CN119403826A TdT特异性嵌合受体及其使用方法 （贝勒医学院）

2024.12.20PCT/US2023/0663392023.04.28WO2023/212674EN2023.11.02本公开的实施方式涉及与靶向癌治疗相关A02相关的特定末端脱氧核苷酰转移酶肽。在具T细胞受体的细胞，以及可选的靶向相同肽的双23.根据权利要求1或2所述的多核苷酸，其中，所述Td6.根据上述权利要求之任一项所述的多核苷7.根据上述权利要求之任一项所述的多核苷酸，其中，TCR进一步定义为包含鼠恒定324.多肽，其由权利要求1～18之任一项所述的多核25.细胞，其包含权利要求1～18之任一项所述的多核苷酸或第一多核苷酸，其包含编码重组TCR的序列，所述重组TCR包含对T第二多核苷酸，其包含编码BiTE的序列，所述BiTE包含对Td33.治疗个体的因细胞表面存在与HLA一A02相关的TdT或TdT肽而间接或直接引起的个体医疗状况的方法，其包括将治疗有效量的权利要求19～23之任一项所述的组合物和/或治疗有效量的权利要求25～32之任一项所述的细441.根据权利要求40所述的方法，其中，包含所述重组TCR的所42.根据权利要求40所述的方法，其中，包含所述重组TCR的所权利要求19～23之任一项所述的组合物和/或权利要求25～32之任一项所述的5[0001]本申请要求优先于2022年4月29日提交的美国临时专利申请序列号63/336,892，[0006]靶向CD19的嵌合抗原受体(CAR)T细胞在不到一半的难治性/复发性B细胞ALL患者显着增加这些疗法的风险2。因此，难治性或复发性T_ALL和AML患者的总生存期仍然非常[0008]本公开实施例包括用于治疗末端脱氧核苷酰转移酶(TdT)以任何方式相关且需要[0010]在各种实施方式中，本公开通过靶向TdT作为在任何种类的癌细胞表面表达的肿瘤抗原来解决癌治疗技术中的局限性，包括至少在B细胞和T细胞急性淋巴细胞性白血病6[0014]以下附图构成本说明书的一部分，并被包括在内以进一步演示本发明的某些方细胞的扩增(n＝7)。(图3D)CD27和CD45RA在对照和TdT特异性CD8+T细胞上的表达(n＝6)。[0018]图4A～4B：TdT.cTCRT细胞的特异性。(图4A)共培养3天后cTCRT细胞对BV173本和MHCI缺陷(b2MKO)BV173白血病细胞共培养后的脱颗粒(图5A)和IFNγ/TNFα产生(图[0020]图6：通过CAR、cTCR或BiTE重定向针对TdT+/A2+细胞系的T细胞的细胞毒性(n=[0021]图7示出了嵌合TCR的一个实施方式，其中抗体的VH和VL7靶向这些变体肽。患有或疑似患有某种疾病(例如癌)或具有疾病易感性(例如比一般人群面临更高的风险)8或缓解疾病状态以及缓解或改善预后。缓解可能发生在疾病或病症的体征或症状出现之或增强受试者的健康的任何事物。这包括但不限于疾病的一种或多种体征或症状的频率述的描述中)和不同实施例的其他地方讨论的实施方式的上下文中实施[0042]在各种实施方式中，所述方法和组合物增强了嵌合受体靶向肿瘤抗原的敏感基于CAR和TCR的免疫细胞疗法的积极开发及其临床评估促使对调节肿瘤特异性受体敏感[0044]本公开涉及使用靶向一种或多种TdT肽的特异性抗体治疗一种或多种医疗状况以靶向表达TdT肽的有害细胞，例如表达TdT肽的癌细胞，且在具体实施方式中，该肽包含9[0048]ATGGCCTTACCAGTGACCGCC[0049]CCGGCTCAAGTTCAGCTGGTGC[0050]AAGGTCTCTTGTAAGGCCTCA[0051]CAAGCACCAGGACAGGGATTA[0052]AACTACGCCCAAAAATTTCAAG[0053]GCCTACATGGAACTGAGCTCTCT[0054]GACGGGTATAGTGGTAGCTACT[0055]TTAGTGACGGTGAGCAGCGGAG[0056]AGCGTCTCCGGCAGTCCAGGAC[0057]GTGGGGGGCTACAATTACGTA[0058]ATGATTTATGATGTCTCATAC[0059]TCCGGAAACACCGCTTCACTAA[0060]TACTGCTCATCTTACACCAGTTCCAGTACGCTTGTGTTTGGTACTGGAAC业I业L业[0075]其中信号肽位于N末IDNO:39)[0089]其中信号肽位于N端且缺乏scFv包括与SEQIDNO：4～9中的任体等)的任何抗体可包含以下VH序列之一或H结构域至少包含SEQH结构域至少包含SEQ[0105]各种实施方式中的scFv包括SEQIDNO：4～9、22～24或25～27中的与它们具有至少80％序列同一性或具有它们或与它们具有至少克隆的轻链可变区的LCDR1、LCDR2和LCDR3或与它们具有至少80％序列同一性或具有它们体，例如包含结合TdT肽的抗体的受体。在具体实施方式中，嵌合受体是嵌合T细胞受体[0111]在一个实施方式中，嵌合受体是合成的T细胞受体(TCR)和抗原受体(STAR)(Liu[0112]尽管下面提供了包含上述B1抗体且包含两条独立链(B1STAR)的STAR受体的一个码嵌合受体蛋白的多核苷酸也可以编码同样使用抗体的另一种基因产物，包括任何抗TdT受体(TCR)或STAR)和/或基于重组蛋白的(双特异性T细胞接合子)试剂，以靶向特定的TdT[0146]本公开的实施方式允许将CD4+和CD8+T细胞重定向到I类MHC呈递的肿瘤抗原。表达天然TdT特异性TCR的T细胞在胸腺选择过程中被删除，从而排除了天然TdT特异性T细胞式中改善了TdT特异性T细胞反应和整体[0147]如本文其他部分所示，表达TdT特异性cTCR的T细胞与表达类似TdT特异性嵌合抗T细胞相比，双特异性接合子提供现成的可用性并降低制造成本，它们在治疗过程中的应指的cTCR，也包括本文所指的STAR)包含对末端脱氧核苷酰转移酶(TdT)或TdT肽具有特异性的单链片段可变物(scFv)。可以使用与受体相关的任何实施方式，包括非天然的TCR多一些实施方式中在结构上包含含有α链和β链的二硫键连接的膜锚定异二聚体蛋白，且TCR[0152]NGAIAWSNQTSFTCQDIFKETNATYPSSDVPCDATLTEKSFETDMNLNFQNLLVIVLRIL[0154]EDLRNVTPPKVSLFEPSKAEIAN[0155]QAYKESNYSYCLSSRLRVSATFWHNPRNHFRCQVQFHGLSEEDKWPEGSPKPVTQNISAE[0162]可以使用本领域公知的许多不同的表位作图技术来鉴定给定多肽的表位区，包81:3998_4002(1984)；Geysenetal.Proc.Natl.Acad.Sci.USA82:178_182(1985)；Geysenetal.Molec.Immunol.23:709_715(1986)例如，参见EpitopeMapping纳米抗体的方法在PCT公开号WO2015044386A1、WO2010037838A2和Beveretal.,Anal连接。例如，参见SongsivilaiandLachmann,Cl于三抗体、四抗体和高阶抗体多聚体的实施方式(例如，参见Hollingeretal.,ProcNatl.Acad.Sci.USA90:6444_6448(1993)；Polijaketal.,Structure2:1121_1123特异性的抗体。双特异性全抗体可通过Ridgewayetal.,(ProteinEng.,9:616_621,1996)andKrahetal.,(NBiotechnol.39:167_173,2017)中描述的取代工程方法来制变环(或CDR)的长度因抗体分子而异。来自给很高的一级序列相似性/一致性。本领域技术人员可以使用框架区的共识来识别框架区和的三维或三级结构使得框架区更位于分子内部，并提供大部分结构，CDR位于分子的外表中每个区的确切氨基酸。这可以使用多种序列比对方法和算法中的任一种来完成，这些方法和算法可识别构成框架区的保守氨基酸残基，从而识别长度可能不同但位于框架区之间“ANANALYSISOFTHESEQUENCESOFTHEVARIABLEREGIONSOFBENCEJOANDMYELOMALIGHTCHAINSANDTHEIRIMPLICATIONSFORANTIBODY (如C.Chothiaetal.,“Conformationsofimmunoglobulinhypervariableregions,”Nature,vol.342,no.6252,pp.877_883,December1989中所述)；和IMGT(如M._P.Lefrancetal.,“IMGTuniquenumberingforimmunoglobulinandTcellreceptorvariabledomainsandIgsuperfamilyV_likedomains,”Developmental&ComparativeImmunology,vol.27,no.1,pp.55_77,January2003中所述)。这些方法均包括用于鉴定构成可变区的氨基酸残基的唯一编号系统。在大多数抗体分子中，实际接触抗原表位的氨基噬菌体展示文库分析，其中编码哺乳动物抗体Fab片段的基因由噬菌体以被掺入噬菌体外壳中的方式表达。然后允许该表达Fab的噬菌体群体与已固定或可能由不同的外源表达系[0178]在某些方面，亲和力成熟的抗体通过其一个或多个CDR中的一种或多种修饰而增排的亲和成熟，噬菌体展示中采用的CDR和/或框架残基的随机诱变由Rajpaletal.,PNAS.24:8466_8471(2005)andThieetal.,MethodsMolBiol.525:309_22(2009)描述，与Tilleretal.,Front.Immunol.8:986(2017)中演示的计[0180]在某些方面，重链和/或轻链的部分与来自另一个特定物种或属于特定抗体类别抗体类别或亚类的一个或多个CDR，而抗体链的其余部分与来源于另一个物种或属于另一Ann.Allergy,Asthmaa域构成；(v)孤立的互补决定区(CDR)区。这些术语描述于例如，HarlowandLane,Antibodies:ALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratory,NY(1989)；Molec.BiologyandBiotechnology:AComprehensiveDeskReference(Myers,R.A.AdvancedImmunochemistry,2ded.,Wiley_Liss,Inc.NewYork,N.Y.(1990)；号WO88/01649和美国专利号4,946,778和5,260,203中有详细讨论，其公开内容通过引用没有转录后修饰；和/或易于生产、表达和纯化。Skerra，JMol连蛋白III型结构域10、脂质运载蛋白、反钙蛋白、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus布号2010/0285564、2006/0058510、2006/0088908、2005/0106660和PCT公开号WO2006/连接纳米抗体的方法描述于PCT公开号WO2015044386A1，WO2010037838A2和Bever等人，连接。例如，参见SongsivilaiandLachmann,Cl[0204]在某些方面，抗原结合结构域可通过与结合不同抗原的VH和V于三抗体、四体抗体和高阶抗体多聚体的实施方式(例如，参见Hollingeretal.,ProcNatl.Acad.Sci.USA90:6444_6448(1993)；Polijaketal.,Structure2:1121_1123适当特异性的抗体。双特异性全抗体可通过Ridgeway等人(ProteinEng.，9：616_621，一个都由二聚构型的两个可变结构域VH和VL组成。每个可变域的一级结构包括三个高可变变环(或CDR)的长度因抗体分子而异。来自给很高的一级序列相似性/一致性。本领域技术人员可以使用框架区的共识来识别框架区和CDR。已经开发了三种常用的方法来鉴定抗体的CDR：Kabat(如描述于T.T.WuandE.A.Kabat,“ANANALYSISOFTHESEQUENCESOFTHEVARIABLEREGIONSOFBENCEJONESPROTEINSANDMYELOMALIGHTCHAINSANDTHEIRIMPLICATIONSFORANTIBODY述于C.Chothiaetal.,“Conformationsofimmunoglobulinhypervariableregions,”etal.,“IMGTuniquenumberingforimmunoglobulinandTcellreceptorvariabledomainsandIgsuperfamilyV_likedomains,”Developmental&Comparative[0213](3)多肽片段化和肽图谱方法，其中一种从多肽的整个长度产生多个重叠的肽片掺入噬菌体的外壳中的方式表达。然后允许该表达Fab的噬菌体群体与已固定或可能由不[0215]在某些方面，亲和力成熟的抗体通过其一个或多个CDR中的一个或多个修饰而增的亲和成熟，噬菌体展示中采用的CDR和/或框架残基的随机诱变描述于Rajpaletal.,PNAS.24:8466_8471(2005)andThieetal.,MethodsMolBiol.525:309_22(2009)与Tilleretal.,Front.Immunol.8:986(2017)中演示的计[0217]在某些方面，重链和/或轻链的部分与来自另一个特定物种或属于特定抗体类别抗体类别或亚类的一个或多个CDR，而抗体链的其余部分与来源于另一个物种或属于另一Ann.Allergy,Asthmaa片段类型；(iii)由VH和VL结构域构成的F补决定区(CDR)区。这些术语描述于例如，HarlowandLane,Antibodies:ALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratory,NY(1989)；Molec.BiologyandBiotechnology:AComprehensiveDeskReference(Myers,R.A.(ed.),NewYork:VCHSkerra,Meth.Enzymol.,178:497_515(1989)andinDay,E.D.,Advanced[0226]术语Fab片段是指包含VL、VH、CL和CH1结构域的抗体的单VH区与肽接头共价连接以产生二价结构域抗体。二价结构域抗体的两个VH区可以靶向相同是作为抗体与其相关抗原的结合强度与抗体与无关氨基酸序列的结合强度的比较来测量。[0237]有几种实验方法可以由本领域技术人员用来评估任何给定抗体或选择性结合剂M或其中可衍生的任何范围的解离常定接触蛋白中的每个残基。蛋白中的每个氨基酸取代或缺失也不一定会影响结合亲和力。[0246]抗体或免疫球蛋白分子的片段或类似物可以由本领域的技术人员很容易地制片段或类似物的优选氨基和羧基末端出现在功能结构域的边界附近。通过将核苷酸和/或机化的比较方法用于鉴定出现在已知结构和/或功能的其他蛋白中的序列基序或预测的蛋白构象结构域。鉴定折叠成已知三维结构的蛋白序列的标准方法可供本领域技术人员使(在/guide/proteins/)和生物信息学资源门户(在[0248]还设想抗原结合结构域可以是多特异性或多价的，方法是将具有结合相同抗原一个或多个糖基化位点，以增加多肽对抗原的亲和力(美国专利号5,714,350和6,350,乙二醇化多肽可通过与反应性PEG分子(或类似的反应性水溶性聚合物)进行酰化反应或烷[0255]可选地，抗体或抗体的免疫部分可以化学偶联或表达为与其他蛋白的融合蛋优选的二级结合配体是生物素和/或亲和素和链霉亲和素化合物。此类标签的用途为本领团的分子也可用于通过低强度紫外线产生的活性硝化酶中间体与蛋白形成共价键[0260]在抗体药物偶联物(ADC)中，抗体(Ab)通过接头(L)偶联到一个或多个药物部分[0261]本领域技术人员已知的抗体_药物偶联物的实例是可用于局部递送细胞毒性或细胞抑制剂的促药物，即在治疗癌中杀死或抑制肿瘤细胞的药物(SyrigosandEpenetos,的系统施用可能会对正常细胞和目标肿瘤细胞产生不可接受的毒性水平(BaldwinetinCancerTherapy:AReview,”In:MonoclonalAntibodies'84:Biologicaland单克隆抗体在这些策略中都很有用(Rowlandetal.,CancerImmunol.Immunother.21:[0262]在某些方面，ADC包括抗体或其抗原结合片段与其他蛋白或多肽的共价或聚集偶体多肽也可以与(Sigma一Aldrich，St.Louis,Mo.)肽连接，如Hopp等人，Bio/蛋白的Fc区选择性地导入巯基来衍生免疫球蛋白，使用不改变抗体结合位点的反应条件。根据所述方法生产的抗体偶联物被披露具有更高的寿命、特异性和敏感性(美国专利号5,一种修饰的活性或功能(认识到蛋白或多肽可以具有多种活性或功能)。特别考虑到修饰/野生型活性或功能。者任选地是指其中任何信号序列已被去除的蛋白。该蛋白可以直接从其天然生物体中分作的核酸分子或者是此类分子的复制产物产生联具有特定功能的异源蛋白或多肽序列来改变(例如，用于靶向或定位，用于增强免疫原变体氨基酸或核酸取代，或与SEQIDNO：4～19为至少606162636465%,666768697071727374757677787980%,818283848586878889909192939495%,多或正好60616263646566676869707172%,737475767778798081828384858687%,888990919293949596979899％或100％(或其中的任算机化数据库中找到。两个常用的数据库是美国国家生物技术信息中心的Genbank和GenPept数据库(在/)和通用蛋白资源(UniProt；在[0277]以下是关于改变抗体和/或受体相关蛋白的氨基酸亚基以产生等效的、甚至改进列及其相应的DNA编码序列中进行某些氨基酸取代，并且仍然产生具有相似或理想特性的[0283]取代变体通常包含在蛋白或多肽内的一个或多个位点将一个氨基酸交换为另一基于亲水性指数进行更改时，在某些实施方式中，包括氨基酸亲水性指数在±2以内的取[0290]本领域技术人员还可以分析相似的蛋白或多肽中的该相关结构的三维结构和氨可以在/proteomics/protein_structure上找酸序列，该多肽在序列的整个长度上具有至少90优选95％及以上的与本文中描述的氨372,745个(例如，参见Antibodies:ALaboratoryManual,ColdSpringHarbor术在溶液中或在固体载体上合成。例如，参见StewartandYoung,(1984)；Tarnetal,如亲和色谱法(HarlowandLane,Antibodies:ALaborat[0304]制备单克隆抗体的方法在本领域也是众所周知的(KohlerandMilstein,1975；[0305]用于产生单克隆抗体的其它技术包括病毒或致癌转化B淋巴细胞，可以使用分子克隆方法生成核酸或多肽，选择的淋巴细胞抗体方法(SLAM)(例如参见Babcooketal.,[0306]可以使用过滤、离心和各种色谱方法(如HPLC或亲和色谱)进一步纯化单克隆抗[0307]特定免疫原组合物的免疫原性可通过使用免疫反应的非特异性刺激剂(称为佐扩增抗体分子群。Saiki,etal.,Nature324:163(1986)；Scharfetal.,Sal.,ProcNatlAcadSciUSA在没有内源性免疫球蛋白产生的情况下产生一系列人抗体。用于此目的的抗原通常具有6因动物是通过使编码小鼠免疫球蛋白重链和轻链的内源性小鼠免疫球蛋白基因座丧失能力，并将含有编码人重链和轻链蛋白的基因座的人基因组DNA的大片段插入小鼠基因组来际专利申请公布号WO91/10741和WO90/04036；以及欧洲专利号EP546073B1和EPγ)和ĸ轻链免疫球蛋白序列的人免疫球蛋白基因微位点，以及使内源性μ和ĸ链变，以产生高亲和力人IgGĸ单克隆抗体(Lonbergetal.,supra；LonbergandHuszar,536_546(1995))。HuMAb小鼠的制备在Tayloretal.,Nucl.AcidsRes.20:6287_6295al.,Nat.Genetics15:146_156(1997)中也披露了用于在这些转基因小鼠中产生人抗体的Inbaretal.,Proc.Nat.Acad.Sci.USA69:2659_2662(1972)；Hochmanetal.,不同的VL和VH组成的多肽，可以形成与不同表位结合的多聚体scFv(Kriangkumetal.,5879_5883(1988)。设计标准包括确定跨越一条链的C端和另一条链的N端之间距离的适当片段包括通过氨基末端和/或羧基末端缺失获得的片段，其中剩余的氨基酸序列与自然发的某些优点。这些类似物可以是肽、非肽或肽和非肽区的组合。Fauchere,Adv.DrugRes.15:29(1986)；VeberandFreidiner,TINSp.392(1985)；andEvansetal.,的重链和轻链部分的编码序列可以分离或合成并克隆到任何合适的载体或复制子中进行[0319]本公开的实施例包括治疗个体的因细胞表面存在与HLA_A02相关的TdT或TdT肽而的医疗状况的一个或多个症状出现之前和/[0321]在一些实施方式中，表达TdT特异性cTCR和/或STAR疗法的细胞和TdT特异性BiTE及第三种或多种疗法依次施用。在一些实施方式中，在施用TdT特异性BiTE治疗之前施用用TdT特异性BiTE疗法之后施用的。在各种实施方式中，TdT特异性cTCR和/或STAR疗法和TdT特异性BiTE疗法基本上同时施用，因为表达TdT特异性cTCR和/或STAR的细胞是表达和和TdT特异性BiTE疗法基本上同时施用，但表达TdT特异性cTCR和/或STAR的细胞不是表达法和TdT特异性BiTE疗法在不同的时间施用，且表达TdT特异性cTCR和/或STAR的细胞不是可能是也可能不是构成TdT特异性cTCR和/或STAR蛋白[0326]在一些实施方式中，TdT特异性cTCR和/或STAR蛋白和/或BiTE蛋白以1mg/kg~物种和器官/组织。关于摄取和浓度测量所要做出的适用换算系数和生理学假设是众所周[0337]无菌注射溶液的制备方法是将所需量的活性化合物与上述各种其他成分掺入适[0338]组合物的施用通常通过任何公共途径进行。这包括但不限于口服或静脉内施特异性STAR和/或TdT特异性BiTE)可以培养至少在约10天～约40天之间，至少在约15天~细胞的需要修饰或调节培养基和/或培养基补充剂的浓度是本领域技术人员的技能范围。在一些实施方式中，培养基制剂可以是外植体培养基(CEM)，其由补充有10％胎牛血清威尔公园纪念研究所培养基1640(RPMIMedia1640)等。通常，在上述培养基中加入高达丝分裂化合物或用于细胞培养的分化化合物。细胞可以在27℃~40℃的温度(例如31℃~在培养容器中，特别是补充有适合并经测定的用于保护细胞免受体外老化和/或诱导非特与细胞粘附到其上的底物表面相容的底物表面，使得铺板的细胞可以接触所述底物表面，链反应(RTPCR)可用于定量细胞特异性基因和/或监测基因表达响应分化[0350]本公开实施例利用了与TdT肽结合的嵌合受体(包括T细胞受体和其他)。T细胞受α:β异二聚体在结构上与免疫球蛋白分子的Fab片段非常相似，它们解释了大多数T细胞的成，分别命名为γ和δ。两种类型的T细胞受体都不同于作为B细胞受体的膜结合免疫球蛋[0351]T细胞受体的两条链都有一个与免疫球蛋白V结构域同源的氨基末端可变(V)区，修饰/变体的蛋白或多肽具有至少一种修饰的活性或功能(识别蛋白或多肽可以具有多种者任选地是指其中任何信号序列已被去除的蛋白。该蛋白可以直接从其天然生物体中分常是指具有本领域技术人员可识别的结构或功能的氨任何衍生范围)或更多的变体氨基酸取代或在至少或最多或其中的任何衍生范围)606162636465666768697071727374%,757677787980818283848586878889%,90919293949596979899％或100％(或其中的任何可衍生范或其中的任何衍生范围)机化数据库中找到。两个常用的数据库是美国国家生物技术信息中心的和数据库(在/)和TheUniversalProteinResource性STAR和TDT特异性BiTE可能有单独的表达载体，或者它们可以由相同的一个或两个载体本领域已知的多种方法转染到细胞中。载体DNA可通过常规转化或转染技术导入原核或真核细胞中。一些载体可能采用控制序列，使其能够在原核细胞和真核细胞中复制和/或表达。在某些方面，抗体表达构建体可以置于与T细胞激活相关的启动子的控制下，例如由的控制使T细胞(例如靶向肿瘤的T细胞)能够感知其周围环境，并在T细胞本身和周围的内[0381]在具体实施方式中，本公开的细胞包含外源性TCR，其可以具有确定的抗原特异排斥的发育过程抑制内源性TCR基因座的重排和/或表达，导致T细胞仅表达非同种异体反肽的表达载体可以作为预防性治疗给予受试者。此外，(例如单硬脂酸铝和明胶)可以延长注射组[0389]无菌注射溶液的制备方法是将所需量的活性化合物与上述列举的各种其他成分[0390]组合物的施用通常通过任何公共途径进行。这包括但不限于口服或静脉内施[0397]末端脱氧核苷酰转移酶(TdT)是一种在T细胞和B细胞祖细胞递的表面肽进行了荟萃分析(meta_analysis)，并确定了在西方世界的显性I类MHC等位基系BV173共培养72小时中评估表达TdT特异性构建体的T细胞的细胞毒性。一种TdT特异性cTCR构建体对白血病细胞产生了稳健的细胞毒性，而其他克隆则表现出较低的活性(图[0398]为了评估cTCRT细胞的特异性，对恶性和正常淋巴细胞进行72小时的共培养测BV173和NALM6白血病产生高细胞毒性，但对阴性对照CCRF_CEM(TdT+/HLA_A2_)和THP_1巴细胞的细胞毒性，而对照CD19CART细胞预期地杀死了自体CD19+B细胞(图4B)。[0399]由于在噬菌体展示筛选中鉴定的TdT特异性结合子在没有CD8辅助受体帮助的情[0401]图7示出了嵌合TCR的一个实施方式，其中抗体的VH和VL上，与包含嵌合TCR的单独链上的可变重区和可变轻区的STAR受体相反(Liuetal.,SciTranslMed.2021；13(586):eabb5191)。图8cTCRT细胞和BiTET细胞对MLL细胞的代表性癌细胞系(TdT+、HLA_A2+)的细胞毒性的证来说显而易见的所有此类类似的取代物和修改均被视为符合所附权利要求所定义的发明[0407]2.Lulla,P.D.,Mamonkin,M.MyeloidLeukemiaandT_CellAcuteLymphoblasticLeukemia.CancerJ25,19