呼出气一氧化氮检测技术指南总结2026

呼出气一氧化氮检测技术指南总结2026呼出气一氧化氮（exhalednitricoxide，eNO）作为2型气道炎症的生物标志物，在儿童呼吸系统疾病诊疗中具有重要价值［1］。eNO检测无创、便捷，已成为儿童哮喘、慢性咳嗽等疾病或症状的重要炎症评估工具，尤其在哮喘诊断、预测糖皮质激素治疗反应、评估抗炎效果、预测急性发作风险等方面发挥独特作用［2-3］。随着检测技术的发展，eNO已从单一的下呼吸道炎症指标拓展至小气道和上气道的综合评估体系，为呼吸系统2型炎症的精准定位与个体化管理创造了条件。我国2017年发布了《儿童肺功能及气道非创伤性炎症指标系列指南（七）：呼出气体一氧化氮监测》［4］，对推动儿童eNO规范化应用起到了重要作用。然而，随着eNO检测的普及和检测方法的不断拓展，临床实践中仍存在方法选择和操作不规范的问题，尤其是在潮气呼吸（tidalbreathing，TB）法eNO、离线eNO和肺泡一氧化氮（alveolarconcentrationsofNO，CaNO）检测方面，可能与临床医师对相关技术原理和方法学要求认知不足有关［5］。化学发光法是国际推荐的标准eNO检测方法，但因其设备相对昂贵、复杂，目前临床上使用相对少，而电化学法因设备轻便、操作简单，临床上使用更为广泛，但国内不同设备的质量控制存在差异，导致结果不准确，亟须新的技术标准进一步规范eNO检测［6-8］。另外，近年来我国在儿童eNO的正常值研究方面也取得了较大进展［9-10］。为此，中国儿童肺功能联盟组织多领域专家，基于国内外最新循证证据，对2017版指南［4］进行系统修订，旨在进一步规范儿童eNO检测流程，统一结果解读，并促进其在儿童呼吸系统疾病中的合理应用。1、指南制订方法本指南的整体框架和主要修订内容由专家组会议讨论确定。指南工作组成员由儿童呼吸专业、肺功能亚专业、儿内科专业专家组成。证据主要来源于PubMed、Embase、WebofScience、万方数据、中国知网等中英文数据库，检索式由“儿童/children”“呼出气一氧化氮/exhalednitricoxide”“鼻一氧化氮/nasalnitricoxide”“肺泡一氧化氮/alveolarconcentrationsofnitricoxide”“电化学法/electrochemical”“化学发光法/chemiluminescence”等中英文相关词汇及逻辑符号组合，检索截止日期为2025年8月。基于文献证据与临床经验，执笔人完成初稿后，再通过会议讨论进行修订。修订完成后由外部同行专家进行评审，针对反馈意见进行完善，获全体专家同意后形成终稿。指南的目标人群为0～18岁儿童，适用于各级医疗机构eNO检测从业人员及相关儿科医师、肺功能技师、护士等相关医务人员。2、人体肺部NO的来源和病理生理意义NO是L-精氨酸被氧化成L-瓜氨酸后产生的一种气体，该反应依赖一氧化氮合酶（nitricoxidesynthase，NOS）催化。NOS有3种亚型［11］，NOS1、NOS2和NOS3，其中NOS2又称为诱导型NOS（inducibleNOS，iNOS），主要表达在支气管上皮细胞中，生理状态下以低水平表达，维持生理水平NO；炎症状态下，白细胞介素（interleukin，IL）-4、IL-13等细胞因子可激活JAK/STAT6信号通路，诱导产生大量NOS2［12］，在多种免疫细胞中均有表达，且其催化作用不受钙浓度影响，进而生成大量NO，导致NO的病理效应，可在呼出气中检测到NO浓度增高［13］。NO可来源于整个呼吸道，但不同部位的NO浓度有较大差异。从上呼吸道到下呼吸道，NO浓度呈梯度递减分布，上呼吸道NO水平可达下呼吸道的100倍以上［14］。上呼吸道的NO主要由鼻旁窦产生［15-16］，下呼吸道的NO可来源于大气道（气管、支气管）、小气道和肺泡或腺泡区。肺泡处毛细血管网丰富，NO与肺泡毛细血管上的氧合血红蛋白高度亲和，使肺泡NO维持在一个较低水平。支气管上皮产生的少量、生理水平的NO是呼吸生理的基础，作为血管舒张剂、支气管舒张剂、神经递质、炎症介质等NO参与了多种呼吸生理过程［17-19］。病理状态下，NO产生过多，参与了气道炎症、自由基产生、气道高反应性、黏液过度分泌、血管通透性增加、组织损伤等过程。其中，最主要的是其在2型气道炎症中的作用，NO通过改变细胞凋亡、吞噬作用和白细胞黏附等促进炎症过程，并增加肥大细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞的反应性和募集，从而促进气道高反应性和肺部炎症［20-21］。eNO检测技术和方法学基础3.1常用eNO检测技术及性能特点根据NO检测技术的原理不同，可分为电化学法、化学发光法、激光技术等，以前两者较为常见，二者性能比较见表1。

3.1.1电化学法是目前临床上最常用的NO检测方法。该方法基于电化学NO气体传感器，通常由工作电极、对电极、参比电极、电解质等组成，采用安培电流技术进行检测。仪器通过恒电位仪向传感器的工作电极和参比电极之间施加恒定的电位差，检测时样本中的NO分子扩散穿过防水透气膜，并在工作电极上发生氧化反应，产生可测量的电流，电流信号与样品中NO的浓度成正比。

3.1.2化学发光法被认为是NO检测的“金标准”。气体样品中所含的NO可与设备中臭氧（ozone，O3）发生化学反应，生成电子激发态的二氧化氮（nitrogendioxide，NO2）分子。激发态NO2能量较高、不稳定，其恢复到低能量的基态时，会发射出波长在600～3000nm的电磁辐射（光子），可被光电倍增管检测、放大，与样品中NO浓度呈线性关系。

3.1.3其他方法激光技术，如调谐二极管激光和量子级联激光，可测量NO的吸收光谱，具有灵敏度高和响应迅速等优势，但其高成本和技术复杂限制了临床应用。此外，电喷雾离子化质谱法和离子迁移谱等新技术，能够实时捕捉NO变化，为NO检测提供了新的解决方案。

3.2eNO检测的方法学原理eNO的浓度与采样时间点和呼气流量关系密切。一方面，呼出气样本的气体组成随呼气进程而变化，因此采样时相会影响测得的eNO数值。呼气初期采集的气体主要来源于设备无效腔、口腔和上呼吸道，而呼气后期的气体则来源于下呼吸道和肺泡。因此，eNO检测应规范采样时相，在排除无效腔气体后于稳定平台期取值，提高检测结果的代表性。另一方面，eNO浓度受呼气过程中NO交换影响。在呼气过程中，以肺泡内气体NO（CaNO）为起始点，因NO可从支气管壁扩散到管腔内，管腔内NO浓度逐渐增加。NO的增加程度与气道壁NO浓度（tissueconcentrationofNOoftheairwaywall，CawNO）、NO的径向扩散能力（airwaycompartmentdiffusingcapacityofNO，DawNO）和呼气流量有关；随呼气流量增加，气体在传导气道内的停留时间缩短，气道壁NO向管腔内扩散的相对贡献降低，因而测得的NO中远端气道和肺泡区的相对贡献增加。eNO浓度通常随呼气流量增加而降低，但二者呈非线性关系［6，22］。

3.2.1直接测定的eNO（1）鼻呼出气NO：当以低流量经鼻呼气或抽吸鼻腔气体时，测定的NO称为鼻NO（nasalNO，nNO），反映鼻部的NO水平［7］。早期nNO检测多在单侧鼻孔、软腭闭合条件下，以0.2～6.2L/min等不同流量采样，报告特定采样流量下的nNO浓度，结果以ppb（partsperbillion，十亿分之一）表示［23-24］。然而，nNO浓度（ppb）与采样流量成反比；流量大时，nNO浓度（ppb）会偏低，同时可能导致鼻翼塌陷等技术误差；流量小时，nNO浓度（ppb）会偏高，达到稳定平台所需时间明显延长，增加儿童配合难度，且重复性差［25-27］。因此，采用ppb不利于不同方法、不同设备间结果比较。近年更强调将nNO按采样流量标准化，用nL/min（ppb×L/min）来表示nNO的输出量，并推荐在0.3～0.33L/min条件下采样［7，28］。故本指南推荐以0.3L/min的标准流量采样，并以nL/min作为报告单位，以提高结果的可比性、可解释性和与现有诊断证据的一致性。目前国内临床上普遍采用的仍是10mL/s的采样流量，并以ppb报告结果。（2）口呼出气NO：当呼气流量较高时，则反映下呼吸道NO水平，如呼气流量为50mL/s时，测定的eNO称为FeNO50（fractionalconcentrationofexhaledNOat50mL/s），反映的是下呼吸道NO的总体水平［4，6，29］。而当呼气流量达到200mL/s时，测定的eNO称为FeNO200（fractionalconcentrationofexhaledNOat200mL/s），主要反映小气道的NO水平［29-30］。但需要注意的是，无论呼气流量高低，在呼气开始阶段的气体样本均含有无效腔气体，因此NO平台期采样至关重要。

3.2.2间接计算的eNOCaNO不能通过单一呼气流量直接测得，应在不同呼气流量下测定eNO后，通过数学模型间接计算。基于肺的“双室模型”，呼气NO的来源可分解为肺泡稳态浓度（CaNO）和传导气道交换参数（CawNO和DawNO），三者可共同计算传导气道NO总通量（totalfluxofNOintheconductingairwaycompartment，JawNO），即JawNO=（CawNO-CaNO）×DawNO。NO输出量（V̇NO）与呼气流量（V̇E）的关系可表达为以下一般式［6］：V̇NO=

V̇E×FeNO=

V̇E×［CawNO+（CaNO-CawNO）×exp（-DawNO/

V̇E）］。将一般式非线性拟合，可推算出CaNO、DawNO、CawNO［31］，借助Högman-Meriläinen算法［32］对采集到的多流量数据进行数学一致性检验。为了准确区分并计算出气道和肺泡各自NO，需在彼此分离的3个V̇E获取V̇NO，即低（≤20mL/s）、中（100mL/s）、高（350～400mL/s）流量。Tsoukias和George［33］在高呼气流量范围内对一般式进行泰勒近似，将其简化为线性关系V̇NO=CaNO×V̇E+JawNO。以NO输出量对呼气流量进行线性回归，可由直线斜率和纵轴截距分别计算CaNO和JawNO，并以回归相关系数r>0.95作为质量控制标准。该模型是建立在高呼气流量的前提下，同时为提高线性拟合质量，则需要3个递增的、≥100mL/s的高呼气流量。由于儿童完成多个高呼气流量存在一定困难，有研究显示FeNO200与上述模型计算的CaNO呈正相关［30］，因此将模型简化为50mL/s和200mL/s两个流量，并利用校正系数计算CaNO，称为简化版线性模型［29］。该方法虽然操作简便，但不同于经典的线性模型和非线性模型，尚未被公认，其准确性和适用范围仍需进一步验证［34-35］。4、临床应用指征与检测前评估eNO检测可用于儿童气道炎症性疾病的辅助诊断、炎症表型判断、疗效评估及随访管理等。eNO结果受年龄、性别、近期用药、感染及检测方法等多种因素影响，不能作为疾病诊断或治疗调整的唯一依据，应结合临床表现、肺功能、影像学及治疗反应等综合判断［1-2，4，6］。

4.1临床应用指征

4.1.1FeNO50（1）协助儿童哮喘诊断和鉴别诊断［1，36］：①喘息，怀疑哮喘，尤其是缺乏可逆性气流受限证据时；②慢性咳嗽，怀疑咳嗽变异性哮喘或嗜酸性粒细胞性支气管炎；③胸闷，怀疑胸闷变异性哮喘。（2）用于儿童哮喘长期管理：①判断气道炎症是否属于2型炎症；②评估抗炎药物治疗的有效性，尤其是吸入性糖皮质激素［37］；③协助评估抗炎药物的依从性［37］；④评估哮喘是否有急性加重风险；⑤当哮喘控制不佳时，评估是否由2型炎症未控制所致［38］；⑥协助重症哮喘生物制剂治疗策略的制定。

4.1.2nNO（1）协助原发性纤毛运动障碍（primaryciliarydyskinesia，PCD）筛查：对于临床怀疑PCD者，nNO具有重要筛查价值［7，28，39］。（2）辅助评估上气道炎症状态：鼻炎或鼻窦炎时，nNO可明显升高，但鼻窦炎严重时，导致鼻窦口阻塞，nNO反而会明显下降。nNO对鼻炎、鼻窦炎的诊断及严重程度判断具有辅助价值。

4.1.3FeNO200和CaNO哮喘控制不佳、怀疑小气道炎症或外周气道受累的患儿，FeNO200和CaNO可作为FeNO50的补充评估，但价值有限，不作为常规推荐。

4.2不推荐或需谨慎使用的情况（1）不推荐将FeNO50作为儿童哮喘诊断的唯一依据。（2）不推荐仅依据FeNO50水平调整哮喘治疗方案。应结合症状控制、肺功能、用药依从性、是否有急性发作风险以及合并症等情况综合判断。（3）不建议将TB法和离线法eNO结果直接等同于标准一口气法FeNO50结果。（4）不建议在缺乏标准化检测流程、质量控制和适用参考值的情况下，常规将FeNO200、CaNO或离线法、TB法eNO作为临床决策依据。

4.3检测前评估及暂缓检测情况存在以下情况时，建议暂缓检测，待相关因素解除或稳定后再行检测：（1）呼吸道传染性疾病，如结核传染期、病毒感染急性期等。（2）剧烈咳嗽、明显气促、呼吸困难或其他不能耐受检测的情况。（3）哭闹、不能配合、无法维持规定呼气流量或不能完成检测动作。（4）近期摄入或使用了影响eNO结果的食物、药物，或接受了可能影响eNO结果的检查或操作。检查前准备和注意事项5.1环境要求空气中NO水平过高可干扰eNO检测结果，检测应在通风良好、环境NO较低（<5ppb）的室内进行，并记录环境NO水平。

5.2仪器准备及日常校准

5.2.1化学发光分析仪每日开机进行零点设置和流量传感器校准。每日测试前应使用无NO的标准气体进行零点设置，部分设备配有“零点气体”模块［7］。化学发光仪同时测定流量和eNO，与肺功能仪校准方法相同，应通过合适规格的定标筒对流量传感器进行容积和流量的校准［7，28］。每月或在更换关键部件后应进行标准气体的线性校准，以维持仪器量程和线性的准确与可追溯性［6-7，28］。一般使用两种浓度的NO标准气体，以2000ppb作为高浓度气体［6］，1～5ppb作为低浓度气体［28］或直接采用设备内的零点气体［7］，具体可根据制造商说明书执行。校准气体需要保证其准确度在±2%或更佳，稳定性≥6个月，到期或瓶压<100kPa时应及时更换。另外，每年应根据制造商维护流程，检查NO过滤器、化学反应转换器、O3发生器及外围部件，必要时需更换。

5.2.2电化学分析仪每日开机或根据制造商说明书推荐频次进行零点设置，该过程（参考设备说明书）可自动完成或由操作者手动完成。应遵循制造商推荐，选用与传感器兼容、低挥发的清洁方式，不建议使用酒精类或其他易挥发的清洁剂或消毒剂［7，28］。电化学分析仪均配备经预先校准的传感器，传感器使用达到制造商标注的有效测量次数或有效期后，需要更换［6］。电化学分析仪一般不需要标准气体校准，但其性能可随时间或更换传感器而变化［6-7，23］。因此，当设备环境发生显著变化、设备出现异常信息或临床怀疑仪器准确性时，推荐采用生物质量控制方式确认其测量准确性［7，28］，部分设备配置了标准气校准模块，也可进行标准气验证校准。生物质量控制需要选取健康、eNO稳定的工作人员1～2名作为生物对照，记录其eNO基线值与可接受波动范围，当怀疑设备准确性时，则对选定的生物对照人员进行eNO测定。若生物质量控制结果偏离既往稳定区间，应排查泄漏、采样阻塞、连接等问题，必要时更换相关部件并复测。

5.3受试者准备含高硝酸盐食物（如腌制食品）、吸烟、剧烈运动及部分药物（如糖皮质激素、2型炎症相关单克隆抗体等）可影响eNO结果［23，40-42］。因此，建议受试者在检测前1h内不要进食、饮水、剧烈运动、主动或被动吸烟等［3，23，40］；若进食含硝酸盐食物，则至少2h后才能进行eNO检测［23］；同时，检测前应记录近期使用糖皮质激素、支气管舒张剂、生物制剂及抗过敏药物情况。

5.4检测顺序与时间安排肺功能测定（平静呼吸方式的除外）、诱导痰检测、支气管激发试验等可使eNO水平降低［23，40-42］，因此应先进行eNO检测。如因临床需要，须先行上述检查，则应等待至少1h后再进行eNO检测。6

操作方法及质量控制6.1FeNO50FeNO50检测的关键在于保持50mL/s的恒定呼气流量，以及尽可能排除鼻NO的影响。根据是否实时检测NO分为在线和离线两种方式，根据呼气方式和流量控制方式分为一口气法（主动控制流量）和多次呼吸法（被动控制流量）［23］。

6.1.1一口气法在线单次吸气-恒流呼气法（一口气法）为标准FeNO50检测方法，其结果可靠、可重复，适用于能够主动配合的≥4岁儿童。

6.1.1.1操作方法平静呼吸至少1min［23］，取坐位，经口通过NO过滤器吸入不含NO（<5ppb）空气至肺总量（totallungcapacity，TLC）位，立即以50mL/s（±10%）的恒定流量呼气，压力保持在5～20cmH2O（1cmH2O=0.098kPa）以确保软腭关闭，达到目标流量后继续呼气至形成稳定NO平台。<12岁儿童至少出现≥2s平台，且总呼气时间≥4s，一般为6s；≥12岁儿童至少出现≥3s平台，且总呼气时间≥6s，一般为10s［4，23，40］。设备自动完成NO测定和分析计算。建议至少测量2次，差异≤10%，否则需要增加测量次数，直至达标。2次测量间隔至少30s，放松TB。有研究表明，严格遵循上述检测流程和标准，部分电化学分析仪单次测量结果也能提供有价值数据［8，43］，考虑经济或其他限制因素，可采用单次测量作为替代方案，应在报告中注明设备类型与检测次数。目前国内部分设备为提高通过率，降低对流量和呼气时间的控制标准，导致结果不可重复，因此重复检测有助于提高结果的准确性［3，6］。

6.1.1.2质量控制经NO过滤器吸气，去除环境NO的影响。呼气时保持一定口腔压力，以关闭软腭，避免鼻腔NO污染。确保50mL/s恒定呼气流量，并达到足够的呼气时间，从而获得稳定的NO平台，在平台期采样，方能避免无效腔气体影响。吸气至TLC位后应立即呼气，不要屏气，呼气过程中避免漏气、换气等，如出现上述情况应立即终止并重新测试。

6.1.2多次呼吸法多次呼吸在线或离线检测的流量控制主要由仪器完成，对受检者配合要求低，适用于3～5岁不能配合完成一口气法的儿童，但需采集多次呼吸平台期的样本，其可重复性有限，与一口气法不可互换，报告中应注明采用“多次呼吸法、离线/在线、恒定流量”方法学。

6.1.2.1操作方法（1）在线检测：使用具有快速响应的NO分析仪，并配备呼气阻力调节装置。取坐位，含住咬口，咬口连接双向阀，吸气侧连接NO过滤器或无NO（<5ppb）空气储气袋，呼气侧连接呼气阻力调节装置和NO分析仪。受检者保持安静、缓慢、规则的TB，操作者通过调节呼气阻力，尽可能使每次呼气出现接近50mL/s（允许40～60mL/s）的有效区段。进入目标流量后，实时读取稳定段的NO值［23］。获取多次符合标准的呼气样本，取其平均值作为最终结果，同时记录NO浓度、流量和压力曲线，便于质量控制。（2）离线检测：使用具备动态流量限制或定值阻力的离线采样器，并配备NO检测专用气体采样袋（材质不与NO反应且对NO通透性低）。取坐位，含住咬口，经NO过滤器吸气或吸入无NO的空气，至TLC位后，经口对抗装置阻力缓慢呼气，使流量接近50mL/s（允许40～60mL/s）并维持1s以上，收集此后稳定段的气体至采样袋［23］。重复以上过程，直至采集足够气体样本用于后续分析。采集完成后立即密封，12h内完成NO检测。

6.1.2.2质量控制虽然是多次呼吸，仍需受检者配合稳定呼吸、适应阻力调节。保留适度呼气阻力并维持口腔正压（5～20cmH2O）有助软腭关闭、减少鼻源NO。样本收集应排除呼气初期的无效腔气体。

6.2TB法eNOTB法无流量控制，可用于3岁以下婴幼儿或无法主动配合者。但其检测出的eNO并非标准FeNO50，而是整个呼吸系统的综合eNO水平，尤其是上气道的nNO，导致结果变异度较大，其参考值和临床意义尚不明确。目前主要用于科研及临床特殊场景［4］，报告中应注明采用“TB、在线/离线、非流量控制”方法学。

6.2.1操作方法（1）在线检测：使用快速响应的NO分析仪，以便实时分析每一次呼吸的NO浓度。婴幼儿在安静、规则的TB（可为自然睡眠或清醒安静状态）下进行检测，佩戴覆盖口鼻的双腔面罩或仅覆盖口部的面罩。在口面罩部分开小孔接取样管至NO分析仪，或通过双向阀呼气侧的侧口取样，以实现吸气与呼气分离［23］。吸气侧连接NO吸附过滤器或无NO空气，在安静TB阶段连续记录NO，获取多次稳定呼吸用于分析。（2）离线检测：通过TB采样器收集呼出气样本，再用分析仪测定NO浓度，对NO分析仪响应时间无严格要求。采样器的吸气端连接NO过滤器或无NO空气，呼气端连接采样袋。将面罩与潮气采样器连接好，采用双腔面罩分别罩住婴幼儿口鼻，轻轻按压，确保贴合以减少漏气，整个过程保持平静呼吸30～60s，以采样袋半满以上为宜。气体采集完成后，立即密封采样袋，12h内连接分析仪完成检测与分析［23］。

6.2.2质量控制尽量减少鼻源NO的影响，建议使用口鼻分隔双腔面罩或仅口部面罩并封闭鼻孔；若使用普通口鼻面罩，须在报告中说明为混合呼出气。在线检测时尽量缩短取样管路，以减少无效腔的影响，必要时同步记录二氧化碳（carbondioxide，CO2）浓度和流量信号，便于识别无效腔［44］。

6.3nNO根据呼气方式可将nNO检测方法分为对抗阻力呼气（exhalationagainstresistance，ER）法、屏气（breath-hold，BH）法和TB法，其中ER和BH适用于≥5岁且能配合的儿童，优先推荐ER法；TB法适用于1～5岁或不能配合ER或BH者［7，29］。优选具备快速响应能力的化学发光分析仪，较为准确。目前临床使用较多的电化学分析仪不能显示实时曲线，以固定时间窗平均取值［7］。要求检查环境NO浓度应<20ppb，否则应在解读时估算性扣除［7］。

6.3.1ER或BH法取坐位，选型号合适的鼻塞式探头放入一侧鼻孔并接采样管，确保无漏气，对侧鼻孔处于开放状态。深吸至近TLC后，ER法要求受检者缓慢、持续经口对抗阻力呼气，以口腔正压（≥5cmH2O）促软腭关闭，可使用阻力器或哨笛等简易装置；而BH法要求受检者屏气并进行轻度Valsalva动作（声门闭合状态下做向外吹气的动作）以促软腭闭合。分析仪以0.30L/min（5mL/s）速度抽气采样［26］，化学发光分析仪实时显示NO浓度曲线，操作者判断曲线达到可接受平台，即平台内NO波动≤10%且稳定≥3s［7］，取其平均值作为本次nNO结果；目前临床使用最多的是电化学分析仪，但其缺点是无法实时显示NO浓度，采样时间一般10s以上［45］，获取采样时间窗内的平均nNO浓度。休息30s后再进行重复检测。同一侧鼻孔至少检测2次，双侧鼻孔均应检测，并获得可重复的结果。当一侧鼻孔2次nNO差异≤10%，则满足单侧可重复性，取较高值作为本侧nNO结果。对侧鼻孔也应达到同样的标准，并记录该侧nNO。对比两侧鼻孔nNO，差异应≤10%，则满足双侧可重复性，以两侧中的高值作为最终nNO浓度（ppb），将最终浓度换算为nL/min表示，报告中注明分析仪类型、采样流量和呼气方式［7，28］。若采用电化学分析仪，可能受限于测量次数而导致不可重复，需谨慎评估结果可靠性。

6.3.2TB法取坐位或自然安静睡眠，选合适鼻塞式探头放入一侧鼻孔、对侧开放，在不发声、不哭闹的条件下，经鼻安静、规则TB，记录≥30s的连续曲线。人工选取3～5个最高且可重复的TB的NO峰值，其峰间变异≤20%或≤10ppb（取较大者），取NO峰值平均值作为本次nNO结果。间隔约30s后在同侧重复一次，要求同侧差异≤20%，并取其中较高值作为该侧最终nNO。按同样方法检测对侧鼻孔，亦应获得2次可重复结果。两侧nNO差异应≤30%，最终取两侧中的较高值作为本次nNO浓度。与ER法相同，最终换算为nL/min，并在结果中注明分析仪类型、采样流量及呼气方式［7，28］。

6.3.3质量控制（1）去除环境NO影响，在检测前测定环境NO浓度，若>20ppb，建议在结果中估算并扣除。（2）为避免受检鼻孔漏气，应选择合适型号的鼻塞式探头，清理鼻腔分泌物，保持鼻腔的通畅性。5岁以上儿童可主动配合保持鼻塞式探头堵住被检鼻孔，5岁以下儿童则由家长或操作者托住头部并帮助固定鼻塞式探头与管路，防止漏气和脱落。（3）确保单次测试的稳定性，可接受的NO平台（≤10%）或稳定的峰值（≤20%或10ppb）；确保单侧鼻孔多次nNO和双侧nNO的可重复性，质量分级见表2。（4）采用电化学分析仪时，一方面无实时NO曲线，结果通常来自固定时间窗的平均值；另一方面需要根据采样速率确定采样时间，一般应≥10s。由于该方法的重复测定受限，故质量控制等级相对低，见表2。（5）BH法中屏气同时需做Valsalva动作，否则可能会因软腭未闭合导致结果偏低或差异较大。有条件时推荐用对侧鼻末端CO2浓度≈0%作为软腭闭合的佐证。（6）TB法中安静、稳定、规律的TB至关重要，不得活动、发声或哭闹等。其结果不同于ER和BH法，结果的可靠性差。

6.4FeNO200和CaNO

6.4.1操作方法化学发光分析仪具有快速响应能力，能实时显示NO浓度；电化学分析仪也常用于测量，但无法实时显示NO浓度，且其重复检测能力有限，计算CaNO的可靠性需进一步验证。操作方法同FeNO50的一口气在线检测，而呼气流量由所选用的计算模型决定。建议选择50mL/s以外的3个不同流量，在200mL/s流量下测得的结果即为FeNO200，每个流量应测量2次，并确保每次测量均能获得稳定的NO平台。最后，取2次测量的平均值作为该流量的eNO，并用于CaNO的计算。非线性模型采用低（≤20mL/s）、中（100mL/s）和高（350～400mL/s）3个流量，线性模型采用最低（100mL/s）和最高（350～400mL/s）之间的3个流量进行测定［6］。对于不能配合最高流量呼气的儿童，可以接受250mL/s作为最高流量，但需要先检测FeNO50，要求用250mL/s作为最高流量的非线性模型估算出的FeNO50与实际测得的FeNO50差异<5ppb。简化版线性模型则仅需要50mL/s和200mL/s两个流量，该方法尚未被公认，仍需进一步验证其有效性［29］。

6.4.2质量控制CaNO的计算准确性依赖于不同流量下测得的NO浓度的准确性，以及所使用计算模型的可靠性。建议使用3个递增的流量计算CaNO。线性模型是高呼气流量区域做泰勒近似而得到的，因此所选流量应均≥100mL/s［6］。7、正常值和切点值eNO正常值来源于符合健康标准的儿童群体，基于其数值分布建立参考区间或正常界限，并考虑年龄、身高、性别、种族、地理区域等生理因素的影响。eNO切点值是基于特定疾病诊断或治疗相关结局（如嗜酸性气道炎症可能性、预测吸入性糖皮质激素治疗反应等）而确定的界限值，强调临床决策阈值。因此，正常值反映健康状态下的生理分布，而切点值用于支持疾病诊断或临床决策，不可相互替代。

7.1FeNO502024年发布了我国来自20个中心的5949名6～18岁非过敏、健康儿童一口气法FeNO50的正常值，结果显示FeNO50的几何均值为14.1ppb，正常上限（upperlimitofnormal，ULN）为38.1ppb，6～11岁儿童FeNO与年龄和身高有关，12～18岁儿童FeNO值与性别、身高和地区有关［9］。受纳入人群基线特征、检测设备及检测方法差异限制，不推荐将该参考值直接外推至过敏体质、喘息患儿及婴幼儿群体。建议进一步开展研究，确定有临床价值的切点值，从而确立正常与异常及异常程度的判断标准。切点值更有助于临床决策，2011年美国胸科协会（AmericanThoracicSociety，ATS）指南［3］推荐了FeNO50鉴别2型气道炎症的切点值（表3），一直沿用至今［2，4，29］。其中低水平提示2型气道炎症可能性较小，中水平属于灰区，需结合临床谨慎解读，高水平提示2型气道炎症可能性较大。FeNO50在一定程度上受NO分析仪影响，不同设备之间的结果不可互换，ULN和切点值也不能完全跨设备通用［46］。TB法eNO的正常值虽有相关研究，但检测方法的局限性导致结果差异较大，尚不能形成统一结论。Daniel等［47］对133名2～7岁健康儿童进行TB法在线和离线FeNO检测，在线法均值为3.9ppb，ULN为8.2ppb，离线法均值为3.0ppb，ULN为7.1ppb。vanderHeijden等［48］对51名1～5岁健康儿童进行TB法离线FeNO检测，均值为7.1ppb，ULN为22.6ppb。目前尚无可推荐的儿童TB法eNO正常值，不建议直接采用一口气法FeNO50的正常值，上述研究的正常值也仅具备科研参考价值，不推荐临床常规用于正常值判定及炎症分级。

7.2nNO2023年发布了我国来自12个中心的2580名6～18岁非过敏、健康儿童的nNO正常值［10］，该研究采用BH法、10mL/s（即0.6L/min）抽气采样，使用电化学分析仪测定nNO；结果显示儿童nNO均值为454.5ppb，正常下限（lowerlimitofnormal，LLN）为134.5ppb（80.7nL/min），ULN为844.0ppb（506.4nL/min）。6～11岁儿童nNO与年龄呈正相关，12～18岁儿童nNO与年龄呈负相关，且男童高于女童，并观察到地区差异。目前仅推荐nNO减低用于PCD筛查，ER或BH法的切点值为77nL/min［7，28，39，49］，TB法中1～2岁儿童的切点值为30nL/min，>2岁儿童的切点值为44nL/min［7］。

7.3FeNO200和CaNOCaNO的正常值与计算模型密切相关，现有研究结果差异较大，尚未形成统一结论。Puckett等［38］检测了21名6～17岁健康儿童，使用线性模型计算CaNO值，最高值为2.23ppb。Hgman等［50］纳入了83名<20岁健康儿童和青少年，使用线性或非线性模型计算，ULN为3.59ppb。我国658名6～18岁儿童的FeNO200和CaNO水平研究测得FeNO200均值为6.9ppb，ULN为15.0ppb，使用简化版线性模型计算CaNO均值为3.0ppb，ULN为11.2ppb［9］。临床意义8.1反映2型炎症疾病2型炎症已被认为是涉及皮肤、呼吸、消化等多种系统疾病的共同免疫病理机制。患者可同时罹患多种2型炎症性疾病，其中呼吸系统疾病以慢性鼻窦炎、过敏性鼻炎、哮喘最为常见。各类致病因子刺激2型固有淋巴样细胞（innatelymphoidcellstype2，ILC2）、2型辅助T细胞（Thelper2cell，Th2）分泌IL-4、IL-5和IL-13等2型细胞因子，最终上调iNOS，产生大量NO，导致FeNO浓度升高［51］。

8.1.1辅助儿童哮喘诊断对于有典型哮喘症状的患者，若FeNO50为高水平，支持2型哮喘诊断［37］。但FeNO50增高并非哮喘特有，过敏性疾病（过敏性鼻炎）或嗜酸性气道疾病（嗜酸性粒细胞支气管炎、嗜酸性肉芽肿性多血管炎等）也可增高［3，52-53］。另外，FeNO50正常也不能排除哮喘，需要进一步结合肺功能检查明确是否存在可变呼气气流受限［37］。

8.1.2协助儿童哮喘管理FeNO50增高一方面提示治疗效果欠佳，另