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文档简介
致谢葵花盘绿原酸的鉴定实验探究目录TOC\o"1-3"\h\u25187葵花盘绿原酸的鉴定实验探究 1143981.1试剂与仪器 1246171.1.1试剂 1301861.1.2仪器 1118531.2实验方法 2290861.2.1最大吸收波长的确定 256141.2.2红外光谱的检测 28001.2.3高效液相色谱 2323391.3结果与分析 243071.3.1全波长扫描 3101741.3.2红外光谱检测 4101531.3.3高效液相色谱法 525741.4小结 61.1试剂与仪器1.1.1试剂表4-1实验试剂表1.1.2仪器表4-2实验仪器1.2实验方法1.2.1最大吸收波长的确定参比液为无水乙醇,准确吸取1mL葵花盘绿后,用无水乙醇定容50mL容量瓶中,用紫外可见分光光度计在200到700nm范围内扫描。1.2.2红外光谱的检测取适量的葵花盘绿原酸样品、绿原酸标准品少量后,挤压成片后用红外光谱进行分析。1.2.3高效液相色谱准确称取10mg纯化前和纯化后的葵花盘绿原酸样品及标准品并加50%的甲醇定容于10mL的容量瓶中,超声震荡20min后用0.22um过滤,等待检测。设置样品进样次数1次为色谱条件;进样体积为10uL;为进样时间为30min;检测波长为330nm;柱温为25℃,进样流速为1mL/min;色谱柱为HypersilC18;流动相是色谱纯乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱见下表4-3。表4-3梯度洗脱条件1.3结果与分析1.3.1全波长扫描图1.1绿原酸标准品紫外全波长扫描图1.2葵花盘绿原酸紫外扫描紫外的光谱检测能够得到某些物质的特征吸收峰,判断该物质的类别可以通过图中的特征吸收峰。可得出,葵花盘绿原酸的最大吸收波长在330nm,并且对比图1.1和图1.2可以看出,出峰位置和绿原酸标准品的位置基本一样,与所查文献相同[72],进一步表明为绿原酸,因此确定葵花盘中含有绿原酸。同时,这也是提取绿原酸和高效液相检测选取330nm为检测的波长的原因。1.3.2红外光谱检测图1.3葵花盘绿原酸红外光谱图由图1.3可知,葵花盘绿原酸的红外光谱的主要波数为3252cm-1、2929cm-1、1959cm-1、1379cm-1、1036cm-1,通过查阅文献[73],3252m-1属于羟基的特征吸收峰;亚甲基的反对称伸缩振动峰为2929cm-1;1959cm-1属于α,β,γ,δ不饱和酯的伸缩振动峰,1379cm-1属于芳环骨架,1036cm-1属于=C-H面内弯曲振动峰。因此,可以证明葵花盘提取的物质含有绿原酸。1.3.3高效液相色谱法图1.4绿原酸标准品的高效液相色谱图图1.5葵花盘绿原酸纯化前的高效液相色谱图图1.6葵花盘绿原酸纯化后的高效液相色谱图依据上图1.6可以得出,绿原酸标准品的保留时间为11.580min。依据上图1.5和图1.6中可以看出,该保留的时间都出现明显的峰,因此,所测的样品中含有绿原酸。从图中可以看出,纯化后的葵花盘绿原酸明显比纯化前杂峰少了很多,因此可以进行后续的体外降血糖实验。1.4小结通过紫外可见吸收光谱、红外光谱及高效液相色谱,对葵花盘绿原酸进行定性分析实验,可以得出结论:葵花盘绿原酸的特征吸收峰为330nm。红外光谱主要的
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