SN∕T 5863-2025 出口植物源性食品中氰霜唑及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱 质谱法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T5863—2025出口植物源性食品中氰霜唑及其代谢物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法Determinationofcyazofamidanditsmetaboliteinplantoriginproductsforexport—HPLC-MS/MSmethod2025-12-11发布2026-07-01实施中华人民共和国海关总署发布Ⅰ前言 Ⅲ 2规范性引用文件 3术语和定义 4方法提要 5试剂和材料 6仪器和设备 7试样的制备 8分析步骤 9检出限、定量限、回收率和精密度 附录A（资料性）质谱参数 附录B（资料性）氰霜唑和CCIM标准物质多反应监测（MRM）色谱图 附录C（资料性）不同基质的添加水平和回收率 Ⅲ本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位：中华人民共和国海口海关。本文件主要起草人：王玉健、符灵梅、徐莉、梁振纲1出口植物源性食品中氰霜唑及其代谢物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法本文件描述了出口植物源性食品中氰霜唑及其代谢物4-氯-5-（4-甲苯基）-1H-咪唑-2腈残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。鸡油菌、甜菜、核桃、花生、牛油果、干蚕豆、大米、橙、菠萝、葡萄干、咖啡粉等植物源性食品中氰霜唑及其代谢物4-氯-5-（4-甲苯基）-1H-咪唑-2腈残留量的测定。其他植物源性食品参照执行。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB2763—2021食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4方法提要采用含1%乙酸乙腈溶液提取试样中的氰霜唑及其代谢物4-氯-5-（4-甲苯基）-1H-咪唑-2腈，以C18和弗罗里硅土固相萃取填料净化并过滤后，采用液相色谱-质谱/质谱进行测定，外标法定量。5试剂和材料除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。5.1.3无水硫酸镁：于500℃马弗炉内灼烧4h，冷却后贮于密闭容器中备用。5.1.4氯化钠。25.1.70.1%甲酸溶液：准确量取1.0mL甲酸（5.1.5用水定容至1000mL，混匀。5.2标准物质5.2.1氰霜唑（Cyazofamid，分子式：C13H13ClN4O2S，CAS号：120116-88-3纯度≥95%，或具有有证标准物质证书的标准物质。95%，或具有有证标准物质证书的标准物质。5.3标准溶液配制于10mL容量瓶中，用乙腈（5.1.1）溶解并定容至刻度，配制成质量浓度约为1mg/mL的标准储备液，混匀，于-18℃冷冻避光保存，有效期1个月。5.3.2标准中间液（1μg/mL取适量标准储备液（5.3.1用乙腈（5.1.1）稀释成浓度为1μg/mL的标准中间液，于-18℃冷冻避光保存，有效期7d。5.3.3混合标准工作溶液：吸取适量的标准中间液（5.3.2用溶剂或空白样品提取液配成质量浓度为液，混合标准工作溶液应现配现用。5.4.1十八烷基硅烷键合相吸附剂（C1840μm~60μm。6仪器和设备6.1液相色谱-质谱/质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。6.3涡旋混合器。6.4离心机：最大转速不低于4000r/min。6.550mL聚丙烯离心管。6.6组织捣碎机。6.8马弗炉。7试样的制备附录A的规定执行。对于个体较小的样品，取样后全部处理；对于个体较大的基本均匀样品，可在对称轴或对称面上分割或切成小块后处理；对于细长、扁平或组分含量在各部分有差异的样品，可在不同部位切取小片或截成小段后处理；取后的样品将其切碎，充分混匀，用四分法取样或直接放入组织捣碎机中捣碎成匀浆。匀浆放入聚乙烯容器中。取样后的核桃、花生、干蚕豆、大米、葡萄干样品各500g，粉碎后充分混匀，放入聚乙烯瓶或袋中。咖啡粉试样混合均匀。3试样于-18℃及以下温度条件下保存。8分析步骤称取5.0g左右样品（精确至0.01g）于50mL离心管中，加入10mL水浸泡20min，使试样完全润滤膜（5.4.3供液相色谱-质谱/质谱测定。8.1.2其他样品称取5.0g左右样品（精确至0.01g）于50mL离心管中，加入20mL1%乙酸乙腈溶液（5.1.6涡取1.0mL上清液于装有50mgC18粉末（5.4.1）和50mg弗罗里硅土吸附剂（5.4.2）的10mL离心管中，涡旋2min，以4000r/min离心5min，取上清液过0.22μm滤膜（5.4.3供液相色谱-质谱/质谱测定。8.2.1液相色谱条件8.2.1.3流动相：A为乙腈，B为0.1%甲酸溶液（5.1.7梯度洗脱，洗脱程序见表1。表1液相色谱的梯度洗脱程序时间/min流动相A/%流动相B/%0.00.2554.08.2.2质谱参考条件质谱参考条件如下：a）电离方式：电喷雾电离（ESISN/T5863—20254b）扫描方式：正离子扫描；c）检测方式：多反应监测模式（MRMd）使用前应调节各参数使质谱灵敏度达到检测要求，参考条件见附录A。8.2.3定性测定按照液相色谱-质谱/质谱条件测定样品和标准溶液，如果检测的质量色谱峰保留时间与标准物质保留时间相差不超过±2.5%，定性离子对的相对丰度与浓度相当标准溶液的相对丰度一致，相对丰度允许偏差不超过表2规定的范围，则可判定样品中存在对应的被测物。表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度/%>50>20~50>10~20≤10最大允许偏差/%±20±25±30±508.2.4定量测定采用单点或多点校正外标法定量。为减少基质对定量测定的影响，除黄瓜、苹果、油桃、荷兰豆、鸡油菌、橙、菠萝等基质外，其他基质应采用基质标准溶液定量，并且保证所测样品中被测物的响应值应在工作曲线范围内。氰霜唑和CCIM的多反应监测（MRM）色谱图见附录B。8.2.5空白试验除不称取试样外，均按上述步骤进行。8.3结果计算与表述试样中氰霜唑或CCIM残留量X，以质量分数毫克每千克（mg/kg）表示，单点校正按式（1）计算：Xn……………（1）式中：X——试样中氰霜唑或CCIM残留量，单位为毫克每千克（mg/kgA——试样溶液中氰霜唑或CCIM的峰面积响应值；Cs——标准溶液中氰霜唑或CCIM浓度的数值，单位为微克每毫升(μg/mLV——净化后取上清液体积，单位为毫升（mLAs——标准溶液中氰霜唑或CCIM的色谱峰面积响应值；m——试样质量的数值，单位为克（gn——稀释倍数。Xn……………（2）式中：X——试样中氰霜唑或CCIM残留量，单位为毫克每千克（mg/kgCx——标准曲线上查得的试样中氰霜唑或CCIM浓度的数值，单位为微克每毫升(μg/mLV——净化后取上清液体积，单位为毫升（mLm——试样质量的数值，单位为克（gn——稀释倍数。SN/T5863—20255注：计算结果应扣除空白值。当计算结果小于等于1mg/kg时，保留2位有效数字；当计算结果大于1mg/kg时，保留3位有效数字。9检出限、定量限、回收率和精密度9.1检出限和定量限本方法在黄瓜、马铃薯、荔枝、卷心菜、生菜、荷兰豆、鸡油菌、甜菜、葡萄干中氰霜唑及其代谢油果、干蚕豆、大米、橙、菠萝中氰霜唑及其代谢物在洋葱和咖啡粉中氰霜唑及其代谢物CCIM的检出限为0.0095mg/kg，定量限为0.020mg/kg。9.2回收率及精密度回收率及精密度试验数据见附录C。6（资料性）质谱参数1）液相色谱-质谱/质谱参数如下：a）电喷雾电压（IS5500V；b）离子源温度（TEM550℃;e）辅助气压力（GS2344.74kPa；f）氰霜唑、CCIM的母离子、子离子、去表A.1多反应监测（MRM）的条件化合物名称母离子（m/≈)子离子（m/≈)去簇电压/V碰撞能量/eV氰霜唑CCIMa定量离子。1）非商业性声明：附录A所列参数是在API4000质谱仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励文件使用者尝试采用不同厂家或型号的仪器。7（资料性）氰霜唑和CCIM标准物质多反应监测（MRM）色谱图氰霜唑和CCIM标准物质多反应监测（MRM）色谱图见图B.1和图B.2。4.0×1043.5×1043.0×1042.5×1042.0×1041.5×1041.0×1045.0×103a)325.1>108.08×1037×1036×1035×1034×1033×1032×1031×103b)325.1>261.1图B.1氰霜唑基质标准溶液的多反应监测（MRM）色谱图（0.04μg/mL）44444a)218.1>139.0b)218.1>183.3图B.2CCIM基质标准溶液的多反应监测（MRM）色谱图（0.04μg/mL）8（资料性）不同基质的添加水平和回收率氰霜唑和CCIM在不同基质中的添加水平和回收率见表C.1。表C.1氰霜唑和CCIM在不同基质中的添加水平及回收率（n=6）基质添加水平/（mg/kg）氰霜唑回收率/%氰霜唑相对标准偏差/%CCIM回收率/%CCIM相对标准偏差/%黄瓜71.1~99.075.6~107.370.2~94.971.2~88.575.6~86.14.280.3~93.682.0~104.78.385.5~106.8马铃薯82.1~109.373.3~93.574.2~100.283.8~105.38.181.3~107.472.5~97.981.7~104.88.582.78~102.8葡萄89.3~108.984.7~106.98.991.4~106.875.9~99.48.480.1~95.04.973.1~81.588.3~104.787.2~101.2荔枝78.7~109.274.9~93.178.6~108.172.1~91.382.9~99.677.7~92.8西瓜87.2~109.973.7~99.980.3~104.08.183.5~109.077.6~97.674.9~97.785.3~98.778.5~93.5苹果87.8~105.984.9~104.788.47~106.372.6~96.784.2~97.04.175.3~88.889.0~101.54.887.9~102.9油桃85.7~109.887.5~108.790.7~105.888.8~108.88.088.7~108.783.4~98.486.1~101.289.5~101.6SN/T5863—20259表C.1氰霜唑和CCIM在不同基质中的添加水平及回收率（n=6续）基质添加水平/（mg/kg）氰霜唑回收率/%氰霜唑相对标准偏差/%CCIM回收率/%CCIM相对标准偏差/%洋葱0.02077.2~103.874.5~104.00.04074.0~94.077.7~105.70.20083.1~104.780.1~104.3西红柿0.00490.8~106.874.2~104.90.00889.9~102.979.9~102.90.04075.6~90.14.974.6~85.44.00.30086.6~99.788.6~104卷心菜0.00873.2~98.871.0~102.80.01672.4~89.970.3~94.20.08072.4~94.172.0~88.40.30088.7~101.289.7~104.5生菜0.00884.6~109.971.8~93.00.01685.0~103.278.5~101.60.08085.2~109.375.9~103.991.1~103.04.191.4~105.1芹菜0.00482.7~104.885.6~106.90.00886.4~100.984.9~103.30.04083.5~99.976.1~93.791.8~106.091.4~104.24.8荷兰豆0.00877.7~107.380.9~104.90.01678.5~105.871.0~92.50.08079.0~107.290.7~105.20.25083.9~100.388.8~104.7鸡油菌0.00877.4~106.375.1~97.10.01674.7~101.477.2~94.80.08076.3~99.083.8~99.4甜菜0.00881.4~104.978.4~109.40.01688.3~108.081.9~107.40.08081.6~101.885.1~105.9核桃0.00479.4~104.282.5~109.90.00887.9~109.882.9~107.80.04089.7~108.894.4~108.8表C.1氰霜唑和CCIM在不同基质中的添加水平及回收率（n=6续）基质添加水平/（mg/kg）氰霜唑回收率/%氰霜唑相对标准偏差/%CCIM回收率/%C