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文档简介

(一)粒黜胞系统

1.原始粒黜胞(myeloblast):1078am,胞IS剧或类真圄形,核占金1胞的2/3以上»居中或

略偏位,核染色^呈金I弗朗立状排列均匀,核仁2~5值|、敕小、清楚;胞^量少,染天蓝色,

有透明感,趣颗粒。

2.早幼粒^胞(promyelocyte):12~20〃m,敕原粒黜胞大,核染色^^原粒黜胞粗糙,染

色^颗粒^始有聚集,核仁可见或消失;胞藜染淡蓝色、蓝色或深蓝色,含大小不等、形憨

不一的紫缸色颗粒(即非特累性颗粒)。

3.中幼粒黜胞(myelocyte)

①中性中幼粒(neutrophilicmyelocyte):10~18”m,胞核幡[H形或一假礴始扁平,

可有凹陷,其凹陷鹿名勺占湖胞的2/3-1/2,核染色聚集呈索现状,核仁隆冬勺可冕或消失;

胞藜量多,染淡名工或少数图域略偏盛,含大小一致的幺工色果期立、即特昇性果真粒(致少有一他

府域)。

②嗜酸性中幼粒(eosinophilic):15-20/zm:核舆中性中幼粒相似;胞^内充;粗大而

均匀、排列聚密的橘缸色特累性嗜酸性果期立。

③嗜^性中幼粒(basphilic):10~15〃m,核RI形或腌圄形、但常常翰廓不清,核染色

模糊:胞藜内及核上含有排列零窗L、大小不等数量不多的紫黑色嗜^性颗粒。

4'晚幼粒黜胞(metamyelocyte)

①中性晚幼粒(neutropilicmetamyelocyte):10~162m,核明^凹陷呈臀形,焉蹄形»

半月形,但其核凹陷程度不超谩假^直彳箜的一半,核染色^粗糙,排列更聚密,瓢核仁;胞

^量多,涤缸色,充满中性特兵性颗粒。

酸性晚幼粒(eosinophilicmetamyelocyte):10〜16〃m»核形及幺吉横舆中性晚幼

粒相似;胞藜内充满橘缸色的、大小一致的嗜酸性特臭性颗粒。

^性晚幼粒(basophilicmetamyelocyte):10~14〃m,核固缩呈胃形,翰廓模糊;

胞柴内及核上分怖有少量嗜的性非特巽果百粒v

5.杆状核粒^0胞(stabgranulocyte)

①中性杆状核粒黜胞(neutrophilicstabgranulocyte):10~15〃m,核凹陷程度超谩

假IS直彳笃的一半,核彳至最窄虑大於最宽虑1/3以上,呈带状鸳曲,核染色^粗糙呈瑰状;胞

^充满中性¥0粒。

②嗜酸性杆状核粒黜胞(eosinophilicstabgranulocyte):11〜16〃m,核舆中性杆

状相似;^内充满嗜酸性耨粒。

③性杆状核粒黜胞(basophilicstabgranulocyte):10~12〃m,核呈模糊杆状;

胞藜内及核上分伟有少量嗜偏性颗粒。

6.分集核粒^0胞(segmentedgranulocyte)

①中性分蕖核粒黜胞(neutrophilicsegmentedgranulocyte):10~14am,核呈分

蕖状,蕖舆集之^有^^殂逋或全^^,常分2〜5蕖,核染色^已渡集呈粗的小瑰状,染深

紫SE色;胞藜矍富,内含淡ST色均匀黜小颗粒。

②1W酸性分集核粒黜胞((eosinophilicsegmentedgranulocyte):11~16〃ir,核

多分2集,核染色^^横舆中性分集核相似;胞禁内充满粗大均勺一致的橘缸色嗜酸性颗

粒。

③嗜竣性分集核粒黜胞(basophilicsegmentedgranulocyte):10~12〃m,核可分

3~4蕖或分蕖不明;胞雄分伟有少量大小不等的紫黑色嗜的性颗粒。

(二)鼾黜I胞系统

①原始缸黜胞(pronormoblast):I5~2()〃m,呈[1形或幡圄形,遏^常呈&li角状或瘤

状突起,核呈H1形,居中或偏位,幺勺占黜胞飕的4/5左右,核染色^呈?S粒状敕原粒^胞粗

而密集,核仁b3(因不等,且大小不一,形状不烧即J,呈涤叠色或暗蓝色;胞藜量少,染深

盛色、不透明,有油重叠或,瓢颗粒。

②早幼胞(earlynormoblast):10~18〃m,核剧形或描剧形,图g占^胞的2/3以上,

核染色^颗粒有液集现象,事交原缸名田胞粗糙,核仁模糊或消失:胞藜量憎多,染不透明蓝色

或深蓝色,遏^可见瘤状突起。

③中幼缸蜩0胞(polychromaticnormoblast):8~l5〃m,核圄形,幺勺占名田胞的1/2,

核染色凝聚呈脩索状或瑰状,中IW有明^空隙,如屋碎fit乾檬或打碎墨砚感,辗核仁;胞

藜量相勤悖交多,藜内由於三合成不等量的血缸蛋白,可染呈不同程度的嗜多色性。

④晚幼缸黜胞(orthochromaticnormoblast):7-10/zm»核【剧形居中或偏位»占黜

胞的1/2以下,核染色^^密聚集成^情不洸的紫黑色凰现状,熊核仁;胞浆量敕多,因已

合成大量血缸蛋白,常染涩灰ST色或浅缸色。

缸黜胞(reticulocyte):7.2~7.5〃m悬晚幼红细幽J脱核而成,是尚未完全成熟

的ani胞,瑞氏染色^多胃性缸黜胞,用煌焦油盛活^染色彳灸在黜胞内可见蓝色黜颗粒或呈

竦状或^^名吉摘。

⑥缸黜胞(erythrocyte):正常缸黜胞平均:a7.2〃m,呈曼面微凹之[S篮状,中央较薄,

染色涅,遗^敕厚,染色条,呈粉缸色,维核。

(三)军核黜胞系统

①原始军核黜胞(monoblast):15~20〃m,胞血同形或楠剧形,核较大圄形或^叵形,

核染色?1^冬田,呈疏髭状结横,核仁1~3值I;胞^量敕其它原始细胞瞿富,灰蓝色,不透

明,遏/彖不规划或有儡足状突起。

②幼稚军核黜胞(promonocyte):15~25〃ni,核圄形或不规员I」形,易尉丑曲'凹陷、

切卧等改燮,核染色敕原始军核名田胞粗糙疏髭,核仁可有可辗;胞浅灰蓝色,不透明,

可见细小颗粒。

③罩核黜胞(monocyte):12~20〃m,核形憩常不烷用J,有胃形,,焉蹄形,“S”形,

分集状,肇架形等,核染色疏髭呈状或修余文)|犬结情,熊核仁;胞藜量敕多,染不透明

的灰盛色,可兄iffl小缸色^粒。

(四)淋巴黜胞系统

1•原始淋巴SH胞(lymphoblast):10~18〃m,胞醴圄形或椭圄形,核呈阊形或榴同形,核

染色^呈&田颗粒状,核仁1~2(固;胞藜量少,呈淡蓝色,透明,辗果第立。

2•幼稚淋巴黜胞(prolymphocyte):10〜16am,核[E]形或幡剧形,核染色箕仍较黜缎,核

仁可有可趣;胞藜量较少,淡盛色,偶见有少言午缸色颗粒。

3•淋巴10胞(lymphocyte)

①大淋巴黜胞:12~15〃m,核值|形稍偏於一但IJ,核染色排列聚密均匀,深紫和:色;

胞,簧量相封率交多,染透明淡蓝色,可有少量大小不等的缸色嗜天青颗粒。

②小淋巴^胞:6〜,核相封较小,呈II形,核染色繁密呈大现状,结情不清楚,

染深紫缸色;胞^趣少,似裸核檬,如可见即呈淡蓝色,一般簸颗粒。

(五)藜黜胞系统

1.原始Shffl胞(plasmablast):14〜18am,胞飕U形或楠HI形,核H形,占金I胞的2/3以上,

居中或偏位,核染色^呈组果解拆罔J伏,染紫缸色,核仁2~5flS|:胞藜量多,染深叠色,不透

明,辗颗粒v

2.幼稚蝴胞(proplasmacyte):12〜16〃m,胞醴多呈椭囿形,核剧形或椭剧形,占幺田胞

的1/2,居中或偏位,核染色较原藜&田胞粗糙聚密,始聚集,染深紫缸色,核仁模糊或

消失;胞^量多,深盛色或紫蓝色或呈蓝色火焰状,不透明,有畤可有空泡及少数嗜天青颗

粒。

3.嬷ffl胞(plasmacyte):8~15〃m,核明IS缩小,IH形,占IB胞的1/3以下,偏於一俱”,

核染色货滤集成现状,常排列呈单•输状,瓢核仁;胞装量瞿富,染蓝色或紫臆色,不透明,

有畤有泡沫感,^内可含有小空泡及/或少量嗜天青?@粒,偶兄胞;奥中有较大的SE色或淡盛

色透明的球状物,稽Russell小飕,是球蛋白聚集而成。

(六)巨核^胞系统

1•原始巨核黜胞(megaka^oblast):15~30〃m,胞飕圄形或不规刖形,核大,呈g|形或

不烧划形,核染色^^其池原始细胞粗,呈粗^状或细脩索状结横,染深紫缸色,核仁2~3

fi,淡蓝色,不清晰,不烷即J;胞^量较少,不均匀,不烧划,染深蓝色,辗果真粒。

2•幼稚巨核黜胞(promegkaryocyte):30-50/zm»外形不规刖»核亦不规刖,有重叠,可

扭樽呈胃形或分集状,核染色^呈粗颗粒或粗^状或局部渡集呈小境状,排列聚密,核仁可

有可融;胞^量增多,常有偏足状突出,染蓝色或漫蓝色,在近核虑出现或多或少的很黜小

缸色嗜天青颗粒。

3•巨核Iffl胞(megakarycyte)

(M粒型巨核胞:40~70am,可滓100〃m,外形不掰刖,核敕大,形熊不掰即I,多

呈分蕖状,核染色较粗糙,排列繁密呈困境状,紫缸色,簸核仁;胞藜量瞿富,染粉缸色,

爽雄有欧色,内含大量黜小缸色颗粒,常聚集呈簇,但瓢血小板形成。

②崖板型巨核细胞:40-70/zm,可逵100〃m,形熊大致典颗粒型巨核泉田胞相似,唯有

不同的一黠是胞藜内充满细小的缸色颗粒及数量不等的血小板。

③裸核型巨核黜胞:是崖板型巨核细胞的胞藜解醴彼,臊放出大量血小板,(堇剩一他

细胞核,耦之悬裸核。

4.血小板(platelet):胞猾很小,2~4〃m,呈囿形、檎H形,逗蚓犬,不规划J形,中心部

位有小紫缸色颗粒,燕细胞核,罡片上血小板常三五成群堆集出现。

(七)其他黜胞

1•IS御胞(tissuebasophiliccell)*又不再肥大黜胞(mastcell),12〜20〃ni»呈H]

形,幡u形,梭形,三角形等,核小,呈圄形或楠剧形,居中或偏位,核染色^模糊,结情

不清;胞糜充满圄形•大小一致的深紫色嗜触性颗粒V

2•内皮Sffl胞(endothelialcell):8~22〃m,形憩趣不规EJ,多呈梭形,核呈剧形或椭直形,

核染色呈^状,多熊核仁;胞^量少,染淡蓝色,遏^常模糊不清,常沿核晨触的丽俱IJ或

一端呈尾状伸出,可有黜小紫SE色颗粒。

3•雉黜胞(fibrocyte):胞飕较大,不规划,多^^尾形,核圄形或楠圄形(卜数佃),

核染色^呈或名田或粗的^状结横,核仁卜2/固,不清晰,成熟者瓢核仁:胞糜瞿富,多在黜

胞南喘,染淡整色,谖界模糊,内含^雒各罔状物及少粉嗜天青颗粒。

4•成骨黜胞(osteoblast):胞醴敕大,20〜40〃m,是幡[II形或不规即形,军f固或多偃成群

分怖,核IH形或楠IH形,常偏於黜胞一例I,核染色排列呈粗^状,染深紫缸色,核仁可有

1-3(0;胞藜登富,染深蓝色或灰色,遏^常呈模糊霎霜状。

5•破骨黜胞(osteoclast):胞jg巨大,60~100〃m,形怨不规刖,衣直象巨核胡1胞,核小、数

量较多,3-100他不等,剧形或楠剧形,大小大致相等,遏^清晰,彼此彳蜀立,熊核^相速,

随意排列,核染色呈粗^状,黑乎每f固核都有一偃I蓝色核仁;胞藜蹩富,染淡蓝色或;‘变缸

色,含大小不等的紫缸111小?|粒。

6,脂肪黜胞(fattycell):30〜50〃m,胞飕1]形或幡回形,核较小,形状不规印J,常被摘

屋在一遴,核染色呈黜皴密^状,辗核仁:胞藜内充满大量空泡。

7,微黜胞(histiocyte):胞醴较大,20〜50〃m,形憩多檄,一般呈圄形或椭剧形及不规

刖形,核可有剧形,描剧形,胃形,核染色^呈疏希怒剧I溜吉横,核仁2~4彳固不等;胞装多少

不一,染色也常不一致,有深藻,淡德,灰皓色等,遏^多不短印I或不清楚,趣颗粒或含有

少量或g田或粗或粗^不一的嗜天青颗粒,可有空泡或含累物等。

8・吞噬黜胞(phagocyte):不是一桎褐立的黜胞,而是胞4黄内含有吞噬物^的一自且^胞的

金窗再。具有吞噬功能的黜胞有军核黜胞、组白戢黜胞、血管内皮黜胞,^雉细胞等。吞噬黜胞

的形惑趣不一致,由吞噬物的^型及吞噬物的多少而定。其胞核IH形、楠1H形或不规电形,

常一f固核,有畤悬曼核,核常被摘屋至一假U,核染色^敕疏髭,核仁可有可辗。胞^多少不

一,淡蓝色或淡缸色,常有"空泡,或有数量不等的吞噬物,吞噬物有空泡、色素、颗粒、有

核^胞、SL细胞、血小板、碳核、名田菌等。有畤吞噬幺田胞成堆存在。

第二节累常血IH胞形憨擘(4擘畴)

瞭解:初步青瑞®各桎昊常血黜胞形憩,加重出每一台^微^下的黜胞圄像。

血黜胞形憩在病理情;兄下,可在胞醴、胞核、胞^等方面赞生昊常改燮。

(一)粒黜胞系统形憨臭常

1•白血病口寺粒胞改燮

①胞醴:大小不等、畸形。

②胞^:Auer小醴,颗粒粗大、增多。

Auer小飕:是在细胞^内出现结横均匀一致的SE色黜棒状小飕。崖生原因是嗜天青粒

融合而成。常见於急性非淋巴黜胞性白血病黜胞^内。

③胞核:畸形、切跳、折叠、凹陷、扭曲、分集等。如急淋畴核易破碎,核分裂象增多。

④核^比:增大、转育不平衡(M2b)。

⑤核仁:大、数量增多、亦可不清楚。

2•巨大粒黜胞:可见於中'晚、杆、分喀段。常见巨晚幼、巨杆状。

①形魅特徵:典同期相比,胞醴大、核大、核染色^^同F皆段细胞籍1缴5。

②形成原因:核酸代障凝。

③常见疾病:巨幼贫、M6、MDS、M2b、抗蕖酸^桀物治瘵彼。

3♦中性粒黜胞分蕖遇多:分5蕖以上,常见於巨幼贫、掇重感染恢彳复期。

4•粒细胞中毒燮性改燮

①中毒果真粒:胞;袅果真粒大小不等、分佛不均、染紫黑色或深紫SE色。兄於殿重感染、大面稹

等。

②空泡:^或核内空泡。嵬於酸重感染。

③杜勒小醴(Dohlc):蓝斑,在黜胞藜内直^/勺l~2〃n】的蓝色显域。冕於殿重感染,肝硬

化等。

④核燮性:核固缩、核膻眼、核碎裂、核溶解。兄於殿重感染。

(二)胞系形熊昊常

1•巨幼缸黜胞

①形憩特徵:典同期黜胞相比,胞醴大、核大、核染色、排列疏震“幼核老藜”。

②崖生原因:核酸代障碾。

③常兄疾病:巨幼热、M6、MDS、抗蕖酸治瘵接等。

2•低色素性胞

①形憨特徵:舆同期细胞相比,^量少、嗜脓性、著色偏蓝,核染色^^明^^常改燮“幼

少就老核”。成熟缸黜胞中心淡染显明^^大。

②崖生原因:Hb合成障碾(不能^缺^)。

③常见疾病:IDA、Hb病、慢性感染性贫血等。

3•缸细胞大小不等•形魅不整:且於各槿增生性贫血。

4•球形缸黜胞:<6.4〃门,中心淡染Ig明^缩小或消失。见於遗傅性球形缸细胞增多症。

5•幡圄形ST黜胞:横彳箜/是彳至<0.78。见於遗停性楠剧形缸黜胞增多症。

6•靶形缸黜胞:见於低色素性贫血、地贫等。

7•嗜多色性缸黜胞:成熟缸黜胞染灰盛色或涤灰色。多表示骨髓造血功能活蹬,多免於溶

M、失血性贫血等。

8•嗜胸性黠彩缸细胞:瑞氏染色接在缸名用胞装中角蓝黑色^小颗粒存在。表示骨髓再生加

速。金谷中毒日寺多见。

9•裂狙直1胞:即SB田胞碎片。可见於微血管病性溶贫、Die及^^性。

10•SB用胞中出现昊常结楷

①豪•周小醴(Howoll-Jolly,s):匾核残绘物。可见於巨幼贫、溶贫、脾切除彼、貂中毒等。

②波璟(Cabot,sring):可足於^中毒、巨幼贫等。

(三)淋巴黜胞形熊臭常

1•臭型淋巴黜胞:分藜黜抱型、里核黜胞'幼稚型。可兄於出血热、傅单及其它病毒感染。

2•原、幼淋巴黜胞:淋巴黜胞白血病'淋巴瘤等。

(四)军核-巨噬黜胞系统形憩累常

1•悲冬且:多形性、多核昊名且。

2•急军、核^胞白血病反鹰等。

3•戈iKUfl胞(Gaucher):戈gf病。

4•尼曼-皮克细胞(Niemann-pick):尼曼-皮克病。

(五)巨核黜胞系统形魅臭常

1•幼巨崖板:ITP。

2・小巨核:大小舆成熟淋巴黜胞相似,形憩不烷划,有偏足突起,核染色^^集,辗明核

仁。可兄於白血病、MDS等。

3•巨大血小板:见於巨大血小板粽合症。

第二章横瞬的基本方法

第一窗j裂片方法(1学暗)

掌握:裂片及染色的基本方法。

瞭解:染液及^^液的配裂方法。

一、骨髓裂片

1•第一次骨髓穿刺患者,骨髓罡片8张以上或符所抽骨髓液全部壅完,同畤堡外周血

片4张。

2•徨查病人,骨髓罡片4,同畴壅外周血片25g。

二、脱落黜胞裂片

1•一般包境穿刺,壅片1〜2张。

2•胸腹水及尿液襟本,取50ml以上蹄心(3000r/分)10分,取沉激物壅片2强。

3•月衙脊液糕本,符全部送检物雕心(3000匹分)沉;殿,取沉殿物壁片1张。

4•痰液襟本,取可疑部分壅片3〜55R。

第二血黜胞及脱落黜胞瑞氏-姬姆窿染色(1W)

一、浪剧

1.瑞氏染色液:1克瑞氏染粉,加入1瓶甲醇(分析触,4勺500ml)中混匀,室温放

置3他月彳爰愿用或每天混匀1次,放置室温逋绩7天后鹰用。

2.姬姆窿染色液:ffi0.5克姬姆窿(吉氏)染粉,加入33ml丙三醇(甘油,分析触)中

混匀,放56七水浴箱中3小日寺以上,中^混匀3〜5次,取出冷硅至室

温,再加入33ml甲醇(分析触)中,混勺即可鹰用。

3.磷酸盥辍衡液(PH=6.4〜6.8):磷酸二氧御(辗水,分析触)5克

磷酸氢二金内(含12.HQ,分析触)5克

蒸解水10000ml

溶解混匀储用

4.姬姆窿染色液一磷酸蹙§|衡液混合比例:姬姆窿染色液/勺2〜3ml,加磷酸液幺勺30

〜40ml混匀即可鹰用。每天上下午各新鲜配裂I次。

二、染色方法

1•血或骨髓罡片在瑞氏染色液中固定5〜8秒

2•放人姬姆窿染色液一磷酸豌辍衡液混合液中染色15〜20分,慢性粒籍1胞白血病患者

罡片染色30分,取出沫韩或用滤纸吸斡即作金更下截察。

第三、四@5血象及骨髓象横瞬分析步骤(2擘畤)

掌握:血象横瞬幺吉果及骨餐象检吉果的正常值,正常骨髓象的正常形憩特徵。

熟悉:常见血液病的陶床表现及血象、骨聪象的形憨阜改建特徵。

瞭解:其他系黜胞的正常形憩及昇常形憩。

(-)血象横瞬

1•在做骨髓穿刺的同口彭即故血象检脓

(DBRC、RC、WBC、PLT引嗷。

⑵罡片染色10察。

①SB田胞形魅有辗昇常。

②白黜胞形熊有趣累常。

③血小板形憩及敷量有辗臭常。

④角舞寄生蠡及具他昇常黜胞。

2、作用

(1提供思路

①一系减少:HbI、WBC及PLT正常^贫血。

WBCI、Hb及PLT正常一粒黜胞;咸少或缺乏。

PLTIHb及WBC正常fITP。

②二系减少:Hb及PLTJWBC正常-FTP、急白、MDS、巨幼贫■>

③三系;咸少:Hb、PLT及WBC均I->AA、急白、巨幼贫。

(2提供^^依獴

①骨髓象相似,血象有IS利

如:球形RBCt症—骨髓名工系t、血象有核幺工T、球形RBCl。

IDA^骨髓缸系t、血象辗有核gl、RBC中心淡染显播大。

②而象相似,骨髓象不同

如:AA--------------»血象三系I、骨髓巨核细胞I及辗白血病黜胞。

非白血病性白血病-------->血象三系I、骨髓有白血病黜胞。

MA-------------->血象三系J,骨髓粒系、SE系、巨核系均有巨幼爱。

③血象有明^燮化'骨髓娓燮化

如:博里-----------A&1象淋巴细胞T、昊淋T(〉10%)、骨髓罪燮化。

傅淋-----------^红象淋巴名田胞T、昇淋I、骨髓维建化。

④骨髓有燮化、血象辗明^燮化

如:戈^病--------》骨髓有戈^^胞、血象辗明^^化。

尼曼-皮克病----------A骨髓有尼曼-皮克黜胞、血象维明^^化。

(二)骨髓象检查

凡疑有血液系统或伊赞血液系统疾病均鹰作骨髓穿刺检查

1•逋鹰症

①检查血常规有冏题:血象增高、减少。

⑵陶床艘征有不明原因贫血、出血、彝熟、骨痛、肝脾淋巴结踵大。

2、禁忌症

①由於凝血因子缺陷引起的出血性疾病,如血友病。

②晚期妊娠作骨穿检查要慎重。

③小完及不合作患者不宜作胸骨穿刺淅。

3、楝本株集:一般由陶床翳生作。

(1睬集部位:胸骨、脊突、潞骨、腔骨粗隆(2蕨以下小完)。

(2睬集^量保瞪

①辗菌、殿防感染。

②死亡病例鹰在30分内完成。

③量不能多,一般不超谩0.2ml,否划碑致血稀(混血),影簪判定^^。

④封某些疾病探取多部位穿刺可提高^断率。如樽移癌、骨髓瘤等在病燮或骨痛部位穿刺其

随性率

电交高;如AA多部位穿刺有利硅粉。

⑶堡片量保瞪

①推片畤角度太大、太快都使罡片厚,反之即薄。

②先壁而片、接壁骨髓片。

③骨髓抽太多,裂片人鹰蹲剩骨髓液的玻片斜立,用棉花在斜面的底部吸去部分血液,再行

壅片,底片不能丢。

④作好^姓名、血片(8)、骨髓(1\4)。

⑤罡片中前3张壅片,封估言十PLT量敕好。

⑷判定骨髓取材满意的镂^指襟

(W由吸骨髓日寺病人有特殊的痛感。

②骨髓液及壅片均可兄骨髓小粒(骨髓渣)和脂肪滴。

③^微金竞^察罡片可亵现骨髓特有名田胞。

④含有大量幼粒幼翻胞,粒黜胞杆状核典分集核的比值大於血片中的比值。

⑸韩抽的概念:是指非技衙或穿刺位置不富而抽不出骨髓液或只得到少量血液。其常见

疾病有:

①原彝性或畿转性骨髓^雉化-

②骨髓增生趣度活1®,黜胞遇於渡集。如:白血病、真缸。

③骨髓增生减低:AA。

④月毒瘤骨髓浸润:想淋、MM、樽移癌等。

4、横瞬的方法及步骤

(1)低倍f竟^察

①取材、壅片、染色情;兄:探用“良好”、“尚可”、“欠佳”等檄型逛行押慎。

②判定骨髓有核黜胞增生程度:有核黜胞典成熟缸黜胞之比,分五级:

增生棒度活耀:平均幺勺1:1

增生明^活耀:平均《勺1:10

增生活耀:平均冬勺1:20

增生;咸低:平均冬勺1:50

增生才亟度减低:平均g勺I:200

③践察堡片尾部及谖^有趣大的或成群(博I)的昇常黜胞,同畴三十数全片巨核黜胞。

(2)油金竟^察

①逗择部位:在壅片飕、尾交界霓,逗撵黜胞分怖比敕均匀虑。

②有核^胞分数:可根撼增生程度硅定分类窿息数

增生;咸低及趣度减低:分100或200(固区田胞。

增牛活蹄:分200或500倜细1胞。

增生明^活耀及趣度活耀:分50(“固细胞。

③践察黜胞形魅

粒系:中毒颗粒、空泡、有黑巨幼燮粒黜胞、Aure小飕等。

冬工系:幼幺工余田胞及成熟红黜胞有辗臭常建化。

巨核系:小巨核、幼巨崖板、巨大血小板、估舒•血小板量。

④注意有艇寄生盘。

⑤判定低倍^下觐察到的昊常细胞性。

(3)言十算结果

①根披分类照吉果^算出各系统及各F皆段黜胞的百分率。

②n•算粒条工比值:粒黜胞系^和/s球田胞系^和。

(4)填嘉辍告

①根撼骨髓象分^结果,按辍告军要求逐项选行填嘉V

②做好骨髓象所见的形魅特徵描述。

(5)骨髓辍告分析及意见

①取材、壅片、染色情况:良好、尚可、欠佳。

②骨髓增生程度,粒:缸=?:?。

③粒系:

④缸系:

⑤淋巴系或军核系:

⑥全片巨核细胞数,根獴血小板分伟估n•其量是多'正常、少。

⑦有维寄生盘。

⑧血片分S3及所见暹行描述。

⑨嘉出^意兄:根獴血象、骨髓象和黜胞化擘染色所兄,结合陶床资料,提出具飕^^意

见或供参考的意见。意见分^以下黑槿:

肯定性^^:骨髓有特昇性燮化,麻床表现又典型者,如各槿白血病、MA、MM、醇移癌、

戈病'尼曼-皮克病等。

支持性^断:血象、骨髓象有形憩改燮,可解释陶床表琨,如IDA、AA、溶贫等。

可疑性粉断:骨髓象有部分燮化或出现少量昊常^胞,陶床表现又不典型,可能悬某槿疾病

的早期或前期或不典型病例者,如辘治性贫血等,要结合陶床、作相Fg的椀查,加勤熊践察

其攀化。

排除性^断:如陶床上懊疑ITP的患者,其骨髓中血小板易见(不少),巨核黜胞艇成熟障

碾,即可排除ITP的可能性。

形憩阜描嘉:骨髓有些改燮,但提不出上述性^^断意足,可曾述其形魅阜建化的主要特黠,

36建^作勤憩践察,可能提出迤一步检查的建^。

⑩填第3辍告日期或窈名。

5、骨髓象检查的注意事项

①由於g田胞形熊燮化多槿多檬,故践察黜胞।诗不能根榛其一、二彳固特黠就馨易作出肯定性^

断或否定性^^,要全面察细胞的形憩燮化,结合牖床粽合分析作出判断。

②同一病人的骨髓壁片,可因裂作壅片不佳(太厚、太薄)、染色不好、逗撵分^或践察的

部位不常均易醇致判断错^。

③觐察黜胞形悲要^到仙黜胞的樊育是一•倜^不断的^程,封各系黜胞副分卷若干F皆段

是人卷副分的,在宜I燎觐察中常曾遇到一些^胞既有上一陷段的某些特徵,又有下一P皆段

的某些特黠,由於血黜胞是向成熟方向樊育,故一般遇此情况牖入下一I®段。

④封於(固别介於雨系统之^的细胞辘以判断I痔,可抹用大数牖^法(即揩此^以判断的^

胞^入细胞多的黜胞系)。如在缸系较多的骨髓片中,符介於^^胞典幼缸黜胞之^的细

胞日帚入SE系^胞;介於原粒黜胞典原淋巴黜胞之^的^胞,一般情况原粒黜胞事交原淋巴黜

胞易兄,故鹰端人原粒;如^急性淋巴黜胞白血病的病人,雁端人原淋巴黜胞。切忌在急

性白血病骨髓象中分出多槿原始细胞(如原粒、原军、原淋郎角)的垣象。

⑤急性白血病日寺,各系统原始黜胞在理^上员隹各有特徵,但有畴及;&相似,很辘饕另卜道畤

愿注意践察伴随出现的幼稚细胞'成熟黜胞,加舆其比较,同畴要结合细胞化擘染色、血

象^胞形熊等粽合考鹿」推测原始^胞的E帚^。

⑥有日寺可兄到辘以言能别的^胞,可参考壅片上其他金I胞彳女作出判断,如仍不能硅定可^入

“分^不明黜胞”,但不宜太多,若有一定数量,刖鹰通遇黜胞化孥染色、集醴^片或曾

^等方法弄清^别。

⑦骨髓罡中巨核金1胞减少或血小板减,而外周血象中血小板数正常畤,刖往往是由穿刺凝固

或壅片凝固所致。

⑧作骨髓*田胞阜检查H寺,Fg同日寺作血象黜胞孥检查,道有助於疾病的^断及化瘤接瘤效判

断。

(三)判定骨髓升数值的高低

根掳骨髓各系统各陷段狙胞的料数值舆其相J1的X+SD的离隹散程度涯行判断。

直十数值:在X±1SD以内视悬正常

在X—ISD以下视悬减低

在X+ISD~2SD之^^悬增高

在X+2SD以上明^增高

也五^起以下的U^^均生日已勤手做,教肺辅溥。

第五g5大致正常骨髓象(4擘畤)

掌握:血象检瞬结果及骨髓象检瞬冬吉果的正常值,骨髓各系统各E皆段名田胞的正常形憩特徵,

正常骨髓象甄告的善嘉方法。

熟悉:其他系细胞的正常形憩。

一般符合列情况者,可视悬大致正常骨髓象。

1"骨髓有核^胞增生活睡。

2•粒SE比值:2~4:1。

3•各系统各隋段黜胞比值在正常靶圉,形憨辗明II兵常。

①粒系:冬勺占40-60%,其中原粒<2%,早幼粒<5%,中性中幼粒8%~12%,中性晚幼粒

10%-15%,中性杆状核15%~20%,中性分集核12%~20%,且杆状〉分集,嗜酸<5%,

嗜城<1%。

②缸系:&勺占20%~25%,原1%,早幼缸<5%,以卬、晚幼胞卷土、各处/占10%,

形憨趣昇常。

③淋巴黜胞系:的占15〜25%>均悬成熟淋巴黜胞,原幻淋巴细胞小完偶见。

④里核及^^胞系:各<4%。维原幼军及原幼藜细胞。

⑤巨核系:通常在1.5x3cm的壅片膜上,可见7~35《固巨核^胞。其中原巨0或罕兄,幼巨

0~5%,果薪立巨10-27%,崖板巨44%~60%,裸核0-30%。血小板易兄,呈堆存在。

⑥其它&田胞:可足少量非造血细胞,如&且^^田胞、内皮黜胞、肥大黜胞、破骨&田胞、成骨细

胞、脂肪细胞等。

⑦核分裂象少。

⑧辗昊常泉田胞及寄生蠹。

⑨各系细胞形憩正常。

第六S5陶床血液生化和血细胞化擘

一、黜胞化擘染色(4擘畤)

掌握:NAP染色、$戟粒染色、POX染色方法、结果判定、正常值及陶床意羲。

熟悉:NAP染色、粒染色、POX染色方法的^睿J配裂。

瞭解:NAP染色、粒染色、POX染色方法的。

(-)性磷酸酶染色(NAP)

------挹励法

1.原理细胞内的^性磷酸酹在PH9.2~9£H寺,符底物£-甘油磷酸M水解,滥生磷酸根,

接者奥其^液中的金丐蹄子作用形成磷酸金手,再典硝酸葩起反鹰,形成磷酸的,最彳爰舆硫化^

作用形成硫化JS黑色沉殿定位於胞^中。

2届理I

(1)储用^弹J:①95%乙醵@2%CaCh③2%硝酸的④1%硫化毅⑤6-甘油磷酸热⑥

Tris-HCI^衡液(PH9.5):Tris6g溶于400ml水中,加0.1MHC180ml,PH9.5,加水至

500ml

(2)孵育液(每次必须新鲜配裂):Tris缓衡液20ml,2%CaCl2

20ml,8一甘油磷酸纲200mg。

3.方法

(1)新鲜血片用95%乙醉固定10min,取出,自然乾燥。

(2)聘孵育液放入45℃水浴箱中先TS温5min彳爰,再放入壅片孵育30min,取出壅片(不油

洗)立即放入2%硝酸铝中5min,取出用自来水允分冲洗乾净。

(3)放入1%硫化^溶液(每次必须新鲜配裂)中2min,用自来水冲洗乾浮,用核固SO1

染30min0

4.结果

随性:中性粒^胞胞^为有棕黑色沉激。

隙性:中性粒幺田胞胞藜为维棕黑色沉激。

5.正常参考值

成人:稹分80分左右,

兄童:因年龄而臭。

6.陶床意羲

(1)细菌:稹分球菌tT>GN捍菌,病毒;咸低或熊燮化。但NAP稹分正常/I,不能除

外黜菌感染。

(2)慢粒II白T〜T1。

(3)ALLT,ANLLJ。

(4)AAfT,PNH正常/1。

(5)J,反鹰性^僦胞增多T〜TT。

(6)增性SBffl胞增多症[,畿樊性SE东田胞增多正常。

(7)激素治瘵接NAPf,

(8)妊娠期NAPf。

7.量保瞪

(1)孵育液、1%硫化^每次^^必须新鲜配裂。

(2)Tris-HCl液的PH鹰控制在9.2~9.8之^。

(3)温度鹰殿格控制在45℃左右(上下不超退11)。

(4)罡片在孵育液中型硅温有30分多童。

(5)罡片优孵育液中取出口寺不能冲洗,鹰直接放入硝酸钻,舌刖宜瞬失败v

(6)罡片优硝酸钻中取出H寺鹰用自来水冲洗3分^,否即罡片太麟,结果不好18察。

(7)每次染色必须作封照。

(-)^染色

1.原理骨髓小粒中的含^血黄素布黜胞外gE,其中的三典分子中的蛋白^结合不牢

固,冬至稀豌酸虑理彼而游蹄,加能在酸性克^氟化御溶液中崖生普鲁士蓝反F8。泉田胞内^也

可用此法^示。根揶反鹰的强弱瞭解骨髓中徽的含量。

2弑翔I

(1)酸性克^氨化绊溶液

200g/L受徽氟化御溶液5份

渡蜜酸1份

取200g/L受徽氧化^溶液置於就管中,辍滴加渡舞酸,遏滴遏摇匀,至出现白色

沉殿,再滴加200g/L至^氨化绊溶液,亦遏滴遏摇匀,至白色沉;殿消失^止,借用。

(2)2g/L核固缸一硫酸翱溶液

取硫酸S32g溶於100ml蒸解水中,再加入核固缸0.2g,置37℃水浴中1小畴,

畴振摇,使溶解,谩渡接使用。

3.方法

(1)逗髓粒粤富的骨髓片,用甲醇固定10分袋。

(2)髓片卜滴满酸性至^氨化绊溶液,染色30分^。

(3)用蒸解水冲洗接,用核固复染20分^。

4.结果判断

幼SB田胞内出现盛名余色颗粒悬随性。

5.正常参考值

正常:东田胞内徽>20%,黜胞外徽+~++。

IDA:与田胞内^<15%,黜胞外徽除性。

6.量保瞪

(1)需^察外徽畴玻片最好作去徽虞理,取材壅片彳爰鹰俄量减少污染徽,最好立即暹行

染色。

(2)氟化^溶液少量配裂,如舆蹙酸混合彳爰出现蓝色必须重配。

(3)酸性受徽氧化御溶液必须新鲜配裂。

<4)逗择髓粒瞿富的骨腌壅片・

(5)胞外^敕规划,呈H1或椭剧,舆黜胞存在於同一平面,污染^^细胞不在同一平面。

(6)瑞氏染色接的骨髓片,用甲醵脱色接仍可作^染色。

(7)作随性封照。

7.腕床意羲

(1)东田胞内、外^“一、吞噬细胞内辗咛存徽,可粉断IDA。

(2)条田胞内饿”广、外^”二、吞噬^胞内角后存,可^惭悬ACD。

(3)黜胞内“T"、外^“t/N"、缸黜胞形憩小、低色素,提示可能^Hb病。

(4)黜胞内f或“f”、外^“T/N”、琪形^粒幼SESH胞〉15%,可考鹿:悬琪形徽粒幼细

胞性贫血(RAS)。

(5)MDS、AAY用胞内、外徽均“f”。

(三)遇氧化物酶染色法(POX)

1.原理&田胞内的谩氧化物醐(peroxidase)能揩底物的遇氧化氮分解,筐生新生熊氧。

接者^中的骄苯胺氧化^^苯胺欧,它是一擂不稳定的中^^物,辗需酣的作用迤而建

成棕色化合物沉激於酗的所在部位。

2•武酎

(1)第一液

馨苯胺0.3g

360g/L年硝基氧化纲的和液1ml

95%乙醇加至100ml

吩存於棕色瓶中,可保存一年。小瓶分装储用。

(2)第二液(稀谩氧化氢液,新鲜配裂)

3%谩氧化氮0.3ml

蒸解水25ml

3•方法

(1)於新解乾燥血壅片或骨髓罡片上,滴加第一液5~8滴,使盖满整(固血膜,作用1~2分

袋。

(2)滴加等量的第二液,混匀,染4〜8分^。

(3)勿阳去染液,直接用水冲洗。

(4)乾燥接再用瑞氏染液^染。

4•皓果

除性:辗蓝色或蓝棕色粒。

弱随性:蓝色或蓝棕色颗粒小,分怖较稀疏。

随性:蓝色或蓝棕色果真粒略粗,分伟较密集。

强隔性:叠色或叠棕色颗粒粗大。

5.量保瞪

(1)聊基胺配装在85%〜88%的乙鸣溶液中染色效果敕好,勿用90%~95%的乙阱,否即腐

胞表面蛋白^很快凝固,妨b疑就剜向内渗入而作用减弱。

(2)谩氧化氢需新鲜配裂,其浸度典加入量勿随意更改。

6.陶床意莪

(1)白血病^型:原始及幼稚细胞

J随性强:AML

①随性率23%:ANLLI

弱隔性:AMOL

②随性率<3%:ALL

(2)成熟中性粒黜胞谩氧化物酶燮化

(3)活性t:ALL、CLL、感染、AA等。

活性I:AML、AMOL。

(4)想组^胞:(一)

二、血液生化就瞬(逗做4擘畴)

掌握:Coombs、蔗糖溶血^^、Hb甯泳及HbF等四的操作方法,结果判定,正常

值及陶床意羲。

熟悉:Coombs就瞬、蔗糖溶血者式瞬、Hb量:泳及HbF等^^的原理。

瞭解:Coombs就瞬、蔗糖溶血就瞬、Hb雷:泳等就瞬的就制配裂方法。

(一)抗人球蛋白割除(Coombs,直接法)

1.原理抗人球蛋白^^(Coombs)是用於横瞬K完全抗醴的四。用正常人血清、

血^或血^球蛋白注射免疫家兔,使兔艘内崖生抗人球蛋白抗骸(温反鹰抗飕)。其方法有

直接^^和^接就瞬雨槿。直接^^的目的是检查病人缸黜胞表面的不完全抗醴、即^筮水

洗源彳爰的致敏幺工细胞熟液中加入抗人球蛋白血清,^察是否彝生凝集,彝生凝集者卷Coombs

直接^^随性。

2.

抗人球蛋白血清,生理鞭水。

3.方法

(1)取受检者脱^雉名工细胞用生理蜜水洗源3次。然接配成20%缸黜胞生理鞭水熟液。

(2)符抗人球蛋白血清按1:2、1:4、1:8、1:16的比例稀释。

(3)取一现白瓷板,符上述各稀释度抗血清各1滴,然接分别加20%gU田胞1滴,混匀,

5分^^段查^果,

4.《吉果

不凝集悬除性,凝集^随性。按效慎辍告。

5.正常参考值

正常翻>1胞Coombs就瞬直接反鹰呈隙性。

6.量保瞪

(1)襟本1焦新鲜。富天迤行就瞬,否即反鹰;成弱甚至呈除性。

(2)缸级I胞IS充分冼源,除去吸附的血8黄球蛋白,以免中和抗人球蛋白而出现假卜含性。

(3)冷凝集素很高的血楝本,就瞬前鹰保持在37℃,26用温热豌水冼源。

(4)抗凝弹性j强抗!§熊明^影皆,但可能封弱抗醴或神飕有影辔。因此以脱^雉蛋白血^

好。

7.陶床意羲

(1)自身免疫件溶而怦智而畤Coombs直接就瞬常;&隔忤。

(2)部分慢性淋巴^胞白血病、淋巴瘤、傅:染性军核增多症、巨球蛋白血症、丫•重筵病、

SLE、Evan粽合征(ITP伴自免溶贫)可出现Coombs直接瞬随性。

(二)糖水就瞬

1.原理低蹄子浸度的庶糖溶液在371C温育脩件下,可促迤Iffi醴成分典SE黜胞膜的皓合,

使襁醴敏感的缸东田胞形成小孔,庶糖水溶液逛入aim胞内引起am胞膜破裂,彝生溶血现

象。

2•就配

IO()g/L蔗糖溶液,38g/L枸椽酸纳溶液。

3•方法

(1)取患者枸檬酸系内抗凝血0.5ml,放於4.5mll00g/L蔗糖溶液中。

(2)混合彳爰置37℃水浴中30分享重。

(3)低速雕心,觑察上清液有辗溶血7

4•结果

除性:辗溶血;随性:有溶血。

5.量保瞪

器皿必须清澈乾燥,以免溶血。每次^^畴作正常封照。

6.陶床意莪

(1)PNH患者常呈隔性,AA-PNH粽合征患者亦可随性。

(2)部分自身免疫性溶血性贫血'巨幼黜胞性贫血、遗傅性球形缸黜胞增多症患者可呈隔

性。

(3)健康人呈怪性反愿。

(三)酸溶血就瞬(Ham's频)

1.原理睡樊性睡眠性血缸蛋白尿症(PNH)病人的gj田胞由於膜有缺陷,封神醴溶血效

鹰的敏感性增加,在酸化的正常血清中(PH666.8)37℃孵育,易破壤溶血。

2争9|

(1)25molHCI溶液。

(2)8.5g/LnaCl溶液。

3•方法

(1)取患者血4ml於有小玻璃珠的三角瓶内,馨搐使脱^雉,符此去隹血用生理鞭

水洗源缸名卅胞3次.配成5()%^幺用胞魅液。

(2)取患者血4ml(不抗凝),待凝固接分离隹血清。

(3)按(1)、(2)方法取舆患者同型或AB型正常封照的血裂情SJIII胞熟液和血清。

(4)取2支小^管,按下表操作。

^^操作步^

反鹰物待测管封照管

健康人血清(ml)0.50.5

患者50%RBC熟液(ml)0.025—

健康人50%RBC熟液(ml)—().025

0.25molHCI(ml)0.5—

(5)雨管均加塞,置37℃水浴中1小畴。

(6)直接SS察或低速蹄心彳发S0察雨管有簸溶血现象。

4•皓果判断

待洌管溶血、封照管辗溶血卷随性;雨管均辗溶血即卷除性。

5.量保瞪

(1)本^^不用抗凝血,因抗凝饵J曾阻碾溶血,降低窥敏度。一般用脱线雉蛋白血或抽血

接立即注入生理豌水中洗源。

(2)一切用具要乾燥,剑吗宜要粗,SU田胞熟液要直接滴人液S3,不要沿管壁流下,以免溶

血。

(3)正常血清要新鲜,以免祷醴失活,造成假怪性。

(4)

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