药学专业 -何首乌黄酮类化学成分研究

目录 II英汉缩略语对照表摘结论：本文成功设计出提取分离何首乌块茎中的黄酮类化合物的方案，并完成了对黄酮类化合物的提取分离，应用核磁共振技术()对所得化合物进行结构鉴定，分析结果发现何首乌中已知的黄酮类化合物苜蓿素和表。Pleuropterusmultiflorus(Thunb.)Pleuropterusmultiflorus(Thunb.)NakaiMethod：TheethylacetatephaseextractisobtainedfromtherootsofPleuropterusmultiflorus(Thunb.)usingamethodcombiningcontinuousrefluxextraction(Soxhlet)andsolvent-systemfractionalextraction.Subsequently,gradientelutionseparationisperformedusinganormal-phasesilicagelcolumn,anoctadecylsilane(ODS)reversed-phasecolumn,andaSephadexLH-20gelcolumn(across-linkeddextran-derivedglucopolymer).Finally,thetargetcompoundsarepurifiedtohighpurityusingpreparativehigh-performanceliquidchromatography(preparativeHPLC)Conclusion：Inthisstudy,theschemeofextractingandseparatingflavonoidsfromthetubersofwassuccessfullydesigned,andtheextractionandseparationofflavonoidswerecompleted.ThestructuresoftheobtainedcompoundswereconfirmedusingNuclearMagneticResonance(NMR)spectroscopy,andtheknownflavonoidsinwerefound.andepicatechin.tricinPleuropterusmultiflorus(Thunb.)Nakai何首乌中的二苯乙烯苷类化合物具有防治疟疾REF_Hlk195798583\r\h[5]，降低血脂及提高记忆力REF_Hlk195798635\r\h[6]，抗衰老REF_Hlk195798702\r\h[7]等作用。蒽醌类化合物既是何首乌主要成分之一，又是蓼科植物共同存在的成分REF_Ref196417966\r\h[8]。何首乌中的黄酮类化合物有着清除自由基REF_Ref196418001\r\h[9]，抵抗炎症以及缓解疲劳等作用REF_Ref196418033\r\h[10]。何首乌的化学成分谱系已形成多层次结构体系，涵盖酚苷类、黄酮类、醌类、脂质类、糖类及有机酸衍生物六大核心类别。基于超高效液相色谱-高分辨质谱联用(UPLC-HRMS)技术，近十年研究从何首乌属植物中共解析出162种单体化合物，其中酚苷类含二苯乙烯苷33种、黄酮类40种、醌类24种、生物碱类7种、磷脂及其衍生物7种、羧酸类(含芳香酸与脂肪酸衍生物)36种、甾醇类4种、木脂素类5种及其他未归类成分35种。REF_Ref197526173\r\h[11]。编号名1TricinREF_Ref196418137\r\h[13]2tricin-6-O--D-glucosideREF_Ref196418068\r\h[11]3thunberginolC6-O-β-D-glucopyranosideREF_Ref196418068\r\h[11]4ChromoneREF_Ref196418208\r\h[14]5KaempferolREF_Ref196418208\r\h[14]6MyricetinREF_Ref196418208\r\h[14]7myricetin-3-O-β-D-glucopyranosideREF_Ref196418208\r\h[14]8quercetin-3-O-α-L-rhamnosideREF_Ref196418208\r\h[14]9ChrysoeriolREF_Ref196418294\r\h[15]ApigeninREF_Ref196418294\r\h[15]kaempferol-3-O-β-D-glucosideREF_Ref196418294\r\h[15]QuercetinREF_Ref196418331\r\h[16]LuteolinREF_Ref196418331\r\h[16]5″-methoxy-hydnocarpinREF_Ref196418331\r\h[16]2,5-dimethyl-7-hydroxychromenoneREF_Ref196418448\r\h[17]polygonflavanolAREF_Ref196418477\r\h[18]IsoorientinREF_Ref196418491\r\h[19]KaempferitrinREF_Ref196418502\r\h[20]annulatin3′-O-β-D-xylosideREF_Ref196418502\r\h[20]IcaritinREF_Ref196418515\r\h[21]NoreugeninREF_Ref196418529\r\h[22]HyperosideREF_Ref196418889\r\h[23]RutinREF_Ref196418529\r\h[22]VitexinREF_Ref196418529\r\h[22]25querctin3-O-β-D-galactosideREF_Ref196418835\r\h[24]quercetin-3-O-β-D-arabinosideyREF_Ref196418835\r\h[24](+)-CatechinREF_Ref196418667\r\h[25](+)-EpicatechinREF_Ref196418667\r\h[25]3-O-galloyl-(+)-catechinREF_Ref196418667\r\h[25]3-O-galloyl-(+)-epicatechinREF_Ref196418667\r\h[25]3-O-galloyl-procyanidinB-2REF_Ref196418667\r\h[25]3,3′-di-1O-galloyl-procyanidinB-2REF_Ref196418667\r\h[25]2-(2′-hydroxylpropyl)-5-methylchromone-7-O-β-D-glucopyranosideREF_Ref196418448\r\h[17]2,5-dimethyl-7-hydroxy-chromone-7-O-β-D-glucopyranosideREF_Ref196418541\r\h[26]noreugenin-7-O-β-D-glucopyranosideREF_Ref196418541\r\h[26]GenistinREF_Ref196418541\r\h[26](S)-2-(2′-hydroxypropyl)-5-methyl-7-hydroxychromone-7-O-α-L-fucopyranosyl(1→2)-β-D-glucopyranosideREF_Ref196418599\r\h[27]5-carboxymethyl-7-hydroxy-2-methylchromoneREF_Ref196418567\r\h[28]quercetin-3-O-β-D-glucoosideREF_Ref196418554\r\h[29]2-(2′-hydroxypropyl)-5-carboxymethyl-7-hydroxy-chromoneREF_Ref196418541\r\h[26]黎红等通过REF_Ref196900807\r\h[32]。此外，何首乌借助诱导有丝分裂活动，增强老化皮肤的抗氧化潜力，缓解衰老小鼠模型的皮肤老化REF_Ref196419074\r\h[33]。周暄宣等REF_Hlk195798702\r\h[7]报道何首乌及提取物二苯乙烯苷可激活Klotho蛋白抑信号通路过度活化，减少氧化应激损伤，调节脂肪组织微环境抑制局部慢性炎症反应，促进真皮层胶原纤维Ⅰ/Ⅲ型比例优化，显著改善皮肤组织退行性病变。Lo等REF_Ref196419102\r\h[34]从何首乌中提取大黄素衍生物大黄素-8-O-6′-O-丙二酰-葡萄糖苷，系统评估了其在大鼠垂体前叶原代细胞中的内分泌调节活性。实验结果显示，EMMG通过模拟内源性生长激素释放肽的分子作用模式，显著增强生长激素的合成与分泌，提示该化合物可能作为何首乌抗衰老功效的核心活性成分。向韵等REF_Ref197416959\r\h[42]通过实验研究发现何首乌苷()可减少脑梗死体积和改善神经功能，实现对脑缺血再灌注()损伤中神经元的保护作用。何首乌可改变认知功能，研究表明经何首乌处理12周后，糖尿病大鼠在水迷宫测试、Y迷宫测试和旷场测试中的表现均有所提升。研究发现，何首乌的这种抑制神经元凋亡的能力与和通路有关。何首乌可降低糖尿病大鼠外周血和海马组织中和的水平，抑制海马组织中信号通路的激活。实验表明，何首乌能在体内抑制海马中HDAC4的表达，其主要成分大黄素在体外也能显著抑制的表达，可减少磷酸化，抑制通路激活，从而减少海马神经元凋亡，发挥神经保护作用REF_Ref197419106\r\h[43]。刘洋REF_Ref197419132\r\h[44]建立“高通量定向筛选+骨髓间充质干细胞靶向诱导”药物筛选模型并对何首乌主要的8个单体成分进行筛选，判断具有神经保护作用的活性成分，之后经实验验证发现大黄素、二苯乙烯苷、虎杖苷均可以通过调控神经突触可塑性及神经元存活相关信号通路，促进脑组织损伤区域神经元胞体修复，对大鼠具有明显的治疗作用。。。。14.1化合1的结1为黄色针状结晶，溶于甲醇，HR-ESI-MS中[M+H]+峰为m/z330.2629(计算值为330.2629)，分子式为C17H14O7，计算其不饱和度为11。化合物1的1H-NMR中(600MHZ,CD3OD)谱中δH3.98是两个甲基上的氢质子信号，在δH6.75(1H,s,H-3),δH6.56(1H,d,J=2.0Hz,H-8),δH6.27(1H,d,J=2.0Hz,H-6),δH7.4(2H,s,H-2',6')对应C-3,C-8,C-6,C-2',C-6'位氢质子信号。在化合物1的13C-NMR(150MHz,CD3OD)谱中共有9个碳信号；其中δc183.1(C-4)表示化合物1含有1个羰基碳信号，δC165.0(C-2),183.1(C-4),163.3(C-5'),39.9(C-4'),164.9(C-7),158.5(C-9),105.2(C-10),149.1(C-3')为8个季碳信号；δC104.6(C-3),105.3(C-6')为2个叔碳信号。结合文献数据REF_Ref197457616\r\h[45]和上述结构特征，鉴定化合物1为苜蓿素，氢谱和碳谱的具体归属如下表4.1。表4.1化合物1的1H-NMR和13C-NMR数据归属1-158.82165.0105.23104.66.75(s)1'122.34183.1105.37.4(s)5163.313.03(s)-3.986-6.27(d,2.0)-7164.95'-3.98894.8105.37.4(s)图4.2化合物2的结构δH''δH氢质子信号。δC'')为6个季碳信号；δC'''δC表4.2化合物2的1H-NMR和13C-NMR数据归属1--231'4565'78采用分级加热回流提取-多相溶剂体系萃取-色谱联用纯化，对何首乌药材进行系统分离：以70%乙醇为溶剂，于85℃下对干燥何首乌块茎进行三次动态回流提取，合并提取液后经旋转蒸发仪浓缩至浸膏状。随后依次以石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇为溶剂进行液-液分配萃取，得乙酸乙酯相萃取物，经硅胶柱色谱梯度洗脱，SephadexLH-20凝胶柱进一步纯化，结合半制备型HPLC分离，为明确化合物结构，采用多维核磁共振1D-NMR、2D-NMR和紫外-可见光谱UV-Vis联用技术，与已有文献对比，确定了这两种单体化合物的化学结构。.:].:汪茂和.中国养生宝典下册[M].第2版.北京:中国医药科技出版社,1998:2603-2604.周荣汉.中药资源学[M].北京:中国医药科技出版社,1993:265-269.ParkWH,LeeSJ,MoonHI.AntimalarialactivityofanewstilbeneglycosidefromParthenocissustricuspidatainmice.AntimicrobAgentsChemother.2008Sep;52(9):3451-3.高王宣,胡英杰,符林春.何首乌二苯乙烯苷的调节血脂作用[J].中国中药杂志,2007,(04):323-326.周暄宣.高纯度二苯乙烯苷制备工艺及其抗衰老机制研究[D].第四军医大学,2013.张静娴.何首乌神经保护活性成分研究[D].北京协和医学院,2016.钱小东,黄伟.何首乌茎叶总黄酮的提取及其抗运动疲劳作用[J].食品研究与开发,2017,38(03):66-69+80.杨闻,段玉峰,王蓓蓓等.首乌藤总黄酮的抑菌活性研究[J].食品工业科技,2012,33(09):111-113.王冯瑞,唐子龙,王宇轩等.何首乌属化学成分与药理作用研究进展[J].陕西中医药大学学报,2024,47(03):136-150.袁炜.何首乌的化学成分研究[D].北京中医药大学,2017.赵利琴,张小平,张朝凤.木藤蓼化学成分的分离鉴定[J].食品科学,2012,33(07):1-5.陈靖,张朝凤,张勉.卷茎蓼地上部分化学成分研究[J].中国中药杂志,2010,35(23):3165-3167.颜世伦.制何首乌的化学成分研究[D].天津大学,2014.ChenLL,HuangXJ,LiMM,etal.PolygonflavanolA,anovelflavonostilbeneglycosidefromtherootsofPolygonummultiflorum[J].PhytochemistryLetters,2012,5(4):756-760.饶高雄,薛咏梅,惠婷婷等.首乌叶化学成分研究[J].中药材,2009,32(06):891-893.KimHK,ChoiYH,ChoiJS,etal.AnewstilbeneglucosidegallatefromtherootsofPolygonummultiflorum[J].ArchivesofPharmacalResearch,2008,31(10):1225-9.etal.NonakaGI,MiwaN,NishiokaI.StilbeneglycosidegallatesandproanthocyanidinsfromPolygonummultiflorum[J].Phytochemistry,1982,21(2):429-432.孙文丽.中药夜交藤的化学成分研究[D].云南中医学院,2018.赵慧男,陈丽丽,黄晓君等.何首乌中一个新的色原酮糖苷[J].中国中药杂志,2014,39(08):1441-1444.李续娥,刘金珠,廖森泰等.何首乌的酚类成分研究(英文)[J].热带亚热带植物学报,2009,17(06):617-620.李鑫,徐浩南,李世兴等.“太白七药”朱砂七化学成分研究[J].中草药,2023,54(04):1043-1050.梅雪,余刘勤,陈小云等.何首乌化学成分和药理作用的研究进展[J].药物评价研究,2016,39(01):122-131.汪明金,陈雯清,袁伟博等.何首乌化学成分、药理作用及肝毒性的研究进展[J].上海中医药杂志,2024,58(03):86-91.黎红,王昆,陈瑶等.基于UHPLC-QE-MS方法结合网络药理学探讨炆何首乌抗衰老的作用机制[J].中国中医药现代远程教育