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烟曲霉次生代谢产物的化学筛选概述烟曲霉次生代谢产物的化学筛选概述 11.1前言 11.2实验部分 21.1.1实验仪器 21.1.2实验材料 21.3菌株发酵培养的筛选 21.3.1培养基 21.3.2种子液培养 31.3.3单菌固体发酵筛选 31.3.4单菌液体发酵筛选 31.4结果与讨论 4一些内生真菌可以通过产生各种代谢产物来超净工作台(上海一恒科技有限公司);超低温冰箱(海尔中国);WFH-204B手提式紫外分析仪；上海BoxunLS-220N恒温摇床；苏泊尔电磁炉；YP601川鄂乌头，短距乌头GF254薄层层析硅胶板(青岛黄海)从川鄂乌头的根、茎、叶中分离得到53株植物内生真菌，经ITS测序鉴定为曲霉菌属、青霉属、镰刀菌属等共12个属，共22个参考物种，从短距乌头中分离得到13株内生真菌，未测序，将这些菌种接到PDA斜面培养基上保存，放至4℃冰箱中存放。(20g),冷却凝固前分装到试管中，胶塞封□,置于121℃灭菌30min,然后摆放放在160r/min,恒温28℃摇床培养3天，备用。挑选川鄂乌头内生真菌22株，将土豆切成约1cm的小块，每个发酵罐装入50g,121℃灭菌30min,冷却至室温，用灭菌后的竹签在经过酒精和紫外灯灭菌后的干净工作台上将PDA斜面上活化好的植物病原真菌菌丝在无菌环境下挑拨到发酵罐中，放置在恒温箱中30天，每株菌设置三组对照实验，并设置不接菌30天后甲醇提取并超声，氯仿甲醇9:1点板，观察TLC情况。挑选川鄂乌头内生真菌22株，短距乌头内生菌13株，按照每400g土豆2L水的比例，将土豆加入锅中煮至软烂，趁热过滤，加入40g葡萄糖，搅拌均匀，每瓶150ml培养液，121℃灭菌30min,用灭菌后的竹签在进过酒精和紫外灯灭28℃恒温培养7天，每株菌设置三组对照实验，并设置不接菌的空白对照实验。7天后乙酸乙酯萃取，氯仿甲醇9:1点板，观察TLC情况。水相乙酸观察TLC通过对所有筛选菌株发酵提取物的TLC板的情况进行观察，固体筛选中未液体筛选中，编号DJG-1,DJG-12,DJG-13,DJY-14四株菌的

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