洁净区环境监测管理规程（符合最 新标准）

洁净区环境监测管理规程1.目的规范本公司洁净区环境的监控，洁净室(区)环境监测的项目、频次、布点、采样、测试、判定、异常处理、记录与报告全过程，确保环境持续满足法规与注册技术要求，防止污染、交叉污染与混淆，保障产品质量稳定可控。3.范围适用于本企业所有洁净生产区、洁净实验室、无菌检验室、洁净辅助用房的环境监测，覆盖温湿度、压差、换气次数、悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面微生物全项目；适用于静态、动态两种状态监测，覆盖空调系统启用、日常生产、维修后、长期停用后全场景。3.职责品质部负责文件的起草；品质部实验室主管负责文件的审核；品质负责人负责本文件的批准；使用部门负责区域内日常温湿度的记录；品质部负责悬浮粒子及微生物项目的监测。4.依据YY0033-2000《无菌医疗器具生产管理规范》GB/T16292-2025医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法GB/T16293-2025医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法GB/T16294-2025医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法5定义洁净室(区)

：对尘粒及微生物污染进行环境控制及分级的房间或区域。其建筑结构、装备及其使用均具有减少对该区域内污染源的进入、产生和滞留的功能。悬浮粒子：用于空气洁净度分级的尺寸范围在0.1um~100um的固体和液体粒子。注:对于悬浮粒子计数测量仪,一个微粒球的面积或体积产生一个响应值,不同的响应值等价于不同的微粒直径。单向流:通过洁净室或洁净区整个断面,风速稳定且平行的受控气流。非单向流:洁净室或洁净区的送风以诱导方式与室内空气混合的气流分布。静态:洁净室或洁净区建成且设备就位,按议定的方式运行,但无人员在场的状态。动态:洁净室或洁净区设施按议定方式运行,且有规定数量的人员按议定方式工作的状态。浮游菌:悬浮在空气中的活微生物。本文件特指通过主动式采样法收集到的悬浮在空气中的活微生物。沉降菌:通过被动式采样法收集到的悬浮在空气中的活微生物。6.程序6.1温湿度监测操作人员每班次按要求在工作日每班各记录一次，必要时可增加记录次数。并填写相应的《温湿度记录》；各洁净区温湿度控制标准如下表：洁净级别温度相对湿度10000级、100000级18~28℃45~65%6.2压差监测标准：相同洁净级别房间之间静压差应不低于2Pa，不同级别洁净区之间的压差应不低于5Pa，洁净区与非洁净区之间的压差应不低于10Pa。监测频率：操作人员每班次按要求在工作日每班各记录一次压差，必要时可增加记录次数，填写相应的《日常压差记录》；品质部每月对实验室及车间的相关洁净区域进行一次压差监测，结果填写在《月度压差记录》中。监测操作：日常压差记录读取压差表上的数值即可，品质部月度压差测试使用压差计进行测试，压差计操作按照《压差计操作与维护规程》执行。6.3悬浮粒子监测：监测对象：≥0.5μm和≥5.0μm的悬浮粒子。监测频率：洁净级别监测频率--静态监测频率--动态车间实验室车间实验室10000级1次/年1次/年1次/季1次/季100000级1次/年1次/年1次/季1次/季备注：静态监测为所有房间，动态监测为主要操作间。尘埃粒子计数器中房间的代号输入形式为数字形式，洁净区各个房间的数字代码如下：房间名称数字代码房间名称数字代码无菌微生物一更01一更14无菌微生物二更02二更15无菌微生物缓冲间03洗理衣间16无菌微生物洗衣间04缓冲间17微生物限度室05洁具间18无菌室06容器具存放间19无菌微生物洁具间07容器具清洗间20阳性对照一更08洁净走廊21阳性对照二更09内包间22阳性对照洗衣间10装配间23阳性对照缓冲间11中检室24阳性对照室12精洗间25阳性对照洁具间13暂存间26测试方法：1）测试原理：粒子计数器从采样口吸入含有悬浮粒子的气体,悬浮粒子进入测量腔后受到光源发出的单色光照射,单色光发生不同程度的散射,检测器将散射光脉冲信号转化为电脉冲信号。散射光的强度与悬浮粒子表面积成比例关系,散射光的脉冲数量与悬浮粒子的数量成比例关系,因此电脉冲的幅度对应粒子的粒径大小,电脉冲的数量对应悬浮粒子的数量,即粒子浓度。2）测试状态：包括静态测试和动态测试。3）测试条件：房间的温湿度和压差，应在规定的范围之内。4）测试时间：对单向流，如局部100级洁净室（区），测试应在净化空调系统正常运行不少于10min开始。对非单向流，如100000级以上的洁净室（区），测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。5）采样点数目及布置：布置采样点时应避开送风口、回风口和排风口；取样点数参见《环境监测清单》。6）采样点的位置：采样点一般在工作面高度左右布置。7）采样次数：每个采样点的采样1次。8）采样量：洁净级别采样量（L/次）100级100010000级28.3100000级28.39）采样注意事项：l对于单向流洁净室（区），粒子计数器的采样管口应正对气流方向；对于非单向流洁净室（区）粒子计数器的采样管口应向上。l采样管必须干净，严禁渗漏。l采样管的长度应根据仪器的允许长度。除另有规定外，长度不得大于1.5m。l采样时，测试人员应在采样口的下风侧，并尽量减少活动。l某个采样点发现非正常情况引起的异常计数时,经验明后可剔除该计数并在检测报告中予以说明,然后重新采样。l采样完毕后，应对粒子计数器进行自净。l静态测试时室内测试人员不得多于2人。l设备具体操作按照《悬浮粒子计数器操作与维护规程》执行。10）结果判定：每个点所选粒径的粒子浓度应符合《洁净区环境监控检测标准》的规定。11）记录填写：检验人员填写《悬浮粒子检验记录》。6.4浮游菌监测监测频率：洁净级别监测频率--静态监测频率--动态车间实验室车间实验室10000级1次/年1次/年1次/季1次/季100000级1次/年1次/年1次/季1次/季备注：静态监测为所有房间，动态监测为主要操作间。测试方法：1）方法原理：本方法通过使用适宜的培养基收集浮游在空气中的活的微生物，放在适宜的温度下培养一定的时间，使其繁殖成可见的菌落进行计数，根据单位体积空气中的活微生物数，即浮游菌浓度来评定洁净室（区）的洁净度。2）培养基平板：培养基平板可使用成品培养基平板或配制的培养基平板。培养基平板制备：无菌操作将15~20ml经灭菌的胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）（≤45℃）倾入无菌培养皿内，室温放至凝固后使用或于2℃～8℃药品保存箱贮存在有效期内使用。3）测试条件：房间的温湿度和压差，应在规定的范围之内。4）测试状态：包括静态测试和动态测试。5）测试人员：测试人员必须穿戴符合环境洁净级别的工作服。静态测试时，室内人员不得多于2人。6）测试时间：对单向流，如局部100级洁净室（区），测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始。对非单向流，如100000级以上的洁净室（区），测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。7）采样点和采样量及采样次数：具体取样点数参见《环境监测清单》。采样量见下表：洁净级别采样量（L/次）100级100010000级500100000级100300000级100采样次数，每个采样点采样一次，每次用一个平皿。8）采样点布置：对于100级洁净室（区），可离送风口处约30cm设采样点，对于10000级，100000级的非单向流的洁净室（区）可在工作面处设采样点。对于单向流洁净室(区)或送风口,采样器采样口朝向应正对气流方向;对于非单向流洁净室(区),采样口向上。9）测试步骤：测试前，采样仪进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌，用于100级洁净室的采样仪宜预先放在被测房间内。采样口使用前必须高温灭菌。如用消毒剂对采样管的外壁及内壁进行消毒时，应将管中的残留液倒掉并晾干。采样前，先用消毒剂擦拭采样仪内外表面进行消毒，浮游菌采样仪经消毒后先不放入培养皿，开启仪器，使仪器中的残余消毒剂蒸发，时间不少于5min。然后检查流量并根据采样量调整设定采样时间；放入培养皿，盖上盖子，置仪器于采样点后，开启浮游菌采样仪进行采样。采样结束后，拿出培养皿盖好盖子，按同样操作步骤测试其他采样点。设备具体操作按照《浮游菌采样仪操作与维护规程》执行。每次测试用一只同批培养好的胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）平板不取样放置相同的时间，作为阴性对照。10）培养：全部采样结束后，将培养皿倒置于培养箱在20℃~25℃培5天后再转移至30℃~35℃培养2天。11）菌落计数

：肉眼直接计数或用菌落计数器计数；若平板上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时，仍以2个或2个以上的菌落计数。培养后阴性对照培养皿应无菌生长,否则测试无效。12）结果计算：每个测点的浮游菌浓度式中:C浮游菌浓度,单位为菌落形成单位每立方米(CFU/m3

);M菌落数,单位为菌落形成单位(CFU);V—采样量,单位为升(L)。13）结果评定：每个测点的浮游菌浓度应符合《洁净区环境监控检测标准》。

14）记录填写：检验人员填写《浮游菌检验记录》。6.5沉降菌（Φ90mm）监测监测频率：洁净级别监测频率--静态监测频率--动态车间实验室车间实验室10000级1次/年1次/年1次/周1次/周100000级1次/年1次/年1次/周1次/周备注：静态监测为所有房间，动态监测为主要操作间。洁净级别监测频率--静态监测频率--动态超净工作台生物安全柜超净工作台生物安全柜100级//每次实验时/备注：动态监测同主要操作间动态监测进行；超净工作台内进行实验需同步进行沉降菌监测至实验结束，实验时间过长的（超过4小时），则4小时后需更换培养皿。每次实验时对超净工作台进行沉降菌监测，监测点数为3个点，分别为超净工作台的操作区左、中、右三个位置，并按时填写《超净工作台日常监测记录表》。当超净工作台中的房间进行沉降菌监测时，应同时进行超净工作台的沉降菌监测。测试方法：1）方法原理：本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。2）培养基平板：培养基平板可使用成品培养基平板或配制的培养基平板。培养基平板制备：无菌操作将15~20ml经灭菌的胰酪大豆胨琼脂培养基（≤45℃）倾入Φ90mm无菌培养皿内，室温放至凝固后使用或于2℃～8℃药品保存箱贮存在有效期内使用。3）测试条件：房间的温湿度和压差，应在规定的范围之内。4）测试状态：包括静态测试和动态测试。5）测试人员：测试人员必须穿戴符合环境洁净级别的工作服。静态测试时，室内人员不得多于2人。6）测试时间：对单向流，如局部100级洁净室（区），测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始。对非单向流，如100000级以上的洁净室（区），测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。7）采样点数目/采样次数及其布置：具体取样点数参见《环境监测清单》；采样点的布置布置采样点时应避开送风口、回风口和排风口；工作区采样点的位置高度在工作面左右；每个采样点采样一次。8）测试步骤：采样方法：静态：将制备好的胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）平板带到被测试的洁净室（区），按要求放置于采样点，打开培养皿盖使培养基表面暴露30min，再将培养皿盖盖上后。每次测试一个区域用一只同批培养好的胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）平板不暴露放置相同的时间，作为阴性对照。动态：将胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）平板带到被测试的洁净室（区），按要求放置于采样点。如实验/生产总时长＜4小时的，则培养皿暴露时间为实验/生产全程；如如实验/生产总时长≥4小时的，则培养皿暴露时间为4h；每次测试用一只同批培养好的胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）平板不暴露放置相同的时间，作为阴性对照。9）培养：全部采样结束后，将培养皿倒置于培养箱在20℃~25℃培5天后再转移至30℃~35℃培养2天。10）菌落数的计数：用肉眼直接计数或在菌落计数器上点计，计算得出各个测点的菌落数,培养后阴性对照培养皿应无菌生长,否则测试无效。11）结果评定：每个测点的沉降菌根据《洁净区环境监控检测标准》判定是否符合要求。12）记录填写：检验人员填写《沉降菌检验记录》。13）采样注意事项

：布置采样点时，至少应尽量避开尘粒较集中回风口。采样时，测试人员应站在采样口的下风侧，并尽量少走动。应采取一切措施防止采样过程的污染和其他可能对样本的污染。6.6表面微生物监测监测频率：位置监测频率-动态周期范围主要操作间墙面1次/月操作面位置高度墙壁主要操作间设备表面1次/月设备操作区域位置表面生产/实验人员洁净服表面1次/月帽子前额处、口罩、前臂、腹部、大腿、小腿双手手套每次实验在进行微生物限度检验或无菌检验结束时进行按以上监测条件和监测频率对洁净区主要操作间墙面、设备表面、洁净服表面和双手手套进行表面微生物监测，其中主要操作间每个房间墙壁取样2个皿；设备表面取样2个皿；人员洁净服表面各取样点分别取样1个皿；双手手套在每次实验结束时对左右手的五指尖分别进行取样1个皿。（表面微生物只做动态监测，其中阳性对照室和生物安全柜不做表面微生物监测要求）测试方法：1）设备设施及工作服表面取样操作：使用φ55mm的TSA接触碟，打开碟盖，使培养基表面与取样面直接接触，均匀按压接触碟底板，确保全部琼脂表面与取样点表面均匀接触10s左右，再盖上碟盖。取样后，用沾有75%酒精的棉签或无尘纸擦拭被取样表面，以除去残留琼脂。同时用一个同批号的培养基平板不取样，作为阴性对照。2）双手手套取样操作：使用φ55mm的TSA平板，打开平皿盖，手指在TSA平板上滚动一圈，五个手指均需要进行取样，一个φ55mm的TSA平板取样一只手的五个手指。同时用一个同批号的培养基平板不取样，作为阴性对照。3）培养：全部采样结束后，将培养皿倒置于培养箱在20℃~25℃培5天后再转移至30℃~35℃培养2天。4）菌落数的计数：用肉眼直接计数或在菌落计数器上点计，计算得出各个测点的菌落数,培养后阴性对照培养皿应无菌生长,否则测试无效。5）可接受标准：除另有规定外，设备≤25cfu/皿，工作服≤20cfu/皿，微生物限度实验手套≤5cfu/皿，无菌试验手套<1cfu/皿。6）记录填写：检验人员填写《表面微生物检验记录》。6.7换气次数每月对洁净区的所有房间进行换气次数检测，检测方法为采用风量仪测定房间每小时的风量，通过每小时的风量和房间体积的关系计算出房间每小时的换气次数，结果记录在《换气次数检测记录》中。换气次数计算方式：换气次数（次/小时）=总送风量（m3/h）/房间体积（m3）风量测试操作按照《风量罩操作与维护规程》执行。结果评定：每个测试房间的换气次数根据《洁净区环境监控检测标准》判定是否符合要求。记录填写：检验人员填写《换气次数检验记录》。6.8）监测要求监测后应及时记录，并根据《检验报告书管理规程》的要求及时出具COA。洁净区无生产、检测、取样活动时，可进行模拟动态环境监测。洁净区空调系统停用12天以上，使用前由使用部门通知品质部对所有房间进行全项目检测，合格后方可恢复使用。6.9）功能间区分微生物限度室、无菌室、阳性对照室、精洗间、装配间、内包间为洁净区内的主要操作间。7.相关文件《悬浮粒子计数器操作与维护规程》《浮游菌采样仪操作与维护规程》《风量罩操作与维护规程》《压差计操作与维护规程》《检验报告书管理规程》8.相关表单/记录《温湿度记录》《日常压差记录》《月度压差记录》《环境监测清单》《洁净区环境监控检测标准》《悬浮粒子检验记录》《浮游菌检验记录》《沉降菌检验记录》《表面微生物检验记录》《换气次数检验记录》温湿度记录表温湿度计编号：房间名称：可接受标准：______年时间温度（℃）湿度（RH%）记录人月日备注：复核人/日期：日常压差记录压差计编号：房间名称：可接受标准：______年时间压差（Pa）记录人月日复核人/日期：月度压差记录____年____月房间名称压差（Pa）可接受标准（Pa）是否符合规定无菌微生物一更≥10□是□否无菌微生物二更≥2□是□否无菌微生物缓冲间≥2□是□否无菌微生物洗衣间≥2□是□否微生物限度室对缓冲≥2□是□否微生物限度室对室外≥10□是□否无菌室对缓冲≥2□是□否无菌室对室外≥10□是□否无菌微生物洁具间≤2□是□否阳性对照一更≥10□是□否阳性对照二更≥2□是□否阳性对照洗衣间≥2□是□否阳性对照缓冲间≥2□是□否阳性对照室对缓冲≤2□是□否阳性对照室对室≥10□是□否阳性对照洁具间≤2□是□否一更≥10□是□否二更≥2□是□否洗理衣间≥2□是□否缓冲间≥2□是□否洁具间≤2□是□否容器具存放间≥2□是□否容器具清洗间≥2□是□否洁净走廊对外界≥10□是□否内包间对洁净走廊≥2□是□否内包间对外界≥10□是□否装配间洁净走廊≥2□是□否装配间对外界≥10□是□否中检室洁净走廊≥2□是□否精洗间洁净走廊≥2□是□否精洗间对外界≥10□是□否暂存间洁净走廊≥2□是□否暂存间对外界≥10□是□否监测人/日期：复核人/日期：洁净区环境监测清单序号房间名称洁净级别房间面积(m2)悬浮粒子取样点数浮游菌取样点数沉降菌取样点数/实验室1无菌微生物一更十万级5.43142无菌微生物二更万级5.43143无菌微生物缓冲间6.24144无菌微生物洗衣间8.35255微生物限度室126256无菌室12.66257无菌微生物洁具间7.64148阳性对照一更十万级4.83149阳性对照二更万级4.631410阳性对照洗衣间5.531411阳性对照缓冲间6.341412阳性对照室11.962513阳性对照洁具间9.6525/生产车间14一更十万级8.452515二更1162516洗理衣间1562517缓冲间10.562518洁具间11.362519容器具存放间18.462520容器具清洗间18.462521洁净走廊46.6103622内包间48103623装配间82155824中检室36.2103625精洗间38.1103626暂存间41.61036洁净区环境监控检测标准项目100级10000级100000级悬浮粒子最大允许数，个/m3≥0.5μm35003500003500000≥5μm0200020000微生物最大允许数沉降菌，个/皿1310浮游菌，个/m35100500压差，Pa相同洁净级别房间之间静压差应不小于2Pa，不同级别洁净区之间的压差应不小于5Pa，洁净区与非洁净区之间的压差应不低于10Pa。温度，℃18-28湿度，RH%45-65换气次数/≥20≥15悬浮粒子检验记录检验依据监测状态□动态□静态监测人数仪器编号可接受标准：≥0.5μm的微粒应：□100级3500个/m3，□10000级350000个/m3，□100000级3500000个/m3；≥5.0μm的微粒应：□100级0个/m3，□10000级2000个/m3，□100000级20000个/m3。测试点中悬浮粒子数应低于或等于上述标准。房间名称/编号洁净级别温度（℃）相对湿度（%）压差（Pa）取样点编号≥0.5μm≥5.0μm是否

符合规定结果结果□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否检验人/日期：复核人/日期：浮游菌检验记录洁净区域检测日期浮游菌采样仪编号培养基批号培养箱编号培养温度（℃）/时间监测人数操作人/日期检验依据监测状态□动态□静态洁净级别□100级□10000级□100000级房间名称/编号温度（℃）相对湿度（%）压差（Pa）取样点编号采样量（m³）结果（个/皿）计算结果（个/m³）报告值（个/m³）可接受标准（个/m³）是否

符合规定100级≤5个/m³10000级≤100个/m³100000级≤500个/m³压缩空气≤500个/m³□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否确认人/日期：复核人/日期：沉降菌检验记录洁净区域检测日期培养温度（℃）/时间培养基批号培养箱编号监测人数操作人/日期检验依据监测状态□动态□静态洁净级别：□100级□10000级□100000级房间名称/编号温度

（℃）相对湿度

（%）压差

（Pa）取样点

编号结果

(个/皿)报告值

(个/皿)可接受标准

(个/皿)是否

符合规定百级≤1

万级≤3

十万级≤10□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否确认人/日期：复核人/日期：表面微生物检验记录□设备设施及工作服表面取样操作：使用经过预培养的φ55mmTSA接触碟（批号：______，有效期：______），打开接触碟盖，使培养基表面于取样面直接接触，均匀按压接触碟底板，使琼脂培养基表面与取样面均匀接触10s左右，再盖上碟盖。同时用一只同批号的培养基平板不取样，作为阴性对照。

□双手手套取样操作：使用经过预培养的φ55mmTSA平板（批号：_____