（正式版）DB45∕T 2829-2023 《地中海贫血筛查与诊断技术规范》

45I 2 2 2 2 2 5 5 5 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。1地中海贫血筛查与诊断技术规范本文件适用于广西壮族自治区行政区域内医疗机构GB39707医疗废物处理处置污染控制WS/T405血细胞分析参考区间WS/T779儿童血细胞分析参考区间WS/T406临床血液学检验常规项目分析质量要求WS/T641临床检验定量测定室内质量控制WS/T641、WS/T644界定的以及下列术语和定义适用于本文件。输血依赖型地贫transfusiondependenttha产前诊断prenataldiag对可疑出生缺陷的胎儿在出生前应用各种检测手段，产24缩略语HbA2：血红蛋白A2（HemoglobinDNA：脱氧核糖核酸（DeoxyribonucleicAciPCR：聚合酶链反应（PolymeraseChainReactiMCV：红细胞平均体积（MeanCorpuscularVolume）MCH：红细胞平均血红蛋白量（MeanCorpuscularHemoglobin）SOP：标准操作程序（StandardOperationNMPA：国家药品监督管理局(NationalMedicalMedicalProductsAdministration)EDTA：乙二胺四乙酸（EthyleneDiamineTetraacetic5.1筛查人群全人群均可筛查，重点筛查人群包括：婚前、孕前、产前的夫妇及新生儿、疾病查因人群等。5.2筛查流程5.3筛查技术5.3.1.1标本处理用含EDTA抗凝剂的真空采血管，静脉采血2ml，轻轻混匀，避免标本溶血，采样后及时送检，4h5.3.1.2试剂和仪器5.3.1.3检测方法MCV——红细胞平均体积，单位为分升（fL3A——每升血液中血细胞比容，单位为百分比（%）；B——每升血液中红细胞数，单位为1012每升（1012/MCH——红细胞平均血红蛋白量，单位为匹克（pg)；B——每升血液中红细胞数，单位为1012每升（1012/C——每升血液中红细胞血红蛋白量，单位为克每升（g/5.3.1.4质控物——宜使用配套质控物，若选择非配套质控物时应评价其质量和适用性；5.3.1.5参考区间28天～18岁儿童参考区间按WS/T779执行，成年人参考区间按WS/T45.3.2.1标本处理5.3.2.1.1检测样本不受饮食和采血时间的影响。5.3.2.1.2按照适用于临床实验室检测的5.3.2.2检测方法学5.3.2.3检测系统5.3.2.3.1应选用有NMPA认证的分5.3.2.3.3实验室启用/更换一个新的分析系统检测临床样5.3.2.3.4试剂的性能验证方法宜参考CNAS-GL037进行，5.3.2.3.5仪器应定期校准，或者维修后应进行校准。5.3.2.4质控物5.3.2.4.1质控物应有良好的长期稳定性，宜选择商品制品，或自制。5.3.2.4.3实验室自制新鲜冰冻全血质控物，原料为足量的混合新鲜全血，采用冻存管分装，并对均45.3.2.5测定5.3.2.5.1所用试剂、耗材应按说明书要5.3.2.5.2实验室应制定标准操作程序，包含但不限于以下内容：项目名称、检测原理、样本采集及5.3.2.6报告（％）5.3.2.6.4异常血红蛋白，宜以血红蛋白组别归属进行报告（如H5.3.2.6.5存在图谱异常或检测结果异常，应提供结果描述和检测建议，以利于临床医生判断结果。5.3.2.6.6血红蛋白分析报告5.3.2.7参考区间5.3.2.7.2产前样本脐带血，尚无参考区间。5.3.2.7.4血红蛋白组分在小于2岁以内的5.3.2.7.5宜根据检测方法学设定不同年龄参考区间。12%≤HbA≤40%60%≤HbF≤90%0%≤HbA2≤1.0%83%≤HbA≤95%0%≤HbF≤13%0.8%≤HbA2≤3.0%91.5%≤HbA≤97.9%0%≤HbF≤5%2.4%≤HbA2≤——MCV＜82fl；——MCH＜27pg；——HbA2＜2.4%；——HbF＞5%；5.3.3.2具有以下至少一项实验室检测——MCV、MCH低于其年龄段参考范围56.1.1.2地中海贫血基因诊断（产前标本）临床基因检测实验室应具备产前诊断资质。6.1.1.3地中海贫血基因（罕见型）诊断6.1.2.1实验室技术人员应具有检验资格证，且应经过国家级或省级临床检验中心培训并取得《临床6.1.2.2实验室技术人员应具有检验资格证，且应经过国家级或省级临床检验中心培训并取得《临床6.1.2.3地中海贫血基因诊断（静脉血）结果6.1.2.4地中海贫血基因诊断（产前标本）结果报告审核人员应具备副高职称及以上的职称。6.1.2.5地中海贫血筛查、基因诊断人员应每——地中海贫血筛查阳性；——育龄夫妇双方，阳性一方为缺失型α0-地中海贫血（--/，如：--SEA/、--THAI/、--FIL/等）——育龄夫妇双方，阳性一方为α+-缺失型及α-非缺失型时，当配偶一方筛查为阴性结果（包括），——育龄夫妇双方，其中一方为β-地中海贫血基因携带者，配偶一方进行血红蛋白组分分析，当检测结果阳性时，进行地中海贫血基因检测；当配偶一方血红蛋白电泳筛查提示存在异常血——脐血血红蛋白筛查阳性时；——有生育中/重型地贫患儿家族史的人群。——地中海贫血基本知识；6——临床适应症。检测应填写申请单，申请单参见附录E，宜包括但不限于以下内容：申请单抬头、受检者姓名、年6.2.1.4.1按照适用于临床实验室检测的常规方法采集6.2.1.4.2检测样本不受饮食和采血时间6.2.1.4.5样本如未能及时检测，可——样本在常温条件下短期保存7天——样本在4℃条件下冷藏保存3个月——凝胶成像分析仪；——杂交仪；——二代测序基因分析仪；——核酸浓度测定仪；——遗传分析仪。应选择NMPA批准应用于临床实验室的地贫基因检测试a)样本进行实验室唯一编号；7b)手工方法提取核酸的，按照试剂盒提取说明书进行；c)使用核酸提取仪的，按照仪器操作说明书进行；d)实验结束后，按照实验室SOP文件进行清理b)按照试剂盒说明书分装、配制反应液（如有需要）；b)可疑结果，宜使用另一种检测方法a)检验报告单应体现检测方法、检测范围及标本类型。b)检验报告单应体现检测结果并书写基因型，不应下临床诊断性报告。c)实验室结果有异常发现，应进行备注描d)可疑结果，应进行罕见型地中海贫血基因检测的，应由行业主管部门批准的罕见型地中海贫e)报告单签发应双人签字，其中一名为中级及以上——有生育非输血依赖型地中海贫血患儿风险的夫妇，进行遗传咨询，宜知情选择地中海贫血基8——基本信息：申请单抬头、受检者姓名、年龄、民族、检测项目、联系电话、申请科室、申请地中海贫血基因产前诊断为侵入性产前诊断，产前诊断时机及取材方式——检测孕妇血细胞分析、凝血功能检测、RH血型、乙肝、艾滋病、丙肝、梅毒结果6.2.2.7.1侵入性产前诊断操作采集的绒毛、羊水、脐血，样本采集后及时送检。如未能及时检测宜6.2.2.7.2肉眼可见明显血色的羊水样本，应6.2.2.7.4产前样本应行母源污染鉴别，出现影响检测结果判断的母源污染，应重新采集样本。9b)按照说明书进行检测和结果判断；见6.2.1.8.3，并增加产前样本检测先判断是否存在母源污染，当母源污染影响结果判断时，应重c)非输血依赖型地贫胎儿，宜知情选择终止妊娠。6.2.3.2.3检测试剂：地中海贫血基因诊断（罕见型）检测商品试剂盒或自配——多重连接探针扩增技术（MLPA——二代测序技术（NGS——第三代测序技术（TGS）静脉血样本提取步骤见6.2.1.8.1，产前样本核酸提取步骤见6.2.2.a)按所用试剂盒说明书在仪器上设置扩增参数，并保存，供长期使用；b)按照试剂盒说明书分装、配制反应液；6.2.3.5.1参照所使用检测方法的判断标准进行结6.2.3.5.2基因检测结果应结合家系、筛查结果、临床信息进行综合6.2.3.5.3检测结果为未知突变的，宜采集家系进6.2.3.6.2检验报告单应体现检测结果并书写基因型，不应下临床诊断性6.2.3.6.4本检测为实验室自配试剂，仅供临床医生参考，不应作为排除性检测结果，宜结合临床症6h必须进行第二次3个水平质控品的检7.1.1.2.1在每批进行样本测试前，应先进行质控物分析，以确定分析系统状态良好，测定结果可靠7.1.1.2.2当出现失控现象，应进行失控分析，并采取相应的措施。质量控制限的设定及失控判断规7.1.2.1.2质控品应包括提取、扩增、产物分析的全过程，实验结果阴性质控品应为阴性，阳性质控7.1.2.1.3整个实验流程应两名实验7.1.2.2.1宜通过实验的可重复性、不同7.2.1项目每年应至少参加省级临床检验中心或国家级临床检验中心室间质量注：图中虚线部分表示宜进行下一步诊断；图中实线部分表示应进行下一步诊断。注：图中虚线部分表示宜进行下一步诊断；图中实线部分表示应进行下一步诊断。注：图中虚线部分表示宜进行下一步诊断；图中实线部分表示应进行下一步诊断。血细胞分析和血红蛋白组分分析自制质控品123456789XX医院XX科检验报告单%%%%%%%%%%%%%采样时间：XX接收时间：XX床表型多不贫血，但如双亲为同型地贫携带者，有生育重型或中间型地贫后代的风险。(后不良。(3)重型α-地中海贫血胎儿主要表现为胎儿水肿、巨大胎盘、胎死宫内及出生后无法存活，且母体易出现高血压、子痫前期等并发症。(4)重型和中间型β-地中海贫血孕期胎儿无明显异常表现，出生到一定年纪后发病。目前公认唯一治愈的方法是造血干细胞移植，但面临无合适供体、排异反应、移植失败等风险，且治疗费用昂贵。大部分患者只能依赖性输血和去铁治疗，长期的治疗费用昂贵。4)其他无法预测的外部因素可能导致检测无法正常进行，将终止该项检5)受检者为儿童时，需要父母双方提供筛查和基因诊断结果，否则不能保6)检测结果为新发突变时，需要父母双方采样进行家系验证，否则无法解释新我的医生已经告知我将要进行的检测项目的内涵、此次检查可能存在的局限性和风险、以及相关检查我授权医生对检测涉及的样本进行处置，包括进一步的送检多种检测方法、科学研究等，以帮助医师我已经告知受检者（授权亲属或法定监护人）将要进行的检查方式、此次检查中及检查后可能发生的并发症和风险、可能存在的其他检查方法并且解答了受检方关于此次检查的三联单编号NO检验费用：元补助金额：元填表说明：如果是男性，就在男方信息栏填写；若为女性，在女方信息栏填写；若为夫妻，则分别填写；若为小孩，则在其他说明行填写其父母的基因诊断结果，若为补助对象，按照指示地中海贫血基因产前诊断知情同意书异常临床指征，出生发病后，则需要终身依赖输血和1)样本如果存在母源污染，可能对检测结果判断造成影响。因此，标本3)如果双盲平行试验结果不一致，应重新采样，否则将终止该项检5)其他无法预测的外部因素可能导致检测无法正常进行，将终止该项检医疗技术规范进行操作，尽最大努力减少上述风险我理解根据我个人的妊娠情况，除上述风险以外，还可能出现其他特殊并发症检查方法并且解答了孕妇关于此次检查的相其他说明：