CN119403572A 用于递送生物活性剂的化合物、组合物和方法 （皇家墨尔本理工大学）

2024.11.20PCT/AU2023/0503312023.04.21WO2023/201399EN2023.10.26法23.根据权利要求或权利要求2所述的LLC脂质载4.根据权利要求1至权利要求3中任一项所述的LLC脂质载体，其中所述结构脂质是单5.根据权利要求1至权利要求4中任一项所述的LLC脂质载体，其中所述氨基脂质以占所述LLC脂质载体的总脂质含量的合适的wt％存在，以在暴露于pH下降时提供所述中间相6.根据权利要求1至权利要求5中任一项所述的LLC脂质载体，其中所述氨基脂质占所7.根据权利要求1至权利要求6中任一项所述的LLC脂质载体，其中所述氨基脂质具有8.根据权利要求1至权利要求7中任一项所述的LLC脂质载体，其中所述氨基脂质具有其中Cyc是5元或6元氮杂环基或杂芳基，所述氮杂环基或杂芳基任选地选自由以下组9.根据权利要求7或权利要求8所述的LLC脂质载体，312.根据权利要求11所述的LLC脂质载体，其中所述稳定剂以占所述LLC脂质载体的总13.根据权利要求12或权利要求13所述的LLC脂质载体，其中所述稳定剂是普朗尼克15.根据权利要求1至权利要求14中任一项所述的LLC脂质载体，其中暴露于pH下降时地约pH7.4或更高的pH下包含六方溶致液晶相17.根据权利要求15或权利要求16所述的LLC脂质载体，其中所述LLC脂质载体在约pH4.0_pH7.0的pH下包含立方溶18.根据权利要求15至权利要求17中任一项所述的LLC脂质载体，其中所述LLC脂质载体在约pH7或更高、任选地约pH7.4或更高的pH下包含六方溶致液晶相结构，且在约pH4.0_pH7.0的pH下包含立方溶421.根据权利要求19或权利要求20所述的LLCI抑制剂，所述拓扑异构酶I抑制剂任选地选自喜树碱(camptothecin)、伊立替康22.根据权利要求1至权利要求21中任一项所述的23.一种溶致液晶(LLC)脂质纳米颗粒组合物，其是根24.一种美容组合物，其包含根据权利要求19至权25.一种药物组合物，其包含根据权利要求19至权26.根据权利要求24所述的美容组合物或根据权利要求25所述的药物组合物，其中所27.一种将活性剂递送到生物系统的方法，所述方法包括向所述生物系统施用根据权颗粒组合物或根据权利要求24至权利要求26中任一项所述的组合28.根据权利要求27所述的方法，其中将所述活性剂递送到所述生物系统中是通过所29.根据权利要求28所述的方法，其中所述应答包含31.根据权利要求27至权利要求30中任一项所述的方法，其中所述应答提供所述活性33.根据权利要求32所述的方法，其中所述LLC脂34.根据权利要求33所述的方法，其中所述中间相5物施用治疗有效量的根据权利要求19至权利要求22中任一项所述的LLC脂质载体、根据权利要求23所述的LLC脂质纳米颗粒组合物或根据权利要求24至权利要求26中任一项所述的颗粒组合物或根据权利要求24至权利要求26中任一项所述的组合物施用于所述哺乳动物40.根据权利要求38或权利要求39所述的氨基脂质，其中R41.根据权利要求38至权利要求40中任一项所述的氨基脂质，其中所述氨基脂质选自67[0002]本申请要求保护于2022年4月22日提交的澳大利亚临时专利申请第2022901069号[0004]本文中对背景技术的任何引用都不应被解释为承认此类技术构成澳大利亚或其[0008]本公开提供了可用于可能期望递送材料的任何生物系统的化合物、组合物和方pH降低)下经历结构变化，所述结构变化使活性剂在具有那些生理条件的局部环境中的释8[0013]在第一方面中，提供了一种溶致液晶(LLC)脂质载体，其包含结构脂质和氨基脂[0015]在实施例中，所述氨基脂质以占所述LLC脂质载体的总脂质含量的合适的wt％存[0024]其中Cyc是5元或6元氮杂环基或杂芳基，所述氮杂环基或杂芳基任选地选自由以9[0037]在实施例中，暴露于pH下降时的所述中间相转变是向对应于较低CPP值的中间相酶I抑制剂，所述拓扑异构酶I抑制剂任选地选自喜树碱(camptothecin)、伊立替康(irinotecan)和SN_38。或所述或根据第二方面所述的LLC脂质纳米颗粒组合物以及美容上可接受的载体、稀释剂组合物或根据第三方面或第四方面所述的组合[0050]在实施例中，将所述活性剂递送到所述生物系统中是通过所述LLC脂质载体对预定义pH范围的应答调节的。在实施例中，所述应答包含所述LLC脂质载体的中间相结构转实施例中，所述应答提供所述活性剂在所述生物系统中在所述预定义pH范围下的优先释方法包含向所述哺乳动物施用治疗有效量的根据第一方面所述的LLC脂质载体、根据第二方面所述的LLC脂质纳米颗粒组合物或根据第三方面或第四方面的LLC脂质纳米颗粒组合物或根据第三方面或第四方面所述的组合物在制备用于治疗疾组合物或根据第三方面或第四方面所述的组合物施用于所述哺乳动物或从所述哺乳动物[0061]其中Cyc是5元或6元氮杂环基或杂芳基，所述氮杂环基或杂芳基选自由以下组成[0070]上述各个章节中提及的本发明的各种特征和实施例在适当的情况下经必要修改[0073]图1是本申请中描述的用于肿瘤治疗中的药物递送的脂质载体的pH依赖性相转变[0075]图3是25℃下的跨3.0至10的pH范围的通过向与F_127一起分散的MO中添加增加量的氨基脂质得到的一系列SAXS衍生的部分脂质_水相图。突出显示的框表示从六方相到立质与总脂质的wt/wt比率。N/D是未确定且不可识别的相。可识别的相包括双连续立方相[0078]图6是装载有SN_38的脂质纳米颗粒的粒径和多分散性指数(PDI)的图形表示。测[0079]图7是装载有不同wt％SN_38的SN_38和氨基脂质的脂质纳米颗粒的SAXS部分相[0080]图8是针对装载有不同wt％SN_38的SN_38和氨基脂质的脂质纳米颗粒确定的药物装载量的图形表示。测量结果是由一式三份求平均的，并且结果以平均值+/_标准偏差报[0081]图9是SN_38药物从使纳米颗粒中的释放的图形表示。使纳米颗粒悬浮在pH7和pH5的PBS缓冲液的1000mL释放介质中。装载SN_38的纳米颗粒在中性pH下是六方体(hexosome)，并且在pH5下是立方体组成组的引用应被视为涵盖这些步骤中的一个和多个(oneandaplurality)(即一个或一起使用时，意指可以使用所列项中的一个或多个的不同组合并且可能仅需要列表中的项且还包含药学上可接受的载体。药物组合物涵盖包种成分的解离，和/或由一种或多种成分的其它类型的反应或相互作用直接或间接产生的学(Remington'sPharmaceuticalSciences)》,第19版.(伊斯顿市的麦克出版公司(Mack学上安全的活性剂的盐，如由药学上可接受的无毒至少一种两亲分子形成以得到能够承载活性剂的二维和/或三维中间相结构的经自组装的不同的光学特性和本领域已知的其它特性来视为作为第一方面或第二方面的颗粒而被包括在内。因此，短程有序海绵相明确地被视为向离散相、反向双连续相—包括原始相、陀螺仪相和金刚石相—和反向不连续相)和其它体中的氨基脂质通常可以包含一个或多个阳离子头部基团和/或[0116]在实施例中，本文所公开的LLC脂质载体中的氨基脂质可以包含阳离子可电离氨[0118]在实施例中，酰氨基接头包含位于氮杂环或杂芳基与酰胺基团之间的任选碳链。[0128]在本文所公开的任何实施例中，氨基脂质的R基团可以选自遵循反双连续立方相至少14个碳构成的碳链中，在沿着骨架的至少中间位置处应存在至少一个顺式不饱和键；[0132]在实施例中，R基团可以选自已知用于与极性头部基团一起形成阳离子或可电离阳离子脂质的脂质尾部。例如，以下脂质已知用于形成用于核酸递送的脂质纳米颗粒[0141]其中Cyc是5元或6元氮杂环基或杂芳基，所述氮杂环基或杂芳基选自由以下组成[0156]根据第一方面，提供了一种溶致液晶(LLC)脂质载体，其包含结构脂质和氨基脂[0157]溶致液晶(LLC)材料通常由在极性介质(例如，水溶液或水)中自组装成各种中间为药物载体以本体相或所制造的胶体纳米载体(例如立方体和六方体)的形式应用。[0161]本文所公开的LLC脂质载体可以呈LLC本体相的形式。本体相LLC材料是粘性凝胶(H2)相或反胶束立方(I2)相，所述非层状本体经自组装的中间相可以根据两亲分子的分子[0163]与如固体脂质纳米颗粒(SLN)或纳米结构化的脂质载体(NLC)等现有技术脂质载体相比，本文所公开的脂质载体是其中两亲分子保留了流体特性的溶致液晶(LLC)脂质载述的现有技术SLN是除了表面活性剂和药物万古霉素(vancomycin)之外包含结晶的氨基脂[0165]本文所公开的LLC材料通常在过量水条件下形成，这使得其特别适于药物递送应重量％的量的水。在一些实施例中，本文所公开的LLC脂质载体包含约10重量％至约60重[0168]本文所公开的LLC脂质载体是由除了具有酰氨基接头的氨基脂质之外的至少一种[0169]所述至少一种结构脂质可以选自本领域已知形成溶致液晶相(具体地立方和/或[0170]适当的至少一种结构脂质的选择可以基于本领域所理解的某些要求来进行。例述脂质可以基于已知的或容易确定的值的标[0171]对所述至少一种结构脂质的选择的指导可以在以下出版物中的一个或多个中找3DNanostructuredAmphiphileSelf_AssemblyMaterialsStableinExcess组装材料(LyotropicLiquidCrystalEngineering–OrderedNanostructuredSmallMoleculeAmphiphileSelf_AssemblyMaterialsbyDesign)”《化学学会评论序纳米结构化的两亲分子自组装材料(Lyotropicliquidcrystalengineeringmovingbeyondbinarycompositionalspace–Orderednanostructuredamphiphileself_C.J.Drummond“走向细胞膜生物模拟脂质立方相：脂质组成空间的高通量探索(Towardcellmembranebiomimeticlipidiccubicphases:ahigh_throughputexplorationoflipidcompositionalspace)”《美国化学学会应用生物材料(ACSApplied[0172]聚羟基(糖脂)和聚醚(聚氧化乙烯)形成可能是所关注的II型形成头部基团中的最大类别中的两种类别。头部基团基序的非限制性实例包括醇、脂肪酸、单酰基甘油酯、化铵(DDAB)；双(油菜乙酯)二甲基氯化铵(DEEDAC)；双十八烷基(二甲基)氯化铵(DOAC/DODMAC)或双十八烷基(二甲基)溴化铵(DODAB)；二油酸甘油酯；二油酰基一甘油(DOG)、基磷脂酸(DOPA)；1,2二油酰基磷脂酰甘油(DOPG)；1,2二硬脂酰基磷脂酰甘油(DSPG)；1,2二油酰基磷脂酰乙醇胺(DOPE)；1,2二硬脂酰基甘油3磷酸乙醇胺(DSPE)；1,2二油酰基磷脂酰胆碱(DOPC)；1棕榈酰基2油酰基sn甘油3磷(POPC)；1,2二油酰基sn甘油3磷酸丝氨酸(DOPS)；1,2二棕榈酰基磷脂酰丝氨酸[0179]在本文的任何实施例中，本公开的脂质载体可以包含MO或植烷三醇与胆固醇、[0181]在其中LLC脂质载体包含至少两种结构性两亲性脂质的实施例中，则至少一种结[0182]在此类实施例中，单油酸甘油酯和/或植烷三醇至少一种结构脂质可以单独或以脂质选自本领域众所周知且可商购获得并且包括各种季铵阳离子化[0183]至少一种结构脂质中的某些结构脂质具体地可以由于其对最终脂质颗粒(例如，N,N1,N2,N3四甲基四棕榈基精胺(cellfectin)；NtN'丁基N'十四烷基3十四烷基氨3双棕榈酰氧基丙基)1甲基1H咪唑(DPIM)；N,N,N',N'四甲基N,N'双(2羟乙N三甲基氯化铵(DOTMA)或其它N(N,N1二烷氧基)烷基N,N,N三取代的铵表面活性醇sn甘油(DOBT)或与胆固醇基团(对于ChOTB)连接的胆固醇基(4'三甲基氨)丁酸酯三甲基铵)乙基甲基氨基乙基胆固醇基3β氧基琥珀酸盐碘化物、3βN(N',N'二甲1,2二肉豆蔻基氧基丙基3二甲基羟乙基溴化铵(D基一sn甘油3乙基磷酸胆碱(DOEPC)；1,2二palToyl一sn甘油3乙基磷酸胆碱[0185]在实施例中，特别优选地阳离子脂质是DOTAP和/或DODAB和/或四辛基溴化铵[0191]在实施例中，LLC脂质载体是非层状溶致液晶相，如经自组装的非层状溶致液晶(LNP))的形式。此类纳米颗粒可以被称为溶致液晶(LLC)脂质纳米颗粒或溶致液晶脂质纳[0195]本发明的LLC脂质载体可以优选地包含至少一种选自本领域已知的稳定剂的稳定[0196]在实施例中，稳定剂可以是泊洛沙姆或表面活性剂或PEG化的脂质稳定剂或其经[0197]在实施例中，稳定剂选自PEG_PPO_PEG三嵌段共聚物和非离子嵌段共聚物表面活对这些组分的选择和对其相容性的理解可以基于本领可以通过使用较长的PEG链或多个PEG链来实现；(ii)存在氢键受体并且不存在氢键供体；分散体(立方体)的空间稳定剂(StericStabilizersforCubicPhaseLyotropicLiquidCrystalNanodispersions(Cubosomes))”于“平面脂质双层和脂质体的进展amphiphilicblockcopolymersfortheformationofstimuli_responsivenon_lamellarlipidnanoparticles)”《分子(Molecules)》,2021,26,3648–3664.DOI:溶致液晶纳米颗粒稳定并降低其细胞毒性(AmphiphilicbrushpolymersproducedbytheRAFTpolymerisationmethodstabiliseandreducethecelltoxicityoflipidlyotropicliquidcrystallinenanoparticles)”《法拉第讨论(Faraday异性的纳米颗粒的法拉第讨论191(FaradayDiscussion191onNanoparticleswithMorphologicalandFunctionalAnisotropy)；(iv)J.Zhai,T.J.Hinton,基于植烷三醇的溶致液晶纳米颗粒在空间上稳定并降低其毒性(Lipid_PEGConjugatesStericallyStabiliseandReducetheToxicityofPhytantriol_BasedLyotropic植烷基共聚物(NovelStericStabilisersforLyotropicLiquidCrystalline烯酸十八酯)一嵌段一聚(聚乙烯乙二醇甲醚丙烯酸酯)(NovelRAFTAmphiphileBrushCopolymerStericStabilisersforCubosomes:Poly(octadecylacrylate)一block一稳定剂普朗尼克F127在溶致液晶纳米结构的颗粒分散体中的布置和缔合(DispositionandAssociationoftheStericStabiliserPluronicF127inLyotropicLiquidCrystallineNanostructuredParticleDispersions)”《胶体与界面科学杂志(J.ColloidandInterfaceScience)》,2013,392,288–296.DOI:10.1016/ThroughputDiscoveryofNovelStericStabilisersforCubicLyotropicLiquid通量评价(StericStabilisationofCubicLyotropicLiquidCrystallineNanoparticles:HighThroughputEvaluationofTriblockPolyethyleneOxide–PolypropyleneOxide–PolyethyleneOxideCopolymers)”.《软物质》,2011,7,4768–4777.DOI:10.1039/c1sm[0202]本文所公开的LLC脂质载体可以通过将本文所公开的氨基脂质和结构脂质混合来选重量比率可以简单地通过试验多个比率并确定哪个比率对于所考虑的pH环境而言是最构脂质或总脂质的重量比率可以是在pH下降至到先确定的pH值时导致中间相转变的重量比例使用。在实施例中，结构脂质与具有酰氨基接头的脂质(如氨基脂质)的比率为95:[0206]在实施例中，具有酰氨基接头的氨[0209]在本文所述的任何实施例中，氨基脂质可以以相对于LLC脂质载体的总脂质含量占本文所公开的LLC脂质载体的总脂质含量的约0.5wt％至约50wt例如占总脂质含量的[0210]为了制备本文所公开的LLC脂质纳米颗粒，可以使氨基脂质与结构脂质的混合物PEG化的脂质稳定剂或其经修饰版本。优选的稳定剂包括但不限于普朗尼克F127或泊洛沙30重量％、约25重量％至约35重量％、约30重量％至约40重量％、约35重量％至约45重55重量％至约65重量％、约60重量％至约70重量％、约65重量％至约75重量％或约70重[0214]本公开的LLC脂质纳米颗粒可以作为在极性介质(如水性介质)中的纳米颗粒分散公开的LLC脂质载体在极性介质中的分散体，如本文所公开的LLC脂质载体的水性分散体。[0215]在一些实施例中，本文所公开的LLC脂质纳米颗粒组合物将通过使本文所公开的LLC脂质载体分散在药学上或美容上可接受的载体或稀释剂中而形成，所述药学上或美容纳米颗粒组合物中的极性介质(例如，水)的量为约80重量％至约99重量例如约80重[0217]LLC脂质载体的纳米结构可以通过相关领域的技术人员已知的任何技术来确定。[0221]在实施例中，暴露于pH下降时的所述中间相转变是向对应于较低CPP值的中间相[0223]在实施例中，非层状溶致液晶相(LLC脂质载体)的纳米结构是六方的(H2)或立方的(Q2某些细菌和真菌的感染部位以及亚细胞(细胞内)公开的LLC脂质纳米颗粒可以经历从pH7下的六方相到pH5.5_6.0下的[0229]在本公开的上下文中，将活性剂包封或包括在LLC脂质载体中意指在包封的活性物。抗癌化学疗法药物的非限制性实例包括替莫唑胺(temozolomide)、达卡巴嗪西他赛(docetaxel)、长春新碱(vincristine)、长春花碱(vinblastine)、长春瑞滨立替康(irinotecan)、多柔比星(doxorubicin)、道诺霉素(daunomycin)、表柔比星(epirubicin)、伊达比星(idarubicin)、甲氨蝶呤(methotrexate)、阿糖胞苷[0239]在实施例中，本文所公开的LLC脂质载体响应于pH下降而经历向界面曲率较低的经历向界面曲率较低的中间相的转变。在实施例中，本文所公开的LLC脂质载体在pH低于[0245]合适地，美容上或药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂可以是或包括稀释所述文献提供了可根据本公开使用的赋形剂的非限制性[0251]在实施例中，美容组合物或药物组合物是分别包含美容活性剂或药学活性剂的组合物或根据第三方面或第四方面所述的组合[0255]如所讨论的，本文所公开的承载的LLC脂方法包含向所述哺乳动物施用治疗有效量的根据第一方面所述的LLC脂质载体、根据第二方面所述的LLC脂质纳米颗粒组合物或根据第三方面或第四方面的LLC脂质纳米颗粒组合物或根据第三方面或第四方面所述的组合物在制备用于治疗疾组合物或根据第三方面或第四方面所述的组合物施用于所述哺乳动物或从所述哺乳动物上可接受的标准化的测试和/或经验测试(包括拭子样品测试等适当的剂量或剂量方案可以通过常规试验或基于用于通过第一方面或第二方面的颗粒递关颗粒或组合物以及一种或多种活性剂可以通过相同或不同的施用途径施用。[0269]本文所公开的LLC脂质载体(例如，LLC脂质纳米颗粒)特别适于活性剂的受控递疾病、病症或病状的方法，所述方法包括向受试者施用本文所公开的LLC脂质载体(例如，LLC脂质纳米颗粒)、本文所公开的LLC脂质纳米颗粒组合物或本文所公开的美容组合物或瘤标志物的表达、肿瘤抑制因子表达或活性的丧失和/或畸变或异常的细胞表面标志物表但不限于此。癌症、肿瘤和恶性肿瘤的更全面列表可以在国家癌症研究所网站(National[0273]http://www.cance假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)、克雷伯氏菌(Klebsiella)、鲍曼不动杆菌(Streptococci)、肺炎球菌属(Pneumococci)、肠球菌属(Enterococci)、芽孢杆菌纲[0278]致病细菌的非限制性实例包括金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、幽门螺杆菌(Helicobacterpylori)、炭疽杆菌(Bacillusanthracis)、百日咳鲍特氏菌(Bordetellapertussis)、白喉杆菌(Corynebacteriumdiphtheriae)、破伤风梭菌pneumoniae)、酿脓链球菌(Streptococcuspyogenes)、单核细胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)、流感嗜血杆菌(Hemophilusinfluenzae)、多杀巴斯德氏菌(Pasteurellamultocida)、痢疾志贺氏菌(Shigelladysenteriae)、结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)、麻风分枝杆菌(Mycobacteriumleprae)、肺炎支原体(Mycoplasmapneumoniae)、人支原体(Mycoplasmahominis)、脑膜炎奈瑟菌(Neisseriameningitidis)、淋病奈瑟菌、立氏立克次体(Rickettsiarickettsii)、嗜肺军团菌typhimurium)、伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphi)、伯氏疏螺旋体(Borrelia[0279]真菌的非限制性实例包括假丝酵母菌种(Candidaspecies)和曲霉种病、病症或病状的真菌选自由以下组成的组：白色念珠菌(C.albicans)、光滑念珠菌[0280]如上所讨论的，本文所公开的LLC脂质载体的相变化和包封的活性剂的相关释放文所公开的包含活性剂的LLC脂质载体进行治疗。合适的寡核苷酸或核酸可以选自基因表如核酶、适体和镜像异构体(spiegelmer)、dicer底物、微小RNA(miRNA)和短发夹RNA体或包含活性剂的根据第三方面或第四方面所述的组合物可以用于检测或诊断上面讨论氨基接头的脂质是根据实施例1至实施例21中任一项所述的脂相在低于约pH7.5的pH下是立方非层状溶[0350]实施例53：根据实施例51所述的美容组合物或根据实施例[0351]实施例54：根据实施例51所述的美容组合物或根据实施例[0352]实施例55：根据实施例51所述的美容组合物或根据实施例施用根据实施例45至实施例50中任一项所述的脂质载体或根据实施例51至实施例55中任述活性剂在所述生物系统中在所述预定义pH范围下的所述哺乳动物施用治疗有效量的根据实施例45至实施例50中任一项所述的脂质载体或根据实施例51至实施例55中任一项所述的一项所述的组合物施用于所述哺乳动物或从所述哺乳动物获得的生物样品以促进诊断所达州伊利森市(Elysian,MN,USA))获得纯度>99％的单油酸甘油酯(MO)和油酸(OA)。从Adooq生物科学公司(Adooqbioscience)购买SN_C18_油烯基尾部对于所有合成脂质保持恒定，但是酰氨基接头的头部基团和长度是变化[0378]利用油酸(OA)与承载头部基团的胺之间的酰胺偶联反应合成氨基脂质。向于DCM核磁共振(NMR)成像(1H)分析进行的分析。使用布鲁克公司(Bruk[0384]本文所公开的LLC脂质载体可以呈本体相，或者可以包含本文所公开的氨基脂质和结构性两亲性脂质的纳米颗粒的形式分散。结构性两亲性脂质可以构成纳米颗粒的本[0385]使用如Tran等人2016中报告的高通量方法调配由氨基脂质和MO组成的LLC纳米颗大利亚新南威尔士州的GeneVac公司(GeneVac,NSW,Australia))将有机溶剂去除，以获得合物中添加1mLF127(20mg于1mLDI水中的溶液)。通过高通量多探针超声仪(QSonica)对[0387]还可以使用两种或更多种氨基脂质的混合物以对纳米颗粒的pH响应性进行微调[0389]将5wt％至50wt％的各种量的氨基脂质添加到MO中并使其与普朗尼克F_127一起[0391]使用马尔文公司ZetasizerNanoZS(英国的马尔文仪器公司(Malvern散性指数(PDI)。在25℃(n＝3)下通过将脂质调配物(10μL)装载到透明96孔半区聚苯乙烯[0393]研究上述纳米颗粒调配物的平均粒径和多分散性指数(PDI)。所得值分别呈现于[0398]表1和2示出了通过向与稳定剂普朗尼克F_127一起分散的MO中添加氨基脂质而制备的纳米调配物的粒径和多分散性指数(PDI)数据。添加到调配物中的氨基脂质的量由RMO[0401]使用高通量调配和同步辐射中心(Synchrotron)小角X射线散射(SAXS)来确定氨[0402]将纳米颗粒制剂(50μL)装载到透明96孔半区聚苯乙烯板(澳大利亚维多利亚州(VIC,Australia)的Interpath公司的格瑞纳生物科技公司)中，并且将50μL指定pH的合适缓冲溶液(柠檬酸盐缓冲液)添加到所述板中。在澳大利亚国家同步Synchrotron)的SAXS/WAXSbeamline处表征纳米颗粒的相行为。所述仪器使用入=1.128A(11.0keV)的X射线波长与大约10光子/秒的典型通量。样品与检测器距离选择℃。在Decris公司(Decris)_Pilatus1_M检测器上使用ScatterBrain记录二维X射线衍射使用基于IDL的软件AXcess按照所描述的方法计算纳米颗粒的晶格参数(Tran等人2018；脂质纳米颗粒。通过SAXS经十个不同的pH值(2.5至10的pH范围)确定不含药物的调配物的中间相结构。图3表示这些纳米颗粒在25℃下的SAXS部分相图。可以通过临界包装参数层状相(Lα的氨基脂质导致中间相结构按照双连续立方相→六方相→反胶束相(Q2→H2→L2)的顺序变向MO中添加脂质10、脂质11和脂质13可以进一步增加有效CPP，从而诱导脂质膜的更大曲的转变的事实最可能是由于酰胺键的亲水性引起的。分配系数P被定义为介于有机相与水MO的头部基团大小更大的头部基团大小的添加剂可以进一步降低有效CPP，从而诱导脂质杂有所研究的四种不同氨基脂质的MO纳米颗粒的中间相结构的影响。通过F_127稳定的纳[0413]氨基脂质的可电离头部基团部分驻留在脂质_水界面处。在以上制备的纳米颗粒每一种是独特的，并且因此可以由于pH和离子强度被改变而具有不同的表观pKa。此表观pKa主要受界面溶剂化介质效应和弱碱界面处的表面电荷密度影响。界面处的表面电荷密度将受头部基团电离化程度(pH效应)和离子强度(静电屏蔽效应)管理(Drummond等人,[0414]发生相转变的pH范围根据氨基脂质的分子结构以及其在MO纳米颗粒中的掺杂水[0415]结果表明，所研究的可电离氨基脂质在中性pH下促进MO纳米颗粒中H2相的形成。13)在pH(pH5.0_pH6.5)(这是实体瘤的病理学相关范围)下显示出pH依赖性H2→Q2相转为Q2[0419]本文所公开的LLC脂质载体(如本文所公开的LLC脂质纳米[0420]通过首先制备以上实例2中描述的MO和氨基脂质的经干燥的脂质混合物来制备包127(2mg/ml)的水溶液。在脉冲模式下对随后的混合物进行探针超声处理，持续5分钟[0427]对四种脂质纳米颗粒调配物中的每种脂质纳米颗粒调配物的如以上实例3所述的[0430]在一定pH范围内确定如实例5所述制备的含SN_38的脂质纳米颗粒调配物中的每发生向Q2相的完全转变。通过Casado等人针对SN_38药物与生物膜模型之间的相互作用进[0436]使用HPLC法确定实例5的四种调配物中的每种调配物的药物装载量(DL)和包封效[0437]在25℃下将含有药物的纳米颗粒以1000×g离心25分钟，以去除任何未包封的药[0438]对于SN_38药物含量测定，使用波长为265nm的UV可变检测器和安捷伦公司呈闭合的内酯环形式。通过用HPLC溶剂(10μL调配物和缓冲液与乙腈的990μL50/50混合来制备调配物。使用离心法从调配物中去除未包封的游离药物，并且如上所概述的使用药物中的大部分被包封在双层中，并且仅存在极少量的游离未包封的药物。对于装载有[0444]装载SN_38的调配物的DL和EE％示出于表3和图8中。对于表示通过添加占调配物[0447]实现了844μg/mlSN_38的高载量，这是SN_38在水中的溶解度的约100倍。由Ranneh等人进行的先前研究将SN_38装载在具有表面活性剂的基于植烷三醇的立方体中，[0448]双层的动态特性可能极大地阻碍或促进如SN_38等疏水分子的掺入。虽然具有刚表面电荷和双层流动性的制造过程(Bala等人,2013)。观察到载量是pH依赖性的，并且用[0451]使用动态透析法评价SN_38从纳米颗粒的体外释放(Zambito,Y.《国际药学杂志透析管(Pur_A_LyzerTMMaxi透析管，分子量截止值3500)中并彻底透析来确定药物释放速[0454]进行在不存在脂质纳米载体药物递送媒剂的情况下药物通过透析膜扩散的校准常细胞生理环境(pH＝7.4)中药物释放速率较慢，并且在所模拟的肿瘤微环境和溶酶体环循环中的药物损失减少和药物在肿瘤部位处的生物利用度增加。在pH＝5.0下较快的释放[0461]使用上述蒸发和超声处理方法使用氨基脂质OAPi_1和OAPy_4以及作为结构脂质[0465]向六周龄Balb/c裸鼠腹膜内注射指定剂量(50mg/kg、100mg/kg和200mg/kg)的经[0469]结果表明，本文所公开的新型LLC脂质纳米颗粒适于作为药剂载体或美容剂载体药和纳米医学方法(ProdrugandnanomedicineapproachesforthedeliveryofthecamptothecinanalogueSN38)《控制释放杂志(JControlRelease)》2013,体调配物：其对两种肿瘤细胞系的细胞毒性作用的表征和体外评估(novelmicrofluidicliposomalformulationfort