2025年病理科技师的病理标本切片技术模拟考试卷答案及解析

2025年病理科技师的病理标本切片技术模拟考试卷答案及解析一、单项选择题（每题2分，共20分）1.关于病理标本固定的操作，正确的是（）A.胃肠标本固定前需剪开管腔并展平，避免黏膜面贴合B.直径5cm的肝肿瘤标本固定时间应控制在2小时内C.冰冻切片标本可用10%中性福尔马林固定以提高清晰度D.电镜标本固定需使用95%乙醇快速渗透答案：A解析：胃肠等空腔器官固定前需剪开管腔并展平（如胃沿大弯剪开，肠管沿肠系膜对侧剪开），确保固定液充分渗透至黏膜面，避免因贴合导致固定不全（A正确）。直径＞2cm的大标本固定时间需24-48小时（B错误）。冰冻切片标本需新鲜未固定组织，固定会破坏细胞结构（C错误）。电镜标本需用2.5%戊二醛等特殊固定液保存超微结构，乙醇会导致蛋白变性（D错误）。2.石蜡切片常规厚度应为（）A.1-2μmB.3-5μmC.6-8μmD.9-10μm答案：B解析：常规石蜡切片厚度以3-5μm为宜。过薄（＜3μm）易导致组织断裂、核结构不完整；过厚（＞5μm）则细胞重叠，影响镜下观察（如核分裂像识别）及免疫组化染色的抗原暴露（B正确）。3.切片过程中出现“颤痕”（波浪状条纹），最可能的原因是（）A.组织块与刀片不平行B.刀片钝或有缺口C.切片机螺丝松动D.展片水温过高答案：C解析：颤痕（振动痕）多因切片机机械稳定性差，如切片机底座未固定、推进系统螺丝松动，导致切片时组织块与刀片产生规律性振动（C正确）。组织与刀片不平行会导致切片厚薄不均（A错误）；刀片钝或缺口会导致切片出现刀痕（线性划痕）（B错误）；展片水温过高会导致细胞肿胀、结构模糊（D错误）。4.HE染色中，盐酸酒精分化的主要作用是（）A.增强苏木精对胞核的着色B.去除胞浆中多余的苏木精C.促进伊红对胞浆的染色D.固定已染色的组织成分答案：B解析：苏木精染色后，组织中细胞核与部分胞浆均被染色，需用盐酸酒精（0.5%-1%盐酸+70%乙醇）分化，选择性去除胞浆中多余的苏木精，仅保留细胞核的深染（B正确）。分化过度会导致核染色过浅，不足则胞浆背景过深，影响伊红对胞浆的对比染色。5.包埋时“面”的选择原则，错误的是（）A.皮肤标本应垂直包埋（表皮向上）B.胃镜活检标本需将黏膜面朝下包埋C.淋巴结标本应保持原有解剖方向D.肿瘤标本需包埋最大截面以显示浸润深度答案：B解析：胃镜活检标本多为黏膜组织，包埋时应将黏膜面朝上（与刀片接触方向），确保切片能完整显示黏膜层-黏膜下层结构（B错误）。皮肤垂直包埋可观察表皮-真皮-皮下组织的层次（A正确）；淋巴结保持解剖方向利于观察被膜、皮质、髓质结构（C正确）；肿瘤最大截面包埋可清晰显示肿瘤与周围组织的关系（D正确）。二、多项选择题（每题3分，共15分，多选、少选、错选均不得分）1.影响组织脱水效果的因素包括（）A.脱水剂浓度梯度B.组织大小与密度C.脱水时间D.脱水剂更换频率答案：ABCD解析：脱水需遵循“由低到高”浓度梯度（如70%→80%→95%→无水乙醇），避免高浓度乙醇骤渗导致组织收缩（A正确）。组织越大、密度越高（如纤维组织），脱水时间需越长（B正确）。常规小标本（如活检）脱水时间4-6小时，大标本需延长（C正确）。脱水剂因吸收组织水分会逐渐稀释，需定期更换（D正确）。2.透明不充分的组织可能出现（）A.切片时组织发脆易碎裂B.石蜡无法渗入组织间隙C.切片背景浑浊D.染色时脱蜡不彻底答案：BC解析：透明（常用二甲苯）的作用是置换组织中的乙醇，为浸蜡做准备。透明不充分时，乙醇残留会阻碍石蜡渗透（B正确），导致组织与石蜡结合不良，切片时易出现裂隙（非发脆，发脆多因脱水过度或浸蜡温度过高）（A错误）。透明剂残留会导致切片在HE染色脱蜡时无法完全去除，背景浑浊（C正确）。脱蜡不彻底主要与烤片温度或脱蜡时间有关（D错误）。3.展片时出现组织皱缩，可能的原因有（）A.展片水温过低（＜45℃）B.切片刀角度过大C.组织脱水过度D.载玻片未涂胶答案：AC解析：展片水温过低时，石蜡无法充分软化，切片难以展平，导致皱缩（A正确）。脱水过度会使组织变硬、弹性下降，切片时易卷曲，展片时难以展平（C正确）。切片刀角度过大（通常10°-15°）会导致切片过薄或断裂（B错误）；载玻片未涂胶会导致切片脱片（D错误）。三、简答题（每题8分，共40分）1.简述肝穿刺标本（直径1mm，长1cm）的处理流程及关键注意事项。答案：处理流程：①固定：离体后30分钟内浸入10%中性福尔马林（体积＞标本20倍），固定4-6小时；②脱水：70%乙醇（1h）→80%乙醇（1h）→95%乙醇Ⅰ（1h）→95%乙醇Ⅱ（1h）→无水乙醇Ⅰ（30min）→无水乙醇Ⅱ（30min）；③透明：二甲苯Ⅰ（15min）→二甲苯Ⅱ（15min）；④浸蜡：石蜡Ⅰ（60℃，30min）→石蜡Ⅱ（60℃，30min）；⑤包埋：将肝组织沿长轴方向竖直包埋（避免弯曲），标记方向；⑥切片：厚度3-4μm，连续切片3-5张；⑦展片：水温50-55℃，展平后贴片于涂胶载玻片；⑧烤片：60℃烤片30分钟。关键注意事项：①固定及时，避免自溶（肝组织含大量溶酶体，易自溶）；②脱水时间需严格控制（组织细小，易过度脱水导致发脆）；③包埋时保持组织直线方向，避免切片时出现“弯曲”伪像；④切片时使用新刀片（组织细小，刀片钝易导致断裂）；⑤展片水温不宜过高（＞60℃会破坏肝窦结构）。2.分析切片中出现“空泡”（无组织的空白区域）的可能原因及解决方法。答案：可能原因及解决方法：①组织取材时存在气泡（如穿刺标本未完全浸入固定液）：取材后轻压组织排除气泡，固定时确保完全浸没；②脱水不彻底（乙醇残留）：延长脱水时间或检查脱水剂浓度（如无水乙醇是否吸水）；③透明不充分（二甲苯未完全置换乙醇）：增加透明时间或更换新鲜二甲苯；④浸蜡时石蜡温度过低（石蜡未完全渗入组织）：提高浸蜡温度（常规58-60℃）或延长浸蜡时间；⑤包埋时石蜡中混入空气（如石蜡冷却过快）：包埋时用热镊子轻压组织排除气泡，待石蜡表面凝固后再完全冷却。3.简述HE染色中“核着色过浅，胞浆着色过深”的可能原因及纠正措施。答案：可能原因及纠正措施：①苏木精染色时间不足：延长苏木精染色时间（常规5-10分钟，根据染液浓度调整）；②分化过度（盐酸酒精作用过强）：缩短分化时间或降低盐酸浓度（如0.3%盐酸替代0.5%）；③伊红染色时间过长：减少伊红染色时间（常规1-3分钟）；④苏木精染液失效（氧化或沉淀过多）：更换新鲜苏木精染液（需过滤后使用）；⑤水洗不充分（分化后残留盐酸）：加强分化后的流水冲洗（5-10分钟），中和残留酸，促进苏木精复蓝。4.简述冰冻切片“冰晶”形成的预防措施。答案：预防措施：①标本取材后立即冷冻（避免放置室温导致水分聚集）；②冷冻温度适宜（恒冷箱温度-20℃至-25℃，避免过低导致组织硬脆）；③组织大小控制（直径＜2cm，厚度＜0.5cm，减少内部冰晶形成）；④冷冻前用OCT包埋剂（最优浓度10%-20%）包裹组织，降低冰点并减少自由水；⑤切片时保持刀刃锋利（钝刀会摩擦生热，导致局部解冻后再冻结形成冰晶）；⑥切片后立即固定（95%乙醇或丙酮，避免冰晶融化破坏结构）。四、操作题（共25分）某医院接收1例胃窦部溃疡标本（大小5cm×4cm×2cm），需制作常规石蜡切片。请描述从标本接收到切片完成的完整操作流程，并说明每个步骤的质量控制要点。答案：操作流程及质量控制要点：1.标本接收与登记（2分）核对送检信息（患者姓名、ID、标本类型、数量）；观察标本状态（是否新鲜、有无自溶/坏死）；记录标本大小、颜色、溃疡位置（距切缘距离）、周围组织情况。质量控制：避免标本混淆（双人核对），记录需详细（为诊断提供定位依据）。2.取材（5分）固定：将标本沿大弯剪开，展平黏膜面，浸入10%中性福尔马林（体积＞标本10倍），固定24-48小时（至组织彻底硬化）；取材：选取溃疡中心、边缘（包括黏膜层-肌层）、正常胃壁各2块，每块大小1.5cm×1.5cm×0.3cm（厚度≤0.3cm确保脱水充分）；标记：每块组织放入包埋盒，标注取材部位（如“溃疡中心”“溃疡边缘”）。质量控制：固定时间足够（大标本需穿透固定），取材厚度均匀（避免过厚导致脱水不全），标记清晰（避免包埋时方向错误）。3.脱水、透明、浸蜡（6分）脱水：70%乙醇（4h）→80%乙醇（4h）→95%乙醇Ⅰ（4h）→95%乙醇Ⅱ（4h）→无水乙醇Ⅰ（2h）→无水乙醇Ⅱ（2h）；透明：二甲苯Ⅰ（1.5h）→二甲苯Ⅱ（1.5h）（观察组织是否透明如玻璃样）；浸蜡：石蜡Ⅰ（60℃，2h）→石蜡Ⅱ（60℃，2h）（石蜡需过滤去除杂质）。质量控制：脱水剂梯度严格（避免高浓度骤渗），透明时间根据组织大小调整（过久会导致组织脆化），浸蜡温度恒定（避免过高破坏抗原）。4.包埋（4分）预热包埋机（65℃），将组织按取材方向放入包埋框（黏膜面朝上）；注入新鲜石蜡（与浸蜡石蜡同型号），用热镊子轻压组织确保平整；冷却：先置4℃冰箱表面快速冷却（避免石蜡收缩产生裂隙），再完全冷却。质量控制：包埋方向正确（黏膜面朝上保证切片完整性），石蜡无气泡（影响切片连续性），冷却速度适中（过快导致组织与石蜡分离）。5.切片与展片（5分）修块：用粗刀修去多余石蜡，暴露组织面（与刀片平行）；切片：安装新刀片（角度12°-15°），切片厚度3-4μm，调节推进速度（2mm/s）；展片：水温50-55℃，用毛笔轻展切片至无皱折，贴片于涂有防脱胶（如多聚赖氨酸）的载玻片；烤片：60℃烤片1小时（确保切片与载玻片黏附牢固）。质量控制：刀片锋利（避免刀痕），切片厚度均匀（影响诊断），展片水温适宜（避免细胞肿胀），烤片时间足够（防止脱片）。6.染色