压疮感染的微生物学基础

压疮感染的微生物学基础

一、感染

感染又称传染，是病原微生物侵入机体后，在一定的部

位生长、繁殖，从而引起一系列病理生理的过程。

由于机体的抵抗力和病原菌两方面的力量不同以及环

境因素的影响，有时不表现临床症状，成为隐性传染或带菌

状态，有时表现出临床症状-一传染病。

传染病可从一个宿主个体直接或间接传播到另一宿主

个体。

决定传染结局的三大因素：病原体；宿主的免疫力；环

境因素。

（一）病原微生物的致病性

1.细菌

毒力：某种微生物对一定宿主，在一定条件下引起疾病

的能力，亦称为致病性。强弱取决于侵袭力和毒素。

侵袭力：病原菌突破宿主防线，并能在宿主内定居、繁

殖和扩散的能力。与酶（卵磷脂晦、透明质酸晦、胶原酶、

链激酶、凝固酶）和微生物结构（荚膜、菌毛、表面抗原）

有关。

毒素：根据性质、来源和作用分为外毒素和内毒素。

外毒素：病原菌生长过程中不断向外界环境分泌的一类

毒性蛋白。毒性强，可选择性地作用于各自特定的组织器官，

抗原性强，毒性不稳定（对热和化学物质敏感）；0.3~0.4%

甲醛脱毒，成为类毒素（仍保持抗原性）。如肉毒毒素、破

伤风痉挛毒素、白喉毒素等。

内毒素：是G-菌细胞壁外层的组分之一，化学成分为脂

多糖（LPS）,一般不分泌到环境中。毒性低，没有器官特异

性，抗原性弱，化学稳定性强。

2.病毒

病毒在宿主细胞内增殖，影响宿主细胞的核酸和蛋白质

代谢，产生3种类型的后果：

第一种：杀细胞感染，如脊髓灰质炎病毒、腺病毒等。

第二种：稳定状态感染，病毒与细胞并存、繁殖、传递

给子细胞，不引起细胞死亡，但在增殖过程中引起宿主细胞

膜组分改变而诱发自身免疫反应，造成对宿主的免疫损伤，

如甲肝病毒等。

第三种：整合感染，整合于宿主细胞染色体或以质粒形

式存在，不增殖，但长期潜伏，可引起恶性肿瘤，如人类多

瘤病毒、人类逆转录病毒等。

3.真菌

（1）致病性真菌：主要是外源性真菌引起的皮肤、皮

下和全身性病害，如手足癣等。

（2）条件致病性真菌：主要是一些内源性真菌在机体

免疫力降低的情况下，引起皮肤病、肺炎、食道炎、膀胱炎、

脑膜炎等。

（3）真菌变态反应性疾病：真菌本身不致病，但引起

变态反应性疾病，如曲霉、青霉等引起的哮喘、鼻炎等。

（4）真菌性中毒：有些真菌产生毒素，引起疾病，但

与细菌病毒感染不同，没有传染性，有明显的地区性和季节

性。

二、免疫

传统上，免疫是指动物机体对微生物侵染的抵抗力和对

同种微生物再感染的特异性防御能力。

后发现，很多现象如器官移植排斥反应、过敏反应等与

病原微生物感染并无关系。因此，人们把生物体能够辨认自

我与非我、对非我作出反应以保持自身稳定的功能称为免疫。

现代免疫的概念具有了更为广泛的意义和更为复杂的

内涵。免疫系统是由免疫组织和器官、免疫细胞及免疫活性

分子等组成。免疫细胞对病原体或肿瘤细胞的适当应答，使

之清除，执行免疫防卫功能。另一方面，免疫细胞的不适当

应答，或应答过高，会致过敏性疾病；或应答过低，易致严

重感染，对自身组织发生应答，导致自身免疫病，均会对生

物机体有害。

（-）免疫反应分类

非特异性免疫是机体对所有病原微生物都有防御作用,

没有特殊的选择性。它受遗传控制，是机体在长期的种系发

育与进化过程中逐渐建立起来的一系列防卫机能，在个体一

出生就具有，又弥天然免疫（先天免疫）。

特异性免疫是指机体针对某一种或某一类微生物或其

产物所产生的特异性抗力。是个体在生活过程中通过隐性感

染或预防接种等方式，使抗原与免疫系统的细胞相接触后而

获得的防卫机能。又称后天获得性免疫。

自动免疫与被动免疫。自动免疫是指用人工方法注射抗

原（菌苗、疫苗、类毒素），使机体产生免疫功能。被动免

疫是指用人工方法注射抗体（抗毒素、抗血清）而产生对病

原体的抵抗力。

细胞免疫与体液免疫细胞免疫是指致敏淋巴细胞与其

相应抗原作用所产生的特异性免疫。体液免疫是抗体的免疫

作用。

免疫学即是研究免疫系统的结构与功能，探索其对机体

有益的防卫功能和有害的病理作用及其机制的科学。可用以

发展有效的免疫学措施，实现动物和人类的防病、治病。

实际上免疫学理论和方法已经扩展到化学分析、分子生

物学、生物传感器等诸多学科和领域。

（二）免疫的基本特征

1.免疫可识别自身与非自身：动物的免疫系统，能够识

别自身与非自身的大分子物质，是机体免疫应答的物质基础。

2.免疫具有特异性：免疫系统的免疫应答和由此产生的

免疫物质具有高度的特异性，即具有很强的针对性。

3.免疫具有记忆性：机体对某种外源物质（抗原）的免

疫应答产生的抗体经过一段时间后会逐渐消失，但免疫系统

仍然保留对该抗原的免疫记忆，若同一外源物质再次侵入机

体时，机体会会迅速产生较上次侵入时更多的抗体，这种现

象称为免疫记忆现象。

（三）动物矶体的免疫具有三项基本功能

L免疫防御功能，即机体对由消化道、呼吸道、皮肤、

黏膜等途径进入体内的病原体的抵抗力，通过机体的特异性

或非特异性免疫杀死病原体。

2.免疫稳定：免疫的第二个重要功能是把新陈代谢中衰

老和死亡细胞清除出体内，以维护机体的生理平衡。

3.免疫监视功能：清除自身突变细胞的功能称为免疫监

视。

三、抗原

抗原是一类能刺激机体免疫系统产生免疫应答产物一

一抗体或致敏淋巴细胞又能与之发生特异性结合的物质。具

有一定的化学结阂、物理及生物学特性，并具有免疫原性（抗

原性）和反应原性。

刺激机体产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的免疫应答

能力称为抗原的抗原性或称免疫原性。

抗原能和特异性抗体或致敏淋巴细胞结合，发生特异性

反应的能力即是抗原的反应原性。又称为免疫反应性。

（一）抗原的分类

完全抗原：具有免疫原性和反应原性的抗原。如大多数

蛋白质、细菌、病毒、细菌外毒素和一种动物血清等，称为

完全抗原。

半抗原：只有反应原性，没有抗原性。

很多小分子物质不能单独刺激机体产生抗体或致敏淋

巴细胞，但能与相应的抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应,

此类物质称半抗原。

如青霉素类药物、药理活性肽类一些激素、喋吟咯暖碱

基、核甘、核甘酸、寡核甘酸、人工多聚核甘酸以及核酸大

分子等物均为不完全抗原。这些分子量较小的半抗原物质与

相应的载体蛋白（如甲基化牛血清蛋白，MBSA）结合为复合

物后，就可各

自通过实验手段诱发出高度特异的抗体，此种抗体可用

于放射免疫测定或其他测定，可检出极微量的相应半抗原物

质。

半抗原又可分为简单半抗原和复合半抗原。

L简单半抗原：又称阻抑半抗原，其分子量较小，既无

免疫原性，也无反应原性，只有一个抗原决定簇，不能与相

应的抗体发生可见的反应，但能中和相应的抗体，阻止了抗

体在相应的完全抗原或复合半抗原发生可见的反应（用沉淀

抑制反应可证实）。如抗菌素、酒石酸、苯甲酸等都属于这

类抗原。

2.复合半抗原：复合半抗原的分子量较大，有多个抗原

决定簇.一般的半抗原都属于此类，能与相应的抗体发生沉

淀反应。二硝基氯苯、多糖类、脂质、脂多糖等都属于这类

抗原。

（二）抗原的性质（构成抗原的条件）

1.大分子物质

分子量通常在104Da以上。一般来说，分子量越大抗原

性越强，低于4xlO4Da的物质，一般不是抗原。

2.一定的结沟

除分子量外，抗原物质还要求有一定的化学组成和结构,

且组成必须暴露在大分子的表面，抗原分子还需具有一定的

空间构型。

3.特异性

由分子表面的特定化学基团所决定，此基团称抗原决定

簇（半抗原工

4.抗原的结合价

凡能与抗体分子结合的抗原决定簇的数目。

抗原决定簇或称抗原表位是位于抗原物质分子表面或

者其他部位的具有一定组成和结构的特殊化学基团，它能与

免疫系统中淋巴细胞上的受体及相应的抗体分子结合，它是

免疫原引起机体特异性免疫应答和免疫原与抗体特异性反

应的基本构成单位。

抗原决定簇决定着抗原的特异性，即决定着抗原与抗体

发生特异结合的能力。一般来讲，蛋白质抗原的3〜8个氨

基酸残基可以构成一个抗原决定簇，多糖抗原中的3〜6个

吠喃环可以构成一个抗原决定簇。抗原分子中直接由分子基

团的一级结构序列决定的决定簇称为顺序决定簇或连续决

定簇。抗原分子中由分子间特定的空间构象决定的决定簇称

为构象决定簇或不连续决定簇。

蛋白质抗原的顺序决定簇决定于肽链的氨基酸序列即

肽链的一级结构，而构象决定簇决定于由这个一级结构折叠

而成的空间构象。

5.异物性

指进入机体的抗原物质必须与机体的组织细胞与体液

的成分有差别，差别越大，免疫原性越强。

包括：异种间的物质，不同种之间的动物体成分有差异,

可互为抗原；同种个体间的不同成分，同种动物的不同个体

之间，相应的组织细胞成分也不同；自体内隔绝成分，固定

在某一部位，与产生抗体的细胞相隔离的成分；其他自体组

织蛋白，因理化因素的影响发生变性，成为自身抗原。

（三）抗原的分类

根据抗原的不同来源可分为：

天然抗原一一天然抗原是指天然生物、细胞及天然产物。

天

然抗原又可具体分为组织抗原、细菌抗原、病毒抗原等。

人工合成抗原一一人工抗原是指人工化学改造后的抗

原，例如半抗原经化学改造后就是人工抗原。

合成抗原一一合成抗原是化学合成的具有抗原性质的

分子，如氨基酸的聚合物等。

根据抗原与矶体的亲缘关系又可分为：异种抗原、同种

异型抗原、自身抗原。

根据抗原的化学性质可分为蛋白质抗原、多糖抗原、脂

抗原、核酸抗原等。

根据刺激机体细胞产生抗体是否需要细胞辅助又可分

为：胸腺依赖性抗原、非胸腺依赖性抗原。绝大多数天然抗

原属于前一种。

（三）微生物的抗原结构

细菌、病毒、立克次氏体等都是很好的抗原，由它们刺

激机体所产生的抗微生物抗体，一般都有保护机体不再受该

微生物侵害的能力。

微生物的各种化学成分如蛋白质及与蛋白质结合的各

种多糖和脂类，都可能是抗原，并可产生各种相应的抗体。

微生物的抗原结构是微生物分类的依据之一。

细菌的抗原：菌体抗原、鞭毛抗原、表面抗原、细菌毒

素抗原。

1.菌体抗原

一个细菌细胞含有多种抗原，是由不同蛋白质、多糖和

脂类组成的复合抗原。不同种或不同型的细菌各有自己特有

的菌体抗原，称为特异抗原，所产生的特异抗原只能与该种

或该型的细菌发生反应。有些不同种或不同型之间有相同的

抗原，称为类属抗原或共同抗原，它们所产生的类属抗原既

能与产生这一抗体的该细菌发生反应，又能与含有相同抗原

的其他种细菌发生反应，称为交叉反应。

具有鞭毛的细菌在失去鞭毛后，不能形成云雾状菌落,

德语中称为OhneHauch,因此把那些丢失鞭毛后的菌体抗原,

称为0抗原。

2.鞭毛抗原

具有鞭毛的细菌可形成云雾状菌落，德语中称为Hauch,

因此将鞭毛抗原命名为H抗原。

3.表面抗原

包围在细菌菌体抗原外表的抗原，它的存在可干扰菌体

抗原与相应抗体的结合。

最先证实的细菌表面抗原是肺炎球菌的荚膜抗原，以后

陆续发现伤寒杆菌的Vi抗原，大肠杆菌的K抗原等。

4.细菌毒素抗原

细菌毒素如外毒素是一类抗原性很强的蛋白质，进入人

体和动物后可引起宿主产生抗体。

类毒素是外毒素经甲醛脱毒后的蛋白质，对于动物已无

毒，但仍具有良好免疫原性而仍是良好抗原。

四、抗体

抗体是机体在抗原物质的刺激下形成的一类能与抗原

特异性结合的血清活性球蛋白，又称免疫球蛋白，由B细胞

（淋巴细胞）合成并分泌，主要存在于动物的血清、淋巴液、

组织液及其他外分泌液中，因此将抗体介导的免疫称为体液

免疫。

抗体特性：抗体在体外可与相应的抗原特异结合而发生

肉眼可见反应；抗体在体内如与病原微生物结合，起抗传染

作用，如作用于自身组织细胞，使机体发生自身免疫性疾病。

抗体存在于血清和其他体液如乳液及某些外分泌液中。

（一）抗体的基本结构和分类

免疫球蛋白的种类很多，但其基本结构却相同。由四条

多肽链组成，其中两条相同的长链叫重链（H链），两条相同

的短链叫做轻链（L链两条重链借二硫键连接起来，呈Y

字形，两条轻链又通过二硫键连接在Y字的两侧，所以整个

免疫球蛋白分子结构是对称的。

近对称轴的一对较长的链称为重链或H链，重链的分子

量约为50〜75kD,由450〜550个氨基酸残基组成。

在对称轴较短的一对肽链称为轻链或L链，轻链的分子

量约25kD,由214个氨基酸残基构成。

IgG分子由3个相同大小的节段组成，位于上端的两个

臂由易弯曲的较链区（hingeregion）连接到主干上形成一

个“Y”形分子，称为Ig分子的单体，这是构成免疫球蛋白

分子的基本单位。

根据肽链中氨基酸顺序是否恒定，将H链和L链分别分

为恒定区域（C区）和可变区域区（V区）。Ig的v区端是肽

链的氨基末端（N端），另一端为竣基末端（C端），H链上的

"CHO”代表它的糖基。

（二）抗体的种类

根据抗体的作用可将抗体分为：

1.抗毒素抗体

由外毒素（或类毒素）刺激机体产生，由于它与相应外

毒素结合后可中和其毒性，因而称为抗毒素抗体。

2.抗菌抗体

机体针对细菌抗原所产生的抗体，当与相应细菌相遇时,

彼此发生结合，本有电解质存在下细菌发生凝集，这类抗体

称为抗菌抗体。

3.抗病毒抗体

针对病毒抗原的抗体。

4.亲细胞性抗体

能吸附在肥大细胞或嗜碱性细胞上，其类别为IgE。

就抗体的理化及免疫学性状看，基本有五种：IgG,IgM,

IgA,IgD和IgE。五种免疫球蛋白单体之间的区别在于

重链C区的氨基酸组成和抗原性有所不同。

（三）抗体的生理功能

识别并特异性结合抗原是免疫球蛋白分子的主要功能,

这种特异性主要是由免疫球蛋白V区的空间构型所决定。免

疫球蛋白分子有单体、二聚体和五聚体等几种体形式。。

抗体在体内与相应抗原特异结合，发挥免疫效应，清除

病原微生物或导致免疫病理损伤。例如IgG和IgA可中和外

毒素，保护细胞免受毒素作用；病毒的中和抗体可阻止病毒

吸附和穿入细胞从而阻止感染相应的靶细胞；分泌型IgA可

抑制细菌粘附到宿主细胞。B细胞膜表面的IgM和IgD是B

细胞识别抗原受体，能特异性识别抗原分子。抗体在体外与

抗原结合引起各种抗原抗体反应。

补体是动物血清中具有类似酶活性的一组蛋白质，具有

潜在的免疫活性，激活后能表现出一系列的免疫生物活性,

能够协同其他免疫物质直接杀伤靶细胞和加强细胞的免疫

功能。IgM、IgG与相应抗原结合后，可通过经典途径活化补

体。IgA和IgG不能激活补体经典途径，但其凝聚形式可通

过旁路途径活化补体，继而由补体系统发挥抗体感染功能。

结合细胞：多种细胞表面（如吞噬细胞、K细胞、NK细

胞）具有IgFc段（结晶片段）的受体，当Ig通过其Fc与

相应受体结合后，可进一步通过受体细胞发挥不同的作用。

如增强吞噬作用或杀伤作用。

通过胎盘：IgG使新生儿自然被动免疫，抵抗感染疾病。

（四）机体产生抗体的一般规律

若初次用适量抗原免疫动物时，须经一定的潜伏期（1

周以上）才能检出低效价的以IgM为主的抗体，这一现象为

初次应答。

此后，在抗体下降时再次注射该抗原进行免疫，则这次

潜伏期明显缩短、效价增高，而且维持时间长，此时产生的

抗体以IgG为主，这就是再次应答，也称免疫记忆或回忆应

答。

有时再次进入机体的是与初次接触抗原不同的另一种

抗原，也可引起初次抗原相对应的抗体产生，称非特异性再

次应答。

再次应答的抗体类别属免疫球蛋白G（IgG）产生抗体的

细胞。抗体的产生是由于巨噬细胞、T细胞、B细胞联合作

用的结果。

在免疫细胞中，执行固有免疫功能的细胞有吞噬细胞、

NK细胞、Bl-B细胞等等。

执行适应性免疫功能的是T及B淋巴细胞。各种免疫细

胞均源于多能造血干细胞。

（五）抗原抗体反应

抗原与其相应抗体相遇，两者将发生特异性结合。

抗原与抗体能够特异性结合是基于两种分子间的结构

互补性与亲和性，这两种特性是由抗原与抗体分子的一级结

构决定的。

在体外，抗原与其相应的抗体结合后，在一定的外界环

境条件下，会出现凝集、沉淀、补体结合等反应。由于抗体

存在与血清等体液中，所以这类测定法称体液免疫测定法，

或称血清学反应检查法。

由于反应的特异性，所以可用已知的抗原测定未知的抗

体，也可用已知抗体鉴定未知抗原。

（六）抗原抗体反应的一般规律

1.特异性

所谓特异性，即一种抗原只能和由它刺激产生的抗体相

结合，不能跟与它无关的抗体发生反应。这种特性是由抗原

的决定簇基于抗体可变的化学组成、空间立体构型所决定的。

例如白喉抗毒素只能与相应的外毒素相结合，而不能与破伤

风外毒素结合。但由于较大分子的蛋白质常含有多种抗原表

位。如果两种不同的抗原分子上有相同的抗原表位，或抗原、

抗体间构型部分相同，都可出现交叉反应。

2.按比性

抗原一般都是多价的，而抗体则是二价的，只有二者比

例适合时，抗原抗体才能结合得最充分，形成的抗原抗体复

合物最多，反应最明显，结果出现最快，此称为等价带。

如抗原或抗体过多，则二者结合后均不能形成大的复合

物，不呈现可见反应，称此为带现象，出现在抗体过量时,

称为前带，出现在抗原过剩时，称为后带。

3.可逆性

抗原与抗体的结合虽具有稳定性，但由于二者之间是非

共价键结合，因此又是可逆的，在一定条件下可解离，且解

离后各自生物活性不变。

抗原抗体复合物的解离取决于两方面的因素，一是抗体

对相应抗原的亲和力，二是环境因素对复合物的影响。高亲

和性抗体的抗原结合点与抗原表位在空间构型上非常适合,

两者结合牢固，不容易解离。反之，则较易解离。解离后的

抗原或抗体均能保持未结合前的结构、活性及特异性。

4.分阶段反应

抗原抗体反应可分为两个阶段：

第一为抗原与抗体发生特异性结合的阶段，此阶段反应

快，仅需几秒至几分钟，但不出现可见反应。

第二阶段为在抗原和抗体发生结合作用的影响下，进一

步交联和聚集，表现为凝集、沉淀、溶解、补体结合介导的

生物现象等肉眼可见的反应。此阶段反应慢，往往需要数分

钟至数小时。实际上这两个阶段难以严格区分。

5.敏感性

抗原抗体不仅有高度特异性，还具有较高敏感性，不仅

可用

于定性，还可用于检测极微量的抗原抗体，其灵敏程度

大大超过当前应用的常规化学方法。但反应的类型不同，其

敏感性有很大的差异

（七）影响抗原抗体反应的因素

1.电解质

电解质能降低抗原抗体结合物的表面电荷，从而促使其

沉淀或凝聚。最常用的是NaCl,适宜浓度为0.15mol/L,即

生理盐水在补体结合试验或溶血反应时，在稀释液中加入少

量的CU2+和Mg2+能加强补体的活性。

2.pH

大多数抗原抗体反应的最适pH为6〜8。当反应pH接近

蛋白质的等电点（pH5〜5,5）时，往往导致抗原抗体的非

特异性沉淀。pH为2〜3时可使抗原一抗体结合物解离。

3.温度

反应温度与反应速度有密切关系。温度高时反应速度快,

反应的最适温度通常为37℃o

4.振荡

机械振荡能加速反应，但强烈振荡可使结合物离解。

5.杂质

反应中如存在与反应无关的蛋白质、多糖等非特异性的

结合物质，往往抑制反应进行甚至引起非特异性反应。

反应的组成成分：抗原、特异抗体。

发生反应的环境因素：基本因素，0.85%NaCl作电解质；

反应温度37℃或56℃；pH为7.0；特殊因素，补体。

反应的基本埼点：抗原与抗体的结合具有特异性；抗原

与抗体是分子表面的结合；抗原与抗体结合形成可见反应,

还与抗原、抗体的相对浓度有关。

抗原抗体反应分两个阶段：结合阶段，抗原抗体特异结

合；反应阶段，结合后受环境因素影响出现可见反应。

（A）主要的抗原抗体反应

1,凝集反应

颗粒性抗原与相应抗体相遇后，在电解质参与下出现肉

眼可见凝集物的现象，称为凝集反应。

反应中的抗原称为凝集原，抗体称为凝集素。凝集反应

又可分为直接凝集反应和间接凝集反应。

直接凝集反应是指颗粒性抗原与凝集素直接结合所出

现的凝集现象；间接凝集反应是指将可溶性抗原吸附于与免

疫无关的小颗粒（载体）表面，此吸附抗原（或抗体）的颗

粒与相应的抗体（或抗原）结合，在有电解质存在的适宜条

件下而发生的凝集反应。

2.沉淀反应

可溶性抗原（蛋白质、多糖或类脂溶液、血清、细菌抽

提液、组织浸出液等）与其相应的抗体在合适条件下反应并

出现絮凝状沉淀物的现象。

用于沉淀反应中的抗原称沉淀原。

用于沉淀反应中的抗体称沉淀素。

3.中和反应

抗体使相应抗原（毒素或病毒）的毒性或传染性丧失的

反应称为中和反应。广义而言，中和激素和酶活性也包括在

内。该试验不仅可用于毒素或病毒种型的鉴定与抗原性分析,

还可用于抗毒素或中和抗体的效价滴定。这种中和作用，不

仅有严格的种、型特异性，而且还表现在量的方面，即一定

量的病毒必须有相应数量的中和抗体才能被中和。

中和试验的基本过程是，先将抗血清与病毒混合，经适

当时间作用，然后接种于宿主系统以检测混合液中的病毒感

染力。

特异性抗体抑制多种抗原的生物学活性（细菌外毒素的

毒性、酶的活性、病毒的感染性等）的反应。例如在临床实

验诊断中测定风湿病患者体内的抗链球菌0抗体的反应，都

是利用的中和试验。

五、免疫

（一）免疫检测方法和技术

免疫标记技术是指将抗原或抗体用荧光素、酶、放射性

同位素和电子致密物质等加以标记，借以提高其灵敏度的一

类新技术。

优点：特异性强、灵敏度高、应用范围广、反应速度快、

容易观察、能定位、能定量。

免疫荧光技术：将结合有荧光素的荧光抗体进行抗原抗

体反应的技术。

常用的荧光素有异硫氯酸荧光素和罗丹明等。它们可与

抗体球蛋白中赖氨酸的氨基结合，在蓝紫光激发下，可分别

出现鲜明的黄绿色及玫瑰红色。

酶免疫测定：用酶标记的抗体来进行的抗原抗体反应。

用酶代替荧光素作标记物以及显示酶标记抗体的方法

是用酶的特殊底物来处理标本。由于酶的催化作用可使原来

无色的底物通过水解、氧化或还原反应而显示颜色。

酶免疫测定的优点：反应结果产生颜色，可用显微镜观

察结果；标本经酶标抗体染色后，还可用其他染料复染，显

示细胞形态结构；标本可长久保存，随时备查；特异性强;

灵敏度高。

标记酶应具备的特点：纯度高、高溶性、特异性强、稳

定性高；测定方法应简单、敏感、快速；与底物作用后会呈

现颜色；与抗体交联后，仍保持酶活性。

最常用的标记酶是辣根过氧化物酶。

放射免疫测定法是应用同位素标记技术来检测抗原抗

体反应的高灵敏度方法。此法兼有放射性同位素标记物所显

示的高灵敏度（可达到ng和pg水平）和血清学反应的高特

异性优点。

发光免疫测定法将化学发光反应与免疫测定法结合起

来的新型技术。

常用的发光试剂有鲁米诺和光泽精。

发光免疫测定法优点：可定量检测抗原或抗体；灵敏度

高，约比酶免疫技术高1000倍；试剂稳定、无毒；检测操

作简便、快速（半小时至数小时）。

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