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文档简介
团体标准《桑叶饲用技术规程团头鲂》编制说明《桑叶饲用技术规程团头鲂》团标制定组2026年6月
目录1. 任务来源 52. 编制目的和意义 53. 编制的经济效益、生态效益、社会效益 73.1经济效益 73.2生态效益 83.3社会效益 84. 实施可行性 95. 编制原则和依据 106. 编制过程 116.1准备阶段 116.2编制阶段 126.3主要编制人员分工 127. 国内外有关现状 138. 编写学术依据 138.1桑叶在水产饲料中的应用研究进展 138.2桑叶在水产饲料中应用的适宜添加水平 168.3桑叶对团头鲂生长、血清生化指标及肠道微生物与代谢组学的影响 189. 采用的国际标准 3810. 与现行法律法规和强制性标准的关系 3811. 重大分歧意见的处理经过和依据 3912. 标准作为强制性或推荐性标准的意见 3913. 贯彻标准的要求和措施建议 3914. 废止现行有关标准的建议 3915. 其他应予说明的事项 39
任务来源我国每年进口大豆1亿吨左右,蛋白饲料资源短缺是长期制约我国畜牧业可持续发展的瓶颈。木本源饲料具有蛋白含量高、生物量大、功能成分丰富等优势,开发利用饲料桑新型蛋白饲料资源,形成饲料豆粕减量替代新方案,是实现畜牧业高质量发展的重大需求。在此背景下,国家十四五科技项目“木本源新型蛋白饲料加工与高效转化技术”(2022YFD1300900)立项。项目聚焦木本源饲料植物丰产技术体系不完善、加工工艺待优化、功能物质挖掘不充分、饲用不精准等突出问题,通过科学问题解析、关键技术攻关和集成示范,建立节本降损、提质增效的木本源饲用产品加工及畜禽精准高效利用全产业链,提升我国木本源饲料产业综合效益和竞争力,践行“大食物观”,服务乡村振兴和“双碳”战略。为了更好的推广应用十四五科技项目“木本源新型蛋白饲料加工与高效转化技术”(2022YFD1300900)各项科研成果,规范化使用饲料桑新型蛋白饲料资源,现制定《桑叶饲用技术团头鲂》,进而实现对饲料企业、桑叶种植加工企业和农村地区群众利用桑叶饲料饲喂团头鲂提供技术指导和服务,推动非常规饲料资源桑叶产业的规范化、科学化发展。编制目的和意义饲料是养殖业的基础,约占养殖成本的70%。2022年我国粮食中的谷物、豆粕以及粮食加工副产品饲用消费达39190万吨,占粮食消费总量48%,高于33%的食用和17%的工业用消费占比,养殖业饲粮需求庞大。但作为主要饲料原料的玉米和豆粕,在我国的生产量远不及需要量。据联合国粮食与农业组织(FAO)统计,2021年国内玉米产量达到2.72亿t,同年国内进口玉米3270万t,创历史新高;2021年国内大豆进口量9912万t左右,同年大豆总产量为1640万t,仅为进口量的16%。伴随养殖业的快速发展,动物对粮食饲料的需求量不断增加,常规饲料原料供给量相对减少,进口依赖性大,人与动物争粮矛盾越来越突出,开发利用非常规饲料资源有利于缓解该局面,以确保动物生产的可持续性,已成为养殖业可持续健康发展的重要课题。针对豆粕短缺问题,我国开展了饲用豆粕减量替代工作,豆粕在饲料消耗中占比呈逐年下降趋势,饲用豆粕用量逐年减少,统筹利用可替代优质蛋白饲料资源也亟待解决。水产养殖业被认为是世界上发展速度最快、规模最大的产业之一,对世界经济的贡献举足轻重。水产是动物性优质蛋白的重要来源,17%的动物性蛋白来自水产养殖,预计到2025年需要增加水产饲料3.7×107kg,到2030年水产养殖产量达1×108kg(联合国粮农组织FAO)。随着树立大食物观中“向江河湖海要食物”的提出,越来越多的人开始聚焦于水产养殖业。水产养殖每生产1kg干物质消耗的饲料仅为畜禽蛋奶类的1/2-1/5,发展水产养殖可在增加水产动物性蛋白供给的同时,降低粮食资源的消耗。在水产动物中,当前的团头鲂饲养以人工配合饲料为主,且蛋白质的主要来源是豆粕和鱼粉。蛋白质是维持鱼类正常生理活动的基础营养物质,它提供的氨基酸和部分肽参与鱼类的生长、体蛋白沉积和组织蛋白代谢更新,及用于构成激素和酶催化或调节基本生理活动。水产配合饲料中蛋白质原料以豆粕、棉粕和菜籽粕等植物性原料为主。然而,鱼类饲料中的主要蛋白源豆粕面临着来源不足、价格上涨等问题,另一方面,大豆含有多种抗营养因子,过量使用会损害团头鲂健康。近年来,高密度、集约化的水产养殖模式的推广以及养殖规模的不断扩大,鱼类的产量持续增加,养殖产量的增加意味着对饲料的需求加大,在全球饲料原料资源愈发紧缺、价格不断攀升的大背景下,寻找新的原料来源替代鱼粉、豆粕等饲料原料已成为动物营养学界共同研究的课题。我国蛋白质饲料资源丰富,种类繁多,但仍存在蛋白质饲料短缺的问题。蛋白质作为鱼类生长所必需的营养素,在鱼类饲料中所占比例最大,随着蛋白质资源短缺,鱼类养殖成本进一步提高。加快非常规饲料原料营养价值评价与应用,可进一步降低水产饲料对粮食类饲料资源的需求。因此,在保证鱼类健康和生产的前提下,需尽可能避免饲粮中蛋白质浪费,精准供给和加快开发非常规饲料资源势在必行。桑叶是传统的家蚕饲料,其营养成分全面,具有较高的蛋白质营养价值和富含生物活性物质,可作为养殖业的非常规饲料资源,开发潜力和利用价值极大,且桑叶作为动物饲料的安全性已经得到验证。此外,桑叶具有产量高、适口性好等特点,能够提高动物生产性能及动物产品品质,降低饲料成本和提高动物免疫力,是优良的动物饲料,可刈割鲜食或饲喂干桑叶,有利于缓解我国饲料来源压力。而且我国丰富的桑叶资源使桑叶饲料商品化生产成为可能。开发及合理利用桑叶不仅可以有效缓解常规饲料资源的不足、降低生产成本并增强动物的机体健康、提升动物产品的品质,而且能够解决资源浪费问题、增加农民收入、改善环境、促进饲料加工业的发展,促使养殖业朝着良性循环发展,走可持续发展路线。编制的经济效益、生态效益、社会效益3.1经济效益(1)降低水产饲料生产成本,压缩养殖投入豆粕价格常年高位波动,本试验证实饲料中可用8%桑叶粉等比例替代豆粕,饲料粗蛋白、粗脂肪维持稳定,不影响团头鲂生长性能。桑叶原料采购成本远低于商品豆粕,饲料企业添加桑叶后可直接减少豆粕采购用量,每吨配合饲料原料成本显著下降;养殖户使用桑叶型配合饲料,饵料系数稳定无恶化,单位鱼增重饲料投入降低,规模化养殖可形成可观成本节约。同时,桑叶可就地刈割、就地加工,桑园种植户无需复杂深加工即可向饲料厂供应桑叶粉,省去长途粮食原料运输成本,全产业链原料流通成本进一步降低。(2)提升团头鲂商品鱼品质,提高水产品溢价饲料添加适宜比例桑叶可显著改善团头鲂肉质:肌肉硬度、咀嚼性、剪切力等质构指标提升,肌肉必需氨基酸、风味氨基酸含量显著增加,粗脂肪含量下降,鱼肉低脂高蛋白、口感紧实、风味更佳。优质商品鱼可进入商超、生鲜精品渠道,相比普通养殖团头鲂售价提升,拓宽养殖户盈利空间;同时高品质水产品可打造特色水产品牌,提升产品市场竞争力。(3)延伸蚕桑产业链,拓宽桑农增收渠道传统蚕桑仅依靠蚕茧单一收益,产业链短、抗风险弱。推广桑叶饲用团头鲂技术后,桑园每年可多次刈割桑叶供应饲料加工,桑农新增桑叶售卖稳定收入;同步催生桑叶烘干、超微粉碎、发酵桑叶加工等配套小微企业,创造桑叶加工、饲料生产、水产养殖配套就业岗位,形成“桑-渔”循环种养复合收益,提升桑园单位土地综合产出,改变种桑低收入现状。(4)减少养殖防病用药,节约病害防治成本桑叶活性成分可改善团头鲂肠道消化酶活力、优化肠道有益菌群结构(厚壁菌门、芽孢杆菌丰度提升),提高溶菌酶、SOD、CAT等抗氧化免疫指标,降低肝脏损伤、细菌性病害发病概率,减少保肝、抗菌类药物采购与使用,大幅降低水产病害防控投入,减少养殖损失。3.2生态效益(1)构建桑渔循环种养模式,实现种养废弃物资源化利用桑园可吸收水产养殖尾水氮磷养分,减少水体富营养化;水产养殖塘底淤泥可作为桑园有机肥,替代化肥,形成“桑园产桑叶饲喂团头鲂、鱼塘淤泥还田养桑”闭环循环体系,减少化肥、化学肥料施用,降低农业面源污染。废弃桑枝叶不再露天焚烧,消除秸秆焚烧带来的大气污染。(2)减少粮食消耗,助力“双碳”战略落地生产1吨豆粕需消耗大量耕地、水资源,大豆长途运输、加工碳排放高;桑叶为多年生木本植物,固碳能力强,桑林具备显著碳汇功能,以桑叶替代粮食型蛋白原料,可减少粮食种植、加工、运输全链条碳排放。同时桑叶替代豆粕降低饲料整体碳足迹,契合畜牧业、水产养殖低碳转型要求,助力农业领域碳达峰碳中和目标。(3)推动水产绿色养殖,降低养殖污染排放桑叶可降低团头鲂体内脂肪沉积,提升营养消化吸收率,减少粪便氮、磷排泄量,降低养殖水体氮磷富集风险,缓解池塘水质恶化、蓝藻爆发问题;桑叶天然抗炎抗氧化特性可减少抗生素使用,避免养殖水体药物残留污染,保护江河湖库水域生态环境。3.3社会效益(1)保障水产品质量安全,守护居民饮食健康利用桑叶天然功能性成分替代化学促生长、降脂添加剂,减少水产饲料中化工助剂、抗生素添加,降低水产品药物残留风险;桑叶饲喂团头鲂产出低脂高蛋白优质鱼肉,提升居民动物性蛋白膳食营养水平,丰富优质绿色水产品供给,落实食品安全民生需求。(2)助力乡村产业振兴,稳固涉农就业本技术打通蚕桑、水产两大特色农业产业,带动桑种植、桑叶加工、水产饲料、团头鲂养殖多环节产业发展,吸纳农村劳动力参与桑叶采收、粉碎加工、水产养殖,拓宽农村本地就业渠道;适宜在南方蚕桑主产区、水产养殖集中区推广,带动县域特色种养产业发展,壮大村集体经济,巩固脱贫攻坚成果。(3)完善非常规饲料标准化体系,引领行业技术升级当前国内缺少桑叶饲喂团头鲂统一技术规范,各地桑叶添加比例、加工方式、饲喂方案参差不齐。本规程制定统一原料标准、加工工艺、适宜添加量、饲喂管理规范,填补行业标准空白,为饲料企业、养殖户提供标准化技术指导,推动木本源饲料桑产业规范化、科学化发展,引领水产低豆粕、绿色饲料行业技术革新。(4)保障国家粮食安全,优化饲料资源结构通过规模化利用桑叶替代豆粕,减少我国大豆进口依赖,缓解国际粮食市场波动对水产养殖业的冲击;挖掘木本饲料新型蛋白资源,丰富国内饲料原料供给体系,形成“粮食蛋白+木本蛋白”多元饲料供给格局,践行“向林草、向江河湖海要食物”的大食物观,夯实国家粮食安全防线。实施可行性(1)资源基础可行:桑叶供给充足,原料易得我国桑园种植规模庞大,两广、江浙、川渝、山东等区域存量桑叶资源富余,饲料桑可规模化人工种植,一年可多次刈割,生物量大、原料供应稳定;桑叶加工工艺简单,晒干、超微粉碎、发酵技术成熟,中小型加工厂即可实现桑叶粉量产,原料获取、加工门槛低,适合农村中小企业、合作社落地实施。(2)技术理论可行:科研数据充分,试验支撑完善项目团队开展多梯度桑叶替代豆粕养殖试验,整合生长性能、血清生化、肠道微生物、肌肉代谢组、肉质品质多维度检测数据,明确团头鲂饲料桑叶适宜添加区间2%~8%,8%替代比例综合效益最优;同时参考国内外大量桑叶水产应用文献,形成完整学术依据,试验条件、检测方法科学严谨,数据可重复、可落地,技术方案成熟可靠。配套发酵、超微粉碎、外源酶协同处理桑叶工艺可进一步提升桑叶利用效率,技术体系完整。(3)产业落地可行:产业链主体接受度高项目前期赴广东、广西、山东多地饲料企业、水产养殖场、桑业企业实地调研,饲料厂、养殖户、桑农均存在降本增效、盘活桑叶资源的现实需求;现有团头鲂养殖、配合饲料相关国家标准可与本规程配套衔接,企业无需大幅改造现有生产线,仅调整配方即可生产桑叶型团头鲂饲料,养殖端无需改变原有池塘、投喂模式,推广落地成本低、适配性强。(4)政策支撑可行:契合多项国家农业专项导向本标准依托国家“十四五”重点研发计划“木本源新型蛋白饲料加工与高效转化技术”(2022YFD1300900)科研成果,符合饲用豆粕减量替代、水产绿色健康养殖、乡村产业振兴、农业“双碳”、大食物观等国家政策导向,可获得地方农业农村、科技、乡村振兴项目政策与资金扶持,具备政策推广落地条件。(5)市场需求可行:产业刚需强烈,市场空间广阔国内团头鲂养殖体量巨大,水产饲料企业普遍面临豆粕成本上涨压力,急需低成本、功能性替代原料;终端消费者对绿色、无抗、高品质淡水鱼需求持续提升,桑叶饲喂生态团头鲂具备差异化市场优势,饲料产品、商品鱼市场双向需求旺盛,技术转化市场空间充足。编制原则和依据按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写》的要求和规定编写本内容。本技术体系的编制原则是对桑叶饲料化利用相关行业所产生的桑叶饲料配方和饲喂技术规程进行明确的限定,同时充分结合国内现阶段桑叶饲用现状,桑叶相关的理论知识和桑叶在实际生产中的应用,确保相关术语、评价指标及技术工艺的科学性、先进性和适用性。(1)范围明确制定一系列桑叶饲料化利用技术规程,需要基于我国饲用桑叶原料、桑叶饲料产品及其加工、饲喂利用现状,研究适合现阶段我国桑叶产业具体情况的术语及技术规程。(2)科学先进调查分析现阶段桑叶饲料化利用现状,科学合理地确定相关术语及技术规程,做到准确、规范、合理,系统全面地涵盖桑叶饲料化利用的主要环节。编制过程本项目开展之前,主要起草人王勇生、袁号天开展了大量的文献查阅工作,了解了国内外关于饲料桑在水产动物中的应用现状,并实施开展了饲料桑叶饲喂团头鲂的试验,为本技术体系的制定奠定了科学基础。主要起草人杨富裕教授已对木本饲料加工技术相关内容开展了多年研究工作,发表了多篇学术论文。《优质饲草青贮调制及成型产品加工技术研发》、《贵州务川县杂交构树产业技术开发》等优质饲草料加工技术等有关项目的研究,并负责牵头于2019年1月公开发布了8个构树团体。这些前期工作的积累,为保证项目的顺利进行奠定了基础。6.1准备阶段(1)2025年5月,提出单位成立项目编制工作组,由相关方面的专家和专业人员组成,确定编制组成员。(1)2025年6月-9月,组建科研团队,开展了饲料桑叶饲喂团头鲂的试验。(2)2025年8月至2024年9月,文献调研阶段。制定团队认真研究该领域内一切相关的资料。搜集资料的主要类型包括:法律、法规等权威性文献;教科书、科学论文、科技期刊等学术团体普遍公认的文献;小册子、报告等常见的,但未必得到公认的资料;术语数据库;术语词汇集、辞典、百科全书、叙词表;工作组成员和有关专家所提供的口头或书面资料。(2)2025年9月至2025年10月,实地企业走访调研阶段。项目专家团队、项目成员赴各地桑叶饲用试点企业调研、指导共计10余人次。王勇生、袁号天调研了广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所国家蚕桑产业技术体系蚕蛹加工岗位科学家,广东杰大饲料科技有限公司,广东省特种水产功能饲料工程技术研究中心,广东清远锦潭水产有限公司,中粮饲料(佛山)有限公司,广东省农业科学院动物科学研究所水产营养研究室等,杨富裕教授多次前往广西然泉农业科技有限公司、山东丰唐生态农业科技有限公司等等。在与相关企业对接后,项目团队专家获得了相关的一手资料,为本技术体系更加科学的制定提供了技术支撑。(4)数据收集整理为更好契合生产实际,提高技术体系的应用性,项目在科研实验以及专家指导的企业生产实验的基础上,先后在《动物营养学报》、《中国科学院院刊》、《\o"紫色刊名为"饲料工业》、《黑龙江畜牧兽医》、《养殖与饲料》、《中国饲料》、《中国畜禽种业》、《水生生物学报》等国内外期刊杂志搜集相关科学实验文献数据,并整理、评价了文献资料,经项目团队筛查,进一步论证和调整该技术体系中相关数据。6.2编制阶段2025年11月,项目专家团队按GB/T1.1-2020的制定程序和编写要求《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写》,对收集到的资料进行汇总。2025年12月,项目专家组内多次进行研讨,确定体系框架和主要内容,并于2026年1月编制形成草案稿。拟与2026年4月,召开专家论证会,进行专家论证,征求专家意见。6.3主要编制人员分工本技术体系主要起草人有王勇生、杨富裕、丁昊、袁号天。本技术体系起草过程中,杨富裕教授主要构思了技术体系的整体框架,王勇生教授主要负责查阅相关文献资料及编制《桑叶饲用技术体系团头鲂》文本,袁号天负责开展了饲料桑叶饲喂团头鲂的科学试验。国内外有关现状目前,本项目所提出的技术体系,基于科学实验及产业现状,并参考或借鉴了《GB/T17715-1999团头鲂》、《GB/T36205-2018团头鲂配合饲料》、《DB13/T1028-2009无公害食品团头鲂苗种池塘养殖技术规范》、《T/CFIAS8003-2022团头鲂低蛋白低豆粕多元化日粮生产技术规范》、《DB13/T895-2007无公害食品团头鲂成鱼池塘养殖技术规范》等相关现有标准或技术体系。编写学术依据8.1桑叶在水产饲料中的应用研究进展桑树几乎在我国各地均有分布,特别是在江浙、四川、广东、山东等地大面积种植,因此桑叶资源十分丰富。然而,近年来我国东部蚕区养蚕业已大为萎缩,比如浙江湖州仅有30%左右的桑叶被用于饲养家蚕,除部分被用作反刍动物青(贮)饲料外,大量的桑叶资源未得到利用。为此,亟需转变种桑养蚕的单一模式,以提高桑叶的资源利用效率。当前,将桑叶粉用作养殖动物配合饲料的原料已成为提高桑叶资源利用效率的重要途径之一。桑叶粉的蛋白质(氨基酸)含量、必需脂肪酸含量、矿物质含量和可代谢能等相对较高,具有良好的饲用营养价值。同时,桑叶粉还含有多种生物活性物质,具有显著的降脂、降糖、抗氧化及清除自由基等作用。桑叶粉作为饲料原料直接用于养殖鱼类配合饲料的研究已有报道。钱文春等(2022)研究表明,团头鲂摄食桑叶粉质量分数为2%、4%和5%的饲料后鱼体增重和饲料系数与摄食不含桑叶粉的饲料组均无显著差异,而饲料中桑叶粉用量进一步提高,团头鲂的体增重显著降低,饲料系数显著升高;团头鲂摄食含15%和20%桑叶粉的饲料后全鱼粗脂肪含量显著下降,肌肉中的粗脂肪含量均随饲料中桑叶粉用量增加而呈下降趋势;饲料中桑叶粉质量分数为4%或更高时团头鲂血清葡萄糖水平显著降低;饲料中添加桑叶粉不影响团头鲂的成活率和鱼的体型指数,包括肥满度、脏体指数和肝体指数。总之,团头鲂饲料中桑叶粉的适宜添加量为2%~5%,如果团头鲂饲料中桑叶粉质量分数超过5%,会使鱼的生长速度减慢,饲料系数提高。在金鲳鱼饲粮中分别添加0.0%、2.0%、4.0%、6.0%和8.0%的桑叶,饲养8周,结果表明,桑叶与多酶预混料对金鲳鱼幼鱼的生长、消化、脂质代谢和抗病性均有促进作用,研究人员给出最佳的替代比例为:在配方饲料中添加4%~6%的桑叶(Ning等,2021)。与此同时,将发酵桑叶含量分别为0.0%、2.0%、4.0%、6.0%和8.0%的5种饲料投喂金鲳鱼,结果显示,在金鲳鱼幼鱼配合饲料中,最佳发酵桑叶添加量为4.0%(Ning等,2022)。Hou等(2019)以桑叶粉分别替代0%、6.3%、12.6%、18.9%、25.2%和31.5%的鱼粉,配制6种不同水平的等氮等能饲粮饲养鲤鱼,结果表明桑叶粉促进肝脏载脂蛋白的表达,促进胆固醇转运的逆转,从而降低血液中胆固醇含量;激活了鱼的脂肪酸氧化能力,但抑制了fabp1的表达,可能导致游离脂肪酸的积累;还可能通过抑制脂肪细胞的分离和增殖,降低肝脏脂质含量。Saheli等(2019)以发酵桑叶粉代替鱼粉的0%、25%、50%和75%,配制4种等蛋白质、等脂质、等能的饲料饲喂鲫鱼和鲶鱼8周,结果表明淀粉酶活性和后续碳水化合物的利用是影响发酵桑叶粉替代鱼粉被利用的关键因素。Mondal,K.等(2015)发现含有鱼杂粉(Fish-offalmeal,FOM)和桑叶粉(MLM)的发酵混合物作为蛋白质补充剂,对幼鲤的生长有利。抗营养因子会导致动物生长不良和饲料利用效率低下。竹炭具有良好的吸附能力,可以与抗营养因子结合,减少其在胃肠道中的吸收,是一种经济的饲料补充剂。LinghongMiao等(2020)结果表明,对转基因改良罗非鱼(GIFT)饲喂添加竹炭添加剂的桑叶粉是可以行的,饲料中添加30%桑叶粉和0.4%竹炭对GIFT幼鱼的生长性能、血脂代谢、抗氧化和抗病能力均有一定的改善作用,桑叶粉和竹炭添加剂的添加水平对GIFT幼鱼的生长性能和非特异性免疫力具有联合作用。外源酶制剂添加可以降低桑叶中粗纤维水平和抗营养因子水平,从而提高桑叶营养价值,且添加外源酶制剂发酵桑叶饲喂带来的有益效果优于普通发酵桑叶(Ning等,2022)。LijunNing等(2021)表明日粮桑叶与多酶(植酸酶、木聚糖酶、纤维素酶)预混料对金鲳幼鱼的生长性能、降脂和增强免疫力具有一定的作用,饲料中桑叶添加量为6.0%、多酶预混料添加量为1.3%时,鱼体生长性能最佳,消化酶活性最高;饲料中桑叶添加量为4.0%,多酶预混料添加量为1.3%时,鱼体对哈维氏弧菌的抗病性最好。桑叶中含有丰富的生物活性成分,其释放会受到不同处理技术的影响。在XuelianTang等(2022)的试验中,与对照组和添加10%桑叶粉的鱼相比,桑叶水提取物和醇提物组的尼罗罗非鱼均表现出更好的生长性能和肠道形态,血清中的抗氧化活性和酸性磷酸酶ACP水平得到提高,免疫细胞因子的表达有所增加,但在饲料中添加10%桑叶乙醇提取物可以更好提高尼罗罗非鱼的生长速度和健康水平。YexinWei等(2023)采用超微粉碎(MG)、破壁(MB)、水提-甲醇沉淀法(ME)对桑叶进行处理,结果表明桑叶添加可以提高大口黑鲈的生长性能(特定生长率和增重率);改善肝糖原、血脂和甘油三酯的水平(显著降低血糖和血清总胆固醇TC、极低密度脂蛋白VLDL和甘油三酯TG水平);显著降低肝细胞凋亡,改善肝脏组织结构,且MB组的效果优于其他组。此外,与对照组相比,MB处理可以上调肝脏中gpx和cat的表达,提高抗氧化酶(GSH-Px、CAT)的活性;抑制肝脏中促炎细胞因子(TNFα和IL-8)的表达,上调了抗炎细胞因子(IL-10和TGF-β)的表达。WenqiangJiang等(2022)也指出,饲料中桑叶粉可以增强团头鲂的抗炎反应,这与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。此外,MB还可以通过限制革兰氏阴性和可能危险的细菌的发展来减少肠道菌群失调。在鱼类养殖过程中,长期投喂配合饲料会导致鱼类体内脂肪积累、免疫力下降等问题。因此,鱼类上市之前降低鱼类脂肪及血糖含量、提高鱼类品质,同时不影响其正常生长十分重要。正常情况下,SOD主要清除氧自由基,减轻或避免自由基和脂质过氧化物对动物机体造成的损伤,而CAT将SOD清除活性氧时产生的过氧化氢(H2O2)转化为水(H2O),保护机体免受损伤。预防性给予发酵桑叶能够增加高脂血症罗非鱼血清SOD和CAT活性以及CAT/SOD,降低血清MDA含量(沈黄冕等,2016)。桑叶存在降脂和降血糖的作用,这可能与其提高机体抗氧化能力、抑制脂质过氧化反应和改善脂质代谢功能有关,且适宜添加量可以促进鱼类生长。桑叶的降脂作用主要体现显著降低血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白含量。桑叶的降脂作用对改善鱼类肝脏健康具有重要意义。Zhi-ChengXv等(2021)以大口黑鲈为动物模型,证明了桑叶具有通过调节肝脏脂肪生成和糖代谢来减轻肝损伤以及减少肝脏脂质积累的能力,并认为桑叶有望成为治疗肝病的潜在或替代药物。这与丁国玉等(2019)关于团头鲂的实验中,添加发酵桑叶对团头鲂肝脏的影响相同。QiruiHou等(2020)试验结果表明,鲤鱼饲料中一半的鱼粉可被桑叶粉替代,且无肝毒性;MLM可以促进肝脏apo-a1的表达,从而促进胆固醇转运的逆转,降低血液中的胆固醇;可以提高鲤鱼脂肪酸氧化的能力,但抑制了fabp1的表达,可能导致游离脂肪酸的积累;MLM组apoa4低表达,不能激活脂蛋白脂酶(lipoproteinlipase,LPL),这和脂肪酸的转运受阻共同影响了血液中甘油三酯的降解;MLM降低肝脏脂质含量可能是通过抑制脂肪细胞的分裂和增殖实现的。沈黄冕等(2016)指出发酵桑叶能剂量依赖性地降低高脂血症罗非鱼的血脂、血糖水平,这与钱文春等(2022)和高胜男等(2017)结论相同。在鱼类上市方面,肉质也是备受关注的点。桑叶可以通过显著提高团头鲂肌肉中蛋白质、肌苷酸、风味氨基酸和不饱和脂肪酸等营养物质和风味物质的含量、减缓肌肉pH的下降速度,降低滴水损失、延缓肌肉的脂质氧化等方法改善肌肉品质。8.2桑叶在水产饲料中应用的适宜添加水平桑叶在水产饲料中的应用研究在团头鲂、大口黑鲈、罗非鱼、金鲳鱼、团头鲂、鲫鱼、金鲳、尼罗罗非鱼、大鲵、鲫鱼、鲤鱼等都已有报道(见表1)。不同的作者选择的鱼种不同,建议的合适添加水平不同。在团头鲂中有建议为2%-5%为适宜(钱文春等,2022),也有建议不超过9%(刘家星等,2018),对于体重比较大的建议10%最好,不超过20%没有不良影响(周东来等,2021)。Hou等(2019)以桑叶粉分别替代0%、6.3%、12.6%、18.9%、25.2%和31.5%的鱼粉,配制6种不同水平的等氮等能饲粮饲养鲤鱼,结果表明试验设置的代替水平均可满足鲤鱼的生长,并建议代替一半的鱼粉都是可行的。表1桑叶在不同品种类型鱼类饲料中的添加水平桑叶添加量合适的量鱼初重鱼品种参考文献0%、5%、10%、15%、20%2%-5%108g团头鲂钱文春等(2022)0%、2%、4%、6%、8%2%-5%58g钱文春等(2022)0%、2.5%、5.0%、7.5%、10.0%不超过7.5%15.01±0.12g团头鲂丁国玉等(2019)3%-5%550g左右(成鱼后期)团头鲂黄传书等(2019)0%、5%、10%5%2-2.215kg团头鲂马恒甲等(2013)0%、5%、10%、15%、20%10%最好,不超过20%,没有不良影响1112.06±83.19g团头鲂周东来等(20210%、3%、6%、9%6%-9%团头鲂孙清华等(2021)0%、3%、6%、9%、12%6%、9%均可,9%最好55±4.5g团头鲂刘家星等(2018)添加量为4%、超微效果最好8.72±0.03g大口黑鲈YexinWei等(2023)提取物10%、20%、40%10%乙醇提取8.34±0.05g罗非鱼XuelianTang等(2022)0%、2%、4%、6%、8%4%9.02±0.03g金鲳鱼LijunNing等(2022)0%、桑粉和发酵桑粉(2.22%、4.44%)2.22%发酵桑叶粉、促进生长性能并增强抗炎反应/4.44%发酵桑叶粉降血脂、肝脏抗氧化20.25±0.24g团头鲂WenqiangJiang等(2022)0%、5%、10%、15%、20%5%27.35±0.30g鲫鱼WenjuanZhu等(2021)0%、2%、4%、6%、8%4%-6%,1.3%多酶预混料9.02±0.03g金鲳LijunNing等(2021)1、3、5g/kg(1%、3%、5%)5g/kg(5%)33±0.26g尼罗罗非鱼Neamat-AllahAhmed等(2021)3、6、9、12、15g/kg计算得出,8.21和8.30g/kg风干饲料28.33±0.42g大鲵ZhanfuLi等(2020)0、15、30、60、90、120g/kg(0、1.5、3、6、9、12%)
46.93和57.21g/kg
7.09±0.17g鲫鱼HuataoLi等(2020)0、6.3、12.6、18.9、25.2、31.5%设置的水平都可以,替代一半鱼粉也是可行的18.02±0.03g鲤鱼QiruiHou等(2020)8.3桑叶对团头鲂生长、血清生化指标及肠道微生物与代谢组学的影响8.3.1伦理声明本研究已获得华南农业大学动物伦理委员会批准(审批号:2017D006)。8.3.2试验饲料解淀粉芽孢杆菌购自山东益昊生物科技有限公司(1×108CFU/g,中国,山东);桑树枝叶由佛山鲲鹏现代农业研究院提供(中国,佛山)。按ADDINEN.CITE<EndNote><CiteAuthorYear="1"><Author>Wei</Author><Year>2023</Year><RecNum>179</RecNum><DisplayText>Weietal.(2023)</DisplayText><record><rec-number>179</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="5dpe9pvautteanezwpdp55zlz9fapfwsvefz"timestamp="1716468965">179</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Wei,Yexin</author><author>Huang,Jia</author><author>Sun,Hao</author><author>Feng,Zhuandong</author><author>He,Yuanfa</author><author>Chen,Yongjun</author><author>Lin,Shimei</author></authors></contributors><titles><title><styleface="normal"font="default"size="100%">Impactofdifferentprocessingmulberryleafongrowth,metabolismandliverimmunefunctionoflargemouthbass(</style><styleface="italic"font="default"size="100%">Micropterussalmoides</style><styleface="normal"font="default"size="100%">)</style></title><secondary-title>AquacultureReports</secondary-title></titles><periodical><full-title>AquacultureReports</full-title><abbr-1>Aquacult.Rep.</abbr-1><abbr-2>AquacultRep</abbr-2></periodical><pages>101508</pages><volume>29</volume><keywords><keyword>Mulberryleaf</keyword><keyword>Processingmethods</keyword><keyword>Antioxidant</keyword><keyword>Metabolism</keyword></keywords><dates><year>2023</year><pub-dates><date>2023/04/01/</date></pub-dates></dates><isbn>2352-5134</isbn><urls><related-urls><url>/science/article/pii/S2352513423000479</url></related-urls></urls><electronic-resource-num>/10.1016/j.aqrep.2023.101508</electronic-resource-num></record></Cite></EndNote>Weietal.(2023)等人的方法,将新鲜桑树枝叶晒干后,用高速搅拌器破碎,然后在超微粉碎机中进一步粉碎以获得破碎的桑树枝叶粉末,并过90目筛。然后测定桑树枝叶的粗蛋白含量为21.48%(干物质),粗脂肪含量为5.34%(干物质)。实验饲料的配方及营养成分见表1,共制备了五种等氮(粗蛋白含量为30.26%)等脂(粗脂肪含量为4.69%)的饲料。对照组(M0)含有63%的豆粕,实验组四种饲料(M1、M2、M3和M4)则是通过用桑树枝叶分别替代5%、8%,10%和20%的豆粕制成。实验饲料是在华南农业大学海洋学院,通过使用实验室制粒机(北京现代扬工机械砂料开发有限公司(中国,北京)配制而成,自然风干后,将饲料装入密封塑料袋中,在4℃下储存备用。测定实验饲料的氨基酸组成见表2。表1饲料成分及其基础营养水平(干物质%)项目Items组别GroupM0M1M2M3M4鱼粉/%5.005.005.005.005.00豆粕/%63.0059.8557.9656.7050.40桑树混合物/%-3.155.046.3012.60豆油/%4.004.004.004.004.00玉米淀粉/%12.0012.0012.0012.0012.00微晶纤维素/%13.0013.0013.0013.0013.00磷酸二氢钙/%1.801.801.801.801.80预混料/%01.201.20解淀粉芽孢杆菌/%00.100.10营养水平水分3.533.823.783.583.64粗蛋白/%31.1830.5630.3831.2630.64粗脂肪/%4.794.984.824.924.88粗灰分/%7.757.918.068.198.31注:1)预混料为每千克饲料提供CaCO3314.0g,KH2PO4469.3g,MgSO47H2O147.4g,NaCl49.8g,Fe(II)gluconate10.9g,MnSO47H2O3.12g,ZnSO47H2O4.67g,CuSO45H2O0.62g,KI0.16g,CoCl26H2O0.08g,NH4molybdate0.06g,NaSeO30.02g,VA500000IU,VC10000mg,VD350000IU,VE2500mg,VK31000mg,VB15000mg,VB25000mg,VB65000mg,VB125000ug,肌醇25000mg,泛酸10000mg,胆碱100000mg,烟酸25000mg,叶酸1000mg,生物素250mg。表2饲料游离氨基酸组成(干物质,mg/100g)组成Item组别GroupM0M1M2M3M4必需氨基酸EAA赖氨酸Lys30.1830.8230.6129.4830.74色氨酸Trp14.4915.8714.4214.7812.37苯丙氨酸Phe10.599.7810.0010.5710.38甲硫氨酸Met1.561.561.401.431.52苏氨酸Thr6.916.256.246.996.86异亮氨酸Ile37.257.47亮氨酸Leu18.4418.3117.5118.6718.91缬氨酸Val5.315.065.215.635.61精氨酸Arg110.65111.02112.09110.19109.15组氨酸His34.7935.4635.7334.7235.69总必须氨基酸TotalEAA240.04241.22240.24239.70238.70非必需氨基酸NEAA丙氨酸Ala26.2125.3125.1526.7426.52天冬酰胺Asn16.1316.2215.6016.2215.74天冬氨酸Asp36.7235.2134.9035.2335.45谷氨酰胺Gln2.813.093.884.213.09谷氨酸Glu45.2345.7744.7444.0945.40甘氨酸Gly8.107.317.848.128.93羟脯氨酸Hyd0.610.560.550.530.47脯氨酸Pro9.109.709.728.298.38丝氨酸Ser5.674.905.195.435.14酪氨酸Tyr8.817.61总氨基酸TotalAA399.45397.40396.03396.97395.438.3.3试验动物团头鲂幼鱼购自广州云丰水产养殖有限公司(中国,广州)。饲养试验在华南农业大学室内循环水养殖系统中进行。将体质健康、大小均一的团头鲂幼鱼暂养2周,暂养期间饲喂商业饲料(广州通威饲料有限公司,中国,广州),该饲料含有30%的粗蛋白和5%的粗脂肪。实验开始时,挑选均重为(4.38±0.02)g的团头鲂幼鱼400尾,随机分至20个养殖缸(200L/缸),每缸20尾。每天分别在9:00和17:00通过人工投喂的方式对鱼进行饱食投喂,持续56天。在实验期间,每周使用水质检测仪检测2次水质指标,整个试验期间水温保持在27.0±1.5℃,溶解氧≥8mg/L,氨氮≤0.05mg/L,pH值为6.8±0.3,光照周期(12L∶12D)。8.3.4形体指标测定及样品采集养殖试验结束后,禁食24h,用MS-222(100mg/L)对实验鱼麻醉后,称量每缸团头鲂的总重量并记录总条数,用于计算末均重、增重率、特定生长率、饵料系数、日增长系数和饲料摄入量。每缸随机选取8尾鱼,测定体重、体长、内脏重、肝脏重和肠道重,用于计算肥满度、脏体比、肝体比和肠体比。每缸随机选取5尾鱼,用灭菌的肝素钠抗凝剂浸润的一次性医用1.0mL注射器,通过尾静脉采集血液样品,经离心处理(4°C,3000r/min,10min)后收集上清液,–80℃保存,用于测定血浆生化指标。随后剖开腹腔,快速剥离肠道,并收集肠道内容物,用于测定肠道消化酶活和肠道微生物分析;紧接着刮去侧线上方鳞片且剥取鱼皮,采集一侧背肌样品分装2管,–80℃保存,分别用于肌肉氨基酸测定和非靶向代谢组学分析;采集另一侧背肌(2cm×1cm×0.3cm)后4℃保鲜,24h内进行肌肉质构测定分析。另外单独采集3条全鱼,–20℃保存用于营养成分测定。8.3.5基础营养成分和游离氨基酸含量测定与分析饲料和团头鲂样品的水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分含量参照ADDINEN.CITE<EndNote><CiteAuthorYear="1"><Author>Ding</Author><Year>2025</Year><RecNum>586</RecNum><DisplayText>Dingetal.(2025)</DisplayText><record><rec-number>586</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="5dpe9pvautteanezwpdp55zlz9fapfwsvefz"timestamp="1761999827">586</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Ding,Hao</author><author>He,Yinglin</author><author>Song,Yujian</author><author>Liang,Jingjing</author><author>Li,Woxing</author><author>Xu,Chao</author><author>Yang,Huirong</author></authors></contributors><titles><title><styleface="italic"font="default"size="100%">Schizochytrium</style><styleface="normal"font="default"size="100%">supplementationincompoundfeed:Effectsongrowth,metamorphosis,intermediatemetabolism,andintestinalhealthofbullfrogs(</style><styleface="italic"font="default"size="100%">Lithobatescatesbeianus</style><styleface="normal"font="default"size="100%">)</style></title><secondary-title>Antioxidants</secondary-title></titles><periodical><full-title>Antioxidants</full-title></periodical><pages>1208</pages><volume>14</volume><number>10</number><dates><year>2025</year></dates><isbn>2076-3921</isbn><accession-num>doi:10.3390/antiox14101208</accession-num><urls><related-urls><url>/2076-3921/14/10/1208</url></related-urls></urls></record></Cite></EndNote>Dingetal.(2025)等人报道的方法进行测定。其中水分含量采用105 °C烘箱干燥至恒重法测定;粗灰分含量通过550 °C马弗炉灼烧法测定;粗蛋白含量采用杜马斯燃烧定氮法测定;粗脂肪含量则采用索氏抽提法测定。氨基酸含量通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析,用于靶向代谢组学研究。该分析在上海美吉生物医药科技有限公司(中国上海)使用ExionLCAD系统与QTRAP6500+质谱仪(赛默飞世尔科技,美国马萨诸塞州弗雷明汉)联用进行。简而言之,样品在HILIC柱(沃特世UPLCBEH芳胺2.1x100mm,1.7μm;美国马萨诸塞州米尔福德)上以35°C的恒定温度进行分离。分离过程持续6分钟(表S3)。代谢物的分离在流速为1mL/min的条件下进行,流动相梯度包括95%乙腈在水中加入0.4%甲酸和20mM氨基甲酸铵(溶剂A)以及5%乙腈在水中加入0.4%甲酸和20mM氨基甲酸铵(溶剂B)。使用串联质谱仪收集质谱数据,该质谱仪与UHPLC相连,并配备电喷雾离子化(ESI)源,以正离子模式运行。参数设置如下:源温度350°C;中压CAD气体压力;两个离子源气体1和气体2均为70磅/平方英寸;离子喷雾电压(IS)5500伏。LC-MS原始数据被导入赛默飞世尔科技软件OS中。所有离子碎片均通过使用默认参数自动识别并进行积分;此外,所有积分结果均进行了人工检查。样本中的代谢物浓度是根据线性回归标准曲线计算得出的。8.3.6血清生理生化和肠道酶活性测定与分析将采集的血浆在4℃下解冻并均质。通过南京建成生物工程研究所生产的试剂盒,测定血浆的葡萄糖(A154-1-1)、L-乳酸(A019-2-2)、总胆固醇(A111-1-1)、甘油三酯(A110-1-1、碱性磷酸酶(A059-2-2)、谷草转氨酶(C010-2-1)、谷丙转氨酶(C009-2-1)、溶菌酶(A050-1-1)、谷胱甘肽还原酶(A062-2-1)、过氧化氢酶(A007-1-1)、超氧化物歧化酶(A001-2-2)、总抗氧化能力(A015-2-1)和丙二醛(A003-1-2)等指标。准确称取团头鲂肠道0.1g,按照重量(g):体积(mL)=1:9加入0.9mL的0.9%的生理盐水进行匀浆,在4℃下2500r/min离心15min,取上清液。通过南京建成生物工程研究所生产的试剂盒测定肠道α-淀粉酶(C016-1-2)、脂肪酶(A054-2-1)、蛋白酶(A080-2-2)、钠钾ATP酶(A070-2-2)、酸性磷酸酶(A060-2-2)等指标,均采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒测定。8.3.7肠道内容物16srRNA基因测序与分析采用QiAampDNAStoolMiniKit(Qiagen,Germany)从肠道样本中提取细菌DNA。使用NanoDrop2000分光光度计(ThermoFisherScientific,USA)检测DNA质量与浓度。通过引物338F(5'-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3')和806R(5'-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3')扩增细菌16SrRNA基因的V3–V4高变区。PCR反应程序为:94°C预变性2分钟;随后进行30个循环(98℃10秒、55℃30秒、68℃30秒);最终68℃延伸5分钟。纯化后的扩增产物在IlluminaMiSeq平台(Illumina,USA)上采用2×300bp双端测序策略进行测序。利用QIIME2(v2024)中的cutadapt插件对合格原始序列进行条形码拆分,并去除引物与接头序列。基于重叠关系对双端读长进行合并,获得质控后的优化序列。通过DADA2(2024版)去除嵌合体序列并将序列聚类为操作分类单元(OTUs)。细菌样本共获得1,286,881条原始序列,经高质量读长处理后鉴定出2,491个细菌ASVs。采用classifier-sklearn插件基于Silva-138参考数据库(https://www.arb-silva.de/)进行物种注释。通过Python软件(v2.7)分析门水平和属水平的群落结构。使用QIIME2计算α多样性指数。基于Bray-Curtis距离矩阵,通过Vegan程序包(v2.5-3)进行主坐标分析(PCoA)和非度量多维尺度分析(NMDS)以评估β多样性。8.3.8肌肉非靶向代谢组测序与分析肌肉代谢物通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析,用于非靶向代谢组学研究。具体步骤为:精确称取50mg样本置于2mL离心管中,加入直径6mm的研磨珠。随后加入400μL含0.02mg/mL内标物(L-2-氯苯丙氨酸)的提取液(甲醇/水=4:1,v/v)进行代谢物提取。样品经Wonbio-96c冷冻组织研磨仪(上海万博朗生物科技有限公司,中国上海)于-10°C、50Hz条件下研磨6分钟,接着在5°C、40kHz条件下进行低温超声提取30分钟。将样品置于-20°C静置30分钟后,于4°C、13000×g条件下离心15分钟,取上清液转移至进样瓶供LC-MS/MS分析。LC-MS/MS分析在上海美吉生物医药科技有限公司(中国上海)采用ThermoUHPLC-QExactiveHF-X系统进行,配置ACQUITYHSST3色谱柱(100mm×2.1mm内径,1.8μm;Waters,美国马萨诸塞州米尔福德)。流动相包括:0.1%甲酸水溶液/乙腈(95:5,v/v)(溶剂A)和0.1%甲酸乙腈溶液/异丙醇:水(47.5:47.5,v/v)(溶剂B)。正离子模式分离梯度:0–3分钟,流动相B由0%升至20%;3–4.5分钟,由20%升至35%;4.5–5分钟,由35%升至100%;5–6.3分钟维持100%;6.3–6.4分钟降至0%;6.4–8分钟维持0%。负离子模式分离梯度:0–1.5分钟,流动相B由0%升至5%;1.5–2分钟升至10%;2–4.5分钟升至30%;4.5–5分钟升至100%;5–6.3分钟维持100%;6.3–6.4分钟降至0%;6.4–8分钟维持0%。流速为0.40mL/min,柱温40°C。原始数据的预处理通过ProgenesisQI(WatersCorporation,Milford,MA,USA)software(3.0)完成,导出CSV格式的三维数据矩阵。矩阵中包括样品信息、代谢物名称和质谱响应强度。矩阵中移除内标峰和已知的假阳性峰(包括噪声、色谱柱流失和衍生试剂峰),并进行去冗余和峰汇总。同时,通过HMDB数据库(http://www.hmdb.ca/)Metlin数据库(/)进行代谢物鉴定。对检测到的代谢物进行正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)以识别差异代谢物(DMs)。变量重要性投影(VIP)>1,显著性水平P<0.05,且|log2(foldchange)|≥0.26的代谢物被认为具有统计学差异。DMs的代谢通路分析和富集通过京都基因与基因组百科全书(KEGG,https://www.metaboanalyst.ca/)进行。8.3.9肌肉质构测定与分析将采集的背肌(2cm×1cm×0.3cm)鲜样使用质构仪(UniversalTA,上海腾拔仪器科技有限公司)以TPA(TextureProfileAnalysis)模式检测肌肉质构参数,包括硬度、咀嚼性、弹性、内聚性、胶黏性和回复性等指标。选用型号为P35的圆柱形探头,测试参数如下:测试前速度为2mm/s,测试后速度为5mm/s,测试速度为1mm/s,2次压缩的时间间隔为2s,压缩比为25%。采用TexturePro软件(Brookfield公司,美国)进行数据采集和实时曲线绘制的数据分析。肌肉质构特性采用质构仪(上海腾拔仪器科技有限公司)进行测定。将采集的背肌(2cm×1cm×0.3cm)鲜样进行全质构(TPA)分析时,包括硬度、咀嚼性、弹性、内聚性、胶黏性和回复性等指标,使用TA25/1000圆柱形探头,测试类型为下压,目标模式为形变,目标值为20%,测试速度为1.00mm/s,探头两次压缩的时间间隔为2s。在测定剪切力指标时,使用燕尾刀替换TA25/1000圆柱形探头,测试类型为下压,目标模式为距离,目标值25.00mm,测试速度为1.00mm/s。8.3.10统计学分析除特别说明的部分外,所有统计分析均通过SPSS软件(v22.0)完成。采用Shapiro–Wilk检验确认数据正态性,并通过Levene检验验证方差齐性。采用单因素方差分析(one-wayANOVA)及事后Tukey事后多重比较检验,以判定各实验组间的差异。数据以均值(mean)±标准误(SE)表示,P<0.05视为差异具有统计学意义。8.4结果8.4.1不同比例桑树替代豆粕对团头鲂形体指标和基础营养成分的影响如表3结果所示,不同例桑树替代豆粕对各组团头鲂的形体指标和基础营养成分无显著影响(P>0.05)。表3不同比例桑树替代豆粕对团头鲂形体指标和基础营养成分的影响组成Item组别GroupPvalueMLP0MLP5MLP8MLP10MLP20初重(g)4.33±0.034.43±0.054.41±0.054.39±0.044.35±0.030.4043末均重(g)10.39±0.2110.47±0.8611.29±0.2411.14±0.3510.14±0.420.3975增重率(%)140.38±5.39137.17±21.61156.17±8.11154.05±9.30133.10±10.120.5966特定生长率(%)1.56±0.041.52±0.171.68±0.061.66±0.071.51±0.080.5772饵料系数1.75±0.061.76±0.241.50±0.071.54±0.081.77±0.120.4462日增长系数2.68±0.082.62±0.322.92±0.102.89±0.132.57±0.150.5399饲料摄入量(mg/fish/d)189.32±4.47178.39±4.19183.82±1.40184.49±3.00180.33±5.790.4012肥满度1.9±0.132.09±0.042.17±0.051.92±0.181.90±0.180.4522脏体比(%)11.26±0.4410.87±0.4511.76±0.6212.16±0.6611.04±0.540.4527肝体比(%)1.74±0.241.63±0.131.71±0.121.76±0.181.67±0.130.9805肠体比(%)2.67±0.272.98±0.203.04±0.382.83±0.232.42±0.180.9307营养成分水分(%)65.75±0.4766.75±0.2466.21±0.7865.89±0.6165.12±1.020.5626粗蛋白(%)47.78±0.7648.51±0.5148.01±0.2748.08±1.4747.38±0.600.9019粗脂肪(%)40.20±2.1540.33±2.3539.90±1.3439.17±1.2738.31±0.210.8973灰分(%)8.51±0.089.02±0.259.02±0.298.96±0.278.63±1.160.9384数值为四次重复实验的平均值±标准误(x̄±SE,n=4),同一行中不同上标字母值组间差异显著(P<0.05)。8.4.2不同比例桑树替代豆粕对团头鲂血清生理生化指标的影响如表4结果所示,不同比例桑树替代豆粕对团头鲂血浆生理生化指标影响显著(P<0.05)。具体而言,随着桑树替代比例的增加,血浆中葡萄糖、L-乳酸、总胆固醇、甘油三酯和丙二醛的含量以及碱性磷酸酶、谷草转氨酶和谷丙转氨酶的活性显著降低(P<0.05),并在M2组达到最低值,但随着桑树替代比例的进一步增加又有上升趋势。此外,随着桑树替代比例的增加,血浆中溶菌酶、谷胱甘肽还原酶、过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的活性以及总抗氧化能力显著提高(P<0.05),并在M2组达到最大值,但随着桑树替代比例的进一步增加又有下降趋势。表4不同比例桑树替代豆粕对团头鲂血浆生理生化指标的影响项目Item组别GroupPvalueM0M1M2M3M4葡萄糖(mmol/L)4.63±0.42c4±0.17c8.44±0.46a6.88±0.84ab5.71±0.44bc0.0000L-乳酸(mmol/L)5.77±0.56b7.64±0.69ab9.92±0.95a8.36±0.66ab6.2±0.52b0.0032总胆固醇(mmol/L)4.36±0.30a3.47±0.21ab3.44±0.09b3.22±0.27b3.78±0.13ab0.0101甘油三酯(mmol/L)2.29±0.07a1.79±0.18b1.27±0.13c1.89±0.09ab2.00±0.07ab0.0000碱性磷酸酶(U/L)59.83±2.17a46.45±1.36b36.35±0.79c44.33±1.93b46.37±0.71b0.0000谷胱甘肽还原酶(U/L)1.73±0.36b2.80±0.27ab3.78±0.35a3.02±0.14ab2.91±0.40ab0.0031谷草转氨酶/天冬氨酸氨基转氨酶(U/L)163.33±7.38a143.50±5.48ab116.5±2.35b125.67±13.15b139.17±10.50ab0.0087谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶(U/L)37.72±2.72a33.60±1.25ab25.77±2.24b31.13±2.95ab35.04±2.36ab0.0184溶菌酶(U/ml)32.00±4.62b34.67±5.33b80.00±9.24a58.67±14.85ab50.67±2.67ab0.0152过氧化氢酶(μmol/min/ml)17.25±0.34c31.68±1.04b45.76±1.55a30.64±1.97b27.03±1.68b0.0000超氧化物歧化酶(U/ml)9.30±1.19b14.23±1.12ab16.99±1.61a14.37±0.76ab11.05±1.02b0.0070总抗氧化能力(μmolTrolox/ml)0.44±0.03b0.43±0.01b0.60±0.05a0.57±0.04a0.48±0.02ab0.0010丙二醛(nmol/ml)9.43±0.22a8.31±0.20ab6.50±0.49c7.49±0.54bc8.48±0.29ab0.0002数值为四次重复实验的平均值±标准误(x̄±SE,n=4),同一行中不同上标字母值组间差异显著(P<0.05)。8.4.3不同比例桑树替代豆粕对团头鲂肠道消化吸收酶活性的影响如表5结果所示,不同比例桑树替代豆粕对团头鲂肠道消化吸收酶活影响显著(P<0.05)。具体而言,随着桑树替代比例的增加,肠道中淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶、酸性磷酸酶和ATP酶的活性显著提高(P<0.05),并在M2组达到最大值,但随着桑树替代比例的进一步增加又有下降趋势。表5不同比例桑树替代豆粕对团头鲂肠道消化吸收酶活的影响项目Item组别GroupPvalueM0M1M2M3M4淀粉酶(U/g)85.07±5.10b99.41±4.39ab122.18±3.25a112.6±9.41ab91.26±6.06b0.0080脂肪酶(U/mg)20.81±2.50b26.67±5.53ab51.23±8.06a28.48±4.98ab26.07±4.34b0.0198蛋白酶(U/mg)2.00±0.07b2.25±0.18ab2.86±0.26a2.35±0.06ab2.45±0.24ab0.0370酸性磷酸酶(U/mg)467.92±17.82b565.48±27.14ab609.19±36.27a576.33±29.07ab494.96±17.82ab0.0186ATP酶(U/mg)13.68±1.01b21.12±1.30b41.55±1.73a19.81±3.22b12.71±0.97b0.0000数值为四次重复实验的平均值±标准误(x̄±SE,n=4),同一行中不同上标字母值组间差异显著(P<0.05)。8.4.4不同比例桑树替代豆粕对团头鲂肌肉游离氨基酸含量的影响如表所示,组氨酸(His)、谷氨酰胺(Gln)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)和赖氨酸(Lys)是所有组别中含量最高的游离氨基酸。随着豆粕被桑树替代比例的增加,与M0组相比,所有替代组肌肉中的组氨酸和总必须氨基酸含量均显著上升(P < 0.05),M3和M4组精氨酸和总氨基酸含量显著上升(P < 0.05),M2、M3和M4组异亮氨酸和丝氨酸含量显著上升(P < 0.05),M3组的丙氨酸含量显著上升(P < 0.05),M1、M2和M3组脯氨酸含量显著上升(P < 0.05),所有替代组中天冬氨酸含量均显著下降,M4组的羟脯氨酸含量显著下降,各组其他氨基酸和总非必需氨基酸含量无显著差异(P > 0.05)。表7团头鲂肌肉游离氨基酸组成(新鲜组织,mg/100g)组成Item组别GroupPValueM0M1M2M3M4必需氨基酸EAA赖氨酸Lys59.77±5.3153.41±3.7057.51±2.0054.37±4.5364.18±0.470.2968色氨酸Trp1.27±0.141.17±0.071.26±0.091.18±0.101.19±0.030.8899苯丙氨酸Phe1.66±0.121.75±0.121.76±0.091.70±0.051.78±0.020.8673甲硫氨酸Met1.10±0.071.20±0.071.30±0.071.05±0.081.20±0.040.1688苏氨酸Thr5.60±0.265.44±0.395.44±0.165.41±0.105.04±0.130.5575异亮氨酸Ile1.90±0.04b2.14±0.03ab2.26±0.02a2.18±0.04a2.38±0.10a0.0014亮氨酸Leu5.24±0.215.96±0.055.88±0.295.68±0.075.87±0.080.0778缬氨酸Val2.13±0.092.18±0.102.45±0.162.06±0.132.52±0.040.0583精氨酸Arg8.74±0.38c9.52±0.37c12.04±0.4ab10.41±0.16bc12.46±0.52a0.0002组氨酸His269.83±2.23c317.41±4.89b367.94±5.10a327.95±5.47b324.60±4.82b0.0000总必须氨基酸TotalEAA357.25±8.51c400.18±6.93b454.69±4.25a415.14±6.98a421.23±5.46b0.0000非必需氨基酸NEAA丙氨酸Ala73.93±0.7b74.25±0.67b78.74±1.33a77.4±0.51ab74.49±0.50b0.0052天冬酰胺Asn0.63±0.020.60±0.010.55±0.050.57±0.010.58±0.060.5473天冬氨酸Asp1.25±0.03a0.88±0.04b0.81±0.1b0.78±0.03b0.48±0.05c0.0000谷氨酰胺Gln150.33±4.11147.77±2.18153.14±14.76153.93±4.01175.26±5.970.1595谷氨酸Glu6.40±0.36a4.81±0.42b3.69±0.28b4.18±0.13b3.64±0.09b0.0003甘氨酸Gly89.17±4.4184.64±3.4077.67±1.8181.10±1.6880.06±2.990.1446羟脯氨酸Hyd0.42±0.02a0.35±0.03a0.35±0.01a0.36±0.02a0.25±0.01b0.0012脯氨酸Pro7.41±0.40b10.35±0.27a10.7±0.44a10.06±0.35a6.17±0.56b0.0000丝氨酸Ser4.91±0.07b4.97±0.05b5.55±0.05a5.70±0.23a5.68±0.12a0.0016酪氨酸Tyr3.10±0.152.91±0.242.99±0.132.86±0.053.01±0.030.7982半胱氨酸Cys0.13±0.01b0.12±0.01b0.23±0.01a0.25±0.02a0.13±0.02b0.0005总非必须氨基酸TotalNEAA337.67±8.51331.66±6.37334.43±15.95337.20±5.35349.75±7.930.7219总美味氨基酸TotalDAA1
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