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文档简介
2026年病理切片制作培训试题(附答案)一、单项选择题(每题1分,共25题,总计25分。每题只有1个正确答案,多选、错选均不得分)1.根据《临床病理技术操作规范(2024版)》要求,常规病理送检标本使用的10%中性缓冲福尔马林固定液,实际有效甲醛浓度范围为A.1.5%~2.0%B.3.7%~4.0%C.7.5%~8.0%D.10%~12%2.国标GBZ2.1-2019规定的病理技术人员职业接触甲醛的时间加权平均容许浓度(PC-TWA)限值为A.0.5mg/m³B.1.0mg/m³C.1.5mg/m³D.2.0mg/m³3.内镜下取材的直径≤2mm的小活检标本,固定液体积应至少达到标本体积的A.2倍B.5倍C.10倍D.20倍4.常规HE石蜡切片的标准化厚度要求范围是A.1μm~2μmB.3μm~5μmC.6μm~8μmD.9μm~12μm5.术中快速冷冻切片的标准化厚度要求范围是A.1μm~2μmB.2μm~3μmC.4μm~8μmD.10μm~15μm6.适配数字病理远程会诊、AI辅助病理诊断的全切片扫描设备,最低分辨率要求为A.0.25μm/像素B.0.5μm/像素C.1μm/像素D.2μm/像素7.病理取材后,常规实体标本的最长允许室温放置时间(未投入固定液)不得超过A.30分钟B.2小时C.6小时D.24小时8.骨组织、钙化组织脱钙处理的合格终点判定金标准是A.针刺无明显阻力B.标本变软可弯折C.重量降至初始重量的20%以下D.脱钙液连续30分钟pH值维持在7.0±0.2无变化9.病理感染性废弃物(含接触过结核、新冠等病原的标本切片)的高压灭菌处理规范参数为A.105℃,80kPa,作用10分钟B.121℃,103kPa,作用20分钟C.134℃,120kPa,作用5分钟D.140℃,140kPa,作用3分钟10.采用柠檬烯作为环保透明剂替代传统二甲苯时,透明工序的重复使用次数不得超过A.50次/升B.100次/升C.300次/升D.500次/升11.苏木素染色后使用的分化液,1%盐酸乙醇溶液的乙醇体积分数为A.30%B.50%C.70%D.95%12.免疫组化抗原修复流程中,柠檬酸缓冲液体系的标准pH值为A.6.0B.7.2C.8.0D.9.013.含糖原的组织标本行PAS特异性染色时,需要设置的专属对照是A.酸性高锰酸钾消化对照B.淀粉酶消化对照C.过氧化氢封闭对照D.正常血清封闭对照14.防脱载玻片使用多聚赖氨酸包被时,推荐的工作浓度范围是A.0.01%~0.05%B.0.05%~0.1%C.0.5%~1%D.2%~5%15.脂肪含量占比超过80%的乳腺、脂肪瘤标本,脱水工序中100%乙醇的浸润时间需较常规标本A.缩短20%B.保持不变C.延长50%~100%D.延长300%以上16.常规石蜡包埋所用石蜡的最优熔点选择范围是A.42℃~46℃B.56℃~58℃C.65℃~68℃D.75℃~78℃17.抗酸杆菌特殊染色流程中,酸性乙醇脱色剂的乙醇体积分数为A.75%B.85%C.95%D.100%18.病理切片制作全流程记录中,患者标本的唯一溯源标识是A.患者姓名B.病理号C.送检科室名称D.送检医师姓名19.术中冷冻切片诊断完成后,剩余冷冻组织块的法定留存期限为A.1年B.5年C.10年D.30年20.行Masson三色染色显示胶原纤维时,胶原纤维的标准显色结果应为A.黑色B.蓝色C.红色D.黄色21.全自动HE染色机日常维护中,染液的常规全部更换周期最长不得超过A.1个月B.3个月C.6个月D.12个月22.病理废水预处理工序中,甲醛去除剂的最优投放比例为每升废水投放A.1g~2gB.5g~10gC.20g~30gD.50g以上23.脑脊液、胸腹水细胞块包埋制作时,离心沉淀的推荐转速和时间为A.1000r/min,5分钟B.3000r/min,10分钟C.5000r/min,20分钟D.10000r/min,30分钟24.常规HE切片质量评分体系中,属于A级优质切片的细胞核质染色清晰度要求是A.核质对比清晰,核染色质颗粒分明,细胞质显色饱满分层B.核质略模糊,部分区域染色不均C.核质对比差,超过30%区域细胞结构不清D.细胞结构完全破坏无法辨识25.病理切片制作过程中,切片机的使用校准频次最低要求为A.每周1次B.每月1次C.每季度1次D.每年1次二、多项选择题(每题2分,共15题,总计30分。每题有2个及以上正确答案,少选、错选、漏选均不得分)1.病理标本固定不充分时,后续切片制作环节可能出现的典型问题包括A.细胞自溶、核染色质结构消失B.组织硬度不足切片出现碎屑、褶皱C.抗原位点丢失导致免疫组化染色结果假阴性D.组织边缘硬化、脆裂无法连续切片2.传统二甲苯作为透明剂的职业危害包括A.眼黏膜刺激损伤B.中枢神经麻痹毒性C.长期接触可致造血系统损害D.属于一类强致癌物质3.石蜡切片连续制作过程中,出现切片厚薄不均、跳片的可能诱因包括A.切片机夹头固定松动B.组织块未完全冷却、硬度不足C.切片刀出现缺口、卷刃D.组织块内存在钙化碎屑未剔除4.苏木素染色过深、细胞核染色成块蓝染无法分辨染色质结构时,可采取的纠正措施包括A.延长1%盐酸乙醇分化时间B.适当提高分化液温度至30℃~35℃C.返回到苏木素染液中重新染色D.增加流水返蓝的时间5.目前临床病理实验室常用的免疫组化抗原修复方法包括A.高温高压热修复B.微波热修复C.酶消化修复D.冷冻低温修复6.符合我国环保要求的病理切片制作替代试剂包括A.柠檬烯系列透明剂B.无甲醛固定液C.乙醇基环保脱水剂D.二甲苯基脱蜡剂7.术中冷冻切片制备过程中,组织出现大量冰晶影响阅片的诱因包括A.组织未及时放入冷冻机速冻平台,室温放置时间过长B.速冻温度设置低于-30℃,冰晶快速析出C.组织表面残留水分过多未擦拭干净直接冷冻D.采用OCT包埋剂完全包裹组织进行冷冻8.病理切片制作全流程的生物安全防控要点包括A.取材环节全程在生物安全二级取材柜内操作B.所有接触标本的废弃物经高压灭菌后再处置C.操作全程佩戴医用外科口罩、防渗透手套D.实验结束后对操作台面使用1000mg/L含氯消毒剂擦拭消毒9.可特异性显示组织内胶原纤维的特殊染色方法包括A.Masson三色染色B.VG维多利亚蓝染色C.抗酸染色D.PAS染色10.小活检标本(内镜黏膜活检、经皮穿刺活检)全流程防丢失的规范操作要求包括A.标本离体后10分钟内投入固定液,禁止裸手直接接触标本B.取材时使用滤纸完全包裹标本后再放入脱水盒C.包埋环节在体视显微镜下确认所有标本组织完全埋入石蜡块内D.切片完成后确认所有组织面完整展现在载玻片上11.常规HE合格切片的质控判定标准包括A.切片完整,无褶皱、裂隙、污染、印片重叠B.核质染色对比清晰,无片染、背景杂质C.封片使用中性树胶无气泡,盖玻片无错位超出载玻片边缘D.附贴在防脱片载玻片上,染色过程中无脱片12.数字病理全切片扫描前的切片预处理要求包括A.切片无多余残留石蜡、无污渍、无指纹印B.染色后的切片充分干燥,无残留透明剂、脱水剂挥发痕迹C.载玻片边缘无黏附的残留胶、组织碎屑,避免遮挡扫描写位标识D.切片厚度均匀,无明显厚薄差导致的扫描失焦13.骨组织病理常用的合规脱钙液体系包括A.10%硝酸脱钙液B.14%乙二胺四乙酸(EDTA)温和脱钙液C.浓盐酸脱钙液D.氢氟酸脱钙液14.病理切片制作过程中,用于防控免疫组化非特异性片染的操作要点包括A.抗原修复后充分使用PBS缓冲液冲洗3次,每次5分钟B.采用5%~10%正常动物血清封闭非特异性位点C.一抗孵育浓度严格按照试剂说明书配比,避免浓度过高D.DAB显色时间严格把控,避免显色时间过长15.病理切片制作全流程的必填溯源记录信息包括A.标本接收时间、固定液类型、固定时长B.脱水机程序编号、脱水起止时间、试剂批号C.包埋操作人员编号、切片操作人员编号、染色试剂批号D.切片质控结果判定时间、质控人员签字三、判断题(每题1分,共10题,总计10分。表述正确打√,错误打×)1.为加快大体积实体标本的固定速度,可将未切开的20cm×15cm×10cm手术切除标本直接整块投入10倍体积的固定液中静置,无需切开暴露剖面。2.柠檬烯作为环保透明剂完全无毒性,可无限次重复使用无需定期更换,不会导致组织透明不充分的问题。3.石蜡切片完成后,组织块剩余的石蜡部分按照要求需归档留存至少15年,符合《病理科建设与管理指南(2023版)》的规定。4.行HE染色时,流水返蓝工序使用的自来水pH值需维持在7.0~7.5之间,酸性过高会导致返蓝不充分、细胞核染色发灰。5.免疫组化染色工序中,只要设置了阳性对照,就不需要同步设置阴性对照片来排除非特异性染色干扰。6.组织脱水工序中,梯度乙醇的浓度从70%、80%、95%到100%逐步提升,可避免组织快速收缩变硬脆裂。7.术中冷冻切片完成后的染色剩余组织标本,可直接作为医疗废弃物丢弃,不需要归档留存。8.防脱载玻片使用前需放置在60℃烘箱内烘烤30分钟以上,完全烘干水分后方可涂抹多聚赖氨酸包被液。9.病理技术人员操作时接触到的10%中性缓冲福尔马林固定液,不会产生挥发性甲醛气体,不需要在通风橱内操作。10.采用环保无二甲苯工艺制作的HE切片,染色质量、封片保存寿命与传统二甲苯工艺制作的切片完全一致,可满足长期归档存储要求。四、实操问答题(每题11.25分,共3题,总计35分)1.请简述常规HE石蜡切片制作全流程的标准化操作步骤,以及每个核心环节的质控要点。2.某病理技术人员批量制作120张肺穿刺小活检HE切片,染色后发现有18张切片出现不同程度的组织脱落,占比15%,请分析可能的全部诱因,并给出对应的整改解决方案。3.某三甲病理科计划于2026年完成全实验室无二甲苯环保工艺改造,请给出完整的工艺替换方案、质控验证标准以及职业健康防护优化措施。-----------------------参考答案一、单项选择题1.答案:B解析:市售福尔马林为37%~40%甲醛水溶液,按体积比1:9稀释于中性磷酸盐缓冲液中得到的10%中性缓冲福尔马林,实际有效甲醛浓度为3.7%~4.0%,是病理标本固定的最优浓度范围。2.答案:A解析:符合我国职业卫生国标GBZ2.1-2019的明确限值要求,病理科需安装甲醛浓度实时报警装置,浓度超标需立即启动通风排毒。3.答案:D解析:小活检标本体积微小,固定液占比不足会导致标本边缘固定充分、中心自溶,因此固定液体积需达到标本20倍以上,确保固定完全。4.答案:B解析:3μm~5μm厚度的切片可清晰展示单层细胞结构,避免细胞重叠,符合常规病理阅片的标准化要求。5.答案:C解析:冷冻组织硬度低于石蜡组织,4μm~8μm厚度可兼顾细胞清晰度与组织结构完整性,避免脂肪组织切片碎裂。6.答案:A解析:0.25μm/像素的扫描分辨率可实现400倍等效光学放大效果,完全满足AI辅助病理诊断、远程会诊的精度要求。7.答案:B解析:离体标本室温放置超过2小时未固定会出现细胞自溶、核抗原降解,影响后续所有制片、诊断环节结果准确性。8.答案:C解析:重量降至初始重量20%以下是脱钙完全的定量判定金标准,其余方法均为经验性判定,存在脱钙不足或过度脱钙导致组织结构破坏的风险。9.答案:B解析:该参数可完全灭活包括分枝杆菌、真菌、病毒在内的所有病原微生物,确保病理废弃物处置符合院感要求。10.答案:C解析:每升柠檬烯透明剂处理病理组织的最大耐受量为300次切片,超过该数值后透明效率下降,有害残留量升高。11.答案:C解析:1%盐酸乙醇分化液采用70%乙醇作为溶剂,可避免分化阶段组织过度吸水膨胀,导致细胞结构破损。12.答案:A解析:pH6.0柠檬酸缓冲液是临床免疫组化应用最广泛的抗原修复体系,适配90%以上常规抗体的修复要求。13.答案:B解析:淀粉酶可特异性消化组织内糖原,排除糖原染色与黏蛋白染色的结果混淆,确保PAS染色结果判读准确。14.答案:B解析:0.05%~0.1%浓度的多聚赖氨酸包被的载玻片黏附力适中,不会出现载玻片背景染色偏高的问题。15.答案:C解析:脂肪组织疏水属性强,延长100%乙醇脱水时间50%~100%可确保脂肪完全被置换去除,避免后续透明不充分。16.答案:B解析:56℃~58℃熔点的石蜡硬度适中,切片时不易出现碎屑、褶皱,可连续切出3μm~5μm的均匀切片。17.答案:C解析:95%乙醇配制的酸性脱色剂脱色效率稳定,可实现抗酸杆菌保留红色、背景完全脱为蓝色的显色效果。18.答案:B解析:病理号是病理标本全流程的唯一溯源标识,具备唯一性、终身可追溯属性。19.答案:C解析:符合《病理科建设与管理指南(2023版)》规定,术中冷冻标本剩余组织块留存期限为10年。20.答案:B解析:Masson三色染色的标准结果为胶原纤维蓝色,肌纤维红色,细胞核黑色,区分结缔组织与肌组织效果优异。21.答案:B解析:全自动染色机的苏木素、伊红染液连续使用3个月后染色效率明显下降,背景杂质升高,需全部更换新液。22.答案:B解析:每升废水投放5g~10g甲醛捕获剂可将废水甲醛浓度降至国家污水排放一级标准限值以下。23.答案:B解析:3000r/min离心10分钟可将胸腹水内的脱落细胞完全沉淀,避免细胞丢失,制备的细胞块细胞量充足。24.答案:A解析:该类切片为A级优质切片,可直接用于常规阅片、数字病理扫描、教学存档。25.答案:B解析:每月校准切片机的切片推进精度、刀架夹角,可避免切片跳片、厚薄不均的问题出现。二、多项选择题1.ABCD2.ABC3.ABCD4.AB5.ABC6.ABC7.ABC8.ABCD9.AB10.ABCD11.ABCD12.ABCD13.AB14.ABCD15.ABCD三、判断题1.×解析:大体积标本厚度超过1cm时需每隔1cm做深切线,暴露内部剖面,确保固定液充分渗透。2.×解析:柠檬烯长期使用会氧化变质,透明效率下降,需定期监测透明效率,每300次/升后及时更换。3.√4.√5.×解析:免疫组化染色必须同步设置阳性对照、阴性对照、空白对照,排除非特异性染色干扰。6.√7.×解析:冷冻剩余组织块需全部归档留存10年,不得随意丢弃。8.√9.×解析:10%中性缓冲福尔马林仍然会挥发出甲醛气体,操作需在通风橱或通风柜内进行。10.√四、实操问答题1.答:常规HE石蜡切片制作全流程标准化步骤及质控要点如下:第一环节为固定,将离体1小时内的标本投入10%中性缓冲福尔马林固定液中,固定液体积为标本10~20倍,常温固定6~24小时,质控要点为固定时间不得少于6小时,大标本厚度超过1cm需切开,避免固定不充分;第二环节为脱水透明,采用梯度乙醇70%、80%、95%Ⅰ、95%Ⅱ、100%Ⅰ、100%Ⅱ逐级脱水,随后投入柠檬烯透明剂透明2次,质控要点为脱水机程序根据组织类型设定,脂肪组织延长脱水时间,透明至组织完全透亮无白色雾状区域;第三环节为浸蜡包埋,透明后的组织投入3个梯度石蜡中浸蜡总时长2~4小时,随后使用包埋机将组织按规范方位埋入石蜡块内,质控要点为浸蜡温度不得超过60℃,避免组织抗原破坏,组织包埋面平整,无歪斜;第四环节为切片展片,将冷冻至-20℃的组织块安装在切片机夹头上,先粗修暴露全部组织面,随后调整切片厚度至3~5μm,连续切片后将切片铺展在45℃恒温水浴槽上,使用防脱载玻片捞片,质控要点为水浴槽内无残留乙醇、组织碎屑,切片无褶皱、无裂隙、无重叠;第五环节为烤片染色,捞片后的载玻片放入70℃烘箱内烤片30分钟,随后进入全自动染色机完成脱蜡、苏木素染色、分化、返蓝、伊红染色全流程,质控要点为烤片充分避免脱片,染色后核质对比清晰,显色层次分明;第六环节为封片归档,染色完成后的切片使用环保封片胶封片,禁止出现气泡、溢胶,贴好病理号标签后归档存储,质控要点为中性树胶浓度适中,盖玻片平整,无多余胶溢出污染载玻片。2.答:切片脱落的诱因及整改方案如下:第一类诱因是载玻片包被不合格,多聚赖氨酸浓度过低、包被后未充分烘干导致黏附力不足,整改方案为重新配制0.05%浓度多聚赖氨酸包被液,载玻片清洗完全无水渍后浸润包被10分钟,60℃烘烤2小时以上备用;第二类诱因是小活检标本固定不充分,组织过软黏附力不足,整改方案为规范小标本
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