生物分离工程复习题库(1126)教案资料

生物分离工程复习题库(20151126)精品资料精品资料仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢PAGE仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢PAGE18精品资料仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢PAGE生物分离工程复习题一、名词解释凝聚:在电解质作用下,破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态,使胶体粒子聚集的过程。分配系数:在一定温度、压力下,溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里,达到平衡后,它在两相的浓度为一常数叫分配系数。絮凝:指在某些高分子絮凝剂存在下,在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程过滤:是在某一支撑物上放过滤介质,注入含固体颗粒的溶液,使液体通过,固体颗粒留下,是固液分离的常用方法之一。萃取过程:利用在两个互不相溶的液相中各种组分(包括目的产物)溶解度的不同,从而达到分离的目的吸附:是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力,使其富集在吸附剂表面的过程。反渗析:当外加压力大于渗透压时,水将从溶液一侧向纯水一侧移动,此种渗透称之为反渗透。离心沉降:利用悬浮液或乳浊液中密度不同的组分在离心力场中迅速沉降分层,实现固液分离离心过滤:使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力,作用在过滤介质上,使液体通过过滤介质成为滤液,而固体颗粒被截留在过滤介质表面,从而实现固液分离,是离心与过滤单元操作的集成,分离效率更高离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂,将溶液中的待分离组分,依据其电荷差异,依靠库仑力吸附在树脂上,然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来,达到分离的目的。固相析出技术:利用沉析剂(precipitator)使所需提取的生化物质或杂质在溶液中的溶解度降低而形成无定形固体沉淀的过程。助滤剂:助滤剂是一种具有特殊性能的细粉或纤维,它能使某些难以过滤的物料变得容易过滤色谱技术:是一组相关分离方法的总称,色谱柱的一般结构含有固定相(多孔介质)和流动相,根据物质在两相间的分配行为不同(由于亲和力差异),经过多次分配(吸附-解吸-吸附-解吸…),达到分离的目的。有机溶剂沉淀:在含有溶质的水溶液中加入一定量亲水的有机溶剂,降低溶质的溶解度,使其沉淀析出。等电点沉淀:调节体系pH值,使两性电解质的溶解度下降,析出的操作称为等电点沉淀。膜分离:利用膜的选择性（孔径大小）,以膜的两侧存在的能量差作为推动力,由于溶液中各组分透过膜的迁移率不同而实现分离的一种技术。化学渗透破壁法：某些化学试剂,如有机溶剂、变性剂、表面活性剂、抗生素、金属螯合剂等,可以改变细胞壁或细胞膜的通透性,从而使胞内物质有选择地渗透出来。超临界流体:超临界流体是状态超过气液共存时的最高压力和最高温度下物质特有的点——临界点后的流体。反渗透:在只有溶剂能通过的渗透膜的两侧,形成大于渗透压的压力差,就可以使溶剂发生倒流,使溶液达到浓缩的效果,这种操作成为反渗透。树脂工作交换容量:单位质量干树脂或单位体积湿树脂所能吸附的一价离子的毫摩尔数称为树脂交换容量,在充填柱上操作达到漏出点时,树脂所吸附的量称为树脂工作交换容量。色谱阻滞因数:溶质在色谱柱(纸、板)中的移动速率与流动相移动速率之比称为阻滞因数,以Rf表示。膜的浓差极化:是指但溶剂透过膜,而溶质留在膜上,因而使膜面浓度增大,并高于主体中浓度。超滤：凡是能截留相对分子量在500以上的高分子膜分离过程称为超滤,它主要是用于从溶剂或小分子溶质中将大分子筛分出来。生物分离技术:是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物(发酵液、培养液)及其生物化学产品中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。物理萃取：即溶质根据相似相溶的原理在两相间达到分配平衡,萃取剂与溶质之间不发生化学反应。化学萃取:则利用脂溶性萃取剂与溶质之间的化学反应生成脂溶性复合分子实现溶质向有机相的分配。盐析：是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异,向溶液中加入一定量的中性盐,使原溶解的物质沉淀析出的分离技术。有机聚合物沉析:利用生物分子与某些有机聚合物形成沉淀而析出的分离技术称为有机聚合物沉析。离子交换平衡:当正反应、逆反应速率相等时,溶液中各种离子的浓度不再变化而达平衡状态,即称为离子交换平衡。功能基团:离子交换树脂中与载体以共价键联结的不能移动的活性基团,又称功能基团平衡离子:离子交换树脂中与功能基团以离子键联结的可移动的平衡离子,亦称活性离子。树脂的再生:就是让使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程,树脂的再生反应是交换吸附的逆反应。层析分离:是一种物理的分离方法,利用多组分混合物中各组分物理化学性质的差别,使各组分以不同的程度分布在两个相中。流动相:在层析过程中,推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或租临界体等,都称为流动相。正相色谱:是指固定相的极性高于流动相的极性,因此,在这种层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度快,先从柱中流出来。反相色谱:是指固定相的极性低于流动相的极性,在这种层析过程中,极性大的分子比极性小的分子移动的速度快而先从柱中流出。吸附层析:是以吸附剂为固定相,根据待分离物与吸附剂之间吸附力不同而达到分离目的的一种层析技术。分配层析:是根据在一个有两相同时存在的溶剂系统中,不同物质的分配系数不同而达到分离目的的一种层析技术。凝胶过滤:层析是以具有网状结构的凝胶颗粒作为固定相,根据物质的分子大小进行分离的一种层析技术。离子交换层析:是以离子交换剂为固定相,根据物质的带电性质不同而进行分离的一种层析技术。高效液相色谱：是指选用颗粒极细的高效耐压新型固定相,借助高压泵来输送流动相,并配有实时在线检测器,实现色谱分离过程全部自动化的液相色谱法。亲和层析:是利用生物活性物质之间的专一亲和吸附作用而进行的层析方法。是近年来发展的纯化酶和其他高分子的一种特殊的层析技术。疏水层析：是利用表面偶联弱疏水性基团(疏水性配基)的疏水性吸附剂为固定相,根据蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差别进行分离纯化的层析技术。介电常数:表示介质对带有相反电荷的微粒之间的静电引力与真空对比减弱的倍数。过滤介质:是指能使固一液混合料液得以分离的某一介面,通常指滤布或膜过滤中所用的膜。等电点：是两性物质在其质点的净电荷为零时介质的pH值,溶质净电荷为零,分子间排斥电位降低,吸引力增大,能相互聚集起来,沉淀析出,此时溶质的溶解度最低。有机酸沉析:含氮有机酸(如苦味酸和鞣酸等)能够与有机分子的碱性功能团形成复合物而沉淀析出。选择变性沉析：是利用蛋白质、酶与核酸等生物大分子对某些物理或化学因素敏感性不同,而有选择地使之变性沉析,以达到目的物与杂蛋白分离的技术,称为选择变性沉析。二、选择1.HPLC是哪种色谱的简称(C)。A.离子交换色谱B.气相色谱C.高效液相色谱D.凝胶色谱2.针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是（C）。A.凝胶过滤B.离子交换层析C.亲和层析D.纸层析3.盐析法沉淀蛋白质的原理是(B)A.降低蛋白质溶液的介电常数B.中和电荷,破坏水膜C.与蛋白质结合成不溶性蛋白D.调节蛋白质溶液pH到等电点4.从组织中提取酶时,最理想的结果是(C)A.蛋白产量最高B.酶活力单位数值很大C.比活力最高D.Km最小5.适合于亲脂性物质的分离的吸附剂是(B)。A.活性炭B.氧化铝C.硅胶D.磷酸钙6.下列哪项酶的特性对利用酶作为亲和层析固定相的分析工具是必需的？（B）A.该酶的活力高B..对底物有高度特异亲合性C.酶能被抑制剂抑制D.最适温度高E.酶具有多个亚基7.用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是(C)A.离子交换色谱B.亲和色谱C.凝胶过滤色谱D.反相色谱45.适合小量细胞破碎的方法是（B）高压匀浆法B.超声破碎法C.高速珠磨法D.高压挤压法8.盐析法沉淀蛋白质的原理是(B)A.降低蛋白质溶液的介电常数B.中和电荷,破坏水膜C.与蛋白质结合成不溶性蛋白D.调节蛋白质溶液pH到等电点9.蛋白质分子量的测定可采用(C)方法。A.离子交换层析B.亲和层析C.凝胶层析D.聚酰胺层析10．基因工程药物分离纯化过程中,细胞收集常采用的方法(C)A.盐析B.超声波C.膜过滤D.层析11.氨基酸的结晶纯化是根据氨基酸的（A）性质。A.溶解度和等电点B.分子量C.酸碱性D.生产方式12.离子交换剂不适用于提取(D)物质。A.抗生素B.氨基酸C.有机酸D.蛋白质13．人血清清蛋白的等电点为4.64,在PH为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电,清蛋白质分子向(A)A:正极移动;B:负极移动;C:不移动;D:不确定。14.蛋白质具有两性性质主要原因是(B)A:蛋白质分子有一个羧基和一个氨基;B:蛋白质分子有多个羧基和氨基;C:蛋白质分子有苯环和羟基;D:以上都对15.使蛋白质盐析可加入试剂(D)A:氯化钠;B:硫酸;C:硝酸汞;D:硫酸铵16.凝胶色谱分离的依据是（B）。A.固定相对各物质的吸附力不同B、各物质分子大小不同C.各物质在流动相和固定相中的分配系数不同D.各物质与专一分子的亲和力不同17.非对称膜的支撑层（C）。A.与分离层材料不同B、影响膜的分离性能C.只起支撑作用D.与分离层孔径相同18.下列哪一项是强酸性阳离子交换树脂的活性交换基团（A)A磺酸基团(-SO3H)B羧基-COOHC酚羟基C6H5OHD氧乙酸基-OCH2COOH19．依离子价或水化半径不同,离子交换树脂对不同离子亲和能力不同。树脂对下列离子亲和力排列顺序正确的有（A）。A.Fe3+﹥Ca2+﹥Na+B、Na+﹥Ca2+﹥Fe3+C.Na+﹥Rb+﹥Cs+D.Rb+﹥Cs+﹥Na+20.乳化液膜的制备中强烈搅拌（C）。A.是为了让浓缩分离充分B、应用在被萃取相与W/O的混合中C.使内相的尺寸变小D.应用在膜相与萃取相的乳化中21.结晶过程中,溶质过饱和度大小（A）。A.不仅会影响晶核的形成速度,而且会影响晶体的长大速度B.只会影响晶核的形成速度,但不会影响晶体的长大速度C.不会影响晶核的形成速度,但会影响晶体的长大速度D.不会影响晶核的形成速度,而且不会影响晶体的长大速度22.如果要将复杂原料中分子量大于5000的物质与5000分子量以下的物质分开选用（D）。A.SephadexG-200B.SephadexG-150C.SephadexG-100D.SephadexG-5023．在蛋白质初步提取的过程中,不能使用的方法（C）。A.双水相萃取B.超临界流体萃取C.有机溶剂萃取D.反胶团萃取24．在液膜分离的操作过程中,（B）主要起到稳定液膜的作用。A.载体B.表面活性剂C.增强剂D.膜溶剂25．离子交换法是应用离子交换剂作为吸附剂,通过（A）将溶液中带相反电荷的物质吸附在离子交换剂上。A.静电作用B.疏水作用C.氢键作用D.范德华力26.真空转鼓过滤机工作一个循环经过（A）。A.过滤区、缓冲区、再生区、卸渣区B、缓冲区、过滤区、再生区、卸渣区C.过滤区、缓冲区、卸渣区、再生区D.过滤区、再生区、缓冲区、卸渣区27.丝状（团状）真菌适合采用（A）破碎。A.珠磨法B.高压匀浆法C.A与B联合D.A与B均不行28.用来提取产物的溶剂称（C）。A.料液B.萃取液C.萃取剂D.萃余液。29.阴离子交换剂（C）。A.可交换的为阴、阳离子B、可交换的为蛋白质C.可交换的为阴离子D、可交换的为阳离子30.分配层析中的载体(C)。A.对分离有影响B.是固定相C.能吸附溶剂构成固定相D.是流动相31.凝胶色谱分离的依据是（B）。A.固定相对各物质的吸附力不同B、各物质分子大小不同C.各物质在流动相和固定相中的分配系数不同D.各物质与专一分子的亲和力不同32.洗脱体积是（C）。A.凝胶颗粒之间空隙的总体积B、溶质进入凝胶内部的体积C.与该溶质保留时间相对应的流动相体积D.溶质从柱中流出时所用的流动相体积33．工业上强酸型和强碱型离子交换树脂在使用时为了减少酸碱用量且避免设备腐蚀,一般先将其转变为（B）。A.钠型和磺酸型B、钠型和氯型C.铵型和磺酸型D.铵型和氯型34.吸附色谱分离的依据是（A）。A.固定相对各物质的吸附力不同B、各物质分子大小不同C.各物质在流动相和固定相的分配系数不同D.各物质与专一分子的亲和力不同35．依离子价或水化半径不同,离子交换树脂对不同离子亲和能力不同。树脂对下列离子亲和力排列顺序正确的有（A）。A.Fe3+>Ca2+>Na+B、Na+>Ca2+>Fe3+C.硫酸根>柠檬酸根>硝酸根D.硝酸根>硫酸根>柠檬酸根36.乳化液膜的制备中强烈搅拌（B）。A.是为了让浓缩分离充分B、应用在被萃取相与W/O的混合中C.使内水相的尺寸变小D.应用在膜相与反萃取相的乳化中37.下面哪一种是根据酶分子专一性结合的纯化方法（A）。A.亲和层析B.凝胶层析C.离子交换层析D.盐析38.纯化酶时,酶纯度的主要指标是:(D)A.蛋白质浓度

B.酶量C.酶的总活力

D.酶的比活力39.盐析法纯化酶类是根据(B)进行纯化。A.根据酶分子电荷性质的纯化方法B.调节酶溶解度的方法C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法D.根据酶分子专一性结合的纯化方法40.分子筛层析纯化酶是根据(C)进行纯化。A.根据酶分子电荷性质的纯化方法B.调节酶溶解度的方法C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法D.根据酶分子专一性结合的纯化方法41.以下哪项不是在重力场中,颗粒在静止的流体中降落时受到的力(B)A.重力B.压力C.浮力D.阻力42.以下哪项不是颗粒在离心力场中受到的力(C)A.离心力B.向心力C.重力D.阻力43.颗粒与流体的密度差越小,颗粒的沉降速度(A)A.越小B.越大C.不变D.无法确定44.工业上常用的过滤介质不包括(D)A.织物介质B.堆积介质C.多孔固体介质D.真空介质45.下列物质属于絮凝剂的有(A)。A.明矾B.石灰C.聚丙烯类D.硫酸亚铁46.关于用氢键形成来判断各类溶剂互溶规律,下列（A）项是正确的叙述。A.氢键形成是能量释放的过程,若两种溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大,则有利于互溶。B.氢键形成是能量吸收的过程,若两种溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大,则有利于互溶。C.氢键形成是能量释放的过程,若两种溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大,则不利于互溶。D.氢键形成是能量吸收的过程,若两种溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大,则不利于互溶。47.关于精馏回流比控制,对于一定的分离任务,以下正确的两项是(A)A.若回流比变大,则精馏能耗增大;B.若回流比变大,则精馏能耗减小;C、若回流比变大,则所需理论塔板数变大;D、若回流比变小,则所需理论塔板数变小。48.结晶过程中,溶质过饱和度大小(A)A.不仅会影响晶核的形成速度,而且会影响晶体的长大速度B.只会影响晶核的形成速度,但不会影响晶体的长大速度C.不会影响晶核的形成速度,但会影响晶体的长大速度D.不会影响晶核的形成速度,而且不会影响晶体的长大速度49.下列哪项不是蛋白质的浓度测定的方法（D）。A.凯氏定氮法B.双缩脲法C.福林-酚法D.核磁共振50.供生产生物药物的生物资源不包括（D）A.动物B植物C.微生物D.矿物质51.发酵液的预处理方法不包括(C)A.加热B絮凝C.离心D.调pH52.其他条件均相同时,优先选用那种固液分离手段(B)A.离心分离B过滤C.沉降D.超滤53.那种细胞破碎方法适用工业生产(A)A.高压匀浆B超声波破碎C.渗透压冲击法D.酶解法54.高压匀浆法破碎细胞,不适用于(D)A.酵母菌B大肠杆菌C.巨大芽孢杆菌D.青霉55.关于萃取下列说法正确的是(C)A.酸性物质在酸性条件下萃取B碱性物质在碱性条件下萃取C.两性电解质在等电点时进行提取D.两性电解质偏离等电点时进行提取56.液一液萃取时常发生乳化作用,如何避免(D)A.剧烈搅拌B低温C.静止D.加热57.在葡聚糖与聚乙二醇形成的双水相体系中,目标蛋白质存在于(A)A.上相B下相C.葡聚糖相D.以上都有可能58.当两种高聚物水溶液相互混合时,二者之间的相互作用不可能产生(D)A.互不相溶,形成两个水相B两种高聚物都分配于一相,另一相几乎全部为溶剂水C.完全互溶,形成均相的高聚物水溶液D.形成沉淀59．超临界流体萃取中,如何降低溶质的溶解度达到分离的目的（C）A.降温B升高压力C.升温D.加入夹带剂60.下列关于固相析出说法正确的是(B)A.沉淀和晶体会同时生成B析出速度慢产生的是结晶C.和析出速度无关D.析出速度慢产生的是沉淀61.盐析操作中,硫酸铵在什么样的情况下不能使用(B)A.酸性条件B碱性条件C.中性条件D.和溶液酸碱度无关62.有机溶剂沉淀法中可使用的有机溶剂为(D)A.乙酸乙酯B正丁醇C.苯D.丙酮63.有机溶剂为什么能够沉淀蛋白质(B)A.介电常数大B介电常数小C.中和电荷D.与蛋白质相互反应64.蛋白质溶液进行有机溶剂沉淀,蛋白质的浓度在(A)范围内适合。A.0.5％～2％B1％～3％C.2％～4％D.3％～5％65.若两性物质结合了较多阳离子,则等电点pH会(A)A.升高B降低C.不变D.以上均有可能66.若两性物质结合了较多阴离子,则等电点pH会(B)A.升高B降低C.不变D.以上均有可能67.生物活性物质与金属离子形成难溶性的复合物沉析,然后适用(C)去除金属离子。A.SDSBCTABC.EDTAD.CPC68.那一种膜孔径最小(C)A.微滤B超滤C.反渗透D.纳米过滤69.超滤技术常被用作(C)A.小分子物质的脱盐和浓缩B小分子物质的分级分离C.小分子物质的纯化D.固液分离70.微孔膜过滤不能用来(D)A.酶活力测定BmRNA的测定及纯化C.蛋白质含量测定D.分离离子与小分子71.吸附剂和吸附质之间作用力是通过(A)产生的吸附称为物理吸附。A.范德华力B库伦力C.静电引力D.相互结合72.洗脱吸附剂上附着的溶质,洗脱液的极性强弱关系为(A)A.石油醚﹤环己烷﹤四氯化碳B二氯甲烷﹤乙醚﹤四氯化碳C.乙酸乙酯﹤丙酮﹤氯仿D.吡啶﹤甲醇﹤水73.那一种活性碳的吸附容量最小(B)A.粉末活性碳B锦纶活性碳C.颗粒活性碳74.酚型离子交换树脂则应在(B)的溶液中才能进行反应A.pH＞7BpH＞9C.pH﹤9D.pH﹤775.羧酸型离子交换树脂必须在(C)的溶液中才有交换能力A.pH＞5BpH﹤7C.pH＞7D.pH﹤576.离子交换树脂适用(B)进行溶胀A.水B乙醇C.氢氧化钠D.盐酸77.下列关于离子交换层析洗脱说法错误的是(D)A.对强酸性树脂一般选择氨水、甲醇及甲醇缓冲液等作洗脱剂B弱酸性树脂用稀硫酸、盐酸等作洗脱剂C.强碱性树脂用盐酸-甲醇、醋酸等作洗脱剂D.若被交换的物质用酸、碱洗不下来,应使用更强的酸、碱78．阳树脂在软化中易受Fe3+污染,可通过（C）清除铁化合物。A.水B乙醇C.加抑制剂的高浓度盐酸D.高浓度盐溶液79.下列关于正相色谱与反相色谱说法正确的是(C)A.正相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性B正相色谱层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度慢C.反相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性D.反相色谱层析过程中,极性大的分子比极性小的分子移动的速度慢80．一般来说,可使用正相色谱分离（B）A.酚B带电离子C.醇D.有机酸81.分子筛层析指的是(C)A.吸附层析B分配层析C.凝胶过滤D.亲和层析82.常用的紫外线波长有两种(B)A.256nm和365nmB254nm和365nmC.254nm和367nmD.256nm和367nm83.以氧化铝和硅胶为介质进行层析,由于对极性稍大的成分其Rf(B)A.大B小C.中等D.不一定84.对于吸附的强弱描述错误的是(A)A.吸附现象与两相界面张力的降低成反比B某物质自溶液中被吸附程度与其在溶液中的溶解度成正比C.极性吸附剂容易吸附极性物质D.非极性吸附剂容易吸附非极性物质85.进行梯度洗脱,若用50g吸附剂,一般每份洗脱液量常为(C)A.20rnLB100rnLC.50rnLD.90rnL86.离子交换用的层析柱直径和柱长比一般为(B)之间A.1:10-1:20B1:10-1:50C.1:10-1:30D.1:20-1:5087．离子交换层析的上样时,上样量一般为柱床体积的（C）为宜。A.2％-5％B1％-2％C.1％-5％D.3％-7％88.通过改变pH值从而使与离子交换剂结合的各个组分被洗脱下来,可使用(A)A.阳离子交换剂一般是pH值从低到高洗脱B阳离子交换剂一般是pH值从高到低洗脱C.阴离子交换剂一般是pH值从低到高D.以上都不对89.那一种凝胶的孔径最小(A)A.SephadexG-25BSephadexG-50C.SephadexG-100D.SephadexG-20090.那一种凝胶的吸水量最大(D)A.SephadexG-25BSephadexG-50C.SephadexG-100D.SephadexG-20091.葡聚糖凝胶可使用那种溶剂溶胀(C)A.甲醇B乙醇C.缓冲液D.乙酸乙酯92.疏水亲和吸附层析通常在(D)的条件下进行A.酸性B碱性C.中D.高浓度盐溶液93.当硅胶吸水量在(B)以上时,就失去其吸附作用A.13%B17%C.10%D.15%94.气相色谱的载气不能用（C）A.氢气B氦气C.氧气D.氮气95.关于电泳分离中迁移率描述正确的是(A)A.带电分子所带净电荷成正比B分子的大小成正比C.缓冲液的黏度成正比D.以上都不对96.在什么情况下得到粗大而有规则的晶体(A)A.晶体生长速度大大超过晶核生成速度B晶体生长速度大大低于过晶核生成速度C.晶体生长速度等于晶核生成速度D.以上都不对97.恒速干燥阶段与降速干燥阶段,那一阶段先发生(A)A.恒速干燥阶段B降速干燥阶段C.同时发生D.只有一种会发生98.珠磨机破碎细胞,适用于(D)A.酵母菌B大肠杆菌C.巨大芽孢杆菌D.青霉99.为加快过滤效果通常使用(C)A.电解质B高分子聚合物C.惰性助滤剂D.活性助滤剂100.不能用于固液分离的手段为(C)A.离心B过滤C.超滤D.双水相萃取101.最常用的干燥方法有(D)A.常压干燥B.减压干燥C.喷雾干燥D.以上都是102.下列哪个不属于高度纯化：(B)A.层析B.吸附法C.亲和层析D.凝胶层析103.酶提取液中,除所需酶外,还含有大量的杂蛋白、多糖、脂类和核酸等,为了进一步纯化,可用(E)方法除去杂质。A.调pH值和加热沉淀法B、蛋白质表面变性法C.降解或沉淀核酸法D.利用结合底物保护法除去杂蛋白E、以上都可以104.物理萃取即溶质根据（B）的原理进行分离的A.吸附B.相似相溶C分子筛D亲和105.纳米过滤的滤膜孔径(D)A0.02～10µmB0.001～0.02µmC<2nmD<1nm106.适合小量细胞破碎的方法是(B)A.高压匀浆法B.超声破碎法C.高速珠磨法D.高压挤压法107.人血清清蛋白的等电点为4.64,在PH为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电,清蛋白质分子向(A)A:正极移动;B:负极移动;C:不移动;D:不确定。108．单宁沉析法制备菠萝蛋白酶实验中,加入1%的单宁于鲜菠萝汁中产生沉淀,属于(D)沉析原理。A盐析B有机溶剂沉析C等电点沉析D有机酸沉析109.关于疏水柱层析的操作错误(D)A疏水层析柱装柱完毕后,通常要用含有高盐浓度的缓冲液进行平衡B疏水层析是利用蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差别进行分离纯化的层析技术C洗脱后的层析柱再生处理,可用8mol/L尿素溶液或含8mol/L尿素的缓冲溶液洗涤,然后用平衡缓冲液平衡D疏水柱层析分辨率很高、流速慢、加样量小110.结晶法对溶剂选择的原则是(C)A.对有效成分溶解度大,对杂质溶解度小B.对有效成分溶解度小,对杂质溶解度大C.对有效成分热时溶解度大冷时溶解度小,对杂质冷热都溶或都不溶D.对有效成分冷热时都溶,对杂质则不溶E、对杂质热时溶解度大,冷时溶解度小111.适用于分离糖、苷等的SephadexG的分离原理是（C）A.吸附B.分配比C.分子大小D.离子交换E、水溶性大小112.关于分配柱层析的基本操作错误(D)。A装柱分干法和湿法两种B分配柱层析法使用两种溶剂,事先必须先使这两个相互相饱和C用硅藻土为载体,需分批小量地倒入柱中,用一端是平盘的棒把硅藻压紧压平D分配柱层析适用于分离极性比较小、在有机溶剂中溶解度大的成分,或极性很相似的成分。113.在高效液相色谱中,下列哪种检测器不适合于在梯度洗脱时使用.(D)A.紫外检测器B.荧光检测器C.蒸发光散射检测器D.示差折光检测器114．网格高聚物吸附剂吸附的弱酸性物质,一般用下列哪种溶液洗脱。（D）A.水B.高盐C.低pHD.高pH115.下列哪项不属于发酵液的预处理:(D)A.加热

B.调pHC.絮凝和凝聚D.层析116.下列哪个不属于初步纯化:(C)A.沉淀法B.吸附法C.离子交换层析D.萃取法117.颗粒与流体的密度差越小,颗粒的沉降速度(A)A.越小B.越大C.不变D.无法确定118.盐析法沉淀蛋白质的原理是(B)A.降低蛋白质溶液的介电常数B.中和电荷,破坏水膜C.与蛋白质结合成不溶性蛋白D.调节蛋白质溶液pH到等电点119.高效液相色谱仪的种类很多,但是无论何种高效液相色谱仪,基本上由(D)组成。A高压输液系统、进样系统、分离系统、过滤系统、记录系统或色谱工作站等五大部分B进样系统、分离系统、检测系统、记录系统或色谱工作站四大部分C高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统四大部分D高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统或色谱工作站等五大部分120.影响电泳分离的主要因素(B)A光照B待分离生物大分子的性质C湿度D电泳时间121.超滤膜通常不以其孔径大小作为指标,而以截留分子量作为指标。所谓"分子量截留值"是指阻留率达(B)的最小被截留物质的分子量。A80%以上B90%以上C70%以上D95%以上122．在凝胶过滤(分离范围是5000~400000)中,下列哪种蛋白质最先被洗脱下来(B)A.细胞色素C(13370)B.肌球蛋白(400000)C.过氧化氢酶(247500)D.血清清蛋白(68500)E.肌红蛋白(16900)123.“类似物容易吸附类似物"的原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质（B）A.极性溶剂B.非极性溶剂C.水D.溶剂124.能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是(C)A.过滤B.萃取C.离子交换D.蒸馏125.从四环素发酵液中去除铁离子,可用(B)A.草酸酸化B.加黄血盐C.加硫酸锌D.氨水碱化126.当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时,蛋白质溶解度(C)A.增大B、减小C、先增大,后减小D、先减小,后增大127．关于大孔树脂洗脱条件的说法,错误的是：（A）A.最常用的是以高级醇、酮或其水溶液解吸。B.对弱酸性物质可用碱来解吸。C.对弱碱性物质可用酸来解吸。D.如吸附系在高浓度盐类溶液中进行时,则常常仅用水洗就能解吸下来。128．为了进一步检查凝胶柱的质量,通常用一种大分子的有色物质溶液过柱,常见的检查物质为蓝色葡聚糖,下面不属于它的作用的是（C）A.观察柱床有无沟流B、观察色带是否平整C.测量流速D.测量层析柱的外水体积129．亲和层析的洗脱过程中,在流动相中减去配基的洗脱方法称作（D）A.阴性洗脱B.剧烈洗脱C.正洗脱D.负洗脱130．下列细胞破碎的方法中,哪个方法属于非机械破碎法(A)A.化学法B.高压匀浆C.超声波破碎D.高速珠磨131.下列哪一项不是常用的滤布材料(C)A.法兰绒B.帆布C.滤纸D.斜纹布132.超滤膜截留的颗粒直径为(B)A0.02～10µmB0.001～0.02µmC<2nmD<1nm133.阴树脂易受有机物污染,污染后,可用(B)处理A柠檬酸B10%NaCl+2%～5%NaOH混合溶液C氨基三乙酸DEDTA134.关于用氢键形成来判断各类溶剂互溶规律,下列（A）项是正确的叙述。A.氢键形成是能量释放的过程,若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大,则有利于互溶。B.氢键形成是能量吸收的过程,若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大,则有利于互溶。C.氢键形成是能量释放的过程,若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大,则不利于互溶。D.氢键形成是能量吸收的过程,若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大,则不利于互溶。135.HPLC是哪种色谱的简称(C）。A.离子交换色谱B.气相色谱C.高效液相色谱D.凝胶色谱136.洗脱体积是（C）。A.凝胶颗粒之间空隙的总体积B、溶质进入凝胶内部的体积C.与该溶质保留时间相对应的流动相体积D.溶质从柱中流出时所用的流动相体积137.分子筛层析纯化酶是根据（C）进行纯化。A.根据酶分子电荷性质的纯化方法B.调节酶溶解度的方法C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法D.根据酶分子专一性结合的纯化方法138.用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是(C)A.离子交换色谱B.亲和色谱C.凝胶过滤色谱D.反相色谱139.用活性炭色谱分离糖类化合物时,所选用的洗脱剂顺序为:(D)A.先用乙醇洗脱,然后再用水洗脱B、用甲醇、乙醇等有机溶剂洗脱C.先用乙醇洗脱,再用其他有机溶剂洗脱D、先用水洗脱,然后再用不同浓度乙醇洗脱140.微滤膜所截留的颗粒直径为(A)A0.02～10µmB0.001～0.02µmC<2nmD<1nm141.下列哪一项不是阳离子交换树脂(D)A氢型B钠型C铵型D羟型142.适合于亲脂性物质的分离的吸附剂是(B)。A.活性炭B.氧化铝C.硅胶D.磷酸钙143.气相色谱柱主要有（C）。A填充柱B毛细管柱CA或BDA或B及其他144.关于分配柱层析的基本操作错误(D)。A装柱分干法和湿法两种B分配柱层析法使用两种溶剂,事先必须先使这两个相互相饱和C用硅藻土为载体,需分批小量地倒入柱中,用一端是平盘的棒把硅藻压紧压平D分配柱层析适用于分离极性比较小、在有机溶剂中溶解度大的成分,或极性很相似的成分。145．按分离原理不同,电泳可分为（A）A区带电泳、自由界面电泳、等速电泳、等电聚焦电泳B纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、琼脂凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳C区带电泳、自由界面电泳、纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳D等速电泳、等电聚焦电泳、琼脂凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳146.在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量(C)A.羟型阴B.氯型阴C.氢型阳D.钠型阳147.超临界流体萃取法适用于提取（B）A.极性大的成分B.极性小的成分C.离子型化合物D.能气化的成分E、亲水性成分148．分离纯化早期,由于提取液中成分复杂,目的物浓度稀,因而易采用（A）A.分离量大分辨率低的方法B.分离量小分辨率低的方法C.分离量小分辨率高的方法D.各种方法都试验一下,根据试验结果确定149．蛋白质类物质的分离纯化往往是多步骤的,其前期处理手段多采用下列哪类的方法。(B）A.分辨率高B.负载量大C.操作简便D.价廉150．亲和层析的洗脱过程中,在流动相中减去配基的洗脱方法称作（D）A.阴性洗脱B.剧烈洗脱C.正洗脱D.负洗脱151.将四环素粗品溶于pH2的水中,用氨水调pH4.5—4.6,28－30℃保温,即有四环素沉淀结晶析出。此沉淀方法称为(B)A.有机溶剂结晶法B、等电点法C、透析结晶法D、盐析结晶法152.针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是(C)。A.凝胶过滤B.离子交换层析C.亲和层析D.纸层析153.下列哪项不是常用的树脂再生剂(D)A1％～10％HClBH2S04.CNaCl、D蒸馏水154.反渗透膜的孔径小于(C)A0.02～10µmB0.001～0.02µmC<2nmD<1nm155.亲和层析的洗脱过程中,在流动相中加入配基的洗脱方法称作(C)A.阴性洗脱B.剧烈洗脱C.竞争洗脱D.非竞争洗脱156．凝胶层析中,有时溶质的Kd>1,其原因是（B）A.凝胶排斥B.凝胶吸附C.柱床过长D.流速过低157.活性炭在下列哪种溶剂中吸附能力最强？（A）A.水B.甲醇C.乙醇D.三氯甲烷158．将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物,该复合物可选择性地与蛋白质结合,在一定条件下沉淀出来,此方法称为（A）A.亲和沉淀B.聚合物沉淀C.金属离子沉淀D.盐析沉淀159．在一定的pH和温度下改变离子强度（盐浓度）进行盐析,称作(A)A.KS盐析法B.β盐析法C.重复盐析法D.分部盐析法160．在超滤过程中,主要的推动力是（C）A.浓度差B.电势差C.压力D.重力161.下面关于亲和层析载体的说法错误的是（B）A.载体必须能充分功能化。B、载体必须有较好的理化稳定性和生物亲和性,尽量减少非专一性吸附。C.载体必须具有高度的水不溶性和亲水性。D.理想的亲和层析载体外观上应为大小均匀的刚性小球。162．在选用凝胶层析柱时,为了提高分辨率,宜选用的层析柱是（A）A.粗且长的B.粗且短的C.细且长的D.细且短的163．如果用大肠杆菌作为宿主细胞,蛋白表达部位为周质,下面哪种细胞破碎的方法最佳?（C）A.匀浆法B.超声波法C.渗透压休克法D.冻融法164.盐析法与有机溶剂沉淀法比较,其优点是(B)A.分辨率高B.变性作用小C.杂质易除D.沉淀易分离165．在萃取液用量相同的条件下,下列哪种萃取方式的理论收率最高（C）A.单级萃取B.三级错流萃取C.三级逆流萃取D.二级逆流萃取166.磺酸型阳离子交换树脂可用于分离(E)A.强心苷B.有机酸C.醌类D.苯丙素E、生物碱167.不能用于糖类提取后的分离纯化的方法是（B）A.活性炭柱色谱法B、酸碱溶剂法C.凝胶色谱法D.分级沉淀法E、大孔树脂色谱法168.用大孔树脂分离苷类常用的洗脱剂是（B）A.水B、含水醇C、正丁醇D、乙醚E、氯仿三、判断题助滤剂是一种可压缩的多孔微粒。(×)通过加入某些反应剂是发酵液进行预处理的方法之一。(√)高级醇能被细胞壁中的类脂吸收,使胞壁膜溶胀,导致细胞破碎。（×)极性溶剂与非极性溶剂互溶。(×)溶剂萃取中的乳化现象一定存在。(×)临界压力是液化气体所需的压力。(×)进料的温度和pH会影响膜的寿命。(√)液膜能把两个互溶但组成不同的溶液隔开。(√)流动相为气体则称为气相色谱。(√)用冷溶剂溶出固体材料中的物质的方法又称浸煮。(×)用热溶剂溶出固体材料中的物质的方法又称浸渍。(×)在生物制剂制备中,常用的缓冲系统有磷酸盐缓冲液;碳酸盐缓冲液;盐酸盐缓冲液;醋酸盐缓冲液等。（×)要增加目的物的溶解度,往往要在目的物等电点附近进行提取。(×)应用有机溶剂提取生化成分时,一般在较高温度下进行。(×）常压干燥浓缩的缺点是设备投资及操作维护费用高,生产能力不太大。（×)生物物质中最常用的干燥方法是减压干燥。(√)冷冻干燥适用于高度热敏的生物物质。(√)溶剂的极性从小到大为丙醇＞乙醇＞水＞乙酸。(√)蛋白质变性,一级、二级、三级结构都被破坏。(×）蛋白质类的生物大分子在盐析过程中,最好在高温下进行,因为温度高会增加其溶解度。（×)吸附剂氧化铝的活性与其含水量无关。(×)酸性、中性、碱性氨基酸在强碱性阴离子交换树脂柱上的吸附顺序是碱性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸(×)离子交换剂是一种不溶于酸、碱及有机溶剂的固态学分子化合物。(√)蛋白质变性后溶解度降低,主要是因为电荷被中和及水膜被去除所引起的。（×)溶剂的极性从小到大为丙醇＞乙醇＞水＞乙酸。(√)当某一蛋白质分子的酸性氨基酸残基数目等于其碱性氨基酸残基数目时,此蛋白质的等电点为7.0。(√）采用氧化铝为吸附剂时,用洗脱剂应从高极性开始,逐渐减低,洗脱剂的极性。（×)重蒸馏法常为制备无盐水的方法。(×)板框压滤机可过滤所有菌体。(×)高压匀浆法可破碎高度分枝的微生物。(×)超声波破碎法的有效能量利用率极低,操作过程产生大量的热,因此操作需在冰水或有外部冷却的容器中进行。(√)冻结的作用是破坏细胞膜的疏水键结构,降低其亲水性和通透性。(×)有机溶剂被细胞壁吸收后,会使细胞壁膨胀或溶解,导致破裂,把细胞内产物释放到水相中去。(√)蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pH﹥pI蛋白质带正电。(×)蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pH﹥pI蛋白质带负电。(√)蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pH﹤pI蛋白质带负电。(×）蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pH﹤pI蛋白质带正电。。（√)离心是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异而实现分离的。(√)不同高分子化合物的溶液相互混合可形成两相或多相系统,如葡聚糖与聚乙二醇(PEG)按一定比例与水混合后,溶液先呈浑浊状态,待静置平衡后,逐渐分成互不相溶的两相,上相富含PEG,下相富含葡聚糖。(√)不同高分子化合物的溶液相互混合可形成两相或多相系统,如葡聚糖与聚乙二醇(PEG)按一定比例与水混合后,溶液先呈浑浊状态,待静置平衡后,逐渐分成互不相溶的两相,下相富含PEG,上相富含葡聚糖。(×)超临界流体温度不变条件下,溶解度随密度(或压力）的增加而增加,而在压力不变时,温度增加情况下,溶解度有可能增加或下降。(√）．盐析是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异,向溶液中加入一定量的中性盐,使原溶解的物质沉淀析出的分离技术。（√)硫酸铵在碱性环境中可以应用。(×)在低盐浓度时,盐离子能增加生物分子表面电荷,使生物分子水合作用增强,具有促进溶解的作用。(√）向含有生化物质的水溶液中加入一定量亲水性的有机溶剂,能使生化物质沉淀析出。（√)丙酮沉析作用小于乙醇。(×)有机溶剂与水混合要在低温下进行。(√)有机溶剂沉析分辨能力比盐析高。(√)若两性物质结合了较多阳离子,则等电点pH降低。（×)等电点沉淀在实际操作中应避免溶液pH上升至5以上。(√)纳米过滤膜孔径最小。(×)离子交换速率总是取决于内部扩散速率。(×)酚型树脂则应在pH小于9的溶液中才能进行反应。(×)伯胺基在pH<7的溶液中使用。(√)在70～80℃时盐型树脂的分解反应达到初步脱盐而不用酸碱再生剂的这种树脂叫热再生树脂。(√)对强酸性树脂一般选择氨水、甲醇及甲醇缓冲液等作洗脱剂。(√)阴树脂易受有机物污染,可用有机溶剂浸泡或淋洗。(×)如不慎树脂失水,应先用水浸泡。(×）只有树脂对被交换离子比原结合在树脂上的离子具有更高的选择性时,静态离子交换操作才有可能获得较好的效果。（√)层析分离是一种化学的分离方法。(×)分离纯化极性大的分子（带电离子等)采用反相色谱（或正相柱),（×)而分离纯化极性小的有机分子(有机酸、醇、酚等)多采用正相色谱(或反相柱)。(×)吸附力较弱的组分,有较低的Rf值。(×）离子交换剂可以分为3部分:高分子聚合物基质、电荷基团和被交换离子。（×)任何情况都优先选择较小孔隙的交换剂。(×)凝胶柱层析可进行生物大分子分子量的测定。(√)在高浓度盐溶液中疏水性相互作用减小。(×)色谱分离技术中固定相都是固体。(×)色谱分离技术中被检测物质的峰越宽越好。(×)制备型HPLC对仪器的要求不像分析型HPLC那样苛刻。(√)在聚丙烯酰胺凝胶中加入阴离子去污剂十二烷基硫酸钠（SDS),影响凝胶的形成。（×)等电聚焦电泳会形成的一个由阳极到阴极逐步递减的pH梯度。(×)在恒速干燥阶段,过程速度由水分从物料内部移动到表面的速度即内扩散所控制。(×)在降速干燥阶段,干燥速度由水的表面汽化速度即外扩散所控制法。(×)渗透压冲击是各种细胞破碎法中最为温和的一种,适用于易于破碎的细胞,如动物细胞和革兰氏阳性菌。(×）等密度梯度离心中,梯度液的密度要包含所有被分离物质的密度。（√)可以用纸色谱的方法来选择、设计液-液萃取分离物质的最佳方案。(√)SephadexLH-20的分离原理主要是分子筛和正相分配色谱。(√)酸性、中性、碱性氨基酸在强碱性阴离子交换树脂柱上的吸附顺序是碱性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸(×)等密度梯度离心适于分离大小相同密度不同的物质。(√)当气体的温度超过其临界温度,压力超过临界压力之后,物质的聚集状态就介于气态和液态之间,成为超临界流体。(√)盐析反应完全需要一定时间,一般硫酸铵全部加完后,应放置30min以上才可进行固-液分离。(√）层析点样时用一根毛细管,吸取样品溶液,在距薄层一端1.5^-2cm的起始线上点样,样品点直径小于3mm。（√)疏水柱层析可直接分离盐析后或高盐洗脱下来的蛋白质、酶等生物大分子溶液(√)某结晶物质经硅胶薄层色谱,用一种展开剂展开,显示单一斑点,所以该晶体为一单体。（×)水提醇沉法时根据物质溶解度差别进行分离的方法。(√)采用溶剂提取法提取中草药有效成分时,选择溶剂的原则是“相似相溶原则"。（√)凝聚与絮凝作用的原理是相同的,只是沉淀的状态不同。(×）冻结-融化法冻结的作用是破坏细胞膜的疏水键结构,增加其亲水性和通透性来破坏细胞的。（√)发生乳化现象对萃取是有利的。(×)丙酮,介电常数较低,沉析作用大于乙醇,所以在沉析时选用丙酮较好。(×)由于pH值可能对蛋白的稳定性有较大的影响,故一般通常采用改变离子强度的梯度洗脱(√）盐析作用也能减少有机溶剂在水中的溶解度,使提取液中的水分含量减少。可以促使生化物质转入有机相从而提高萃取率。（√)珠磨法中适当地增加研磨剂的装量可提高细胞破碎率。(×)中性多糖类药物常用水作溶剂来提取,也可用水浸煮,也可以用冷水浸提。(∨）凝胶层析会使得大分子物质后流出,小分子物质先流出。（×)有机溶剂(如胍、乙醇、尿素和异丙醇等)可以削弱疏水分子间的相互作用。可以用于任何规模的细胞破碎。(√)液一液萃取时,常发生乳化作用,使有机溶济与水相分层困难。而且无法恢复。(×)蛋白质变性后溶解度降低,主要是因为电荷被中和及水膜被去除所引起的。(×）活性氧化铝可分三种类型:碱性氧化铝、中性和酸性氧化铝。（√)细胞破碎技术是生物分离操作中必需的步骤。(×)离心操作时,对称放置的离心管要达到体积相同才能进行离心操作。(×)分配系数K与溶质的浓度和相体积比无关,它主要取决于相系统的性质、被萃取物质的表面性质和温度。(√）甲醇沉淀作用与乙醇相当,但对蛋白质的变性作用比乙醇、丙酮都小,所以应用广泛。（×)氨基酸、蛋白质、多肽、酶、核酸等两性物质可用等电点沉析。(√)同时含有酸、碱两种基团的树脂叫两性树脂(√)氧化铝和硅胶都为亲水性吸附剂,由于对极性稍大的成分吸附力大,所以极性大的成分难以解吸附,Rf小,极性小的成分容易被解吸附,Rf大。同类成分的极性大小主要取决于以下因素。(√)盐析一般可在室温下进行,当处理对温度敏感的蛋白质或酶时,盐析操作要在低温下(如0℃～4℃）进行。(√）蛋白质类的生物大分子在盐析过程中,最好在高温下进行,因为温度高会增加其溶解度。（×)液膜能把两个互溶但组成不同的溶液隔开。(√)沉淀法、吸附法、萃取法、超滤法都是进行初步纯化。(√)渗透压冲击是各种细胞破碎法中最为温和的一种,适用于易于破碎的细胞,如动物细胞和革兰氏阴性菌。(√)同一化合物用不同溶剂重结晶,其结晶的熔点可能有差距。(√)化学萃取即溶质根据相似相溶的原理在两相间达到分配平衡,萃取剂与溶质之间不发生化学反应。(×)若两性物质结合了较多阳离子(如Ca2+、Mg2+、Zn2+等）,则等电点pH升高。(√）采用凝胶过滤分离蛋白质主要取决于蛋白质分子的大小,先将蛋白质混合物上柱然后进行洗脱,小分子的蛋白质由于所受排阻力较小首先被洗脱出来。(×)树脂使用后不可再回收。(×）四、填空发酵液常用的固液分离方法有(离心)和(过滤)等。常用的蛋白质沉析方法有(等电点沉淀),(盐析)和(有机溶剂沉淀)。阳离子交换树脂按照活性基团分类,可分为（强酸型）,（弱酸型）和（中等强度）;其典型的活性基团分别有（磺酸基团）,（羧基）,（磷酸基）。蛋白质分离常用的色谱法有（凝胶色谱法),（多糖基离子交换色谱法),（高效液相色谱法)和（亲和色谱法)。为使过滤进行的顺利通常要加入(惰性助滤剂)。离子交换分离操作中,常用的洗脱方法有(pH梯度)和(离子强度(盐)梯度)。阴离子交换树脂按照活性基团分类,可分为（强碱型),（弱碱型)和（中等强度);其典型的活性基团分别有（季氨基)、（伯、仲、叔氨)、（强弱基团都具备)。离子交换树脂由(载体),(活性基团)和(可交换离子)组成。常用的化学细胞破碎方法有(渗透冲击),(酶消化法),(增溶法),(脂溶法)和(碱处理法)。DEAESepharose是(阴)离子交换树脂,其活性基团是(二乙基氨基乙基)。影响离子交换选择性的因素有(离子化合价),(离子水化半径),(溶液浓度),(离子强度),(溶液的pH值),(有机溶剂),(树脂物理结构)和(辅助力)。CMSepharose是(阳)离子交换树脂,其活性基团是(羧甲基)工业离心设备从形式上可分为(管式),(套筒式),(碟片式),等型式。膜分离过程中所使用的膜,依据其膜特性(孔径)不同可分为(微滤膜),(超滤膜),(纳滤膜)和(反渗透膜)。工业上常用的超滤装置有(板式),(管式),(螺旋卷式)和(中空纤维式)。影响吸附的主要因素有(吸附剂的性质),(吸附质的性质),(温度),(溶液pH值),(盐浓度)和(吸附物浓度和吸附剂用量)。影响盐析的因素有(溶质种类),(溶质浓度),(pH值)和(温度)。简单地说,离子交换过程实际上只有(外部扩散）,(内部扩散）和(化学交换反应）三步;反相高效液相色谱的固定相是（非极性)的,而流动相是（极性)的;常用的固定相有（C18)和（C8);常用的流动相有（甲醇)和（乙睛)。超临界流体的特点是与气体有相似的(粘度(扩散系数)),与液体有相似的(密度)。等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其(等电点(pI））的不同;根据分离机理的不同,色谱法可分为（吸附色谱),（离子交换色谱),（凝胶色谱),（分配色谱)和（亲和色谱)。典型的工业过滤设备有(板框压滤机)和(真空转鼓过滤机)。常用离心设备可分为(离心沉降)和(离心过滤)两大类;根据物化理论,萃取达到平衡时,溶质在萃取相和萃余相中的（浓度的比值)一定;根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同,可将吸附分为(物理)、(化学)、(极性)和(交换)吸附；离子交换操作一般分为(动态)和(静态)两种;蛋白质等生物大分子,在溶液中呈稳定的分散状态,其原因是由于(分子表面电荷）和(水化层）；盐析用盐的选择需考虑（盐析作用强)、（溶解度大)、（生物学惰性)和（来源丰富、经济)等几个方面的因素;影响有机溶剂沉淀的因素有(温度)、(pH)、(样品浓度)、(中性盐浓度)和(金属离子)。结晶包括三个过程(过饱和溶液的形成)、(晶核的形成)和(晶体的生长)。过饱和溶液的形成方法有(饱和溶液冷却)、(部分溶剂蒸发)、(解析)和(化学反应结晶)。物料中所含水分可分为(结合水)和(非结合水)三种;根据干燥曲线,物料干燥可分为(恒速干燥阶段)和(降速干燥阶段)两个阶段；液－液萃取从机理上分析可分为(物理萃取）和(化学萃取）两类;大孔网状吸附剂有（非极性)、（中等极性)和（极性)三种主要类型;影响离子交换速度的因素有(树脂粒度)、(交联度)、(溶液流速)、(温度)、(离子的大小)、(离子的化合价)和(离子浓度)。分配色谱的基本构成要素有(载体)、(固定相)和(流动相)。分子筛色谱也称(凝胶色谱)的主要应用是(脱盐)和(分级分离)根据膜结构的不同,常用的膜可分为(对称性膜)、(非对称膜)和(复合膜)三类；固体可分为(结晶)和(无定型)两种状态;结晶的前提是(过饱和溶液的形成）;结晶的推动力是(溶液的过饱和度）;根据晶体生长扩散学说,晶体的生长包括（溶质借扩散作用从溶液中转移到晶体的表面)、（溶质长入晶面放出结晶热)和（结晶热传递回到溶液中)三个过程；影响晶体生长速度的主要因素有(杂质）、(搅拌）、(过饱和度）和(温度）。五、简答与问答题1.试述凝胶色谱的原理?答：将混合原料加在柱上并用流动相洗脱,则无法进入孔隙内部的大分子直接被洗脱下来,小分子因为可以进入孔隙内部而受到很大的阻滞,最晚被洗脱下来,而中等大小的分子,虽然可以进入孔隙内部但并不深入,受到的阻滞作用不强,因而在两者之间被洗脱下来。2.在色谱操作过程中为什么要进行平衡?答:1.流速平衡:流速是柱层析操作当中的主要影响因素,流速的快慢直接影响着分离的效果,流速过快,混合物得不到完全的分离,流速过慢,整体分离的时间要延长,因此在分离前首先要确定留宿。2.液体环境:为了保持被分离物质运动的均一性,以及好的吸附和解析效果,因此要保持孔隙内部和外部液体环境的一致,所以进行液体环境的平衡。3.以羧酸吸附蛋白质为例,简要说明离子交换树脂的洗脱方法及其原理?答:1.加碱:主要是调节蛋白质到达等电点,是蛋白质带电量减少,吸附力下降从而被洗脱下来。2.加酸:主要是抑制羧酸的电离,使活性基团带电量下降,吸附力下降从而蛋白质被洗脱下来。3.加盐:依照质量作用定律,把蛋白质洗脱下来。3.在离子交换色谱操作中,怎样选择离子交换树脂?答:1.对阴阳离子交换树脂的选择:正电荷选择阳离子交换树脂,负电荷选择阴离子交换树脂。2、对离子交换树脂强弱的选择:较强的酸性或碱性,选择选用弱酸性或弱碱性树脂。3.对离子交换树脂离子型的选择：根据分离的目的,弱酸或弱碱性树脂不使用H或OH型。4.简述盐析的原理及产生的现象?答:当中性盐加入蛋白质分散体系时可能出现以下两种情况:(1)"盐溶"现象—低盐浓度下,蛋白质溶解度增大(2)"盐析"现象—高盐浓度下,蛋白质溶解度随之下降,原因如下:(a）无机离子与蛋白质表面电荷中和,形成离子对,部分中和了蛋白质的电性,使蛋白质分子之间的排斥力减弱,从而能够相互靠拢;（b）中性盐的亲水性大,使蛋白质脱去水化膜,疏水区暴露,由于疏水区的相互作用导致沉淀;5.简述吸附色谱分离技术的原理?答:利用溶质与吸附剂之间的分子吸附力(范德华力,包括色散力、诱导力、定向力以及氢键)的差异而实现分离6、在运用离子交换技术提取蛋白质时,为什么要使用多糖基离子交换剂?答:因为离子交换树脂孔径小,大分子蛋白质难以进入。同时,树脂内部主要为疏水性,对亲水性的蛋白质会产生影响。而多糖基离子交换剂没有上述问题。7、简述过饱和溶液形成的方法?答:(1)热饱和溶液冷却(等溶剂结晶)适用于溶解度随温度升高而增加的体系；同时,溶解度随温度变化的幅度要适中；(2)部分溶剂蒸发法(等温结晶法)适用于溶解度随温度降低变化不大的体系,或随温度升高溶解度降低的体系；(3)真空蒸发冷却法使溶剂在真空下迅速蒸发,并结合绝热冷却,是结合冷却和部分溶剂蒸发两种方法的一种结晶方法。(4)化学反应结晶加入反应剂产生新物质,当该新物质的溶解度超过饱和溶解度时,即有晶体析出;8、怎样进行离子交换树脂的预处理及转型?答：物理处理：水洗、过筛,去杂,以获得粒度均匀的树脂颗粒;化学处理:转型（氢型或钠型）阳离子树脂酸—碱—酸阴离子树脂碱—酸—碱最后以去离子水或缓冲液平衡9、何谓等电点沉析法?答:蛋白质再等电点下的溶解度最低,根据这一性质,再溶液中加入一定比例的有机溶剂,破坏蛋白质表面的水化层和双电层,降低分子间斥力,加强了蛋白质分子间的疏水相互作用,使得蛋白质分子得以聚集成团沉淀下来。10、何谓超临界流体萃取,并简述其分离原理?答：超临界流体萃取是利用超临界流体具有的类似气体的扩散系数,以及类似液体的密度(溶解能力强）的特点,利用超临界流体为萃取剂进行的萃取单元操作。其特点是安全、无毒、产品分离简单,但设备投资较大。11.简述结晶过程中晶体形成的条件?答：结晶过程包括过饱和溶液的形成、晶核的形成及晶体的生长三个过程,其中溶液达到过饱和状态是结晶的前提,过饱和度是结晶的推动力。12.简述凝胶色谱的分离原理?答:凝胶排阻色谱的分离介质(填料)具有均匀的网格结构,其分离原理是具有不同分子量的溶质分子,在流经柱床是,由于大分子难以进入凝胶内部,而从凝胶颗粒之间流出,保留时间短;而小分子溶质可以进入凝胶内部,由于凝胶多孔结构的阻滞作用,流经体积变大,保留时间延长。这样,分子量不同的溶质分子得以分离。13.膜分离过程中,有那些原因会造成膜污染,如何处理?答:（1)膜污染主要有两种情况:一是附着层被滤饼、有机物凝胶、无机物水垢胶体物质或微生物等吸附于表面;另一种是料液中溶质结晶或沉淀造成堵塞。（3分)(2)膜污染是可以预防或减轻的,措施包括料液预处理、膜性质的改善、操作条件改变等方式。(2分)(3）膜污染所引起的通量衰减往往是不可逆的,只能通过清洗的处理方式消除,包括物理方法冲洗和化学药品溶液清洗等。(2分）14.超临界萃取的原理及SC-CO2萃取的优点?答:原理:溶质在超临界流体中的溶解度,与其密度有关,密度越大,溶解度越大。在临界点附近,微小的压力增加或温度下降,则溶剂的密度大幅度增加,对溶质的溶解度将大幅度增加,有利于溶质的萃取。而在临界点附近,微小的压力下降或温度上升,则溶剂的密度大幅度减少,对溶质的溶解度将大幅减少,有利于溶质的分离和溶剂的回收。优点:无毒无腐蚀性,不可燃烧,价格低廉,传质好萃取快,临界温度和临界压力较低适合于热敏生物制品,可获萃取物或萃余物15.何谓免疫亲和层析,简述亲和免疫层析介质的制备过程?答、免疫亲和层析是利用亲和技术和色谱分离集成产生的一种高效色谱分离技术,其分离原理是通过抗原-抗体之间特异性的相互作用,从而实现高效的分离。层析介质的制备过程包括:抗体的制备、抗体提取、载体活化,手