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文档简介
2026病理学技术(中级)考试试题及答案1.单项选择题(每题1分,共40分。每题只有一个最佳答案)1.1石蜡切片在HE染色前最常用的脱蜡试剂是A.无水乙醇 B.二甲苯 C.丙酮 D.正丁醇 E.氯仿答案:B1.2下列哪项不是PAS染色阳性物质A.糖原 B.黏液 C.真菌胞壁 D.胶原纤维 E.基底膜答案:D1.3免疫组化热诱导抗原修复最常用的缓冲液是A.Tris-HClpH7.6 B.PBSpH7.4 C.柠檬酸缓冲液pH6.0 D.EDTApH8.0 E.甘氨酸-HClpH3.5答案:C1.4冷冻切片出现“冰晶空洞”最主要的原因是A.切片刀钝 B.组织固定过度 C.冷冻速度过慢 D.抗卷板过紧 E.载玻片未粘胶答案:C1.5用于显示含铁血黄素的普鲁士蓝反应其染色原理属于A.氧化反应 B.还原反应 C.络合反应 D.偶氮偶联 E.酸碱中和答案:C1.6电镜标本包埋常用树脂是A.石蜡 B.环氧树脂618 C.明胶 D.聚乙二醇 E.琼脂答案:B1.7下列哪种固定液含重铬酸钾A.10%中性甲醛 B.Zenker C.Bouin D.Carnoy E.4%多聚甲醛答案:B1.8全自动密闭式脱水机酒精缸浓度下降最常见原因是A.组织含水 B.石蜡残留 C.环境温度高 D.泵管老化 E.试剂挥发答案:A1.9切片出现“纵裂”首先应调整A.切片速度 B.刀架角度 C.防卷板位置 D.刀锋间隙角 E.组织块温度答案:D1.10免疫荧光染色后封片常用A.中性树胶 B.甘油-PBS C.二甲苯 D.石蜡油 E.丙烯酸树脂答案:B1.11下列哪种酶标记最适合用于福尔马林固定石蜡切片A.AP B.β-Gal C.HRP D.GOD E.LDH答案:C1.12原位杂交检测HPV16E6mRNA,探针类型首选A.DNA B.cDNA C.RNA D.PNA E.LNA答案:E1.13图像分析系统测定核面积前必须完成的步骤是A.白平衡 B.光密度校准 C.阈值分割 D.标尺标定 E.噪声滤过答案:D1.14下列哪项不是Masson三色染色中红色成分A.肌纤维 B.胞浆 C.红细胞 D.胶原 E.角蛋白答案:D1.15组织芯片制作最关键设备是A.玻片书写仪 B.点样仪 C.组织打孔仪 D.切片机 E.漂烘仪答案:C1.16用于显示神经纤维的Bielschowsky银染属于A.嗜银染色 B.亲银染色 C.黑色素染色 D.脂褐素染色 E.铁染色答案:A1.17下列哪种情况最可能导致“免疫组化假阴性”A.一抗浓度过高 B.内源生物素封闭不足 C.抗原修复过度 D.切片过厚 E.显色时间过长答案:C1.18流式细胞术检测细胞周期,荧光染料首选A.PI B.FITC C.PE D.APC E.PerCP答案:A1.19石蜡切片厚度一般设置为A.1–2μm B.3–5μm C.6–8μm D.10–12μm E.15–20μm答案:B1.20下列哪项不是特殊染色A.PAS B.AB-PAS C.HE D.VG E.PTAH答案:C1.21免疫组化阳性对照应选用A.已知阳性组织 B.PBS代替一抗 C.同型IgG D.阴性组织 E.空白片答案:A1.22组织固定后流水冲洗的主要目的是A.硬化组织 B.去除固定液 C.增强染色 D.中和酸性 E.增加折光答案:B1.23下列哪种包埋方向最适合皮肤活检A.横断 B.水平 C.垂直于表皮 D.斜切 E.任意答案:C1.24切片出现“搓板纹”提示A.刀口缺损 B.组织脱水不足 C.刀架松动 D.石蜡过软 E.抗卷板压力不均答案:A1.25用于显示淀粉样物的刚果红染色,偏振光下呈A.苹果绿双折光 B.橙红单折光 C.蓝紫双折光 D.黄绿单折光 E.无色答案:A1.26下列哪项属于非交联性固定液A.甲醛 B.戊二醛 C.乙醇 D.丙烯醛 E.多聚甲醛答案:C1.27电镜负染色常用试剂A.醋酸铀 B.柠檬酸铅 C.磷钨酸 D.锇酸 E.重铬酸钾答案:C1.28全自动染色封片机封片速度下降首先检查A.盖玻片存量 B.封片胶气泡 C.机械臂校准 D.电源电压 E.电脑系统答案:B1.29下列哪项不是荧光淬灭剂A.DAPI B.抗淬灭剂 C.甘油 D.中性树胶 E.石蜡油答案:D1.30用于显示钙盐的VonKossa染色,黑色沉淀物是A.金属银 B.金属钙 C.磷酸钙 D.碳酸钙 E.草酸钙答案:A1.31免疫组化DAB显色后,阳性颗粒颜色A.红色 B.蓝色 C.棕黄色 D.紫色 E.绿色答案:C1.32组织透明剂选用氯仿替代二甲苯的主要优点是A.价格低 B.毒性小 C.速度快 D.折光高 E.易挥发答案:B1.33切片封片前烤片温度过高将导致A.掉片 B.皱褶 C.抗原破坏 D.染色过深 E.气泡答案:C1.34下列哪项不是图像分析系统硬件A.CCD相机 B.显微镜 C.电脑 D.扫描仪 E.打印机答案:E1.35用于显示脂质的油红O染色,切片类型必须为A.石蜡 B.树脂 C.冷冻 D.碳蜡 E.塑料答案:C1.36组织芯片点样直径通常A.0.1mm B.0.6mm C.2.0mm D.5.0mm E.10mm答案:B1.37免疫组化高压热修复,高压锅到达工作压力后维持A.30s B.1min C.2min D.5min E.10min答案:C1.38下列哪项属于还原性染料A.伊红 B.苏木素 C.碱性品红 D.亚甲蓝 E.刚果红答案:B1.39电镜超薄切片厚度约为A.0.5μm B.1μm C.50–70nm D.200nm E.500nm答案:C1.40下列哪项不是免疫组化二抗系统A.聚合物法 B.ABC C.LSAB D.EnVision E.Feulgen答案:E2.多项选择题(每题2分,共20分。每题有两个或两个以上正确答案,多选少选均不得分)2.1下列哪些属于亲银染色A.Fontana-Masson B.Grimelius C.Bodian D.Sevier-Munger E.Churukian-Schenk答案:A、B2.2可导致“免疫组化非特异性胞浆着色”的原因A.一抗浓度过高 B.组织干燥 C.内源生物素丰富 D.二抗交叉 E.显色时间过长答案:A、B、D、E2.3属于荧光染料的有A.Cy3 B.AlexaFluor488 C.DAB D.Hoechst33342 E.FastRed答案:A、B、D2.4下列哪些组织需延长脱钙时间A.肋骨 B.股骨 C.甲状腺 D.颅骨 E.指骨答案:A、B、D、E2.5关于HE染色,正确的有A.苏木素染核蓝 B.伊红染胞浆红 C.分化用盐酸乙醇 D.返蓝用弱碱水 E.伊红后需脱水答案:A、B、C、D、E2.6属于电镜固定液的有A.2.5%戊二醛 B.1%锇酸 C.4%多聚甲醛 D.10%甲醛 E.PLP答案:A、B、C、E2.7下列哪些属于特殊染色中“三染色”A.Masson B.PAS-AB C.Movat D.Gordon-Sweets E.PTAH答案:A、C2.8组织芯片优点A.节省试剂 B.条件一致 C.高通量 D.可重复 E.可替代常规答案:A、B、C、D2.9图像分析系统可测定A.面积 B.周长 C.光密度 D.核浆比 E.细胞凋亡率答案:A、B、C、D2.10下列哪些属于抗原修复酶A.胰蛋白酶 B.胃蛋白酶 C.蛋白酶K D.链霉蛋白酶 E.胶原酶答案:A、B、C、D3.填空题(每空1分,共20分)3.1免疫组化中,3%H₂O₂用于阻断________酶活性,防止________反应。答案:内源过氧化物、非特异性显色3.2石蜡切片脱蜡至水顺序:二甲苯Ⅰ→二甲苯Ⅱ→________→________→________→流水。答案:100%乙醇、95%乙醇、80%乙醇3.3Masson三色染色中,胶原纤维呈________色,肌纤维呈________色。答案:蓝绿、红3.4电镜标本脱水常用________系列浓度,包埋常用________树脂。答案:丙酮、环氧树脂3.5流式细胞术前,细胞浓度应调至________/mL,避免________现象。答案:1×10⁶、细胞重叠3.6组织固定液10%中性甲醛其甲醛实际浓度为________%,pH范围为________。答案:4、7.0–7.43.7冷冻切片OCT包埋剂主要成分为________和________。答案:聚乙二醇、聚乙烯醇3.8图像分析系统光密度校准常用________滤光片,其OD值范围________。答案:中性密度、0–2.03.9免疫荧光淬灭剂DAPI发射波长为________nm,呈________荧光。答案:461、蓝色3.10组织芯片点样后需________℃烤片________min,使组织________。答案:60、30、粘附牢固4.名词解释(每题3分,共15分)4.1抗原修复答案:利用热、酶或化学方法破坏甲醛固定导致的蛋白交联,恢复抗原表位,提高抗体结合效率。4.2嗜银染色答案:组织成分本身对银无直接还原能力,需外加还原剂使银离子还原为金属银而显色。4.3冰晶空洞答案:冷冻切片时水分缓慢结晶形成的组织空隙,破坏原有结构,影响诊断。4.4图像分割答案:将数字图像中目标区域与背景分离的过程,是定量分析的前提。4.5组织交叉污染答案:不同组织或不同病例成分在切片、染色或封片过程中相互污染,导致假阳性或误诊。5.简答题(每题5分,共25分)5.1简述免疫组化阳性对照设置原则。答案:选用已知阳性组织,固定、处理与待测一致;阳性强度适中;定位明确;每批染色均设;结果记录归档。5.2列举三种脱钙方法并比较优缺点。答案:①EDTA:对抗原保留好,速度慢,适合免疫组化;②甲酸-甲醛:速度中等,对组织损伤小;③硝酸:速度快,易破坏抗原,适合常规HE。5.3简述石蜡切片“皱褶”产生原因及解决措施。答案:原因:石蜡过软、刀钝、切片速度过快、抗卷板压力不当。措施:更换硬蜡、磨刀、调慢速度、调整抗卷板、降低室温。5.4简述DAB显色后复染苏木素步骤及注意事项。答案:步骤:DAB显色→流水冲洗→苏木素染30s→流水→1%盐酸乙醇分化2s→流水返蓝5min→梯度脱水→封片。注意:分化时间不宜过长,防止阳性颗粒褪色;返蓝充分,避免背景红染。5.5简述冷冻切片快速染色HE流程。答案:冷冻切片→固定(丙酮或甲醇)1min→苏木素1min→流水→分化→返蓝→伊红30s→梯度乙醇→封片,总时长约3min。6.综合应用题(共40分)6.1计算题(10分)已知组织块体积为4mm×4mm×2mm,脱水盒底面积20mm×20mm,石蜡密度0.9g/cm³,求包埋所需石蜡质量。答案:体积=0.4×0.4×0.2=0.032cm³;质量=0.032×0.9=0.0288g≈29mg。6.2分析题(15分)某乳腺穿刺标本,免疫组化ER染色出现“间质细胞核着色”,分析可能原因并提出验证方案。答案:原因:①一抗浓度过高;②封闭不足;③内源生物素高;④组织干燥边缘;⑤抗体交叉。验证:设阴性对照(同型IgG)、封闭内源生物素、降低一抗浓度、更换抗体克隆、重复制片。6.3综合设计题(15分)设计一个“双标荧光原位杂交(FISH)”实验方案,检测肺癌石蜡切片中EGFR基因扩增与ALK重排,要求写明探针类型、预处理、杂交条件、荧光镜检通道及结果判读标准。答案:探针:EGFR橙色(CSP7)、ALK分离探针(绿3′红5′)。预处理:65℃烤片2h→二甲苯脱蜡→蛋白酶K37℃20min→梯度乙醇→干燥。杂交:探针混合液85℃变性5min→组织75℃变性5min→37℃杂交过夜。洗涤:0.3%NP-40/2×SSC72℃2min→DAPI复染。镜检:橙色通道(EGFR)、绿红通道(ALK),DAPI定位。判读:EGFR/CEP7≥2.0为扩增;ALK重排信号模式(红绿分离或单绿)>15%细胞为阳性。7.英文文献翻译与解读(10分)原文节选:“Formalin-fixedparaffin-embedded(FFPE)tissuesremainthemainstayofdiagnosticpathology.However,variablepre-analyticalfactors,includingcoldischemiatime,fixativevolume,andduration,significantlyinfluencenucleicacidquality.”问题:7.1翻译上述句子。(3分)答案:甲醛固定石蜡包埋(FFPE)组织仍是诊断病理学的基石,然而,包括冷缺血时间、固定液体积和持续时间在内的多种分析前因素显著影响核酸质量。7.2列举两项提高FFPE组织RNA质量的实验室措施。(2分)答案:缩短冷缺血时间至30min内;固定液与组织体积比≥10:1;低温固定(4℃);使用RNAlater预处理。7.3解释“coldischemiatime”对下游RT-PCR的影响机制。(5分)答案:冷缺血时间延长导致RNase活性升高,mRNA降解,片段化,RT-PCR扩增效率下降,Ct值升高,假阴性风险增加。8.实验室安全与质控(10分)8.1列举免疫组化实
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