2026年病理学技术题库及答案

2026年病理学技术题库及答案一、单项选择题（每题2分，共40分）1.用于显示网状纤维的Gomori银染色中，关键的预处理步骤是？A.氧化B.还原C.氨银溶液孵育D.硫代硫酸钠处理答案：A（网状纤维含较多糖蛋白，需先经高锰酸钾氧化暴露醛基，才能与银离子结合）2.液基细胞学标本处理时，离心后细胞沉淀最佳的固定液是？A.95%乙醇B.10%中性福尔马林C.Bouin液D.Carnoy液答案：A（液基细胞学要求快速固定保持细胞形态，95%乙醇能有效固定蛋白质并防止细胞溶解）3.免疫组织化学染色中，内源性生物素最易干扰的检测系统是？A.荧光素直接标记法B.辣根过氧化物酶（HRP）-DAB系统C.链霉亲和素-生物素（SABC）系统D.碱性磷酸酶（AP）-快红系统答案：C（链霉亲和素与生物素亲和力极高，组织内源性生物素会非特异性结合，导致假阳性）4.冰冻切片时，组织过硬导致切片碎裂的主要原因是？A.冷冻温度过低（<-30℃）B.冷冻温度过高（>-18℃）C.组织含血量过多D.组织未充分干燥答案：A（温度过低会使组织内水分形成冰晶，破坏细胞结构，导致切片易碎；适宜温度为-18~-25℃）5.原位杂交技术中，防止RNA酶污染的关键措施是？A.使用DEPC水配制所有试剂B.高压灭菌玻璃器皿C.戴乳胶手套操作D.以上均是答案：D（RNA酶广泛存在且耐高温，需通过DEPC处理水、高压灭菌（180℃干烤2小时）、戴手套避免汗液污染等综合措施）6.组织芯片制作中，受体蜡块的最佳厚度是？A.1mmB.3mmC.5mmD.7mm答案：B（过薄易破碎，过厚影响切片连续性；3mm厚度兼顾支撑性和切片质量）7.HE染色中，苏木精染色后分化不足会导致？A.细胞核着色过浅B.细胞质背景发蓝C.核质对比度下降D.切片脱片答案：B（分化步骤通过盐酸乙醇去除多余苏木精，分化不足则胞质中残留苏木精，与伊红重叠呈现蓝背景）8.流式细胞术检测细胞周期时，常用的DNA染料是？A.碘化丙啶（PI）B.异硫氰酸荧光素（FITC）C.藻红蛋白（PE）D.4',6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）答案：A（PI可嵌入双链DNA，且需破膜处理，适合固定后细胞的周期分析；DAPI更适用于活细胞）9.电子显微镜标本制备中，戊二醛固定的主要作用是？A.固定蛋白质B.固定脂类C.增强反差D.脱水答案：A（戊二醛通过醛基与蛋白质氨基交联，稳定细胞超微结构；锇酸主要固定脂类）10.荧光原位杂交（FISH）中，探针变性的温度通常为？A.37℃B.55℃C.75℃D.95℃答案：C（DNA双链解链需70~80℃，过高会破坏组织形态，过低则解链不充分）11.细胞爬片免疫荧光染色时，封闭步骤常用的血清是？A.兔血清B.羊血清C.与二抗同源的血清D.胎牛血清答案：C（封闭非特异性结合位点，需使用与二抗种属相同的血清，避免交叉反应）12.分子病理学中，Sanger测序的局限性是？A.无法检测大片段缺失B.通量低，仅能检测单基因C.不能区分同义突变D.对DNA质量要求低答案：B（Sanger测序一次仅能读取约1000bp，适合单基因检测；NGS可同时检测数百基因）13.组织标本长期保存的最佳条件是？A.-20℃冰箱B.-80℃冰箱C.液氮（-196℃）D.10%中性福尔马林答案：C（液氮可长期稳定保存核酸和蛋白质，-80℃保存10年以上可能降解，福尔马林仅适合形态学）14.巴氏染色中，橙黄G主要染？A.表层鳞状上皮细胞胞质B.中层细胞胞质C.底层细胞胞质D.细胞核答案：A（橙黄G对成熟鳞状上皮细胞的角化胞质亲和力高，染成亮橙色）15.免疫组化结果判读时，阳性对照缺失的主要风险是？A.无法排除假阴性B.无法排除假阳性C.影响半定量评分D.不影响结果答案：A（阳性对照应显示明确阳性，若阴性可能提示试剂失效或操作失误，导致真阳性被漏判）16.透射电镜标本包埋时，常用的树脂是？A.石蜡B.环氧树脂C.甲基丙烯酸酯D.明胶答案：B（环氧树脂硬度高，适合超薄切片（50~70nm），且电子穿透性好）17.实时荧光定量PCR（qPCR）中，Ct值与初始模板量的关系是？A.Ct值越大，模板量越多B.Ct值越小，模板量越多C.Ct值与模板量无关D.Ct值稳定时模板量最大答案：B（Ct值为荧光信号达到阈值的循环数，初始模板越多，达到阈值所需循环数越少）18.细胞病理学中，TBS报告系统（2014版）将意义不明确的非典型鳞状细胞缩写为？A.ASC-USB.LSILC.HSILD.AGC答案：A（LSIL为低度鳞状上皮内病变，HSIL为高度，AGC为非典型腺细胞）19.组织化学PAS染色中，过碘酸的作用是？A.氧化多糖中的乙二醇基为醛基B.还原醛基为羟基C.与醛基结合显色D.媒染增强对比度答案：A（PAS反应通过过碘酸氧化多糖（如糖原、黏蛋白）的1,2-乙二醇基提供醛基，再与Schiff试剂结合显紫红色）20.实验室生物安全中，福尔马林的安全操作浓度限值（8小时均值）是？A.0.1ppmB.0.3ppmC.0.5ppmD.1ppm答案：C（美国OSHA规定福尔马林8小时时间加权平均浓度限值为0.5ppm，短期接触限值2ppm）二、多项选择题（每题3分，共30分）1.影响组织固定效果的因素包括？A.固定液体积（组织体积的10~20倍）B.固定时间（一般6~24小时）C.组织厚度（<0.5cm）D.固定液温度（4℃或室温）答案：ABCD（固定液需充分渗透，体积不足、时间过短、组织过厚或温度不当均会导致固定不全）2.免疫组化假阴性的常见原因有？A.抗原修复不充分B.一抗浓度过低C.内源性过氧化物酶未阻断D.孵育时间过短答案：ABD（内源性酶未阻断会导致假阳性，其他选项均可能导致目标抗原未被检测）3.分子病理实验室质量控制需包括？A.样本接收时的完整性检查B.DNA/RNA提取的浓度和纯度检测（A260/A280=1.8~2.0）C.阳性和阴性对照的设置D.检测报告的双人审核答案：ABCD（涵盖样本、试剂、操作、报告全流程质控）4.脱落细胞标本采集的注意事项有？A.避免血液或黏液污染B.采集后30分钟内固定C.深部组织标本可用细针穿刺（FNA）D.阴道脱落细胞需避开月经期答案：ABCD（污染会干扰细胞形态，延迟固定导致细胞自溶，FNA适用于深部肿块，月经血影响阴道细胞判读）5.冰冻切片的优点包括？A.快速（15~30分钟出片）B.保存酶活性（适合酶组织化学）C.抗原保存较好（适合免疫组化）D.切片厚度均匀（3~5μm）答案：ABC（冰冻切片厚度较石蜡厚（5~10μm），但能快速诊断，保留酶和抗原活性）6.电子显微镜标本制备的步骤包括？A.固定（戊二醛+锇酸双固定）B.脱水（梯度乙醇）C.浸透（树脂与脱水剂混合）D.包埋（加热聚合树脂）答案：ABCD（双固定稳定超微结构，梯度脱水避免细胞收缩，浸透和包埋形成硬组织块）7.荧光染色标本的保存要求是？A.4℃避光B.短期保存（24~48小时）C.使用抗荧光淬灭封片剂D.长期保存需-20℃答案：ABCD（荧光易淬灭，需避光、低温，抗淬灭剂可延长观察时间，长期保存需更低温度）8.组织化学染色中，显示铁离子的方法有？A.普鲁士蓝染色（Prussianblue）B.柏林蓝染色（Berlinblue）C.硫化铵法D.阿尔辛蓝染色（Alcianblue）答案：ABC（阿尔辛蓝染酸性黏多糖，其他均为铁染色方法）9.流式细胞术检测前，单细胞悬液制备的关键是？A.机械离散（剪碎、研磨）结合酶消化（胰酶、胶原酶）B.过滤去除细胞团块（40~70μm筛网）C.离心速度（200~400g，5分钟）D.调整细胞浓度（1×10^6~1×10^7个/mL）答案：ABCD（综合方法获得单细胞，过滤避免堵管，适当离心保留活细胞，适宜浓度保证检测效率）10.实验室生物安全等级（BSL）中，BSL-2实验室需具备的条件有？A.生物安全柜（II级）B.高压灭菌器C.自动闭门系统D.定向气流（向内）答案：ABCD（BSL-2处理中度风险微生物，需基本防护设备和环境控制）三、简答题（每题6分，共30分）1.简述HE染色中“核质对比度差”的可能原因及解决方法。答案：可能原因：①苏木精染色过浅（染液失效、染色时间短）；②分化过度（盐酸乙醇作用时间过长，核着色被过度洗脱）；③伊红染色过深（覆盖核颜色）；④返蓝不充分（氨水或温水处理时间短，苏木精未转化为蓝色）。解决方法：定期更换苏木精液（一般3个月），延长苏木精染色时间（5~10分钟）；缩短分化时间（数秒至10秒）；稀释伊红液（0.5%~1%）或减少染色时间（1~3分钟）；确保返蓝充分（温水浸泡5分钟或氨水浸泡30秒）。2.比较液基细胞学（LBC）与传统涂片的优缺点。答案：优点：①细胞分布均匀，背景清晰（去除血液、黏液等干扰）；②细胞收集率高（传统涂片仅收集2%~5%细胞，LBC可达80%以上）；③可制作多张切片或用于分子检测；④减少阅片时间。缺点：①成本较高；②可能丢失某些特殊细胞（如大组织碎片）；③对操作技术要求严格（需标准化处理流程）。3.免疫组化中，如何选择合适的抗原修复方法？答案：①热修复（最常用）：适用于大多数抗原（如CK、ER、PR），包括微波修复（750W，10~15分钟）、高压修复（121℃，2~5分钟）、水浴修复（95℃，20~30分钟）；②酶消化修复：适用于被福尔马林交联严重的抗原（如CD3、CD20），常用胰蛋白酶（0.1%，37℃，5~15分钟）或胃蛋白酶（0.4%，37℃，5~10分钟）；③无需修复：少数抗原（如Vimentin）在福尔马林中稳定，可直接染色。选择依据：抗原特性（是否对热敏感）、固定时间（长期固定需更强修复）、抗体说明书推荐。4.简述PCR技术的基本步骤及各步骤的作用。答案：①变性（94~98℃，30秒）：双链DNA解旋为单链；②退火（50~65℃，30秒）：引物与单链DNA模板特异性结合；③延伸（72℃，1分钟/kb）：TaqDNA聚合酶以dNTP为原料，沿引物延伸合成新链。循环（25~40次）后，目标DNA片段呈指数扩增。5.实验室质量控制中，“室内质控”与“室间质评”的区别是什么？答案：室内质控（IQC）：实验室内部对检测过程的日常监控，通过重复检测已知浓度的质控品（如组织芯片、细胞系），绘制质控图（如Levey-Jennings图），确保检测结果的精密度和准确性，发现操作中的随机误差。室间质评（EQA）：由外部机构（如卫健委临检中心）发放盲样，实验室检测后回报结果，与靶值或其他实验室结果比对，评估实验室间的一致性，发现系统误差（如试剂差异、判读标准不一致）。四、案例分析题（每题10分，共20分）1.某医院病理科接收1例乳腺肿块标本（大小3cm×2cm×1cm），临床怀疑乳腺癌，需快速明确诊断。（1）请设计冰冻切片的完整操作流程；（2）若冰冻切片显示“异型细胞，难以明确性质”，应如何处理？答案：（1）流程：①标本接收后立即用生理盐水湿润（防干燥），选取代表性区域（肿块中心及边缘）；②组织修整（厚度2~3mm），放入冰冻切片机样本托，滴加OCT包埋剂；③冷冻（-20~-25℃，3~5分钟至组织变硬）；④切片（厚度5~8μm），展片（40℃温水）后贴于载玻片；⑤固定（95%乙醇，3~5分钟）；⑥HE染色（苏木精1~2分钟→水洗→1%盐酸乙醇分化3秒→水洗→返蓝（温水5分钟）→伊红30秒→梯度乙醇脱水（80%、95%、100%各30秒）→二甲苯透明（2分钟）→中性树胶封片；⑦镜检并签发冰冻报告（30分钟内完成）。（2）处理：①核查冰冻切片质量（是否有折叠、过厚），必要时重切；②联系手术医生延长取材范围（增加切缘或深部组织）；③建议等待石蜡切片（固定后重新取材，制作更薄切片（3~4μm））；④联合免疫组化（如CK5/6、ER、PR、HER2）辅助诊断；⑤若仍不明确，可请上级医院会诊。2.某实验室进行结肠腺癌标本的CK20免疫组化染色，结果显示所有细胞胞质呈弥漫强阳性，但阳性对照（已知CK20阳性的结肠腺癌组织）未显色。（1）分析可能的原因；（2）提出解决方案。答案：（1）可能原因