螺旋体及检验

螺旋体及检验

・考点

♦概述

♦疏螺旋体属（伯氏疏螺旋体、回归热螺旋体、奋森螺旋体）

♦钩端螺旋体

♦密螺旋体属

•梅毒螺旋体

【内容讲解】

一、螺旋体

♦一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状，运动活泼的原核细胞型微生物。

♦有细胞壁、原始核，以二分裂方式繁殖，对抗生素敏感。

♦所致疾病主要有性传播疾病和自然疫源性疾病。

（-）形态与结构

「原浆柱」相J当细菌菌体

螺旋体-中轴丝----＞运动器官

L外膜----►细菌英膜

G-,但着色较困难。

（-）分类与命名

属种疾病传播方式

由氏疏螺旋体莱姆病硬蚪！

回归热疏螺旋体流行性回归热体虱

疏螺旋体属

赫姆疏螺旋体地方性回归热软婢

奋森螺旋体多种口腔感染条件致病

问号钩端螺旋体钩端螺旋体病接触疫水

钩端螺旋体属

双曲钩端螺旋体

梅毒螺旋体梅毒性传播

雅司螺旋体雅司病皮肤损伤

密螺旋体属

地方性螺旋体地方性梅毒黏膜损伤

品他螺旋体品他病皮肤损伤

二、疏螺旋体属

又称包柔螺旋体属。

螺旋稀疏，有3〜10个螺旋，不规则呈波纹状，运动活泼。

对人类致病：伯氏疏螺旋体、回归热螺旋体和奋森螺旋体。

（一）伯氏疏螺旋体

1.生物学特性

♦螺旋稀疏，运动活泼。

♦Giemsa染色呈紫红色，Wright染色呈棕红色。

♦营养要求高；微需氧，5$〜10%C（）2促进生长；适宜温度35℃。

♦生长慢，在液体培养基中一般需培养2〜3周可观察到生长情况。

♦主要抗原：鞭毛蛋白、外膜雷白。

2.致病性

♦引起莱姆病，莱姆病是一种自然疫源性传染病。

♦储存宿主主要是野生或驯养的哺乳动物，主要传播媒介是硬蚪。

♦叮咬部位出现移行性红斑。

♦未经治疗者发展至晚期主要表现为慢性关节炎、慢性神经系统或皮肤异常。

3.微生物检验

皮损组织、淋巴结抽出液、血液、关节滑膜液、脑脊液和尿液。

（1）直接镜检：

♦暗视野显微镜观察标本中螺旋体的形态和运动。

♦Giemsa染色、Wright,染色。

（2）分离培养：

♦标本接种改良的Kelly（BsK）培养基,33〜35c孵育。

（3）抗体检测：

♦采用间接免疫荧光法、ELISA免疫印迹技术。

（4）直接检测标本中的核酸：PCR技术。

（5）动物实验。

（一）回归热螺旋体

回归热是一种由节肢动物传播的、有周期性反复发作的急性传染病。该病目前在我国己较少见。

♦回归热螺旋体，以虱为传播媒介，引起流行性回归热；

♦赫姆疏螺旋体，以蝴为传播媒介，引起地方性I可归热。

（三）奋森螺旋体

♦（；,专性厌氧，常与梭杆菌寄生于人类口腔牙龈部。

♦一般不致病，只有当人体抵抗力显著降低时，大量繁殖，协同引起奋森咽峡炎、牙龈炎、溃疡性口

腔炎等。

♦微生物检查可用棉拭子从病灶取材，涂片染色镜检可见G-螺旋体与G-梭状杆菌共存。用暗视野显微

镜观察形态和运动。

三、钩端螺旋体属

（-）生物学特性

1.形态与染色

♦钩体呈细长丝状圆柱形，螺旋盘绕细密而规则，数FI较多，在暗视野显微镜下，似细小珍珠排列成

的细链，一端或两端弯曲成钩状。菌体长短不等。运动活泼，沿长轴作旋转、扭转及菌体伸缩匍匐状运动,

因而常使菌体呈C、S、8等字形。

♦Montana镀银染色法染成深褐色。

2.培养特性

♦营养要求较高，适用柯氏培养基。

♦最适温度28〜30C,最适川7.2~7.4,低于6.5、高于8.4生长不良。

♦需氧，通常在液体培养基表面1cm内的部位生长最佳。

♦在人工培养基中生长缓慢，28℃培养2周后形成透明、不规则的扁平菌落。

♦在液体培养基中28℃培养1周左右，呈半透明云雾状混浊。

3.抵抗力

♦对理化因素的抵抗力弱于细菌，但较其他致病性螺旋体强。

♦耐冷不耐热和干燥，加温56cl0分钟或60℃1分钟即死亡。

♦对化学消毒剂极敏感。

♦对青霉素、金霉素、庆大霉素极敏感，对磺胺类药物耐药。

（二）致病性

♦钩体病是一种典型的人畜共患性疾病及自然疫源性疾病。

♦最常见的储存宿主是鼠类和猪。

♦主要感染途径是接触了疫水。

♦临床常见的有黄疸出血型、流感伤寒型、肺出血型、脑膜脑炎型、肾功能衰竭型、胃肠炎蛰等。

（三）微生物检验

发病1周内血液的阳性率高,1周后尿和脑脊液等的阳性率高。

1.直接镜检：

♦暗视野显微镜观察标本中螺旋体的形态和运动。

♦用Fontana镀银染色法及荧光抗体染色法。

2.分离培养：

♦标本接种Korlhof培养基，28C孵育。

3.抗体检测：可采用间接免疫荧光法、ELISA等技术。

♦一般在病初和发病的3〜4周采取双份血清，监测抗体滴度的动态变化。

♦有脑膜刺激征的可抽取脑脊液检测抗体。

梅毒螺旋体

I直楂/间接

局钟站朦

（3W）|

硬性下色（一期梅毒）一

J入血（3M）-早期梅哥（传染性强.破坏小）

全身梅毒疹淋巴结肿（二期梅毒）

\10-15Y

心血管/CNS/皮.黠腹口■（三期梅毒L*晚期梅毒（传染性小.破坏大）

致残死亡

先天梅毒

♦引起胎儿的全身性感染，导致流产和死胎。

♦若能出生，也会出现锯齿形牙、鞍鼻和神经性耳香等。

3.微牛物枪监

（1）直接镜检

♦一期梅毒取硬下疳渗出液，二期梅毒取梅毒疹渗出液，制成涂片用暗视野显微镜直接镜检，如见有

运动活泼的密螺旋体有助于诊断。

♦镀银染色、Giemsa染色后光学显微镜检查。

♦直接荧光染色检查标本中的螺旋体。

（2）血清学试验包括非螺旋体抗原试验和螺旋体抗原试脸。

1）非密螺旋体抗原试验：多用牛心类脂质作为抗原，测定患者血清中的反应素（抗脂质抗体）。

A.性病研究实验室试验（VDRL）

B.快速血浆反应素试验（即R）本试验半定量对评价疗效和判断是否有再感染等是有价值的。

C.不加热血清反应素试验（USR）

2）密螺旋体抗原试验：用密螺旋体抗原，检测患者血中的特异性抗体。

A.荧光密螺旋体抗体吸附试验（FTA-ABS）

B.抗梅毒螺旋体抗体的微量血凝试验（MHA-TP）

C.ELISA

D.免疫印迹试验

WHO推荐：

♦过筛试验：VDRL.RPR法：

♦确认试验：FTA-ABS、MHA-TP、ELISA和免疫印迹试验。

（3）核酸检测：PCR技术。

（4）分离培养：

♦不能在人工培养基上生长繁殖。

♦常规诊断一般不做动物试验，必要时可做兔睾丸内接种。

（二）其他密螺旋体

苍白密螺旋体地方亚种和极细亚种，以及品他螺旋体。

♦微生物检验也可进行暗视野显微镜直接镜检和血清学试验。

♦必须结合临床表现。

【例题】下列关于梅毒螺旋体的叙述中，错误的是

A.密螺旋体

B.在暗视野显微镜下运动活泼

C.可在含活细胞的人工培养基上生长

D.抵抗力强

E.引起人类梅毒的病原体

【正确答案】CD

【例题】密螺旋体抗原实验的抗原是

A.非致密的螺旋体

B.梅毒病变组织

C.牛心肌类脂

1).梅毒螺旋体

E.RF

【正确答案】C

【例题】n期梅毒的特征性临床改变是

A.梅毒疹

B.溃疡

C.硬下疳

D.晚期梅毒

E.神经损伤

【正确答案】A

【例题】关于梅毒螺旋体的叙述，不正确的是

A.苍白密螺旋体的苍白亚种

R在暗视野显微镜下可观察其形态和活泼的运动方式

C.人工培养基上生长良好

D.人是其唯一宿主

E.引起人类梅毒的病原体

【正确答案】C

【例题】诊断回归热主要依靠

A.特异性抗体检测

B.发热期血涂片