌种鉴定结果为结核分枝杆菌复合群分枝杆菌菌种鉴定结果为常见非结核分枝杆菌2)采用对硝基苯甲酸选择培养基生长试验其是细菌菌龄、菌悬液浓度和均匀l含对硝基苯甲酸的培养基由于储存l采用分子生物学方法或质谱等其他核分枝杆菌复合群百分率显著低于试剂环境污染等逐一分析排除可能表型药物敏感性试验抗结核药物耐药2)如检测人群无明显变化时，分析以下原其是细菌菌龄过长即未使用对数生l含药物的培养基由于储存或运输温某一批次的含药培养基存在问题，药物失量控制，确保培养基满足要求，按照规定护程序进行清洁、维护、校准管更换等，缺失表型药物敏感性试验结养基菌落生长不足或未生长而缺失表型药物敏感性试验1)未使用对数生长期菌株即菌龄超过初生2)菌悬液比浊制备时大块颗粒影响真实浊结核分枝杆菌复合群核酸检测阳性率š1)接受结核分枝杆菌复合群核酸检测的人未使用已知结果标本或质控物质进行质6)核酸扩增仪器等功能异常或未按照规定4)对于新批号或新的检测试剂在使用前进行8)使用新的仪器前应进行性能验证，并定期9)使用不合格的痰标本进行让步检测后，进结核分枝杆菌复合群核酸检结核分枝杆菌耐药基因检测5)核酸扩增仪器等功能异常或未按照规定2)对于新批号或新的检测试剂在使用前进行耐药基因抗结核药物耐药检1)接受结核分枝杆菌复合群耐药基因检测已知结果标本或质控物质进行质量l核酸扩增仪器等功能异常或未按照4)对于新批号或新的检测试剂在使用前进行6)加强对人员培训，并定期对人员能力进行结核分枝杆菌耐药基因检测不确定结1)接受结核分枝杆菌复合群耐药基因检测阳性级别）或结核分枝杆菌复合群的核酸），因检测不确定或无法判读的标本的含菌量，菌量