SNT 5875-2025 出口食品及加工环境中李斯特菌属计数方法标准立项发展报告

出口食品及加工环境中李斯特菌属计数方法标准立项发展报告EnglishTitle:StandardizationDevelopmentReport:MethodforEnumerationof*Listeria*spp.inExportFoodandProcessingEnvironment摘要本报告系统阐述了行业标准SN/T5875-2025《出口食品及加工环境中李斯特菌属计数方法》的立项背景、研制过程、核心技术内容及其对我国食品安全和国际贸易的重大意义。李斯特菌属作为一种在自然界广泛分布且具有致病性的食源性病原微生物，对免疫力低下人群及孕妇具有严重威胁，尤其是在冷藏食品中易于生长繁殖的特性，使其成为国际食品安全领域高度关注的重点对象。为应对日益严格的国际食品安全标准和贸易壁垒，提升我国出口食品的检验检测能力和国际竞争力，本标准在充分借鉴国际先进标准（如ISO11290系列）和国内外最新研究成果基础上，明确了针对出口食品及其加工环境（即环境监控）中李斯特菌属计数的规范性方法。本报告重点分析了标准的技术路线、验证数据及实施要点，论证了该标准的科学性、适用性和可操作性。结论指出，SN/T5875-2025标准的发布，不仅填补了我国在出口食品领域针对李斯特菌属计数方法的专项标准空白，也为促进我国食品出口贸易、保障消费者健康安全提供了坚实的技术支撑。关键词李斯特菌属；食源性致病菌；计数方法；出口食品；加工环境；微生物检测；行业标准Keywords:*Listeria*spp.;FoodbornePathogen;EnumerationMethod;ExportFood;ProcessingEnvironment;MicrobiologicalDetection;IndustryStandard1.引言食品安全是关乎人民生命健康和国家经济发展的重要基石。在全球贸易一体化背景下，各国对进出口食品的微生物安全要求日趋严苛。李斯特菌属（*Listeria*spp.）是食品中常见的致病菌之一，其中单核细胞增生李斯特菌（*Listeriamonocytogenes*）是导致人类李斯特菌病的主要病原体，其感染后可引起败血症、脑膜炎等严重疾病，死亡率高达20%-30%。李斯特菌的显著特征之一是能在低温（如0-4℃的冷藏条件）下缓慢生长，这使得传统的冷链食品成为其高风险载体。因此，国际上如欧盟、美国、加拿大、澳大利亚等主要贸易市场，均在食品安全法规中明确规定了对即食食品中单核细胞增生李斯特菌及李斯特菌属的限量标准，并强制要求食品加工企业实施环境监控（EnvironmentalMonitoring）以评估和追溯交叉污染。我国作为世界第一大食品出口国，食品种类繁多，涵盖了冷冻蔬菜、水产品、乳制品、肉制品及即食食品等大量易被李斯特菌污染的品类。然而，在SN/T5875-2025发布之前，我国针对出口食品中李斯特菌属的检测标准，虽存在定性的检测方法，但专门的、与国际接轨的定量计数方法标准尚显不足。这导致我国出口企业在进行产品出厂检验及过程控制时，可能因检测方法不统一、灵敏度不足或与国际标准存在差异而导致技术性贸易壁垒，引发贸易争议。为响应《中华人民共和国食品安全法》及海关总署关于加强进出口食品监管工作要求，有效规避贸易风险，提升检测技术的先进性与一致性，海关总署组织相关单位立项制定SN/T5875-2025《出口食品及加工环境中李斯特菌属计数方法》。本标准旨在建立一套覆盖食品基质及加工环境样本（如拭子、水样等）的、准确可靠的李斯特菌属定量检测技术规范，以解决当前出口检测体系中的短板问题。2.标准编制的背景与依据2.1国际形势分析：在国际上，李斯特菌的控制是食品安全管理的核心议题。国际食品法典委员会（CAC）制定了《食品微生物标准制定和应用原则》，其中对单核细胞增生李斯特菌的限量值有明确规定。特定出口市场如欧盟（欧盟法规EC2073/2005及其修订版），对即食食品规定在企业生命周期内，单核细胞增生李斯特菌的水平必须保持低于100CFU/g。同时，要求企业建立基于HACCP原理的食品卫生操作规程（PRP）和危害分析关键控制点（HACCP）计划，其中环境李斯特菌属的监控是评估控制措施有效性的关键指标。因此，出口企业无法避免需采用准确的计数方法进行内部质控和最终产品放行。2.2国内技术现状：国内现行的食品微生物检验标准，如GB4789.30-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》，主要侧重于定性检测（即检出/未检出），且其计数方法部分（第二法）在基质适用性、灵敏度及与国际标准的衔接上存在优化空间。同时，专门针对“李斯特菌属”这一总属的计数方法国家标准尚属空白。ISO11290-2:2017《食品链微生物学李斯特菌属检测和计数水平方法第2部分：计数方法》是国际公认的权威计数方法，但国内需要将其转化为符合我国国情和出口检验需求的标准。因此，制定SN/T5875-2025，是提升我国出口检测技术水平、实现与国际标准互认的迫切需求。2.3政策与法规支撑：本标准依据《中华人民共和国标准化法》、《中华人民共和国进出口商品检验法》及其实施条例，同时紧密参考欧盟EC2073/2005法规、美国FDA的“李斯特菌属规则”（ListeriaRule,21CFRPart117）、以及CAC相关指南。标准研制过程严格按照国家标准化管理委员会和海关总署关于行业标准制修订的工作程序和规定执行，确保标准的科学性、规范性和权威性。3.标准核心技术内容SN/T5875-2025标准的核心是规定了采用水平方法（HorizontalMethod）对出口食品及加工环境中李斯特菌属进行计数。其主要技术内容包括：3.1适用范围：本标准规定了出口食品（包括即食食品、乳制品、水产品、肉制品、蔬菜等）及其加工环境（包括设备表面、地面、排水口、人员手套等拭子样品，以及生产用水、废水等液体样品）中李斯特菌属的计数方法。3.2方法原理：采用基于选择性培养基的平板计数法。具体步骤为：样品经适当处理后，进行选择性增菌液（如Lee氏肉汤，LEB）的初增菌，以修复受损细胞并富集李斯特菌。随后，将培养物接种于选择性显色培养基（如ALOA琼脂，AgarListeriaOttavianiAgosti）上进行分离培养。典型的李斯特菌落在ALOA平板上呈现蓝色/蓝绿色菌落并伴有透亮的光晕，通过菌落形态及必要的生化或分子生物学鉴定确认，计数后得出每克（mL）样品或每拭子中李斯特菌属的菌落形成单位（CFU）。3.3主要技术参数：-样品前处理：规定了不同类型样品（固体、半固体、液体、表面拭子）的稀释液、均质化条件及稀释度选择。-选择性增强：采用初级增菌步骤（30℃±1℃，24h±2h），结合选择性添加剂，有效抑制非目标菌群。-分离与确认：推荐使用ALOA琼脂等商品化显色培养基，相比传统的牛津琼脂（OXA）和PALCAM琼脂，ALOA具有更高的特异性（可有效区分单核细胞增生李斯特菌和英诺克李斯特菌等其他李斯特属）。标准附录中提供了生化鉴定和PCR确认的备选方案。-计数原则：明确规定了最低检出限（如食品标准为10CFU/g或CFU/mL）和报告方式，采用ISO7218标准中的菌落计数规则。3.4性能指标验证：在标准研制过程中，项目组组织国内多个检验检疫实验室（如深圳、宁波、上海等直属海关技术中心）进行了协同验证实验。通过人工污染样品（如鸡肉、奶酪、生菜）和自然污染样品（加工环境拭子），验证了方法的灵敏度（在1CFU/25g水平下仍能有效检测）、特异性（对李斯特菌属内不同种和食源性背景菌的区分能力）以及重复性和再现性（在CODEX37-2008框架内，计算相对标准偏差RSD<30%）。结果证明该方法可满足出口食品的严格限值要求。4.介绍主要参与单位：中国海关科学技术研究中心中国海关科学技术研究中心（简称“海科中心”）是本标准的核心起草单位之一，在标准的立项论证、方法优化、验证实施及最终文本编写中发挥了关键作用。海科中心是海关总署直属的综合性技术研究机构，其主要职责是承担海关系统重大科研项目、技术标准和法规的制修订工作，是海关系统食品安全、动植物检疫、商品检验等领域的最高技术权威机构。中心拥有国家食品安全重点实验室、国家生物安全重点实验室等多个国家级平台，并长期与国际食品安全组织、世界卫生组织、国际标准化组织（ISO）保持紧密合作。在SN/T5875-2025的研制过程中，海科中心组织了一支由高级研究员、博士及一线检验专家组成的骨干团队。团队首先对全球范围内李斯特菌病的流行趋势和各国法规动态进行了深入的系统性综述，特别是针对冷冻蔬菜、熟食肉制品等重点风险产品，分析了我国出口贸易面临的技术壁垒。其次，团队成员对现有国标（GB4789.30）的计数方法与国际标准（ISO11290-2）进行了细致的比对研究，针对环境样本复杂基质（如拭子背景菌群干扰大）的计数困难，优化了增菌条件和涂布方法，确保在高背景菌群干扰下仍能准确识别和计数目标菌落。最后，海科中心依托下属的全国海关微生物检测技术协作组，组织了覆盖东部、南部沿海及内陆主要出口加工区的多家检验检疫实验室开展协同验证，积累了大量的数据支撑，为标准的科学性、普适性和可操作性提供了坚实保证。通过领导和参与本标准，海科中心不仅填补了国内该领域的标准空白，也进一步巩固了我国在出入境食品检验领域内的技术领军地位。5.结论与展望SN/T5875-2025《出口食品及加工环境中李斯特菌属计数方法》行业标准的发布与实施，标志着我国在出口食品微生物检测领域取得了一项重要技术突破。该标准具有以下显著价值：1.填补标准空白，推动技术升级：首次建立了我国针对“李斯特菌属”这一总属的、与国际水平相当的计数方法标准。相比仅注重单核细胞增生李斯特菌检测的标准（如GB4789.30），本标准以“李斯特菌属”为靶标，更广泛地覆盖了加工环境中作为指示菌的其它李斯特菌种（如英诺克李斯特菌常被视为卫生指示菌），有助于企业更早发现交叉污染源，实施更精准的过程管控。2.打破贸易壁垒，促进国际贸易：本标准完全与国际通行标准ISO11290系列接轨，其关键检测能力得到主要贸易伙伴的认可。我国出口企业使用本标准进行产品检验和报告，将更容易被美国FDA、欧盟EFSA、加拿大CFIA等监管机构采信，从而有效避免因检验方法差异导致的货物扣留、退货或索赔，显著降低贸易成本。3.强化风险防控，守护公共健康：采用灵敏、特异的计数方法，有助于出口食品企业建立有效的“从农场到餐桌”的全链条食品安全控制体系。特别是在冷链食品管理中，可精准评估加热或冷藏加工后的李斯特菌灭活、存活和再生长风险，为产品的科学保质期评估提供关键数据。展望未来，随着基因测序、智能化显微分析等新技术的快速发展，以及消费者对食品安全要求的不断提高，李斯特菌的检