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烟曲霉次生代谢产物的实验探究烟曲霉次生代谢产物的实验探究 11.1前言 11.2实验部分 21.2.1实验仪器 21.2.2实验材料 31.2.3实验试剂 31.2.4发酵 1.2.5提取与分离 41.3结果与讨论 51.4结论与总结 9fumigatus)真菌。经过前期筛选,从该株菌的发酵液中分离提取到4个化合物,经过波谱分析并查找文献对比,确定四个化合物分别为fumitremorginC(1)、化合物1化合物2化合物3化合物4仪器型号生产厂家分析天平日本Shimadzu旋转蒸发仪东京理化东京理化东京理化东京理化紫外-可见分光光度计日本岛津(Shimadzu)高效液相色谱仪美国安捷伦科技有限公司高效液相色谱柱ZorbaxSB-C18,250mm×4.美国安捷伦科技有限公司仪德国布鲁克公司北京华瑞博远科技有电磁炉苏泊尔限公司苏泊尔有限公司规格生产厂家薄层层析硅胶板柱色谱硅胶200-300、300-400目青岛海洋化工集团葡聚糖凝胶美国Amersham公司RP-18硅胶德国默克集团试剂规格生产厂家工业纯天津风船分析纯西陇化工乙酸乙酯分析纯科龙化工甲醇分析纯西陇化工丙酮工业纯天津风船培养基。将配置好的PDA培养基置于500ml锥形瓶中,121℃高温灭菌30min。将菌孢从培养基斜面接到500ml锥形瓶中,设置转速160rpm,恒温28℃培养的液体培养基中,接种量为种子液的10%,扩大发酵得到20L发酵液,以转速160rpm恒温28℃振荡培养7天。在发酵液中加入相同体积的乙酸乙酯,重复提取3次,旋蒸除去乙酸乙酯,得到化合物1和2。Fr2按照氯仿-甲醇200:1的比例洗脱得到Fr-2-1,经过氯仿-甲醇(100:1)洗脱得到Fr2-2,Fr2-1和Fr2-2分别经过凝胶柱纯化得到化合物3和4。硅胶(氯仿甲醇1:0-0:1)Fr.2反相SephadexLH-20(甲醇)化合物3化合物4Fr.1-1Fr.1-2化合物1化合物2化合物1为黄色固体,Hand¹³CNMR数据见表1,经过核磁检测得到的数据与文献40对照基本一致,鉴定化合物11-2-356789表1化合物2为淡黄色固体,Hand¹³CNMR数据见表2,经过核磁检测得到的数据与文献41对照基本一致,鉴定为化合物2。23456-8-9---化合物3为淡黄色固体,¹Hand¹³CNMR数据见表3,经过检测得到的数据与文献42对照基本一致,鉴定为化合物3。-2356789--4.10s---表3化合物4无色固体,Hand¹³CNMR数据见表4,经过核磁得到的数据与文献43对照基本一致,鉴定为化合物4。工23-4567本文从川鄂乌头和短距乌头内生真
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