CN119395309A 一种利用病毒假病毒颗粒评价中和抗体的方法 （南京市计量监督检测院）_第1页
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一种利用病毒假病毒颗粒评价中和抗体的本发明提供了一种利用病毒假病毒颗粒评价中和抗体的方法，通过在293T、293T_CD4、293T_ACE2等不同细胞系中分别接种狂犬病毒、HIV病毒、新型冠状病毒假病毒并进行梯度稀释试验，结合改进型Reed_Muench法计算中和抗体如预先检测细胞自然死亡率并扣除非特异性影2每孔接种约1X103个细胞并加入50μL含2%FBS的DMEM培养基；结果为1x1os个/孔；S8、中和抗体效价表示：将所得PD50值换算为使所述接种病毒假病毒的细胞包括接种狂犬病毒假病毒的293T细胞3.根据权利要求2所述的一种利用病毒假病毒颗粒评价中和抗体的方法，其特征在4.根据权利要求2所述的一种利用病毒假病毒颗粒评价中和抗体的方法，其特征在5.根据权利要求1所述的一种利用病毒假病毒颗粒评价中和抗体的方法，其特征在6.根据权利要求1所述的一种利用病毒假病毒颗粒评价中和抗体的方法，其特征在7.根据权利要求1所述的一种利用病毒假病毒颗粒评价中和抗体的方法，其特征在38.根据权利要求1所述的一种利用病毒假病毒颗粒评价中和抗体的方法，其特征在4[0004]中和抗体的效价是指中和抗体中和病毒感染能力的强度或能力，即在一定条件5293T_ACE2细胞分别进行至少2代以上传代，使其对各自所对接种病毒的具有稳定感受性，6介于导致细胞50%CPE的两个稀释度之间通过多点测量、方差计算及置信区间估计等方式精确确定细胞的自然死亡率(D_baseline)，并在CPE率计算中扣除该部分，排除非特异性细胞死亡的干扰；该改进型Reed_Muench法能够更准确地确定导致50%CPE的稀释倍数，使PD50的计算更加科学7并结合图像分析软件获取每个孔的荧光阳性细胞数量；通过荧光标记可以显著提升阳性/8293T_ACE2细胞分别进行至少2代以上传代，使其对各自所对接种病毒的具有稳定感受性，其中，CPEromeced为修正细胞病变介于导致细胞50%CPE的两个稀释度之间9其中，为计算置信区间；为置信区间阈值；Zu/z表示双侧检验的临界值；Dbaseline为修正基线死亡率。

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