CN118490849B 一种用于多模式成像和癌症联合免疫治疗的纳米诊疗制剂及其制备方法 （南开大学）

一种用于多模式成像和癌症联合免疫治疗种用于多模式成像和癌症联合免疫治疗的纳米诊疗制剂及其制备方法，上述纳米诊疗制剂包缺氧激活探针和血管破坏剂共同负载于金属有2所述缺氧激活探针为基于N-氧化物结构制备的分子探针，所述N-氧2.一种用于多模式成像和癌症联合免疫治疗的纳米诊疗制剂的制备方法，其特征在3.如权利要求2所述的一种用于多模式成像和癌症联合免疫治疗的纳米诊疗制剂的制4.如权利要求2所述的一种用于多模式成像和癌症联合免疫治疗的纳米诊疗制剂的制3在癌症的诊断和预后方面取得了很大的进展，但癌症仍然是全球主要的公共卫生问题。因此，结合高效的综合疾病诊断和治疗策略对提高癌症治疗效果和总生存率至关重要。然而成像技术，具有高灵敏度和价格低廉，但在穿透深度和空间分辨率方面受到限制。光声双模式成像应用到肿瘤诊断中是一种引人瞩目的策略。然而，肿瘤的NIR-IIFL/PA双模式成像目前仍然面临挑战。首先，同时实现NIR-IIFL和PA信号的最大亮度是一项困难的任诊断的灵敏度和精确度。导癌细胞释放大量肿瘤相关抗原（Tumor-associatedantigen,缩写TAAs）和损伤相关分子模式（damage-associatedmolecularpattern，缩写DAMPs这些抗原可促进树突状细胞（Dendriticcells，缩写DC）成熟并有助于抗原呈递给T细胞。除ICD外，模式识别受体具。环磷酸鸟苷-磷酸腺苷酸合成酶（cyclicguanosinemonophosphate-adenosinemonophosphatesynthase，缩写cGAS)-干扰素基因刺激物(stimulatorofinterferongenes，缩写STING)通路的激活可诱导I型干扰素和其他免疫介质的产生，增强先天性免疫4不足和耗氧加速之间的不平衡。这种动态变化导致了大多数实体瘤中普遍存在的缺氧状血管破坏剂和金属有机框架，所述缺氧激活探针和血管破坏剂共同负载于金属有机框架物结构的分子探针可以在缺氧刺激下转化为相应的胺化合物，分子结构由受体-受体构型5[0022]具体合成过程如下：卤代N,N-二乙基苯胺衍生物与苯并双噻二唑发生施蒂勒反[0025]将缺氧激活探针和血管破坏剂整合到一种酸响应性的金属有机框架（Metal仅能够抑制原发肿瘤的生长，而且通过引发强烈的免疫反应抑制4T1荷瘤小鼠体内的远端肿瘤。[0026]当在纳米诊疗制剂的金属有机框架表面覆盖免疫细胞膜后，特别是巨噬细胞膜瘤的靶向聚集，由于巨噬细胞上的α4β1整合素可以结合到癌细胞上的血管细胞黏附分子，[0034]图6是本发明实验例4提供的不同活性氧物质/氧化还原分子/金属离子处理后BC@6细胞孵育BC@Z-M不同时间后近红外一/二区荧光的变化图，B为在常氧条件下4T1细胞孵育BC@Z-M不同时间后近红外一/二区荧光变化，C为常氧/缺氧条件下对细胞层面的荧光数值[0039]图11是本发明实验例9提供的在缺氧/常氧条件下，对用不同配方处理24小时的[0040]图12是本发明实验例9提供的在缺氧条件下不同浓度BC@Z-M对4T1肿瘤细胞杀伤[0041]图13是本发明实验例9提供的在缺氧/常氧条件下，对用不同方式处理24小时的[0043]图15是本发明实验例10提供的不同物质处理4T1细胞的高迁移率族蛋白B1（High[0044]图16是本发明实验例10提供的不同物质处理4T1细胞内ATP和cGAS-STING通路激[0049]图21是本发明实验例12提供的荷瘤小鼠在注射BC@Z-M纳米粒子后不同时间的[0050]图22是本发明实验例12提供的荷瘤小鼠在注射BC@Z-M纳米粒子后不同时间的PAI7[0051]图23是本发明实验例13提供的为评估在4T1荷瘤小鼠中各种干预措施的治疗效果[0053]图25是本发明实验例13提供的不同治疗干预后肿瘤切片的CD31免疫荧光染色，[0054]图26是本发明实验例13提供的不同治疗干预后肿瘤切片的CD31免疫荧光染色荧[0059]图31是本发明实验例13提供的肿瘤组织中细胞毒性T细胞激活的定量分析统计[0060]图32是本发明实验例14提供的双侧肿瘤模型中BC@Z-M介导的协同治疗过程示意[0061]图33是本发明实验例14提供的双侧肿瘤不同治疗后情况，其中，Primary为原位[0062]图34是本发明实验例14提供的不同治疗干预后双侧瘤中细胞毒性T细胞浸润的流[0063]图35是本发明实验例14提供的不同治疗干预后肿瘤中细胞毒性T细胞浸润的定量8因子和损伤相关分子模式（damageassociatedmolecularpatterns，DAMPs释放的是一个由非免疫原性变为免疫原性而介导机体产生抗肿瘤状细胞等免疫细胞，从而引发细胞内或肿瘤微环境中的抗病毒或抗肿瘤免疫反应。cGAS-9的卤代烃在钯催化下发生的交叉偶联反应。反应一般在除水除氧溶剂及惰性环境中进行。等计量的Cu(I)或Mn(II)盐可以提高反应的专一性及反应速率。氧气会使钯催化剂发生氧)2气氛下，反应冷却至-78℃,使用干冰-丙酮混合物，保持30分钟，然后加入正丁基锂（n-)4121.94,77.51,77.20,76.88,67.02,49.96,29.65,8.59。[0090]如图3所示，HRMS(MALDI-TOF,m/z):[M+H]+calcd.forC26H28N6O2S2,[0102]实验例4BC@Z-M在不同干扰离子/物质存在条件下近红外二区荧光信号/光声信[0105]透射电子显微镜(TransmissionElectronMicroscope，简称TEM)和动态光散射nm的球形结构。简称CYP450）的大鼠肝微粒体和还原型辅酶Ⅱ（nicotinamideadeninedinucleotide膜的包裹成功的让巨噬细胞减少了对BC@Z-[0115]当CA4P和BN-O被封装到酸响应性COF载体中时，它们的抗肿瘤作用在常氧条件下[0119]濒死/死亡的肿瘤细胞可以释放大量死亡相关模式分子或抗原，这些成分均可有33333协同传递和靶向释放CA4P和BN-O可显著提高小鼠存活率。[0125]对肿瘤组织进行免疫荧光染色发现血管破坏剂结合PDT/PTT治疗可以有效抑制瘤肿瘤治疗是通过在第7天全身给药不同的制剂，然后在注射后24小时对原发肿瘤进行局部以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；