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高中生物选修三知识点总结填空版同学们,高中生物选修三“现代生物科技专题”是对我们原有生物学知识的拓展和深化,涉及诸多前沿技术。这份填空版知识点总结,希望能帮助大家更好地梳理和巩固所学内容,在理解的基础上记忆,才能真正掌握。---高中生物选修三知识点总结(填空版)专题一基因工程1.1DNA重组技术的基本工具(1)基因工程的概念:基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。(2)基因工程的基本工具:*限制性核酸内切酶(限制酶):主要从原核生物中分离纯化出来。能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。其作用结果是产生黏性末端或平末端。*DNA连接酶:将切下来的DNA片段拼接成新的DNA分子,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。常用的有两类:一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为E·coliDNA连接酶;另一类是从T4噬菌体中分离出来的,称为T4DNA连接酶。*载体:常用的载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等。质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外,并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。作为载体,必须具备的条件包括:能在受体细胞中自我复制并稳定保存;具有一个或多个限制酶切割位点,以便与外源基因连接;具有某些标记基因,便于进行筛选。1.2基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。(1)目的基因的获取:目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因,也可以是一些具有调控作用的因子。获取方法包括:从基因文库中获取;利用PCR技术扩增目的基因;人工合成(适用于基因较小,且核苷酸序列已知的情况)。*PCR技术:全称是多聚酶链式反应,是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。原理是DNA双链复制。前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物。(2)基因表达载体的构建:这是基因工程的核心步骤。构建的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用。一个基因表达载体的组成,除了目的基因外,还必须有启动子、终止子以及标记基因等。*启动子:是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA。*终止子:位于基因的尾端,作用是使转录在相应地方停止。*标记基因:作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来,常用的标记基因是抗生素抗性基因。(3)将目的基因导入受体细胞:*将目的基因导入植物细胞:常用方法有农杆菌转化法(最常用,适用于双子叶植物和裸子植物)、基因枪法(适用于单子叶植物)、花粉管通道法。*将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。*将目的基因导入微生物细胞:常用Ca²⁺处理法,使微生物细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,这种细胞称为感受态细胞。(4)目的基因的检测与鉴定:*分子水平的检测:*第一步:检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,常用方法是DNA分子杂交技术(用放射性同位素标记的目的基因作探针)。*第二步:检测目的基因是否转录出了mRNA,常用方法是分子杂交技术(用放射性同位素标记的目的基因作探针与mRNA杂交)。*第三步:检测目的基因是否翻译成蛋白质,常用方法是抗原-抗体杂交。*个体水平的鉴定:如抗虫或抗病的接种实验,以确定其是否具有抗性以及抗性的程度。1.3基因工程的应用(1)植物基因工程:主要用于提高农作物的抗逆能力(如抗虫、抗病、抗逆转基因植物),以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等。*抗虫基因作物:如导入Bt毒蛋白基因的抗虫棉。(2)动物基因工程:用于提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物(如乳腺生物反应器,又称为乳房生物反应器,其优点是产量高、质量好、成本低、易提取),以及用转基因动物作器官移植的供体等。(3)基因工程药物:如利用转基因工程菌生产人胰岛素、干扰素、白细胞介素等。(4)基因治疗:是指把正常基因导入病人体内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的,这是治疗遗传病的最有效的手段。分为体外基因治疗和体内基因治疗两种。1.4蛋白质工程的崛起(1)蛋白质工程的概念:蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。(2)蛋白质工程的基本途径:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)。因此,蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程,又被称为“第二代基因工程”。专题二细胞工程细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过细胞水平或细胞器水平上的操作,按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。根据操作对象的不同,可分为植物细胞工程和动物细胞工程。2.1植物细胞工程植物细胞工程常用的技术手段有植物组织培养和植物体细胞杂交等。这些技术的理论基础是植物细胞的全能性。*细胞全能性:具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能。细胞全能性的原因是细胞内含有本物种的全套遗传物质。在生物的生长发育过程中,细胞并不表现全能性,而是分化成各种组织和器官,这是因为在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性表达。(1)植物组织培养技术:*概念:在无菌和人工控制的条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。*过程:离体的植物器官、组织或细胞(又称外植体)→(脱分化)→愈伤组织→(再分化)→胚状体或丛芽→完整植株。*脱分化:由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。愈伤组织的特点是:细胞排列疏松而无规则,是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。*再分化:愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程。*应用:微型繁殖(快速繁殖)、作物脱毒(常用茎尖作为外植体)、人工种子(以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料,经过人工薄膜包装得到的种子)、单倍体育种(先花药离体培养得到单倍体植株,再人工诱导染色体加倍,优点是明显缩短育种年限,后代一般是纯合子)、突变体的利用、细胞产物的工厂化生产(如生产人参皂甙干粉)。(2)植物体细胞杂交技术:*概念:将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的杂种植株的技术。*原理:细胞膜的流动性和细胞的全能性。*过程:去除细胞壁(用纤维素酶和果胶酶处理,获得原生质体)→诱导原生质体融合(常用的诱导方法包括物理法:离心、振动、电激;化学法:用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂)→杂种细胞的筛选和培养→杂种植株的再生与鉴定。*意义:克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍,扩大了可用于杂交的亲本组合范围。2.2动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段有:动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等。其中,动物细胞培养是其他动物细胞工程技术的基础。(1)动物细胞培养:*概念:从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。*过程:取动物组织块→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞用酶处理后分瓶继续培养,称为传代培养。*原代培养:从机体取出后立即进行的细胞培养。*传代培养:将原代培养的细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养。细胞在传至10-50代左右时,增殖会逐渐缓慢,以至于完全停止,这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化。当继续传代培养时,少部分细胞会克服细胞寿命的自然极限,获得不死性,这些细胞已经发生了突变,正在朝着等同于癌细胞的方向发展。*动物细胞培养的条件:*无菌、无毒的环境:培养液和培养用具进行无菌处理;通常在培养液中添加一定量的抗生素,以防污染;定期更换培养液,以清除代谢产物。*营养:合成培养基成分包括糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,通常需加入血清、血浆等天然成分。*温度和pH:适宜温度多为36.5±0.5℃;pH多为7.2-7.4。*气体环境:95%空气加5%CO₂的混合气体。CO₂的主要作用是维持培养液的pH。*应用:生产生物制品(如疫苗、干扰素、单克隆抗体)、检测有毒物质、用于生理、病理、药理等方面的研究。(2)动物体细胞核移植技术和克隆动物:*动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。用核移植方法得到的动物称为克隆动物。*种类:包括胚胎细胞核移植(比较容易)和体细胞核移植(比较难)。*体细胞核移植的过程(以高产奶牛为例):供体细胞的采集和培养(常选择传代10代以内的细胞,以保证正常的二倍体核型)→去核卵母细胞的准备(通常选择减数第二次分裂中期(MⅡ中期)的卵母细胞)→细胞核移植(将供体细胞的细胞核注入去核卵母细胞)→重组细胞的激活与培养(激活受体细胞,使其完成细胞分裂和发育进程,形成重组胚胎)→胚胎移植(将胚胎移入代孕母牛体内)→克隆动物的出生。*原理:动物体细胞核具有全能性。*应用:加速家畜遗传改良进程,促进优良畜群繁育;保护濒危物种;生产医用蛋白;作为异种移植的供体;用于组织器官的移植等。*存在问题:克隆动物存在着健康问题,表现出遗传和生理缺陷等。(3)动物细胞融合:*概念:也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。*原理:细胞膜的流动性。*诱导方法:与植物原生质体融合类似,常用的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。其中,灭活的病毒是动物细胞融合特有的诱导剂。*应用:最重要的用途是制备单克隆抗体。(4)单克隆抗体:*传统抗体生产方法(从动物血清中提取)的缺点:产量低、纯度低、特异性差。*单克隆抗体的概念:由单个B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆)形成的细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体。*制备过程:给小鼠注射特定抗原→从小鼠脾脏中获取能产生特定抗体的B淋巴细胞→将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞(能在体外无限增殖)融合→通过特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞(既能无限增殖又能产生特异性抗体的细胞)→进行克隆化培养和抗体检测,筛选出能产生所需特异性抗体的阳性杂交瘤细胞→将该杂交瘤细胞在体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖→从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体。*单克隆抗体的优点:特异性强、灵敏度高、可大量制备。*应用:作为诊断试剂(准确识别各种抗原物质的细微差异,并跟一定抗原发生特异性结合,具有准确、高效、简易、快速的优点);用于治疗疾病和运载药物(如“生物导弹”,是将单克隆抗体与药物或放射性同位素等结合,定向带到癌细胞所在位置,在原位杀死癌细胞,既不损伤正常细胞,又减少了用药剂量)。专题三胚胎工程胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术,如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎,还需移植到雌性动物体内生产后代,以满足人类的各种需求。3.1体内受精和早期胚胎发育(1)精子的发生:场所是睾丸的曲细精管。时期是从初情期开始,直到生殖机能衰退。精子发生的过程大体可以分为三个阶段:精原细胞的增殖(有丝分裂)→精母细胞的减数分裂(形成精细胞)→精子细胞变形形成精子(细胞核变为精子头的主要部分;高尔基体发育为顶体;中心体演变为精子的尾;线粒体聚集在尾的基部形成线粒体鞘;细胞内的其他物质浓缩为球状,叫做原生质滴,最后脱落)。(2)卵子的发生:场所是卵巢。时期是在胎儿期(性别分化以后)完成卵泡的形成和在卵巢内的储备,减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的,减数第二次分裂是在精子和卵子结合的过程中(即受精作用过程中)完成的。排卵:指卵子从卵泡中排出。刚排出的卵子可能是初级卵母
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