CN119403799A 包含2,4-二氨基嘧啶的化合物、其制备方法及作为活性成分含有其的用于预防或治疗癌症的药物组合物 （韩国化学研究院）

2024.12.20PCT/KR2023/0059822023.05.02WO2023/214772KO2023.11.09及作为活性成分含有其的用于预防或治疗癌症本发明涉及一种作为激酶抑制剂的异苯并地用作具有HPK1抑制活性及MLK3抑制活性的异苯并呋喃1(3H)酮衍生物及包含其的用于预防合物可有效地用作用于预防或治疗癌症的组合21_C4烷基或C1_C4烷氧基，C4烷基14烷基1C135及R5与相邻的C一起形成3元至7元的饱和螺环，1_C4烷基或C1_C4烷氧基，4C1C4烷氧基、卤代C1C4烷氧基或C1C4烷氧基CC4化合物3：5,5'((5氯嘧啶2,4二基)双(亚氨基))双(3,3二甲基异苯并呋喃15向需要抑制包括HPK1在内的激酶活性的对象体施用有效量的权利要求1或2所述的由包括联合施用权利要求1或2所述的由化学式1、化学式所述抗癌剂选自选自紫杉烷类抗癌剂、抗肿瘤烷化剂、抗肿包括联合施用权利要求1或2所述的由化学式1、化学式用于体外培养根据权利要求11所述的免疫调节细胞治疗剂中使用的治疗用细胞来实6HPK1抑制活性及MLK3抑制活性的异苯并呋喃_1(3H)_酮衍生物及包含其的用于预防或治疗[0002]蛋白激酶是一种催化酶，所述蛋白激酶催化将腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)的末端磷组分为：包含表皮生长因子受体的跨膜(spanning)生长因子受体(Iwashita,S.etal.,及C_末端Src激酶(Chan,A.C.etal.,AnnuRevImmunol.,12,[0004]不适当的高蛋白激酶活性与起因于非正常细胞作用的多种疾病直接或间接相酶活性的选择性抑制可成为用于治疗疾病的新药开发的有利通过使用多种信号转导系统来调节在癌细胞的增殖及存活中发挥重要作用的MAP激酶疾病、帕金森病及非酒精性脂肪性肝炎等的治疗剂的多项研究(Chadee,D.N.,CanJPhysiolPharmacol.,91(4),268_274,2013；Rattanasinchai,C.etal.,CancersInt.,34(3),427_437,2014；ParkinsonStudyGroupPRECEPTInvestigators,[0007]从原始造血祖细胞克隆的造血祖细胞激酶1(HPK1)是许多MAP激酶激酶激酶激酶7BiolChem,2012.287(14):p.11037_48)。HPK1敲除小鼠对实验性自身免疫性脑脊髓炎HPK1在牛皮癣性关节炎患者的外周血单核细胞及系统性红斑狼疮(SLE)患者的T细胞中被控制肿瘤生长及转移方面更有效(Alzabin,S.,etal.,CancerImmunolImmunother,增加T细胞反应，以根除路易斯(Lewis)肺癌(Alzab(嵌合抗原受体T细胞；ChimericAntigenReceptor_modifiedTcell)等多种CAR_T细胞种在培养容器中快速增殖大量高质量T细胞的技术(Dudley,ME.,etal.,Nat.Rev.Cancer,[0009]另一方面，作为与具有HPK1抑制活性及MLK3抑制活性的异苯并呋喃_1(3H)_酮衍8提供一种具有HPK1抑制活性及MLK3抑制活性的异苯并呋喃_1(3H)_酮衍生物及包含其的用9C11C4烷基14烷基1C1[0051]选自由5_((5_氯_2_((1,2,3[0052]6_((5_氯_2_((1,2,3,4_四式3或化学式4表示的化合物具有对HPK1及MLK3均起[0076]所述病毒感染疾病可选自由寨卡病毒(ZIKAvirus)、人类免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiencyvirus，HIV)、流感病毒(influenzavirus)、甲型流感病毒H1N1亚型(InfluenzaAvirussubtypeH1N1)、禽流感病毒(avianinfluenzavirus)、鼻病毒(rhinovirus)、腺病毒(adenovirus)、冠状病毒(coronavirus)、副流感病毒(parainfluenzavirus)、呼吸道合胞病毒(respiratorysyncytialvirus)、疱疹病毒[0092]所述细胞治疗剂可选自淋巴因子激活的杀伤细胞(LymphokineActivated细胞(EngineeredTcellReceptorTherapy，TCR_T)、嵌合抗原受体T细胞(ChimericAntigenReceptor_modifiedTcell，CAR_T)、嵌合抗原受体NK细胞或其药学上可接受的盐的组合物，其用于体外(ex使用的治疗用细胞来实现免疫活性扩增细胞的制备或者免[0095]本发明的药物组合物可与通常使用的药学上可接受的载体一起配制为合适的剂压的盐或缓冲剂等辅助剂以及其他治疗上有用的物质一并在水中进行混合来制备成溶液可轻易实现基于这些因素的给药量的确定，并且通常给药量在0.01mg/Kg/天至约2000mg/异苯并呋喃1(3H)酮衍生物通过与抗癌药物或细胞治疗剂联合施用，从而具有优异的抗[0102]图1是示出本发明的化合物的A2780细胞株(人类卵巢癌细胞株)及2780/cis细胞[0107]化合物1.5((5氯2((1,2,3,4[0114]在含化合物1一2(1.15g，4.69mmol)的THF(10mL)的溶液中添加85％激活的MnO2[0123]在含2,4,5_三氯嘧啶(100mg，0.545mmol)的IPA(1.5mL)的溶液中添加DIPEA90℃的温度条件下，搅拌4小时。将反应混合物冷却并溶解于EA，用水洗涤。将有机层用MgSO4干燥并使用旋转蒸发器进行浓缩。将反应混合物使用MPLC(20％EA/Hex)进行纯化，trifluoroacetyl)_1,2,3,4_tetrahydroisoquinolin_6_yl)amino)pyrimidin_4_yl)amino)_3,3_dimethylisobenzofu[0126]在含化合物1_6(43.0mg，0.133mmol)的IPA(1mL)的溶液中添加化合物1_7缩。将反应混合物使用MPLC(30％的EA/Hex)进行纯化，得到化合物1_8(34.0mg，6_yl)amino)pyrimidin_4_yl)amino)_3,3_dimethylisobenzofuran_1(3H)_one)(化合物[0132]化合物2.6((5氯2((1,2,3,4四氢异6.75mmol)的THF(30mL)的搅拌的溶液中，在0℃的冰水浴条件下滴加Et2O中的MeMgBr4.97mL，14.9mmol)。将生成的溶液在室温条件下搅拌4小时。并且通过添加150mL的HCl[0145]在含2,4,5三氯嘧啶(20.0mg，0.109mmol)的IPA(1.5mL)的溶液中添加DIPEAamino)3,3dimethylisobenzofuran1(3H)one)二氢异喹啉2(1H)基)2,2,2三氟乙烷1酮(3,3二甲基异苯并呋喃1(3H)酮(6((5chloro2((1,2,3,4tetrahydroisoquinolin6yl)amino)pyrimidin4yl)amino)3,3dimethylisobenzofuran1(3H)one)(化合物[0156]在含2,4,5_三氯嘧啶(100mg，0.545mmol)的IPA(1.5mL)的溶液中添加DIPEAMgSO4干燥并使用旋转蒸发器进行浓缩。将反应混合物使用MPLC(20％EA/Hex)进行纯化，[0160]MLK3的激酶活性抑制通过以下的方法计算。将重组人MKK3蛋白在反应液(8mM的10μl的反应液滴加至P30过滤器中。滴加的过滤器经0.425％的磷酸(phosphoric为100％的对照组(100％ofcontrol)，并换算基于化合物的MLK3抑制程度。为了计算IC50[0162]HPK1的激酶活性抑制通过以下的方法计算。将重组人HPK1蛋白在反应液(8mM的的醋酸镁(Magnesiumacetate)及15uM的[gamma_33P_ATP])中与化合物混合后，在常温条(scintillationcounting)来测定HPK1的活性。将不含化[0164]使用所述实施例1中合成的本发明的化合物1至化合物3来确认MLK3或HPK1的激酶1000nM，500nM，100nMIC50值(values)MLK3的50％抑制浓度(IC50)约为140nM，用并呋喃1(3H)酮衍生物化合物在低浓度(nM)条件下表现出对HPK1及MLK3同时高的抑制活株)及A2780/cis(顺铂(cisplatin)耐药细胞株)进行了如下的评价。将细胞在96孔板中以每孔4000个细胞培养并使其稳定化一天，将所述实施例1中合成的本发50％生长抑制浓度(GI50)约为400异苯并呋喃1(3H)酮衍生物化合物1至化合物3在A2780(癌细胞株)及A2780/cis(耐药癌脑癌)及抗癌剂耐药癌细胞株(阿霉素(doxorubicin)耐药血癌、K562/ADM；紫杉醇0.433.742.280.290.440.990.772.900.390.280.55×105接种到96孔板中，将所述实施例1中合成的本发明的化合物1至化合物3从3μM开始连理并培养6天。使用赛多利斯公司(Sartorius)的人类T细胞活化细胞及细胞因子分析试剂盒(humanTcellactivationcellandcytokineprofilingkit)在iQue设备