CN116472045B 使用杂芳基联苯基酰胺衍生物治疗癌症的方法 （坎莫森特里克斯公司）

2023.01.28PCT/US2021/038339202WO2021/262627EN2021.12.30WO2018119221A1,2018.06.28使用杂芳基联苯基酰胺衍生物治疗癌症的包括向有需要的受试者施用有效量的具有式(I)1234ab如本文所定义的。2或其药学上可接受的盐用于制造通过减缓肿瘤生长、抑制肿瘤生长和/或缩小肿瘤大15.如权利要求1所述的用途，其中该具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐是具3或其药学上可接受的盐。或其药学上可接受的盐。或其药学上可接受的盐。23.如权利要求1至22中任一项所述的用途，其中该24.如权利要求1至22中任一项所述的用途，其中该25.如权利要求1至22中任一项所述的用途，其中该有效量将血浆谷浓度维持在约26.如权利要求1至22中任一项所述的用途，其中该有效量将血浆谷浓度维持在约432.如权利要求1所述的用途，其中该具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐与有43.如权利要求1所述的用途，其中该具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐与有5[0008]程序性细胞死亡蛋白_1(PD_1)是CD28超家族的成员，在与其两个配体(PD_L1或PD_L2)相互作用时传递负信号。PD_1及其配体广泛地表达并在T细胞激活和耐受中发挥广[0009]在多种人类疾病中，PD_1路径的调节有治疗潜力(Hyun_TakJin等人,CurrTop径抑制剂已显示出稳健的活性(RDHarvey,ClinicalPharmacologyandTherapeutics[0010]阻断PD_L1与PD_1或CD80相互作用的药剂是希望的。已经开发并商业化了一些抗2017/066227以及来自BMS的WO2018/009505；来自Aurigene公司的WO2015/033299和WO6[0016]图2A_C示出了在离体混合淋巴细胞反应(MLR)测定中化合物2.001如何促进人T细[0017]图3A_C示出了在离体混合淋巴细胞反应(MLR)测定中化合物2.002如何促进人T细[0020]图6示出了在多个测试条件下在4℃(下小图)和37℃(上小图)下PD_L1的表面水细胞适用于评估体内人PD_L1特异性抑制剂的作用：hPD_L1和mPD_L1以相似的亲和力与[0022]图8A_C说明了在MC38_hPD_L1肿瘤模型中剂量依赖性方式的化合物2.002介导的[0023]图9A_C绘制了在指定的天数媒介物处理(实心圆圈)和API(抗PD_L1抗体或指定的化合物2.001(A)和化合物2.003(7处理时，细胞的人PD_L1染色。此分析中使用的PD_L1的检测抗体被与PD_L1结合的化合物2.001阻断。此图证明了化合物2.001处理的MC38_hPD_L1肿瘤几乎完全被化合物2.001占[0026]图12示出了在MC38_HPD_L1肿瘤模型中多种处理条件如何改变肿瘤浸润免疫细胞[0028]本披露提供了使用具有式(I)的化合物治疗特定癌症的方法。要求保护的化合物1_8意指一至八个碳)的直链或支链烃基的基团。烷基基团的实例包括甲8[0035]术语“亚烷基”本身或作为另一个取代基的一部分意指衍生自烷烃的二价基团(如CH2CH2CH2CH2所例示)。亚烷基基团可以是线性或分支的。后者的实例是CH2C(CH3)2CH2个)氢原子被羟基基团替代。至于烷基基团，羟基烷基基团可以具有任何适合数量的碳原16氮原子任选地被季铵化。杂芳基基团可以通过杂原子附接至分子的其余部分。应当理解，C510杂芳基的叙述是指具有从5至10个环成员的杂芳基部分，其中至少一个环成员是杂原9噻吩基等。每个上述芳基和杂芳基环系统的取代基选自如下所述的可接受的取代基的基2)=2)＝1_8烷基22)＝2)＝31_8烷基C1_4烷基[0044]芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可以任选地被具有式_T_C(O)_2_替代地，芳基或杂芳基环的相邻原子上的两个取代基可以任选地被具有式_(CH2)s_X_[0046]本文的披露内容进一步涉及其前药和生物电子等排体。前药将包括已知在生理条件下水解和/或氧化以提供具有性的官能团时，碱加成盐可以通过使这样的化合物或在合适的惰性溶剂中)接触来获得。衍生自药学上可接受的无机碱的盐的实例包括铝、衍生自药学上可接受的有机碱的盐包胺、乙二胺、N一乙基吗啉、N一乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡萄糖、组氨酸、海巴明盐对碱性的官能团时，酸加成盐可以通过使这样的化合物的中性形式与足量的所希望的酸[0050]化合物的中性形式可以通过使该盐与碱或酸接触并且以常规方式分离母体化合[0053]本披露的化合物还可以在构成这样的化合物的一个或多个原子上含有非天然比露的化合物还可以在构成这样的化合物的一个或多个原子上含有非天然比例的原子同位素。非天然比例的同位素可以定义为从自然中所发现的量至组成元素为100％所考虑原子O–CH33；和S组成的组的1至3个杂原子环顶点的C4-6杂环烷未经取代或经一个至两个取代基取代，该一个至两个取代基独立地选自由以下组成的组：1-4烷基2是CH3。3是–O–CF3。例中，有效量的具有式(I)的化合物将血浆谷浓度维持在不超过500ng/mL。在一些实施例具有式(I)的化合物将血浆谷浓度维持在不超过1[0082]在一些实施例中，有效量的具有式(I)的化合物将血浆谷浓度维持在约2ng/mL至mL至400ng/mL。在一些实施例中，有效量的具有式(I)的化合物将血浆谷浓度维持在约和/或趋化受体拮抗剂是本领域已知的并且描述于，例如，WO2007/002667、WO2007/[0090]通常，本文提供的治疗方法包括向患者施用有效量的具有式(I)的化合物或本文[0091]约0.1mg至约140mg/天/千克体重级别的剂量水平在治疗或预防涉及PD_1/PD_L1选的是，施用足量的化合物以实现5ng(纳克)/mL_1μg(微克)/mL血浆的血浆浓度，更优选化合物以实现30ng/ml_200ng/ml血浆的血浆[0095]用于施用本披露的化合物的药物组合物可以常规地以单成分与液体载体或精细分散的固体载体或两者均匀并且紧密地缔合，然后如果需要的话，在用于口服使用的组合物可以根据本领域已知的用于制造药物组合物的任何方法来制备，衣的或者通过已知技术进行经肠溶或者以其他方式包衣以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，述的技术进行包衣以形成用于控制释放的渗透治疗PEG4000)，和某些表面活性剂(如克列莫佛或solut[0100]通过添加水，适用于制备水性悬浮液的可分散粉和颗粒提供了与分散剂或湿润基乙基天冬酰胺(aspartamide)苯酚、或经棕榈酰基残基取代的聚乙烯氧化物聚赖氨[0107]以下使用的试剂和溶剂可以从商业来源获得，如奥德里奇化工公司(Aldrich[0109]可以如下文所述使用本领域技术人员已知的多种反应合成本披露范围内的化合[0110]此专利中要求保护的某些分子可以以不同的对映异构体和非对映异构体形式存[0111]在本文中用于合成关键化合物的实验程序的详细描述导致通过识别分子的物理2CO3MgSO4干燥。将溶剂在减压下除去并将残余物通过快速硅胶色谱法(己烷中的5％至100%基]3基)1,3二甲基2,4二氧代1,2,3,4四氢嘧啶5甲酰胺。462.0。KOAc(1.2g，10.2mmol)在对二噁烷(18mL)中的混合物中添加具有二氯甲烷的Pd3'(4,4,5,5四甲基1,3,2二氧杂环戊硼烷2基)[1,1'联苯基]3基)1,3二甲基2,4二氧代1,2,3,4四氢嘧啶5甲酰胺。C26H30BClN3O5的MS:(ES)m/z计算值：[M+H]+基)[1,1'联苯基]3基)1,3二甲基2,4二氧代1,2,3,4四氢嘧啶5甲酰胺519.1。(3R,4R)4氨基四氢2H吡喃3醇盐酸盐(24mg，0.154mmol)在二氯乙烷(2mL)和乙醇搅拌10分钟。将混合物通过注射器过滤器并且然后通过制备型HPLC(0％至40％至100％乙氯3'(5((((3R,4R)3羟基四氢2H吡喃4基)氨基)甲基)6甲氧基吡啶2基)2甲基[1,1'联苯基620.2。基)吡啶2基)2甲基[1,1'联苯基]3基)1,3二甲基2,4二氧代1,2,3,4四氢嘧5((((5氧代吡咯啶2基)甲基)氨基)甲基)吡啶2基)2甲基[1,1'联苯基]3基)基)甲基)吡啶2基)[1,1'联苯基]3基)1,3二甲基2,4[1,1'联苯基]3基)1,3二甲基2,4二氧代1,甲氧基5((((5氧代吡咯啶2基)甲基)氨基)甲基)吡啶2基)[1,1'联苯基]3基)1,3637.2。[0132]细胞系和细胞培养：将组成型表达TCR激动剂和PD_L1的CHO细胞用补充有10%导型NFAT应答元件驱动的荧光素酶报告基因T淋巴样细胞系(Jurkat)(效应细胞，EC)(JurkatPD_1)在补充有10％FBS和1X青霉素_链霉素的RPMI中生长并用于基于细胞的测随后1:5稀释)以及40μl的TJurkatPD_1(1x106个细胞/ml)添加至每个孔中并在37℃下孵育6小时。在将细胞冷却至室温后，向培养基中添加80μl的Bio_Glo试剂(普洛麦格公司制信号并导致TCR激活和NFAT_RE介[0134]PBMC分离：使用含有Ficoll_PaquePlus(西格玛奥德里奇公司(SigmaAldrichInc.)，圣路易斯，密苏里州)的StemCellSepMateTM_50管(干细胞科技公司(STEMCELLTechnologies)，温哥华，加拿大)通过密度梯度离心从健康供体从LRS室(去白细胞系统司(MACSMiltenyiBiotech)，贝吉施格拉德巴赫，德国)和autoMACS®Pro分离器通过奇公司)在第6天诱导成熟的树突细胞并培养[0136]人效应细胞的制备：使用人CD4+微珠(MACS美天旎生物科技公司)和autoMACS@[0137]混合淋巴细胞反应(MLR)：将来自不匹配的供体的DC和CD4+T细胞在96孔平底板[0138]体外免疫疗法效力测定：在含有1ug/ml的嘌呤霉素的完全培养基中(DMEM+10%FBS+P/S1X)生长A375_eGFP_Puro细胞(ATCC)。使用含有Ficoll_P拿大)通过密度梯度离心从健康供体从LRS室(去白细胞系统)从血沉棕黄层分离人外周血将3x104个A375_eGFP_Puro细胞接种在96孔透明底黑色TC处理板(最终体积为100ul)(康宁[0139]二聚化测定使用pathHunterg二聚化测定(迪斯卡沃雷克斯公司(DiscoverX)，州)中铺板2x104个U2OS细胞。将ChemoCentryx化合物或抗人PD_L1抗体(AZMedi4736类似时。将110ul的PathHunter快速检测试剂(迪斯卡沃雷克斯公司)添加至每个孔并在室温下在黑暗中孵育1小时。以100ms/孔的速度在FlexStation3读板仪(分子设备有限责任公司物的PBS1X)，并以10x104个细胞/孔的浓度添加至96孔测定板(V底)(爱思进公司(Axygen)，联合市，加利福尼亚州)中。将ChemoCentryx化合物或抗人PD_L1抗体(AZMedi4736类似物)以不同浓度添加至孔中并在37℃或在4℃下孵育2小时。将细胞用冰冷的用具有表达人PD_L1(MC38_hPD_L1肿瘤模型)的鼠MC_38克隆肿瘤细胞的同系肿瘤模型。通过GenOway生成MC38_hPD_L1细胞。首先使用CRISPR科技在MC38细胞中敲除内源性小鼠PD_细胞培养为具有G418的MC38细胞(具有10％胎牛血清和青霉素/链霉素的DMEM)以维持转基因表达。将这些细胞接种至小鼠的2天前，将细胞胰蛋白酶化并在没有抗生素的情况下接[0144]使用卡尺每周测量3次肿瘤宽度(W)和长度(L)，并使用式V＝(W(2)xL胞通过70μM筛过滤。将细胞洗涤并重悬于FACS缓冲液(具有10％FBS和0.1％叠氮化物的[0148]在酶联免疫吸附测定(ELISA)中，化合物2.001和2.002两者均有效抑制PD_L1与[0151]在pathhunter测定(二聚化测定)中，2种PD_L1分子的二聚化会将2个酶亚基结合(允许受体内化的温度)，化合物2.001和2.002显著降低细胞表面的表面PD_L1水平(图6)。抗PD_L1抗体对PD_L1表面水平没有影响。这些事实表明化合物2.001和2.002促进PD_L1内[0153]小鼠肿瘤细胞系(MC38)(其中小鼠PD_L1被人PD_L1转基因替代)用于诱导小鼠中[0154]在此模型中，口服给药的化合物2.002剂量依制了当向小鼠施用抗PD_L1抗体(德瓦鲁单抗)时的肿瘤生长。每个图中的上小图是每个组[0157]为检查化合物2.001在肿瘤细胞上占据PD_L1的抗体染色分离自这些肿瘤的细胞。一旦化合物2.001或治疗抗PD_L1(德瓦鲁单抗)结合PD_[0159]本文描述了本发明的特定实施例，包括发明人已知的用于实施本发明的最佳模