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文档简介
(一)粒黜胞系统
1.原始粒黜胞(myeloblast):1078am,胞IS剧或类真圄形,核占金1胞的2/3以上»居中或
略偏位,核染色^呈金I弗朗立状排列均匀,核仁2~5值|、敕小、清楚;胞^量少,染天蓝色,
有透明感,趣颗粒。
2.早幼粒^胞(promyelocyte):12~20〃m,敕原粒黜胞大,核染色^^原粒黜胞粗糙,染
色^颗粒^始有聚集,核仁可见或消失;胞藜染淡蓝色、蓝色或深蓝色,含大小不等、形憨
不一的紫缸色颗粒(即非特累性颗粒)。
3.中幼粒黜胞(myelocyte)
①中性中幼粒(neutrophilicmyelocyte):10~18”m,胞核幡[H形或一假礴始扁平,
可有凹陷,其凹陷鹿名勺占湖胞的2/3-1/2,核染色聚集呈索现状,核仁隆冬勺可冕或消失;
胞藜量多,染淡名工或少数图域略偏盛,含大小一致的幺工色果期立、即特昇性果真粒(致少有一他
府域)。
②嗜酸性中幼粒(eosinophilic):15-20/zm:核舆中性中幼粒相似;胞^内充;粗大而
均匀、排列聚密的橘缸色特累性嗜酸性果期立。
③嗜^性中幼粒(basphilic):10~15〃m,核RI形或腌圄形、但常常翰廓不清,核染色
模糊:胞藜内及核上含有排列零窗L、大小不等数量不多的紫黑色嗜^性颗粒。
4'晚幼粒黜胞(metamyelocyte)
①中性晚幼粒(neutropilicmetamyelocyte):10~162m,核明^凹陷呈臀形,焉蹄形»
半月形,但其核凹陷程度不超谩假^直彳箜的一半,核染色^粗糙,排列更聚密,瓢核仁;胞
^量多,涤缸色,充满中性特兵性颗粒。
酸性晚幼粒(eosinophilicmetamyelocyte):10〜16〃m»核形及幺吉横舆中性晚幼
粒相似;胞藜内充满橘缸色的、大小一致的嗜酸性特臭性颗粒。
^性晚幼粒(basophilicmetamyelocyte):10~14〃m,核固缩呈胃形,翰廓模糊;
胞柴内及核上分怖有少量嗜的性非特巽果百粒v
5.杆状核粒^0胞(stabgranulocyte)
①中性杆状核粒黜胞(neutrophilicstabgranulocyte):10~15〃m,核凹陷程度超谩
假IS直彳笃的一半,核彳至最窄虑大於最宽虑1/3以上,呈带状鸳曲,核染色^粗糙呈瑰状;胞
^充满中性¥0粒。
②嗜酸性杆状核粒黜胞(eosinophilicstabgranulocyte):11〜16〃m,核舆中性杆
状相似;^内充满嗜酸性耨粒。
③性杆状核粒黜胞(basophilicstabgranulocyte):10~12〃m,核呈模糊杆状;
胞藜内及核上分伟有少量嗜偏性颗粒。
6.分集核粒^0胞(segmentedgranulocyte)
①中性分蕖核粒黜胞(neutrophilicsegmentedgranulocyte):10~14am,核呈分
蕖状,蕖舆集之^有^^殂逋或全^^,常分2〜5蕖,核染色^已渡集呈粗的小瑰状,染深
紫SE色;胞藜矍富,内含淡ST色均匀黜小颗粒。
②1W酸性分集核粒黜胞((eosinophilicsegmentedgranulocyte):11~16〃ir,核
多分2集,核染色^^横舆中性分集核相似;胞禁内充满粗大均勺一致的橘缸色嗜酸性颗
粒。
③嗜竣性分集核粒黜胞(basophilicsegmentedgranulocyte):10~12〃m,核可分
3~4蕖或分蕖不明;胞雄分伟有少量大小不等的紫黑色嗜的性颗粒。
(二)鼾黜I胞系统
①原始缸黜胞(pronormoblast):I5~2()〃m,呈[1形或幡圄形,遏^常呈&li角状或瘤
状突起,核呈H1形,居中或偏位,幺勺占黜胞飕的4/5左右,核染色^呈?S粒状敕原粒^胞粗
而密集,核仁b3(因不等,且大小不一,形状不烧即J,呈涤叠色或暗蓝色;胞藜量少,染深
盛色、不透明,有油重叠或,瓢颗粒。
②早幼胞(earlynormoblast):10~18〃m,核剧形或描剧形,图g占^胞的2/3以上,
核染色^颗粒有液集现象,事交原缸名田胞粗糙,核仁模糊或消失:胞藜量憎多,染不透明蓝色
或深蓝色,遏^可见瘤状突起。
③中幼缸蜩0胞(polychromaticnormoblast):8~l5〃m,核圄形,幺勺占名田胞的1/2,
核染色凝聚呈脩索状或瑰状,中IW有明^空隙,如屋碎fit乾檬或打碎墨砚感,辗核仁;胞
藜量相勤悖交多,藜内由於三合成不等量的血缸蛋白,可染呈不同程度的嗜多色性。
④晚幼缸黜胞(orthochromaticnormoblast):7-10/zm»核【剧形居中或偏位»占黜
胞的1/2以下,核染色^^密聚集成^情不洸的紫黑色凰现状,熊核仁;胞浆量敕多,因已
合成大量血缸蛋白,常染涩灰ST色或浅缸色。
缸黜胞(reticulocyte):7.2~7.5〃m悬晚幼红细幽J脱核而成,是尚未完全成熟
的ani胞,瑞氏染色^多胃性缸黜胞,用煌焦油盛活^染色彳灸在黜胞内可见蓝色黜颗粒或呈
竦状或^^名吉摘。
⑥缸黜胞(erythrocyte):正常缸黜胞平均:a7.2〃m,呈曼面微凹之[S篮状,中央较薄,
染色涅,遗^敕厚,染色条,呈粉缸色,维核。
(三)军核黜胞系统
①原始军核黜胞(monoblast):15~20〃m,胞血同形或楠剧形,核较大圄形或^叵形,
核染色?1^冬田,呈疏髭状结横,核仁1~3值I;胞^量敕其它原始细胞瞿富,灰蓝色,不透
明,遏/彖不规划或有儡足状突起。
②幼稚军核黜胞(promonocyte):15~25〃ni,核圄形或不规员I」形,易尉丑曲'凹陷、
切卧等改燮,核染色敕原始军核名田胞粗糙疏髭,核仁可有可辗;胞浅灰蓝色,不透明,
可见细小颗粒。
③罩核黜胞(monocyte):12~20〃m,核形憩常不烷用J,有胃形,,焉蹄形,“S”形,
分集状,肇架形等,核染色疏髭呈状或修余文)|犬结情,熊核仁;胞藜量敕多,染不透明
的灰盛色,可兄iffl小缸色^粒。
(四)淋巴黜胞系统
1•原始淋巴SH胞(lymphoblast):10~18〃m,胞醴圄形或椭圄形,核呈阊形或榴同形,核
染色^呈&田颗粒状,核仁1~2(固;胞藜量少,呈淡蓝色,透明,辗果第立。
2•幼稚淋巴黜胞(prolymphocyte):10〜16am,核[E]形或幡剧形,核染色箕仍较黜缎,核
仁可有可趣;胞藜量较少,淡盛色,偶见有少言午缸色颗粒。
3•淋巴10胞(lymphocyte)
①大淋巴黜胞:12~15〃m,核值|形稍偏於一但IJ,核染色排列聚密均匀,深紫和:色;
胞,簧量相封率交多,染透明淡蓝色,可有少量大小不等的缸色嗜天青颗粒。
②小淋巴^胞:6〜,核相封较小,呈II形,核染色繁密呈大现状,结情不清楚,
染深紫缸色;胞^趣少,似裸核檬,如可见即呈淡蓝色,一般簸颗粒。
(五)藜黜胞系统
1.原始Shffl胞(plasmablast):14〜18am,胞飕U形或楠HI形,核H形,占金I胞的2/3以上,
居中或偏位,核染色^呈组果解拆罔J伏,染紫缸色,核仁2~5flS|:胞藜量多,染深叠色,不透
明,辗颗粒v
2.幼稚蝴胞(proplasmacyte):12〜16〃m,胞醴多呈椭囿形,核剧形或椭剧形,占幺田胞
的1/2,居中或偏位,核染色较原藜&田胞粗糙聚密,始聚集,染深紫缸色,核仁模糊或
消失;胞^量多,深盛色或紫蓝色或呈蓝色火焰状,不透明,有畤可有空泡及少数嗜天青颗
粒。
3.嬷ffl胞(plasmacyte):8~15〃m,核明IS缩小,IH形,占IB胞的1/3以下,偏於一俱”,
核染色货滤集成现状,常排列呈单•输状,瓢核仁;胞装量瞿富,染蓝色或紫臆色,不透明,
有畤有泡沫感,^内可含有小空泡及/或少量嗜天青?@粒,偶兄胞;奥中有较大的SE色或淡盛
色透明的球状物,稽Russell小飕,是球蛋白聚集而成。
(六)巨核^胞系统
1•原始巨核黜胞(megaka^oblast):15~30〃m,胞飕圄形或不规刖形,核大,呈g|形或
不烧划形,核染色^^其池原始细胞粗,呈粗^状或细脩索状结横,染深紫缸色,核仁2~3
fi,淡蓝色,不清晰,不烷即J;胞^量较少,不均匀,不烧划,染深蓝色,辗果真粒。
2•幼稚巨核黜胞(promegkaryocyte):30-50/zm»外形不规刖»核亦不规刖,有重叠,可
扭樽呈胃形或分集状,核染色^呈粗颗粒或粗^状或局部渡集呈小境状,排列聚密,核仁可
有可融;胞^量增多,常有偏足状突出,染蓝色或漫蓝色,在近核虑出现或多或少的很黜小
缸色嗜天青颗粒。
3•巨核Iffl胞(megakarycyte)
(M粒型巨核胞:40~70am,可滓100〃m,外形不掰刖,核敕大,形熊不掰即I,多
呈分蕖状,核染色较粗糙,排列繁密呈困境状,紫缸色,簸核仁;胞藜量瞿富,染粉缸色,
爽雄有欧色,内含大量黜小缸色颗粒,常聚集呈簇,但瓢血小板形成。
②崖板型巨核细胞:40-70/zm,可逵100〃m,形熊大致典颗粒型巨核泉田胞相似,唯有
不同的一黠是胞藜内充满细小的缸色颗粒及数量不等的血小板。
③裸核型巨核黜胞:是崖板型巨核细胞的胞藜解醴彼,臊放出大量血小板,(堇剩一他
细胞核,耦之悬裸核。
4.血小板(platelet):胞猾很小,2~4〃m,呈囿形、檎H形,逗蚓犬,不规划J形,中心部
位有小紫缸色颗粒,燕细胞核,罡片上血小板常三五成群堆集出现。
(七)其他黜胞
1•IS御胞(tissuebasophiliccell)*又不再肥大黜胞(mastcell),12〜20〃ni»呈H]
形,幡u形,梭形,三角形等,核小,呈圄形或楠剧形,居中或偏位,核染色^模糊,结情
不清;胞糜充满圄形•大小一致的深紫色嗜触性颗粒V
2•内皮Sffl胞(endothelialcell):8~22〃m,形憩趣不规EJ,多呈梭形,核呈剧形或椭直形,
核染色呈^状,多熊核仁;胞^量少,染淡蓝色,遏^常模糊不清,常沿核晨触的丽俱IJ或
一端呈尾状伸出,可有黜小紫SE色颗粒。
3•雉黜胞(fibrocyte):胞飕较大,不规划,多^^尾形,核圄形或楠圄形(卜数佃),
核染色^呈或名田或粗的^状结横,核仁卜2/固,不清晰,成熟者瓢核仁:胞糜瞿富,多在黜
胞南喘,染淡整色,谖界模糊,内含^雒各罔状物及少粉嗜天青颗粒。
4•成骨黜胞(osteoblast):胞醴敕大,20〜40〃m,是幡[II形或不规即形,军f固或多偃成群
分怖,核IH形或楠IH形,常偏於黜胞一例I,核染色排列呈粗^状,染深紫缸色,核仁可有
1-3(0;胞藜登富,染深蓝色或灰色,遏^常呈模糊霎霜状。
5•破骨黜胞(osteoclast):胞jg巨大,60~100〃m,形怨不规刖,衣直象巨核胡1胞,核小、数
量较多,3-100他不等,剧形或楠剧形,大小大致相等,遏^清晰,彼此彳蜀立,熊核^相速,
随意排列,核染色呈粗^状,黑乎每f固核都有一偃I蓝色核仁;胞藜蹩富,染淡蓝色或;‘变缸
色,含大小不等的紫缸111小?|粒。
6,脂肪黜胞(fattycell):30〜50〃m,胞飕1]形或幡回形,核较小,形状不规印J,常被摘
屋在一遴,核染色呈黜皴密^状,辗核仁:胞藜内充满大量空泡。
7,微黜胞(histiocyte):胞醴较大,20〜50〃m,形憩多檄,一般呈圄形或椭剧形及不规
刖形,核可有剧形,描剧形,胃形,核染色^呈疏希怒剧I溜吉横,核仁2~4彳固不等;胞装多少
不一,染色也常不一致,有深藻,淡德,灰皓色等,遏^多不短印I或不清楚,趣颗粒或含有
少量或g田或粗或粗^不一的嗜天青颗粒,可有空泡或含累物等。
8・吞噬黜胞(phagocyte):不是一桎褐立的黜胞,而是胞4黄内含有吞噬物^的一自且^胞的
金窗再。具有吞噬功能的黜胞有军核黜胞、组白戢黜胞、血管内皮黜胞,^雉细胞等。吞噬黜胞
的形惑趣不一致,由吞噬物的^型及吞噬物的多少而定。其胞核IH形、楠1H形或不规电形,
常一f固核,有畤悬曼核,核常被摘屋至一假U,核染色^敕疏髭,核仁可有可辗。胞^多少不
一,淡蓝色或淡缸色,常有"空泡,或有数量不等的吞噬物,吞噬物有空泡、色素、颗粒、有
核^胞、SL细胞、血小板、碳核、名田菌等。有畤吞噬幺田胞成堆存在。
第二节累常血IH胞形憨擘(4擘畴)
瞭解:初步青瑞®各桎昊常血黜胞形憩,加重出每一台^微^下的黜胞圄像。
血黜胞形憩在病理情;兄下,可在胞醴、胞核、胞^等方面赞生昊常改燮。
(一)粒黜胞系统形憨臭常
1•白血病口寺粒胞改燮
①胞醴:大小不等、畸形。
②胞^:Auer小醴,颗粒粗大、增多。
Auer小飕:是在细胞^内出现结横均匀一致的SE色黜棒状小飕。崖生原因是嗜天青粒
融合而成。常见於急性非淋巴黜胞性白血病黜胞^内。
③胞核:畸形、切跳、折叠、凹陷、扭曲、分集等。如急淋畴核易破碎,核分裂象增多。
④核^比:增大、转育不平衡(M2b)。
⑤核仁:大、数量增多、亦可不清楚。
2•巨大粒黜胞:可见於中'晚、杆、分喀段。常见巨晚幼、巨杆状。
①形魅特徵:典同期相比,胞醴大、核大、核染色^^同F皆段细胞籍1缴5。
②形成原因:核酸代障凝。
③常见疾病:巨幼贫、M6、MDS、M2b、抗蕖酸^桀物治瘵彼。
3♦中性粒黜胞分蕖遇多:分5蕖以上,常见於巨幼贫、掇重感染恢彳复期。
4•粒细胞中毒燮性改燮
①中毒果真粒:胞;袅果真粒大小不等、分佛不均、染紫黑色或深紫SE色。兄於殿重感染、大面稹
等。
②空泡:^或核内空泡。嵬於酸重感染。
③杜勒小醴(Dohlc):蓝斑,在黜胞藜内直^/勺l~2〃n】的蓝色显域。冕於殿重感染,肝硬
化等。
④核燮性:核固缩、核膻眼、核碎裂、核溶解。兄於殿重感染。
(二)胞系形熊昊常
1•巨幼缸黜胞
①形憩特徵:典同期黜胞相比,胞醴大、核大、核染色、排列疏震“幼核老藜”。
②崖生原因:核酸代障碾。
③常兄疾病:巨幼热、M6、MDS、抗蕖酸治瘵接等。
2•低色素性胞
①形憨特徵:舆同期细胞相比,^量少、嗜脓性、著色偏蓝,核染色^^明^^常改燮“幼
少就老核”。成熟缸黜胞中心淡染显明^^大。
②崖生原因:Hb合成障碾(不能^缺^)。
③常见疾病:IDA、Hb病、慢性感染性贫血等。
3•缸细胞大小不等•形魅不整:且於各槿增生性贫血。
4•球形缸黜胞:<6.4〃门,中心淡染Ig明^缩小或消失。见於遗傅性球形缸细胞增多症。
5•幡圄形ST黜胞:横彳箜/是彳至<0.78。见於遗停性楠剧形缸黜胞增多症。
6•靶形缸黜胞:见於低色素性贫血、地贫等。
7•嗜多色性缸黜胞:成熟缸黜胞染灰盛色或涤灰色。多表示骨髓造血功能活蹬,多免於溶
M、失血性贫血等。
8•嗜胸性黠彩缸细胞:瑞氏染色接在缸名用胞装中角蓝黑色^小颗粒存在。表示骨髓再生加
速。金谷中毒日寺多见。
9•裂狙直1胞:即SB田胞碎片。可见於微血管病性溶贫、Die及^^性。
10•SB用胞中出现昊常结楷
①豪•周小醴(Howoll-Jolly,s):匾核残绘物。可见於巨幼贫、溶贫、脾切除彼、貂中毒等。
②波璟(Cabot,sring):可足於^中毒、巨幼贫等。
(三)淋巴黜胞形熊臭常
1•臭型淋巴黜胞:分藜黜抱型、里核黜胞'幼稚型。可兄於出血热、傅单及其它病毒感染。
2•原、幼淋巴黜胞:淋巴黜胞白血病'淋巴瘤等。
(四)军核-巨噬黜胞系统形憩累常
1•悲冬且:多形性、多核昊名且。
2•急军、核^胞白血病反鹰等。
3•戈iKUfl胞(Gaucher):戈gf病。
4•尼曼-皮克细胞(Niemann-pick):尼曼-皮克病。
(五)巨核黜胞系统形魅臭常
1•幼巨崖板:ITP。
2・小巨核:大小舆成熟淋巴黜胞相似,形憩不烷划,有偏足突起,核染色^^集,辗明核
仁。可兄於白血病、MDS等。
3•巨大血小板:见於巨大血小板粽合症。
第二章横瞬的基本方法
第一窗j裂片方法(1学暗)
掌握:裂片及染色的基本方法。
瞭解:染液及^^液的配裂方法。
一、骨髓裂片
1•第一次骨髓穿刺患者,骨髓罡片8张以上或符所抽骨髓液全部壅完,同畤堡外周血
片4张。
2•徨查病人,骨髓罡片4,同畴壅外周血片25g。
二、脱落黜胞裂片
1•一般包境穿刺,壅片1〜2张。
2•胸腹水及尿液襟本,取50ml以上蹄心(3000r/分)10分,取沉激物壅片2强。
3•月衙脊液糕本,符全部送检物雕心(3000匹分)沉;殿,取沉殿物壁片1张。
4•痰液襟本,取可疑部分壅片3〜55R。
第二血黜胞及脱落黜胞瑞氏-姬姆窿染色(1W)
一、浪剧
1.瑞氏染色液:1克瑞氏染粉,加入1瓶甲醇(分析触,4勺500ml)中混匀,室温放
置3他月彳爰愿用或每天混匀1次,放置室温逋绩7天后鹰用。
2.姬姆窿染色液:ffi0.5克姬姆窿(吉氏)染粉,加入33ml丙三醇(甘油,分析触)中
混匀,放56七水浴箱中3小日寺以上,中^混匀3〜5次,取出冷硅至室
温,再加入33ml甲醇(分析触)中,混勺即可鹰用。
3.磷酸盥辍衡液(PH=6.4〜6.8):磷酸二氧御(辗水,分析触)5克
磷酸氢二金内(含12.HQ,分析触)5克
蒸解水10000ml
溶解混匀储用
4.姬姆窿染色液一磷酸蹙§|衡液混合比例:姬姆窿染色液/勺2〜3ml,加磷酸液幺勺30
〜40ml混匀即可鹰用。每天上下午各新鲜配裂I次。
二、染色方法
1•血或骨髓罡片在瑞氏染色液中固定5〜8秒
2•放人姬姆窿染色液一磷酸豌辍衡液混合液中染色15〜20分,慢性粒籍1胞白血病患者
罡片染色30分,取出沫韩或用滤纸吸斡即作金更下截察。
第三、四@5血象及骨髓象横瞬分析步骤(2擘畤)
掌握:血象横瞬幺吉果及骨餐象检吉果的正常值,正常骨髓象的正常形憩特徵。
熟悉:常见血液病的陶床表现及血象、骨聪象的形憨阜改建特徵。
瞭解:其他系黜胞的正常形憩及昇常形憩。
(-)血象横瞬
1•在做骨髓穿刺的同口彭即故血象检脓
(DBRC、RC、WBC、PLT引嗷。
⑵罡片染色10察。
①SB田胞形魅有辗昇常。
②白黜胞形熊有趣累常。
③血小板形憩及敷量有辗臭常。
④角舞寄生蠡及具他昇常黜胞。
2、作用
(1提供思路
①一系减少:HbI、WBC及PLT正常^贫血。
WBCI、Hb及PLT正常一粒黜胞;咸少或缺乏。
PLTIHb及WBC正常fITP。
②二系减少:Hb及PLTJWBC正常-FTP、急白、MDS、巨幼贫■>
③三系;咸少:Hb、PLT及WBC均I->AA、急白、巨幼贫。
(2提供^^依獴
①骨髓象相似,血象有IS利
如:球形RBCt症—骨髓名工系t、血象有核幺工T、球形RBCl。
IDA^骨髓缸系t、血象辗有核gl、RBC中心淡染显播大。
②而象相似,骨髓象不同
如:AA--------------»血象三系I、骨髓巨核细胞I及辗白血病黜胞。
非白血病性白血病-------->血象三系I、骨髓有白血病黜胞。
MA-------------->血象三系J,骨髓粒系、SE系、巨核系均有巨幼爱。
③血象有明^燮化'骨髓娓燮化
如:博里-----------A&1象淋巴细胞T、昊淋T(〉10%)、骨髓罪燮化。
傅淋-----------^红象淋巴名田胞T、昇淋I、骨髓维建化。
④骨髓有燮化、血象辗明^燮化
如:戈^病--------》骨髓有戈^^胞、血象辗明^^化。
尼曼-皮克病----------A骨髓有尼曼-皮克黜胞、血象维明^^化。
(二)骨髓象检查
凡疑有血液系统或伊赞血液系统疾病均鹰作骨髓穿刺检查
1•逋鹰症
①检查血常规有冏题:血象增高、减少。
⑵陶床艘征有不明原因贫血、出血、彝熟、骨痛、肝脾淋巴结踵大。
2、禁忌症
①由於凝血因子缺陷引起的出血性疾病,如血友病。
②晚期妊娠作骨穿检查要慎重。
③小完及不合作患者不宜作胸骨穿刺淅。
3、楝本株集:一般由陶床翳生作。
(1睬集部位:胸骨、脊突、潞骨、腔骨粗隆(2蕨以下小完)。
(2睬集^量保瞪
①辗菌、殿防感染。
②死亡病例鹰在30分内完成。
③量不能多,一般不超谩0.2ml,否划碑致血稀(混血),影簪判定^^。
④封某些疾病探取多部位穿刺可提高^断率。如樽移癌、骨髓瘤等在病燮或骨痛部位穿刺其
随性率
电交高;如AA多部位穿刺有利硅粉。
⑶堡片量保瞪
①推片畤角度太大、太快都使罡片厚,反之即薄。
②先壁而片、接壁骨髓片。
③骨髓抽太多,裂片人鹰蹲剩骨髓液的玻片斜立,用棉花在斜面的底部吸去部分血液,再行
壅片,底片不能丢。
④作好^姓名、血片(8)、骨髓(1\4)。
⑤罡片中前3张壅片,封估言十PLT量敕好。
⑷判定骨髓取材满意的镂^指襟
(W由吸骨髓日寺病人有特殊的痛感。
②骨髓液及壅片均可兄骨髓小粒(骨髓渣)和脂肪滴。
③^微金竞^察罡片可亵现骨髓特有名田胞。
④含有大量幼粒幼翻胞,粒黜胞杆状核典分集核的比值大於血片中的比值。
⑸韩抽的概念:是指非技衙或穿刺位置不富而抽不出骨髓液或只得到少量血液。其常见
疾病有:
①原彝性或畿转性骨髓^雉化-
②骨髓增生趣度活1®,黜胞遇於渡集。如:白血病、真缸。
③骨髓增生减低:AA。
④月毒瘤骨髓浸润:想淋、MM、樽移癌等。
4、横瞬的方法及步骤
(1)低倍f竟^察
①取材、壅片、染色情;兄:探用“良好”、“尚可”、“欠佳”等檄型逛行押慎。
②判定骨髓有核黜胞增生程度:有核黜胞典成熟缸黜胞之比,分五级:
增生棒度活耀:平均幺勺1:1
增生明^活耀:平均《勺1:10
增生活耀:平均冬勺1:20
增生;咸低:平均冬勺1:50
增生才亟度减低:平均g勺I:200
③践察堡片尾部及谖^有趣大的或成群(博I)的昇常黜胞,同畴三十数全片巨核黜胞。
(2)油金竟^察
①逗择部位:在壅片飕、尾交界霓,逗撵黜胞分怖比敕均匀虑。
②有核^胞分数:可根撼增生程度硅定分类窿息数
增生;咸低及趣度减低:分100或200(固区田胞。
增牛活蹄:分200或500倜细1胞。
增生明^活耀及趣度活耀:分50(“固细胞。
③践察黜胞形魅
粒系:中毒颗粒、空泡、有黑巨幼燮粒黜胞、Aure小飕等。
冬工系:幼幺工余田胞及成熟红黜胞有辗臭常建化。
巨核系:小巨核、幼巨崖板、巨大血小板、估舒•血小板量。
④注意有艇寄生盘。
⑤判定低倍^下觐察到的昊常细胞性。
(3)言十算结果
①根披分类照吉果^算出各系统及各F皆段黜胞的百分率。
②n•算粒条工比值:粒黜胞系^和/s球田胞系^和。
(4)填嘉辍告
①根撼骨髓象分^结果,按辍告军要求逐项选行填嘉V
②做好骨髓象所见的形魅特徵描述。
(5)骨髓辍告分析及意见
①取材、壅片、染色情况:良好、尚可、欠佳。
②骨髓增生程度,粒:缸=?:?。
③粒系:
④缸系:
⑤淋巴系或军核系:
⑥全片巨核细胞数,根獴血小板分伟估n•其量是多'正常、少。
⑦有维寄生盘。
⑧血片分S3及所见暹行描述。
⑨嘉出^意兄:根獴血象、骨髓象和黜胞化擘染色所兄,结合陶床资料,提出具飕^^意
见或供参考的意见。意见分^以下黑槿:
肯定性^^:骨髓有特昇性燮化,麻床表现又典型者,如各槿白血病、MA、MM、醇移癌、
戈病'尼曼-皮克病等。
支持性^断:血象、骨髓象有形憩改燮,可解释陶床表琨,如IDA、AA、溶贫等。
可疑性粉断:骨髓象有部分燮化或出现少量昊常^胞,陶床表现又不典型,可能悬某槿疾病
的早期或前期或不典型病例者,如辘治性贫血等,要结合陶床、作相Fg的椀查,加勤熊践察
其攀化。
排除性^断:如陶床上懊疑ITP的患者,其骨髓中血小板易见(不少),巨核黜胞艇成熟障
碾,即可排除ITP的可能性。
形憩阜描嘉:骨髓有些改燮,但提不出上述性^^断意足,可曾述其形魅阜建化的主要特黠,
36建^作勤憩践察,可能提出迤一步检查的建^。
⑩填第3辍告日期或窈名。
5、骨髓象检查的注意事项
①由於g田胞形熊燮化多槿多檬,故践察黜胞।诗不能根榛其一、二彳固特黠就馨易作出肯定性^
断或否定性^^,要全面察细胞的形憩燮化,结合牖床粽合分析作出判断。
②同一病人的骨髓壁片,可因裂作壅片不佳(太厚、太薄)、染色不好、逗撵分^或践察的
部位不常均易醇致判断错^。
③觐察黜胞形悲要^到仙黜胞的樊育是一•倜^不断的^程,封各系黜胞副分卷若干F皆段
是人卷副分的,在宜I燎觐察中常曾遇到一些^胞既有上一陷段的某些特徵,又有下一P皆段
的某些特黠,由於血黜胞是向成熟方向樊育,故一般遇此情况牖入下一I®段。
④封於(固别介於雨系统之^的细胞辘以判断I痔,可抹用大数牖^法(即揩此^以判断的^
胞^入细胞多的黜胞系)。如在缸系较多的骨髓片中,符介於^^胞典幼缸黜胞之^的细
胞日帚入SE系^胞;介於原粒黜胞典原淋巴黜胞之^的^胞,一般情况原粒黜胞事交原淋巴黜
胞易兄,故鹰端人原粒;如^急性淋巴黜胞白血病的病人,雁端人原淋巴黜胞。切忌在急
性白血病骨髓象中分出多槿原始细胞(如原粒、原军、原淋郎角)的垣象。
⑤急性白血病日寺,各系统原始黜胞在理^上员隹各有特徵,但有畴及;&相似,很辘饕另卜道畤
愿注意践察伴随出现的幼稚细胞'成熟黜胞,加舆其比较,同畴要结合细胞化擘染色、血
象^胞形熊等粽合考鹿」推测原始^胞的E帚^。
⑥有日寺可兄到辘以言能别的^胞,可参考壅片上其他金I胞彳女作出判断,如仍不能硅定可^入
“分^不明黜胞”,但不宜太多,若有一定数量,刖鹰通遇黜胞化孥染色、集醴^片或曾
^等方法弄清^别。
⑦骨髓罡中巨核金1胞减少或血小板减,而外周血象中血小板数正常畤,刖往往是由穿刺凝固
或壅片凝固所致。
⑧作骨髓*田胞阜检查H寺,Fg同日寺作血象黜胞孥检查,道有助於疾病的^断及化瘤接瘤效判
断。
(三)判定骨髓升数值的高低
根掳骨髓各系统各陷段狙胞的料数值舆其相J1的X+SD的离隹散程度涯行判断。
直十数值:在X±1SD以内视悬正常
在X—ISD以下视悬减低
在X+ISD~2SD之^^悬增高
在X+2SD以上明^增高
也五^起以下的U^^均生日已勤手做,教肺辅溥。
第五g5大致正常骨髓象(4擘畤)
掌握:血象检瞬结果及骨髓象检瞬冬吉果的正常值,骨髓各系统各E皆段名田胞的正常形憩特徵,
正常骨髓象甄告的善嘉方法。
熟悉:其他系细胞的正常形憩。
一般符合列情况者,可视悬大致正常骨髓象。
1"骨髓有核^胞增生活睡。
2•粒SE比值:2~4:1。
3•各系统各隋段黜胞比值在正常靶圉,形憨辗明II兵常。
①粒系:冬勺占40-60%,其中原粒<2%,早幼粒<5%,中性中幼粒8%~12%,中性晚幼粒
10%-15%,中性杆状核15%~20%,中性分集核12%~20%,且杆状〉分集,嗜酸<5%,
嗜城<1%。
②缸系:&勺占20%~25%,原1%,早幼缸<5%,以卬、晚幼胞卷土、各处/占10%,
形憨趣昇常。
③淋巴黜胞系:的占15〜25%>均悬成熟淋巴黜胞,原幻淋巴细胞小完偶见。
④里核及^^胞系:各<4%。维原幼军及原幼藜细胞。
⑤巨核系:通常在1.5x3cm的壅片膜上,可见7~35《固巨核^胞。其中原巨0或罕兄,幼巨
0~5%,果薪立巨10-27%,崖板巨44%~60%,裸核0-30%。血小板易兄,呈堆存在。
⑥其它&田胞:可足少量非造血细胞,如&且^^田胞、内皮黜胞、肥大黜胞、破骨&田胞、成骨细
胞、脂肪细胞等。
⑦核分裂象少。
⑧辗昊常泉田胞及寄生蠹。
⑨各系细胞形憩正常。
第六S5陶床血液生化和血细胞化擘
一、黜胞化擘染色(4擘畤)
掌握:NAP染色、$戟粒染色、POX染色方法、结果判定、正常值及陶床意羲。
熟悉:NAP染色、粒染色、POX染色方法的^睿J配裂。
瞭解:NAP染色、粒染色、POX染色方法的。
(-)性磷酸酶染色(NAP)
------挹励法
1.原理细胞内的^性磷酸酹在PH9.2~9£H寺,符底物£-甘油磷酸M水解,滥生磷酸根,
接者奥其^液中的金丐蹄子作用形成磷酸金手,再典硝酸葩起反鹰,形成磷酸的,最彳爰舆硫化^
作用形成硫化JS黑色沉殿定位於胞^中。
2届理I
(1)储用^弹J:①95%乙醵@2%CaCh③2%硝酸的④1%硫化毅⑤6-甘油磷酸热⑥
Tris-HCI^衡液(PH9.5):Tris6g溶于400ml水中,加0.1MHC180ml,PH9.5,加水至
500ml
(2)孵育液(每次必须新鲜配裂):Tris缓衡液20ml,2%CaCl2
20ml,8一甘油磷酸纲200mg。
3.方法
(1)新鲜血片用95%乙醉固定10min,取出,自然乾燥。
(2)聘孵育液放入45℃水浴箱中先TS温5min彳爰,再放入壅片孵育30min,取出壅片(不油
洗)立即放入2%硝酸铝中5min,取出用自来水允分冲洗乾净。
(3)放入1%硫化^溶液(每次必须新鲜配裂)中2min,用自来水冲洗乾浮,用核固SO1
染30min0
4.结果
随性:中性粒^胞胞^为有棕黑色沉激。
隙性:中性粒幺田胞胞藜为维棕黑色沉激。
5.正常参考值
成人:稹分80分左右,
兄童:因年龄而臭。
6.陶床意羲
(1)细菌:稹分球菌tT>GN捍菌,病毒;咸低或熊燮化。但NAP稹分正常/I,不能除
外黜菌感染。
(2)慢粒II白T〜T1。
(3)ALLT,ANLLJ。
(4)AAfT,PNH正常/1。
(5)J,反鹰性^僦胞增多T〜TT。
(6)增性SBffl胞增多症[,畿樊性SE东田胞增多正常。
(7)激素治瘵接NAPf,
(8)妊娠期NAPf。
7.量保瞪
(1)孵育液、1%硫化^每次^^必须新鲜配裂。
(2)Tris-HCl液的PH鹰控制在9.2~9.8之^。
(3)温度鹰殿格控制在45℃左右(上下不超退11)。
(4)罡片在孵育液中型硅温有30分多童。
(5)罡片优孵育液中取出口寺不能冲洗,鹰直接放入硝酸钻,舌刖宜瞬失败v
(6)罡片优硝酸钻中取出H寺鹰用自来水冲洗3分^,否即罡片太麟,结果不好18察。
(7)每次染色必须作封照。
(-)^染色
1.原理骨髓小粒中的含^血黄素布黜胞外gE,其中的三典分子中的蛋白^结合不牢
固,冬至稀豌酸虑理彼而游蹄,加能在酸性克^氟化御溶液中崖生普鲁士蓝反F8。泉田胞内^也
可用此法^示。根揶反鹰的强弱瞭解骨髓中徽的含量。
2弑翔I
(1)酸性克^氨化绊溶液
200g/L受徽氟化御溶液5份
渡蜜酸1份
取200g/L受徽氧化^溶液置於就管中,辍滴加渡舞酸,遏滴遏摇匀,至出现白色
沉殿,再滴加200g/L至^氨化绊溶液,亦遏滴遏摇匀,至白色沉;殿消失^止,借用。
(2)2g/L核固缸一硫酸翱溶液
取硫酸S32g溶於100ml蒸解水中,再加入核固缸0.2g,置37℃水浴中1小畴,
畴振摇,使溶解,谩渡接使用。
3.方法
(1)逗髓粒粤富的骨髓片,用甲醇固定10分袋。
(2)髓片卜滴满酸性至^氨化绊溶液,染色30分^。
(3)用蒸解水冲洗接,用核固复染20分^。
4.结果判断
幼SB田胞内出现盛名余色颗粒悬随性。
5.正常参考值
正常:东田胞内徽>20%,黜胞外徽+~++。
IDA:与田胞内^<15%,黜胞外徽除性。
6.量保瞪
(1)需^察外徽畴玻片最好作去徽虞理,取材壅片彳爰鹰俄量减少污染徽,最好立即暹行
染色。
(2)氟化^溶液少量配裂,如舆蹙酸混合彳爰出现蓝色必须重配。
(3)酸性受徽氧化御溶液必须新鲜配裂。
<4)逗择髓粒瞿富的骨腌壅片・
(5)胞外^敕规划,呈H1或椭剧,舆黜胞存在於同一平面,污染^^细胞不在同一平面。
(6)瑞氏染色接的骨髓片,用甲醵脱色接仍可作^染色。
(7)作随性封照。
7.腕床意羲
(1)东田胞内、外^“一、吞噬细胞内辗咛存徽,可粉断IDA。
(2)条田胞内饿”广、外^”二、吞噬^胞内角后存,可^惭悬ACD。
(3)黜胞内“T"、外^“t/N"、缸黜胞形憩小、低色素,提示可能^Hb病。
(4)黜胞内f或“f”、外^“T/N”、琪形^粒幼SESH胞〉15%,可考鹿:悬琪形徽粒幼细
胞性贫血(RAS)。
(5)MDS、AAY用胞内、外徽均“f”。
(三)遇氧化物酶染色法(POX)
1.原理&田胞内的谩氧化物醐(peroxidase)能揩底物的遇氧化氮分解,筐生新生熊氧。
接者^中的骄苯胺氧化^^苯胺欧,它是一擂不稳定的中^^物,辗需酣的作用迤而建
成棕色化合物沉激於酗的所在部位。
2•武酎
(1)第一液
馨苯胺0.3g
360g/L年硝基氧化纲的和液1ml
95%乙醇加至100ml
吩存於棕色瓶中,可保存一年。小瓶分装储用。
(2)第二液(稀谩氧化氢液,新鲜配裂)
3%谩氧化氮0.3ml
蒸解水25ml
3•方法
(1)於新解乾燥血壅片或骨髓罡片上,滴加第一液5~8滴,使盖满整(固血膜,作用1~2分
袋。
(2)滴加等量的第二液,混匀,染4〜8分^。
(3)勿阳去染液,直接用水冲洗。
(4)乾燥接再用瑞氏染液^染。
4•皓果
除性:辗蓝色或蓝棕色粒。
弱随性:蓝色或蓝棕色颗粒小,分怖较稀疏。
随性:蓝色或蓝棕色果真粒略粗,分伟较密集。
强隔性:叠色或叠棕色颗粒粗大。
5.量保瞪
(1)聊基胺配装在85%〜88%的乙鸣溶液中染色效果敕好,勿用90%~95%的乙阱,否即腐
胞表面蛋白^很快凝固,妨b疑就剜向内渗入而作用减弱。
(2)谩氧化氢需新鲜配裂,其浸度典加入量勿随意更改。
6.陶床意莪
(1)白血病^型:原始及幼稚细胞
J随性强:AML
①随性率23%:ANLLI
弱隔性:AMOL
②随性率<3%:ALL
(2)成熟中性粒黜胞谩氧化物酶燮化
(3)活性t:ALL、CLL、感染、AA等。
活性I:AML、AMOL。
(4)想组^胞:(一)
二、血液生化就瞬(逗做4擘畴)
掌握:Coombs、蔗糖溶血^^、Hb甯泳及HbF等四的操作方法,结果判定,正常
值及陶床意羲。
熟悉:Coombs就瞬、蔗糖溶血者式瞬、Hb量:泳及HbF等^^的原理。
瞭解:Coombs就瞬、蔗糖溶血就瞬、Hb雷:泳等就瞬的就制配裂方法。
(一)抗人球蛋白割除(Coombs,直接法)
1.原理抗人球蛋白^^(Coombs)是用於横瞬K完全抗醴的四。用正常人血清、
血^或血^球蛋白注射免疫家兔,使兔艘内崖生抗人球蛋白抗骸(温反鹰抗飕)。其方法有
直接^^和^接就瞬雨槿。直接^^的目的是检查病人缸黜胞表面的不完全抗醴、即^筮水
洗源彳爰的致敏幺工细胞熟液中加入抗人球蛋白血清,^察是否彝生凝集,彝生凝集者卷Coombs
直接^^随性。
2.
抗人球蛋白血清,生理鞭水。
3.方法
(1)取受检者脱^雉名工细胞用生理蜜水洗源3次。然接配成20%缸黜胞生理鞭水熟液。
(2)符抗人球蛋白血清按1:2、1:4、1:8、1:16的比例稀释。
(3)取一现白瓷板,符上述各稀释度抗血清各1滴,然接分别加20%gU田胞1滴,混匀,
5分^^段查^果,
4.《吉果
不凝集悬除性,凝集^随性。按效慎辍告。
5.正常参考值
正常翻>1胞Coombs就瞬直接反鹰呈隙性。
6.量保瞪
(1)襟本1焦新鲜。富天迤行就瞬,否即反鹰;成弱甚至呈除性。
(2)缸级I胞IS充分冼源,除去吸附的血8黄球蛋白,以免中和抗人球蛋白而出现假卜含性。
(3)冷凝集素很高的血楝本,就瞬前鹰保持在37℃,26用温热豌水冼源。
(4)抗凝弹性j强抗!§熊明^影皆,但可能封弱抗醴或神飕有影辔。因此以脱^雉蛋白血^
好。
7.陶床意羲
(1)自身免疫件溶而怦智而畤Coombs直接就瞬常;&隔忤。
(2)部分慢性淋巴^胞白血病、淋巴瘤、傅:染性军核增多症、巨球蛋白血症、丫•重筵病、
SLE、Evan粽合征(ITP伴自免溶贫)可出现Coombs直接瞬随性。
(二)糖水就瞬
1.原理低蹄子浸度的庶糖溶液在371C温育脩件下,可促迤Iffi醴成分典SE黜胞膜的皓合,
使襁醴敏感的缸东田胞形成小孔,庶糖水溶液逛入aim胞内引起am胞膜破裂,彝生溶血现
象。
2•就配
IO()g/L蔗糖溶液,38g/L枸椽酸纳溶液。
3•方法
(1)取患者枸檬酸系内抗凝血0.5ml,放於4.5mll00g/L蔗糖溶液中。
(2)混合彳爰置37℃水浴中30分享重。
(3)低速雕心,觑察上清液有辗溶血7
4•结果
除性:辗溶血;随性:有溶血。
5.量保瞪
器皿必须清澈乾燥,以免溶血。每次^^畴作正常封照。
6.陶床意莪
(1)PNH患者常呈隔性,AA-PNH粽合征患者亦可随性。
(2)部分自身免疫性溶血性贫血'巨幼黜胞性贫血、遗傅性球形缸黜胞增多症患者可呈隔
性。
(3)健康人呈怪性反愿。
(三)酸溶血就瞬(Ham's频)
1.原理睡樊性睡眠性血缸蛋白尿症(PNH)病人的gj田胞由於膜有缺陷,封神醴溶血效
鹰的敏感性增加,在酸化的正常血清中(PH666.8)37℃孵育,易破壤溶血。
2争9|
(1)25molHCI溶液。
(2)8.5g/LnaCl溶液。
3•方法
(1)取患者血4ml於有小玻璃珠的三角瓶内,馨搐使脱^雉,符此去隹血用生理鞭
水洗源缸名卅胞3次.配成5()%^幺用胞魅液。
(2)取患者血4ml(不抗凝),待凝固接分离隹血清。
(3)按(1)、(2)方法取舆患者同型或AB型正常封照的血裂情SJIII胞熟液和血清。
(4)取2支小^管,按下表操作。
^^操作步^
反鹰物待测管封照管
健康人血清(ml)0.50.5
患者50%RBC熟液(ml)0.025—
健康人50%RBC熟液(ml)—().025
0.25molHCI(ml)0.5—
(5)雨管均加塞,置37℃水浴中1小畴。
(6)直接SS察或低速蹄心彳发S0察雨管有簸溶血现象。
4•皓果判断
待洌管溶血、封照管辗溶血卷随性;雨管均辗溶血即卷除性。
5.量保瞪
(1)本^^不用抗凝血,因抗凝饵J曾阻碾溶血,降低窥敏度。一般用脱线雉蛋白血或抽血
接立即注入生理豌水中洗源。
(2)一切用具要乾燥,剑吗宜要粗,SU田胞熟液要直接滴人液S3,不要沿管壁流下,以免溶
血。
(3)正常血清要新鲜,以免祷醴失活,造成假怪性。
(4)
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