医药行业无菌室灭菌师药品无菌灭菌操作手册（执行版）

医药行业无菌室灭菌师药品无菌灭菌操作手册（执行版）医药行业无菌室灭菌师药品无菌灭菌操作手册（执行版）文件编号：SOP-STER-001

版本号：V1.0

生效日期：\\\\\\\\\\

依据标准：GMP（2010修订版）附录1无菌药品、《中华人民共和国药典》、ISO17665湿热灭菌、ISO11135环氧乙烷灭菌、企业验证主方案

适用岗位：无菌室灭菌师、灭菌岗位操作人员、灭菌岗位监督员

适用范围：无菌制剂车间A/B/C/D级无菌洁净室、双扉湿热灭菌柜、干热灭菌柜、VHP汽化过氧化氢空间灭菌、物料灭菌、器具灭菌、传递舱灭菌、废弃物灭菌；不适用于辐照灭菌第三方外协工序核心原则：所有灭菌程序必须经过验证；无菌保证水平SAL≤10⁻⁶；先清洁、后灭菌；区分消毒（杀灭繁殖体）与灭菌（杀灭所有微生物包括芽孢）；全过程可追溯，参数偏离必须启动偏差处理。目录岗位职责与人员资质要求术语定义与关键指标通用安全规范与洁净区人员要求湿热灭菌（高压蒸汽灭菌柜）标准操作规程【核心】干热灭菌操作规程VHP汽化过氧化氢无菌室空间/传递舱灭菌规程过滤除菌操作规范（无菌药液）环氧乙烷EO灭菌操作规程（可选）灭菌效果监控：化学指示剂、生物指示剂使用规范灭菌物品管理：待灭菌/已灭菌分区、储存、有效期设备日常维护、校准与再验证管理异常情况、偏差、应急处置流程记录管理要求附件（记录模板清单、常见不合格判定标准）1岗位职责与人员资质要求1.1灭菌师岗位职责严格执行本操作手册，负责无菌室器具、物料、环境、废弃物灭菌操作；灭菌前检查设备状态、待灭菌物品预处理、装载合规性；监控灭菌全过程关键工艺参数，实时完整填写灭菌记录；负责生物指示剂、化学指示剂布点、回收、标识送检；识别湿包、灭菌失败、设备报警等异常，第一时间上报QA质量部门，禁止私自放行；负责灭菌区域清洁、设备日常保养、消毒剂管理；配合QA开展灭菌工艺验证、环境监测、GMP核查。1.2上岗资质（强制要求）经GMP、无菌基础知识、各类灭菌设备专项培训并考核合格；通过洁净区更衣确认，熟悉B级无菌区行为规范；掌握生物指示剂原理、不合格结果风险判定；每年进行复训与能力评估；患有传染性皮肤病、呼吸道感染人员禁止上岗。1.3权限红线❌严禁未经QA批准擅自修改灭菌程序、缩短灭菌时间、降低温度；

❌灭菌未完成、压力未归零强行开门；

❌灭菌失败物品未经重新灭菌私自流入洁净区；

❌混用待灭菌、已灭菌物品；

❌使用过期指示剂、未校准温度探头。2术语定义与关键强制指标SAL无菌保证水平：最终灭菌产品SAL≤10⁻⁶；F₀值：湿热灭菌标准等效灭菌时间，最终灭菌物品冷点F₀≥8min；生物指示剂BI：湿热：嗜热脂肪地芽孢杆菌；干热/EO：枯草芽孢杆菌黑色变种；冷点：灭菌腔室内最难达到灭菌条件位置，验证确认后固定布点；湿包：灭菌后包装外/内部出现可见凝水，判定灭菌不合格；\\parametricrelease参数放行\\：仅经注册批准产品可执行，普通企业以BI结果作为放行依据；消毒≠灭菌：日常擦拭（70%IPA、季铵盐）为消毒；VHP熏蒸、高温蒸汽属于灭菌。3通用安全规范与洁净区通用要求3.1通用前置要求（所有灭菌方式适用）先清洁，后灭菌：所有器具、物料必须清除可见物料残渣、油污、有机物；有机物会包裹微生物造成灭菌失效；包装选择：采用耐受灭菌方式的专用灭菌袋/无纺布；密封松紧适度，严禁完全密封不透气；标识要求：每件待灭菌物品标注：物品名称、装载批次、灭菌日期、操作者；粘贴化学指示标签；分区管理：设置物理隔离的待灭菌区、已灭菌区，单向物流，防止交叉污染。3.2人员PPE要求D/C级洁净区：洁净工作服、口罩、鞋套；A/B级无菌区灭菌作业/VHP熏蒸前准备：连体无菌衣、双层手套、护目镜、无菌鞋套；VHP、EO操作时额外佩戴耐化学品防护面罩、防毒防护器具。4湿热灭菌（双扉高压蒸汽灭菌柜）标准操作规程适用：不锈钢器具、无菌工作服、橡胶软管、包装物料、无菌废弃物；不耐热药品禁止使用4.1灭菌前检查确认设备仪表、压力传感器、温度探头在校准有效期内；检查排水过滤器、密封圈完好；水位正常；蒸汽供给压力稳定；确认腔室内清洁、无积水、无上次残留杂物；核对待灭菌物品包装完好，无破损；不能堆叠密封塑料袋。4.2物品装载规范【高频缺陷点】物品与腔壁、顶部、底部保留≥3~5cm间隙；织物类（无菌衣）竖放，便于蒸汽穿透；容器开口倾斜向下/侧向放置，防止积水；禁止超载；不得堵塞腔室蒸汽进出口、排水口；冷点位置放置生物指示剂；同批次物品统一装载模式。4.3标准运行程序（121℃标准程序）关闭柜门，锁紧，启动程序；排冷空气阶段：充分排气；冷空气残留会造成灭菌温度不足；升温阶段：稳步升压升温；灭菌维持段：121.1℃，维持时间依据验证文件（常规15~30min），持续监控冷点F₀；排气、干燥阶段：按程序抽真空干燥；织物类延长干燥时间，防止湿包。4.4灭菌后操作必须腔内压力完全归零、温度降至≤80℃后方可开启洁净侧柜门；严禁带压开门！逐件检查化学指示剂变色情况；检查有无湿包；收集生物指示剂，标识完整，送微生物实验室培养；合格物品转移至已灭菌存放区；湿包、指示剂变色不合格物品全部隔离，标识“灭菌失败，禁止使用”。4.5不合格判定湿包；化学指示物变色未达到标准色阶；BI培养阳性（检出微生物生长）；运行过程温度、压力低于验证规定参数、F₀＜8min；

出现任意一条，本装载全部判定灭菌失败，启动偏差。5干热灭菌操作规程适用：玻璃器皿、金属器具、耐高温无水分要求物料；除热原（内毒素）装载物品不可紧密堆叠，热风循环通畅；常用程序：180℃≥120min/250℃≥30min（依据验证报告）；BI：枯草芽孢杆菌黑色变种；程序结束自然降温至安全温度方可开门；重点监控：腔室温度均匀性，防止局部温度偏低。6VHP汽化过氧化氢无菌室空间/传递舱灭菌规程（无菌室核心环境灭菌）适用：A/B/C级无菌洁净室、层流罩、传递窗、隔离器周期性空间灭菌

⚠️VHP具有腐蚀性，人员毒性，熏蒸全过程区域严禁有人停留6.1灭菌前准备通知所有人员撤离灭菌区域；设置警戒标识，上锁隔离；关闭区域所有对外门、传递窗；确认房间密闭性；设备表面平整，减少死角；敞开设备腔体、柜门；关闭室内常规净化空调循环，按照验证方案设定HVAC联动模式；在房间死角、设备背面、门缝等难点位置布放生物指示剂。6.2运行三阶段（不可删减）汽化投药阶段：按照验证剂量投加35%食品级过氧化氢；密闭维持灭菌阶段：维持目标浓度，暴露时间满足验证要求（通常30~90min，实现6log芽孢杀灭）；催化分解排风阶段：开启分解系统，持续通风降解过氧化氢。6.3灭菌后放行条件过氧化氢残留浓度检测≤1ppm；全部生物指示剂培养阴性；区域环境沉降菌/浮游菌采样合格（按需）；

未达标禁止人员进入、禁止投入生产6.4重要禁忌禁止熏蒸期间使用75%酒精擦拭、插拔电器插头；禁止过氧化氢与其他消毒剂混合。7无菌药液过滤除菌操作规程（不耐热产品）过滤除菌不能替代终端灭菌，仅用于热不稳定无菌药品，工艺必须经过验证使用0.22μm除菌级滤器；滤膜完整性预先确认；记录过滤压力、流速、药液温度；过滤前后必须做泡点试验（完整性测试）；泡点不合格，该批次药液隔离评估风险；过滤全程在A级层流环境下完成，防止二次污染；记录滤器批号、泡点数值、操作起止时间。8环氧乙烷EO灭菌操作规程（可选，橡胶、塑料不耐湿热物料）物品预处理：控制温湿度（湿度是灭菌关键条件）；装载预留气体流通通道；布放枯草芽孢杆菌BI；灭菌完成后必须执行解析（通风解吸）；成品放行前检测EO残留量，符合药典限度；EO易燃易爆，操作区域严禁明火、静电；配备气体检测报警装置。9指示剂使用标准化规范9.1化学指示剂（每批次装载必用）作用：快速目视初步判断灭菌工艺是否发生；不能证明灭菌合格使用：每件灭菌包装外粘贴；灭菌后对比标准色卡；变色不足直接拒收。9.2生物指示剂BI（法定判定依据）布点：腔室冷点、最难灭菌位置；每个独立灭菌循环放置足量BI；设置阳性对照；灭菌结束及时回收，避免环境杂菌污染；培养条件严格按照菌种要求；BI阳性=灭菌失败，必须开展偏差调查，评估所有同批物品风险。9.3使用期限指示剂必须在有效期内储存；禁止使用过期指示剂。10灭菌物品分区、储存与有效期管理色标管理推荐

待灭菌区：黄色标识；已灭菌区：绿色标识；不合格隔离区：红色标识已灭菌物品离地、离墙存放；避免二次污染；设定灭菌后最长有效期（通过验证确定，常见无菌器具7~14天）；超过有效期必须重新灭菌；遵循先进先出；外包装破损、受潮一律重新灭菌。11设备维护、校准与验证周期温度、压力记录仪、探头：每年至少校准1次；湿热灭菌柜、VHP设备：日常班前检查，每周深度清洁；再验证周期：常规每年至少一次再验证；出现重大维修、改造、连续灭菌失败、工艺变更后必须立即再验证；建立设备维修台账，所有维修记录归档。12异常、应急处置与偏差流程（灭菌师必掌握）12.1运行中途设备停机/断电禁止强行开门；保持密闭状态；立即通知车间主管+QA；根据验证方案评估：循环是否有效；无法判定合格→本次装载全部判定灭菌失败。12.2BI阳性、湿包、参数超标执行标准流程：立即隔离所有该批次物品，悬挂禁止使用标识；填写偏差报告；QA组织调查：装载方式、蒸汽质量、设备故障、操作失误、包装缺陷；调查完成制定CAPA纠正预防措施；风险评估确认无产品污染后方可恢复生产。12.3VHP熏蒸意外人员闯入/气体泄漏迅速撤离人员，转移至通风区域；必要时就医；启动排风系统持续分解；暂停所有灭菌工作；开展泄漏点排查。13记录管理（GMP强制可追溯要求）所有记录实时手写/电子记录，禁止事后补记、涂改；修改需要签名及日期。

灭菌记录最低包含信息：灭菌设备编号、程序名称；装载物品名称、批次、数量、装载模式；灭菌起止时间；关键温度、压力、F₀值；化学指示剂检查结果；BI数量、编号、回收情况；灭菌结论：合格/不合格；操作人员、复核人员签名；异常情况详细描述。记录保存期限：至少药品有效期后1年，不少于5年。14灭菌师日常工作清单（每日执行）✅上岗前更衣、健康自查

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