2026医技类-病理学技术(师)208历年题库含答案详解

2026医技类-病理学技术(师)［208］历年题库含答案详解一、选择题从给出的选项中选择正确答案（共100题）1、以下哪个穴位位于足底第2、3趾蹼缘与足跟连线的前1/3与后2/3交点处A.涌泉B.太溪C.昆仑D.大钟2、在石蜡切片过程中，脱蜡步骤的目的是什么？A.去除组织中的水分B.去除二甲苯中的石蜡C.固定组织蛋白D.增加组织硬度3、HE染色中，苏木精使细胞核呈现什么颜色？A.粉红色B.蓝色C.黄色D.绿色4、冰冻切片常用的冷冻剂是？A.福尔马林B.液氮C.乙醇D.甲醛5、组织固定最常用的固定液是？A.95%乙醇B.4%多聚甲醛C.丙酮D.甲醇6、PAS染色主要用于显示哪种物质？A.蛋白质B.脂肪C.糖原和粘多糖D.核酸7、免疫组织化学技术中，PBS的主要作用是？A.固定组织B.清洗标本C.促进显色D.防止切片脱落8、切片出现皱褶的主要原因不包括？A.切片刀有缺口B.组织脱水过度C.切片机角度不当D.展片水温过高9、细胞学检查中，巴氏染色主要用于？A.细菌检测B.宫颈涂片C.血液病诊断D.真菌培养10、石蜡切片厚度一般为？A.0.5-1μmB.2-5μmC.10-20μmD.50-100μm11、特殊染色中，Masson三色染色主要显示？A.神经纤维B.胶原纤维C.弹力纤维D.肌纤维12、组织处理中，透明剂的常用试剂是？A.二甲苯B.乙醇C.甲醛D.丙酮13、HE染色切片出现蓝色背景的可能原因是？A.染色过深B.分化不足C.脱蜡彻底D.水化充分14、电镜制样中，戊二醛的主要作用是？A.提供反差B.初步固定C.脱水D.包埋15、分子病理学检测中，FISH技术主要用于？A.蛋白质定性B.基因重排检测C.细菌培养D.酶活性测定16、组织切片脱片的主要原因是？A.切片太厚B.载玻片未清洁C.固定充分D.染色时间适中17、免疫荧光技术中，直接法与间接法的区别在于？A.荧光素种类不同B.一抗是否标记荧光素C.观察设备不同D.固定液不同18、石蜡包埋时，蜡块温度一般控制在？A.30-35℃B.40-50℃C.56-60℃D.70-80℃19、细胞固定液丙酮主要用于？A.石蜡切片固定B.冰冻切片固定C.细胞涂片固定D.电镜固定20、特殊染色中，刚果红染色主要用于检测？A.淀粉样变B.钙盐沉积C.铁沉积D.黏液21、组织切片染色后脱水用？A.蒸馏水B.乙醇C.二甲苯D.甘油22、HE染色中，伊红溶液的pH值对染色效果有何影响？A.pH偏低使胞浆偏蓝B.pH偏高使胞浆偏红C.pH无影响D.pH只影响细胞核23、分子病理检测中，PCR技术主要用于？A.蛋白质定量B.DNA扩增C.细胞计数D.组织固定24、在病理组织固定过程中，用于固定的10%中性缓冲福尔马林溶液的配制方法正确的是：A.将40%甲醛100ml与蒸馏水900ml混合后加磷酸氢二钠16g和磷酸二氢钠4gB.将40%甲醛100ml与蒸馏水900ml混合后加磷酸氢二钠4g和磷酸二氢钠16gC.将40%甲醛100ml与生理盐水900ml混合后加磷酸氢二钠16g和磷酸二氢钠4gD.将40%甲醛100ml与蒸馏水900ml混合后加碳酸氢钠16g和氯化钠4g25、HE染色中苏木精使细胞核呈蓝色的原理是：A.苏木精为酸性染料，与碱性的核酸结合B.苏木精为碱性染料，与酸性的核酸结合C.苏木精为中性染料，与蛋白质结合D.苏木精与脂质发生化学反应生成蓝色复合物26、石蜡切片常规厚度为：A.1～2μmB.3～5μmC.6～8μmD.10～15μm27、术中冰冻切片常用于：A.长期病理标本保存B.确定病变性质以指导手术方案C.免疫组化染色前处理D.电镜组织取材28、Fixation（固定）的主要目的不包括：A.防止组织自溶B.保持细胞形态结构C.使组织变硬便于切片D.增加组织颜色以便观察29、PAS（过碘酸雪夫）染色主要用于显示：A.胶原纤维B.糖原和黏多糖C.脂肪D.网状纤维30、免疫组化染色中，抗原修复最常用的方法是：A.高温微波修复法B.低温冷藏法C.室温自然干燥法D.冷冻干燥法31、Masson三色染色中，肌纤维和胶原纤维分别呈现的颜色是：A.肌纤维红色，胶原纤维蓝色B.肌纤维蓝色，胶原纤维红色C.肌纤维绿色，胶原纤维红色D.肌纤维黄色，胶原纤维蓝色32、脱水剂在石蜡切片制作中的主要作用是：A.使组织硬化B.置换组织中的水分以便石蜡渗透C.固定组织蛋白D.杀死细菌33、关于细胞固定液的选择，下列哪项是正确的：A.涂片细胞学标本常用95%乙醇固定B.免疫组化首选福尔马林固定C.电镜取材首选乙醇固定D.冷冻切片需先用乙醇脱水34、TUNEL法检测细胞凋亡的原理是：A.检测细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻B.标记凋亡细胞DNA断裂末端的3'-OHC.检测caspase酶活性D.检测线粒体膜电位变化35、PCR技术在病理学中最主要的应用是：A.蛋白质定量分析B.检测特定基因序列的存在与突变C.观察细胞超微结构D.测量组织含水量36、巴氏染色法主要用于：A.细菌鉴定B.妇科脱落细胞学检查C.真菌培养D.病毒分离37、组织芯片技术的主要优点是：A.可同时检测多种抗原B.多个组织点集成于同一切片，节省试剂和时间C.替代所有传统染色方法D.不需要显微镜观察38、CA125作为肿瘤标志物主要与哪种肿瘤相关：A.肝癌B.卵巢癌C.肺癌D.胰腺癌39、嗜银染色（银染色）主要用于显示：A.弹性纤维B.网状纤维C.胶原纤维D.肌纤维40、冷冻切片制作中常用的冷冻保护剂是：A.甘油B.石蜡C.乙醇D.甲醛41、HE染色后切片出现蓝色背景的原因最可能是：A.苏木精分化过度B.伊红染色时间过长C.苏木精分化不充分或反蓝不足D.脱蜡不彻底42、酶组织化学中，最适pH和温度控制的主要目的是：A.提高切片美观度B.保持酶的活性并保证反应特异性C.加快染色速度D.防止切片脱落43、病理质量控制的指标中，切片厚度误差允许范围一般为：A.±0.5μmB.±1.0μmC.±2.0μmD.±5.0μm44、关于石蜡熔点的选择，常规石蜡切片用的石蜡熔点是：A.42～45℃B.52～56℃C.62～65℃D.72～75℃45、细胞核固缩（pyknosis）在细胞凋亡中的表现是：A.核体积增大，染色质疏松B.核体积缩小，染色质浓缩成块C.核膜破裂，染色质溶解D.核仁明显增大46、HE染色中，使细胞核呈蓝色的染料是：A.伊红B.苏木精C.氨水D.酒精47、石蜡切片中常用的脱蜡溶剂是：A.甲醇B.乙醇C.二甲苯D.丙酮48、细胞固定时最理想的固定剂是：A.甲醛B.乙醇C.丙酮D.戊二醛49、冰冻切片常用的包埋介质是：A.石蜡B.OCT包埋剂C.明胶D.火棉胶50、切片出现皱纹的主要原因不包括：A.切片厚度不均B.刀口有缺口C.组织未完全脱水D.切片时温度过低51、PAS染色主要用于显示：A.蛋白质B.脂肪C.糖原D.核酸52、免疫组化染色中，抗原修复常用的方法是：A.高温加热法B.低温冷冻法C.紫外线照射法D.化学氧化法53、TUNEL法可用于检测：A.细胞增殖B.细胞凋亡C.细胞坏死D.细胞分化54、细胞计数时常用台盼蓝染色，活细胞和死细胞的表现分别为：A.着色、不着色B.不着色、着色C.均着色D.均不着色55、HE染色过程中，分化目的是：A.去除多余染料B.增加颜色对比度C.使组织透明D.固定组织56、病理取材时，血液标本常加入的抗凝剂是：A.甲醛B.肝素C.乙醇D.二甲苯57、冰冻切片中常用快速诊断方法是：A.HE染色B.免疫荧光C.电镜观察D.特殊染色58、细胞学检查中，宫颈刮片常用的染色法是：A.HE染色B.Papanicolaou染色C.Giemsa染色D.银染色59、石蜡切片切片机常用的类型是：A.旋转式切片机B.滑动式切片机C.冷冻切片机D.激光切片机60、组织脱水过程中，透明度转变通常发生在：A.乙醇阶段B.二甲苯阶段C.石蜡阶段D.乙醇过渡二甲苯阶段61、病理切片封固常用的封固剂是：A.中性树胶B.甘油C.石蜡D.甲醛62、细胞培养中，培养箱最常用的气体环境是：A.95%空气+5%CO2B.100%氧气C.95%氮气+5%二氧化碳D.纯二氧化碳63、石蜡切片的常规切片厚度为：A.1~2μmB.4~6μmC.10~15μmD.20~30μm64、苏木精染液久置后表面形成薄膜，该薄膜应：A.保留使用B.过滤去除C.搅拌混匀D.直接丢弃整瓶65、病理标本固定时间一般应不少于：A.15分钟B.30分钟C.6小时D.24小时66、石蜡切片制作过程中，脱水最常用的试剂是A.二甲苯B.乙醇C.甲醛D.丙酮E.氯仿67、在HE染色中，使细胞核染成蓝色的染料是A.伊红B.苏木精C.酸性品红D.橘黄GE.亮绿68、冰冻切片制作时，常用的冷冻剂是A.液氮B.乙醇C.丙酮D.石蜡E.甲醛69、关于甲醛固定液的特性，下列描述正确的是A.渗透速度慢B.固定后组织收缩明显C.可与石蜡互溶D.固定能力强E.不适用于电镜观察70、免疫组织化学染色中，常用的抗原修复方法是A.高温高压法B.有机溶剂法C.机械打磨法D.酸洗法E.酶消化法71、在特殊染色中，Masson三色染色主要用于显示A.脂肪组织B.弹性纤维C.胶原纤维D.网状纤维E.淀粉样物质72、病理标本采集后，首选的固定液是A.95%乙醇B.10%中性缓冲甲醛C.丙酮D.醋酸E.锇酸73、关于病理切片脱蜡的要求，下列正确的是A.二甲苯可多次重复使用B.脱蜡时间越长越好C.组织块需完全浸入二甲苯中D.乙醇浓度越高脱蜡效果越好E.无需彻底脱蜡即可染色74、PAS染色主要用于显示组织中的A.蛋白质B.脂类C.糖原和黏多糖D.核酸E.色素75、冷冻切片的制作过程中，切片的最佳温度范围是A.-5℃至0℃B.-15℃至-20℃C.-25℃至-30℃D.-35℃至-40℃E.-40℃以下76、在病理切片的染色过程中，分化液的作用是A.使染料更深入组织B.去除多余染料使背景清晰C.增强染色强度D.保护组织形态E.使染料与组织结合更牢固77、关于组织固定时间的叙述，正确的是A.固定时间越长越好B.固定时间与组织厚度无关C.一般固定时间为组织厚度的1/10D.小组织块固定时间可缩短E.固定时间不影响后续染色78、银染色法主要用于显示A.胶原纤维B.弹性纤维C.网状纤维D.肌纤维E.脂肪组织79、免疫组化染色中出现非特异性背景着色，最可能的原因是A.一抗浓度过低B.孵育时间过短C.内源性酶未封闭D.显色时间过长E.切片过厚80、关于病理标本的标记，下列说法正确的是A.标本标记可在固定后进行B.标记内容应包含患者姓名和病历号C.标记位置无特殊要求D.可使用普通墨水标记E.标记不需与申请单对应81、在病理制片过程中，透明度检查的目的是A.判断染色是否成功B.确认组织中的水分是否完全去除C.判断石蜡是否充分渗透D.观察组织结构E.检查切片是否完整82、关于HE染色中苏木精染液的老化，下列说法正确的是A.老化染液效果更好B.老化后需用滤纸过滤去除沉淀C.老化不影响染色效果D.老化染液可直接继续使用E.老化染液应丢弃不用83、病理切片封片时，常用的封固剂是A.中性树胶B.石蜡C.乙醇D.甲醛E.二甲苯84、关于蜡块的制作，下列错误的是A.蜡块大小应适中B.组织应置于蜡块中央C.蜡块可在室温下自然冷却D.蜡块应标注相关信息E.蜡块需冷藏保存85、在病理切片染色过程中，水化的顺序应该是A.从低浓度乙醇到高浓度乙醇B.从高浓度乙醇到低浓度乙醇C.直接从二甲苯到水D.从纯水到乙醇E.顺序无所谓86、组织固定液福尔马林的正确浓度是A.5%B.10%C.15%D.20%87、HE染色中苏木精染色的主要靶结构是A.细胞质B.细胞核C.胶原纤维D.肌纤维88、石蜡切片厚度一般控制在A.1~2μmB.4~6μmC.8~10μmD.12~15μm89、冰冻切片常用的冷冻剂是A.液氮B.干冰C.正丁醇D.石蜡90、PAS染色主要用于显示A.脂肪B.糖原和黏多糖C.铁盐D.钙盐91、切片出现皱褶的主要原因是A.切片刀钝B.切片太薄C.展片水温过高D.组织过硬92、Masson三色染色中，胶原纤维显示的颜色为A.红色B.蓝色或绿色C.黄色D.黑色93、免疫组化染色中抗原修复的主要目的是A.增强背景着色B.暴露被福尔马林固定的隐蔽抗原表位C.缩短染色时间D.提高染色特异性94、细胞蜡块制作时常用的离心转速为A.500转/分B.1000转/分C.2000转/分D.5000转/分95、苏丹III染色主要用于检测A.糖原B.脂质C.黏液D.淀粉96、切片中出现刀痕的可能原因是A.切片速度过快B.切片刀有缺口或组织中有钙盐C.展片时间过长D.脱水不彻底97、银染法主要用于显示A.弹性纤维B.网状纤维C.胶原纤维D.肌纤维98、组织脱水使用梯度酒精的原因是A.节省酒精用量B.提高脱水效率并保护组织形态C.增加组织硬度D.便于脱蜡99、免疫组化DAB显色系统的最终产物颜色为A.蓝色B.红色C.棕黄色D.绿色100、组织固定时间过长会导致A.细胞结构更清晰B.组织过硬切片困难C.染色更鲜艳D.抗原活性增强

参考答案及解析1.【参考答案】A【解析】涌泉穴位于足底，蜷足时足前部凹陷处，约在足底第2、3趾蹼缘与足跟连线的前1/3与后2/3交点处。属足少阴肾经井穴，有滋阴补肾、醒脑开窍功效。太溪在内踝与跟腱之间，昆仑在外踝与跟腱之间，大钟在太溪下0.5寸稍后。2.【参考答案】B【解析】脱蜡步骤旨在去除包埋时渗入组织的石蜡，使后续水化试剂能够进入组织。通常先经二甲苯溶解石蜡，再经梯度酒精水化。脱水是前期步骤，固定和硬化分别在取材前和脱水后进行。正确顺序为脱蜡→水化→染色。3.【参考答案】B【解析】苏木精为碱性染料，主要与细胞核内的酸性物质如DNA结合，经分化后呈蓝色或蓝紫色。伊红为酸性染料，使细胞质和胶原纤维等呈粉红色。蓝紫与粉红对比使组织结构清晰可见，是病理切片最常用染色方法。4.【参考答案】B【解析】液氮温度可达-196℃，可使组织迅速冷冻变硬，便于切片。常用于手术中快速病理诊断。福尔马林和甲醛是固定液，乙醇是脱水剂，均不用于冷冻切片。快速冷冻可保存酶活性和抗原性。5.【参考答案】B【解析】4%多聚甲醛（中性缓冲福尔马林）是最常用的组织固定液，能很好保存组织形态和抗原性。固定可防止组织自溶和腐败，使蛋白质变性凝固。常用固定时间为6-48小时，固定不足或过度均影响后续切片和染色效果。6.【参考答案】C【解析】PAS（过碘酸雪夫）染色利用过碘酸氧化糖原等多糖中的乙二醇基，生成醛基后与Schiff试剂结合呈紫红色。常用于显示基底膜、糖原、粘多糖等，对肾小球疾病和肿瘤鉴别有重要价值。蛋白质用刚果红或银染，脂肪用苏丹染色。7.【参考答案】B【解析】PBS（磷酸盐缓冲盐水）用于冲洗多余试剂和未结合的一抗二抗，避免非特异性反应。固定用福尔马林，显色用DAB等底物，防脱落用防脱片载玻片。PBS维持生理pH，保持组织活性，是IHC流程中不可或缺的清洗缓冲液。8.【参考答案】B【解析】切片皱褶多因刀片缺陷、切片角度不当或展片水温不合适引起。脱水过度会导致组织变脆而非皱褶。正确操作包括定期磨刀、调整切片角度、控制水温在40-45℃。皱褶影响观察时需重新切片或调整切片参数。9.【参考答案】B【解析】巴氏染色是宫颈癌筛查最常用的细胞学染色方法，可清晰显示细胞核和胞浆细节。由Papanicolaou发明，通过多重染色区分角蛋白化和非角蛋白化细胞。适用于妇科、呼吸道等脱落细胞学检查，对癌前病变和癌症诊断价值重大。10.【参考答案】B【解析】常规石蜡切片厚度为2-5μm，最佳观察厚度约4μm。超薄切片（0.5-1μm）用于电镜，厚切片（10-20μm）用于特殊研究，50μm以上为冰冻或振动切片范围。切片过厚影响染色透化和显微镜观察，过薄则可能破损。11.【参考答案】B【解析】Masson三色染色可使胶原纤维呈蓝色或绿色，肌纤维和胞浆呈红色，细胞核呈黑色。广泛用于肝纤维化、心肌纤维化等疾病的病理诊断。弹力纤维用V-G染色显示，神经纤维用银染，单纯肌纤维用PAS或刚果红辅助判断。12.【参考答案】A【解析】透明剂（如二甲苯）用于置换脱水剂酒精，使石蜡能够渗透组织。二甲苯与酒精互溶，且能与石蜡互溶，是理想的透明介质。酒精是脱水剂，甲醛是固定液，丙酮也可脱水但透明效果不如二甲苯。透明时间通常为10-30分钟。13.【参考答案】B【解析】分化不足是HE切片背景发蓝的常见原因，酸性分色液未能充分洗去多余苏木精，导致非特异性着色。染色过深会整体颜色偏重，脱蜡彻底和水化充分是正确的操作步骤。解决方法是延长分化时间或用酸性酒精适当分化。14.【参考答案】B【解析】戊二醛是电镜常用的初级固定剂，能很好地保存超微结构。它通过与蛋白质氨基酸残基形成交联来固定细胞结构。锇酸作为二次固定剂，铀铅染料用于染色增加反差，乙醇用于脱水，环氧树脂用于包埋。两者配合可获得最佳超微结构保存。15.【参考答案】B【解析】FISH（荧光原位杂交）利用荧光标记探针与靶DNA序列杂交，可在染色体水平检测基因扩增、缺失、重排等异常。广泛用于肿瘤分子分型和预后评估。蛋白质检测用免疫组化，细菌培养用微生物学方法，酶活性用生化检测。16.【参考答案】B【解析】载玻片污染或处理不当是脱片的常见原因。防脱片载玻片或涂胶可提高附着力。切片太厚不易脱落，固定充分和染色适中有助于保持组织完整性。脱片会影响诊断，需重新制片或使用多聚赖氨酸处理载玻片以增强粘附性。17.【参考答案】B【解析】直接法用荧光素标记的一抗直接与抗原结合，步骤简单但敏感性较低；间接法用未标记的一抗结合荧光标记的二抗，可放大信号但可能有交叉反应。荧光素种类、观察设备和固定液两法可相同。间接法更常用且敏感性更高。18.【参考答案】B【解析】包埋时蜡温控制在40-50℃，既可使石蜡保持液态便于操作，又不会因温度过高损伤组织。石蜡熔点多在56-60℃，室温下已凝固。30-35℃过低蜡不易熔化，70-80℃过高会烫坏组织。正确温度是保证切片质量的关键环节。19.【参考答案】C【解析】丙酮是细胞涂片和印片常用的固定液，能快速脱水并固定细胞形态，且易挥发便于后续染色。石蜡切片多用甲醛固定，冰冻切片可用丙酮或多聚甲醛，电镜用戊二醛和锇酸双重固定。丙酮对某些抗原保存较好，但不适合所有免疫染色。20.【参考答案】A【解析】刚果红染色可使淀粉样物质呈橘红色或粉红色，在偏振光下呈苹果绿色双折射，是诊断淀粉样变的金标准。钙盐用普鲁士蓝或维多利亚蓝染色，铁用普鲁士蓝染色，黏液用PAS或Alcian蓝染色。淀粉样变可见于多种系统性疾病。21.【参考答案】B【解析】染色后切片经梯度乙醇脱水，去除水分以便透明和封片。蒸馏水用于水化，二甲苯用于透明，甘油用于水溶性封片剂。脱水不彻底会导致切片模糊或封片剂浑浊。梯度一般为70%、80%、95%、100%乙醇，每级短暂浸泡后转入更高浓度。22.【参考答案】A【解析】伊红为酸性染料，pH偏低（约4.5-5.0）时染红色减弱，胞浆偏蓝；pH偏高则染色加深呈鲜红色。苏木精染色受pH影响较小。最佳pH范围是4.6-5.2，可使胞浆呈鲜明红色，核浆对比清晰。pH调节是染色质量控制的重要环节。23.【参考答案】B【解析】PCR（聚合酶链式反应）可在体外特异性扩增DNA片段，用于基因突变检测、病原微生物鉴定等。蛋白质定量用ELISA或Westernblot，细胞计数用血球计数板，组织固定用化学固定剂。PCR具有高敏感性和特异性，是分子诊断的核心技术之一。24.【参考答案】A【解析】10%中性缓冲福尔马林是将40%甲醛原液100ml加蒸馏水900ml稀释，再加入磷酸氢二钠16g和磷酸二氢钠4g调节pH至7.2～7.4。选项B缓冲盐比例错误，选项C使用了生理盐水，选项D使用了错误的缓冲物质。25.【参考答案】B【解析】苏木精本身不是染料，需氧化为苏木红后才具染色力。苏木红为碱性染料，可与酸性结构如细胞核内的核酸（DNA、RNA）结合呈蓝色。细胞核富含核酸呈嗜碱性，故被苏木精染成蓝紫色。选项A酸碱性质描述错误。26.【参考答案】B【解析】石蜡切片常规厚度为3～5μm，此厚度既能保证组织结构的完整显示，又便于光线透过显微镜观察。薄至1～2μm适用于电镜超薄切片，6～8μm偏厚易导致组织结构重叠，10～15μm多用于冰冻切片。27.【参考答案】B【解析】术中冰冻切片主要用于手术过程中快速诊断，帮助外科医生判断病变性质（良性或恶性）、切除范围及切缘是否阴性，从而决定手术方式。该方法操作快捷，约15～30分钟出结果，不适合长期保存标本或需要特殊染色的后续研究。28.【参考答案】D【解析】固定的主要目的是迅速杀灭微生物、防止组织自溶和腐败、保持细胞形态结构与生活时的相似性、使蛋白质凝固变硬便于切片加工。固定本身不会增加组织颜色，着色需依靠后续染色步骤完成。29.【参考答案】B【解析】PAS染色利用过碘酸氧化糖类物质的羟基生成醛基，再与雪夫试剂中的无色品红结合形成紫红色沉淀，主要用于显示糖原、黏多糖、基底膜等碳水化合物结构。胶原纤维常用Masson染色，脂肪用油红O染色，网状纤维用银染色。30.【参考答案】A【解析】石蜡切片经固定后抗原表位可能被遮蔽，需进行抗原修复。高温微波修复法是临床应用最广泛的方法，通过将切片置于柠檬酸钠或EDTA缓冲液中微波加热，使交联的蛋白质抗原表位暴露，增强抗体结合能力。低温和室温方法均无法达到有效修复效果。31.【参考答案】A【解析】Masson三色染色是一种多色染色法，可将细胞核染成黑色或深褐色，肌纤维、角质和红细胞染成红色，胶原纤维和黏液染成蓝色或绿色。该方法常用于鉴别纤维组织增生与肌纤维损伤，如心肌纤维化病变的判定。32.【参考答案】B【解析】脱水是石蜡包埋前的关键步骤，目的是用脱水剂（常用梯度乙醇）逐步置换组织中的水分。水分若不彻底去除，石蜡无法渗入组织，切片时将无法形成完整薄片。脱水不完全会导致后续透明和浸蜡失败，影响切片质量。33.【参考答案】A【解析】涂片或细胞学标本常用95%乙醇固定，可较好地保存细胞形态。免疫组化染色通常选用中性缓冲甲醛固定，但过度固定会掩盖抗原。电镜取材首选戊二醛固定以保存超微结构。冷冻切片不需乙醇脱水步骤，直接速冻即可。34.【参考答案】B【解析】TUNEL（末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记）法利用末端脱氧核苷酸转移酶，将标记的dUTP加到凋亡细胞DNA双链或单链断裂的3'-OH末端，经显色或荧光检测可见阳性信号。该方法是检测DNA片段化的经典凋亡检测方法。35.【参考答案】B【解析】聚合酶链式反应（PCR）可在体外特异性扩增目的DNA片段，在病理学中主要用于检测病原体核酸、基因突变、基因重排（如淋巴瘤克隆性分析）、融合基因等。蛋白质定量常用免疫组化或Westernblot，超微结构观察需电镜。36.【参考答案】B【解析】巴氏染色（Papanicolaou染色）是宫颈脱落细胞学检查的经典染色方法，可清晰显示细胞核和细胞质的细微结构，有利于发现癌细胞和癌前病变细胞。该染色法对角蛋白和角质化细胞染色效果好，不适用于微生物培养或分离。37.【参考答案】B【解析】组织芯片技术将数十至数百个组织样本集成于一个石蜡块中，切成连续切片后可同时进行同一种检测，极大节省试剂消耗、染色时间和人力成本，提高检测效率，适用于大规模标本的高通量分析。但它不能替代其他特殊染色或检测技术。38.【参考答案】B【解析】CA125（癌抗原125）是卵巢上皮性肿瘤的重要标志物，尤其在浆液性囊腺癌中升高明显，可用于疗效监测和复发随访。AFP主要用于肝细胞癌，CEA用于消化道肿瘤，CA19-9常用于胰腺癌和胆管癌。39.【参考答案】B【解析】嗜银染色利用银盐能被还原为金属银而沉积在特定结构上的原理，主要用于显示网状纤维（由Ⅲ型胶原蛋白构成），呈棕黑色。网状纤维分布于淋巴组织、肝小叶、肾小球等部位，有助于判断肿瘤的组织来源和浸润范围。弹性纤维用VIeri染色，胶原纤维用Masson染色。40.【参考答案】A【解析】冷冻切片制作时常用甘油或羧甲基纤维素等冷冻保护剂处理组织，可降低冰晶形成对细胞结构的损伤，改善切片质量。石蜡用于包埋，乙醇用于脱水，甲醛用于固定，均不作为冷冻保护剂使用。41.【参考答案】C【解析】HE染色中出现蓝色背景通常是因为苏木精分化不充分或反蓝不够，导致多余的苏木精滞留于组织间质中。分化过度会使核染色过浅，伊红时间过长会使胞质过红，脱蜡不彻底会影响染色均匀性但不会单独导致蓝色背景。42.【参考答案】B【解析】酶组织化学依赖酶的催化活性，必须在接近生理条件的最适pH和温度下进行反应，以保持酶的天然构象和催化活性，同时确保底物反应的特异性，避免非特异性着色干扰结果判读。偏离最适条件可导致酶失活或反应紊乱。43.【参考答案】A【解析】病理切片质量要求严格，常规石蜡切片厚度误差一般允许在±0.5μm范围内，以确保组织结构清晰、染色均匀。过厚易导致细胞重叠、染色过深，过薄则可能遗漏病变或组织碎裂。±1.0μm以上误差会明显影响诊断准确性。44.【参考答案】B【解析】常规石蜡切片使用的石蜡熔点一般为52～56℃，此温度既能保证切片时组织不易碎裂，又能在染色前加热切片时顺利熔化而不损坏组织结构。熔点过低石蜡过硬易碎，过高则熔化温度接近组织变性温度，可能引起细胞结构破坏。45.【参考答案】B【解析】细胞凋亡的形态学特征包括核固缩（pyknosis），表现为核体积缩小、染色质浓缩成致密块状，常沿核膜分布。随后发生核碎裂（karyorrhexis）和核溶解（karyolysis）。选项A为坏死早期表现，选项C为核碎裂阶段，选项D多见于代谢活跃细胞。46.【参考答案】B【解析】苏木精为碱性染料，可与细胞核内的酸性物质（主要是DNA）结合，使细胞核呈蓝色。伊红为酸性染料，使细胞质和胶原纤维呈红色。氨水用于分化后返蓝，酒精用于脱水。47.【参考答案】C【解析】石蜡切片的脱蜡常选用二甲苯作为脱蜡溶剂，因其能有效溶解石蜡且不损伤组织。甲醇、乙醇主要用于脱水，丙酮脱水速度快但组织收缩明显，不适合石蜡切片脱蜡。48.【参考答案】A【解析】甲醛（福尔马林）渗透力强，固定均匀，对细胞形态结构保存较好，是病理学最常用的固定液。戊二醛虽能更好保存超微结构，但渗透慢，主要用于电镜标本。乙醇、丙酮脱水能力强但易使组织变硬变脆。49.【参考答案】B【解析】OCT（冷冻包埋剂）是最常用的冰冻切片包埋介质，具有适当的硬度和低温稳定性，便于切片且不易产生冰晶。石蜡用于常规石蜡切片，明胶和火棉胶不常用于冰冻切片。50.【参考答案】C【解析】切片出现皱纹多因切片厚度不均、刀口有缺口或切片时温度过低导致组织过硬所致。组织脱水程度主要影响切片是否碎裂，而非直接导致皱纹产生。51.【参考答案】C【解析】PAS（过碘酸雪夫）染色主要用于显示多糖类物质，如糖原、黏液、基底膜等。糖原呈紫红色。蛋白质多用双缩脲反应显示，脂肪用苏丹染色，核酸用Feulgen反应显示。52.【参考答案】A【解析】抗原修复主要采用高温加热法，包括微波、高压锅或水煮等方式，使固定引起的抗原表位隐蔽恢复。低温冷冻不利于抗原暴露，紫外线和化学氧化法不作为常规抗原修复方法。53.【参考答案】B【解析】TUNEL法通过标记细胞凋亡时断裂的DNA片段，检测细胞凋亡。其原理是利用末端脱氧核苷酸转移酶在DNA断口处标记荧光素或酶标核苷酸。该方法不用于检测细胞增殖、坏死或分化。54.【参考答案】B【解析】台盼蓝不能透过活细胞完整的细胞膜，故活细胞不着色；死细胞膜完整性丧失，台盼蓝进入细胞使其呈蓝色。这是判断细胞存活率的基本原理。55.【参考答案】A【解析】分化是用酸性酒精去除组织上未结合的多余染料，使染色结果清晰。盐酸酒精能选择性洗去伊红与苏木精的结合，增强细胞核与细胞质的对比。透明和固定分别在分化之前和之后进行。56.【参考答案】B【解析】肝素可抑制凝血酶原转变为凝血酶，从而防止血液凝固，是血液标本常用的抗凝剂。甲醛、乙醇为固定液，二甲苯为脱蜡溶剂，均无抗凝作用。57.【参考答案】A【解析】术中冰冻切片常规采用HE染色进行快速诊断，可在短时间内获得组织学信息。免疫荧光、电镜和特殊染色耗时较长，一般不适用于术中快速诊断。58.【参考答案】B【解析】巴氏染色（Papanicolaou染色）是宫颈细胞学检查的标准染色方法，能清晰显示细胞核和胞质细节，有利于判断细胞异型性。HE染色、Giemsa染色和银染色不用于常规宫颈细胞学检查。59.【参考答案】A【解析】旋转式切片机是石蜡切片最常用的类型，通过旋转刀架实现连续切片，切片厚度均匀稳定。滑动式切片机多用于大块组织或特殊材料，冷冻切片机用于冰冻切片，激光切片机为新型设备。60.【参考答案】D【解析】组织经乙醇脱水后，乙醇与二甲苯互溶，当组织从乙醇转入二甲苯时，因折射率相近，组织由不透明变为透明。单纯的乙醇阶段组织仍呈不透明状态，二甲苯单独使用无法有效脱水处理组织。61.【参考答案】A【解析】中性树胶折光率与玻璃相近，透明性好，是病理切片最常用的封固剂。甘油易挥发且易滋生微生物，石蜡用于包埋而非封固，甲醛为固定液。62.【参考答案】A【解析】哺乳动物细胞培养通常需要5%二氧化碳以维持培养液pH值稳定，其余为空气。纯氧对多数细胞有毒性，高浓度氮气不利于细胞生长，纯二氧化碳会导致pH过低。63.【参考答案】B【解析】石蜡切片的常规厚度为4~6μm，既能保证组织结构完整显示，又便于光线穿透观察。1~2μm过薄常用于电镜或特殊研究，10~30μm过厚，细胞层次重叠影响观察。64.【参考答案】B【解析】苏木精染液久置后表面形成的薄膜是氧化产物，使用滤纸过滤去除后可继续使用，无需丢弃整瓶染液。保留薄膜会影响染色效果，搅拌混匀也不合适。65.【参考答案】D【解析】石蜡切片常规要求标本固定时间不少于24小时，以确保固定充分。固定时间过短会导致组织中心固定不良，影响切片质量和染色效果。过长时间固定也会造成组织变硬，但不宜少于24小时。66.【参考答案】B【解析】石蜡切片制作过程中，脱水是将组织中的水分置换出来，为后续透明和浸蜡做准备。最常用的是梯度乙醇脱水，通常从低浓度（如70%乙醇）逐渐过渡到高浓度（如95%、100%乙醇），因为乙醇能有效去除组织中的水分且对组织形态影响较小，脱水时间需根据组织大小和厚度适当调整。67.【参考答案】B【解析】HE染色是最常用的病理染色方法，苏木精为碱性染料，能使细胞核内的染色质和胞浆内的RNA等酸性物质染成蓝色；伊红为酸性染料，能使细胞质和间质中的蛋白质等碱性物质染成红色，两者配合使用可使组织结构清晰可辨。68.【参考答案】C【解析】冰冻切片制作时，丙酮是最常用的冷冻剂，将组织块浸入丙酮中进行快速冷冻，可使组织迅速冻结变硬，便于切片。液氮虽也可用于冷冻，但成本较高且操作难度大；乙醇主要用于脱水；石蜡用于包埋；甲醛用于固定。69.【参考答案】D【解析】甲醛固定液具有较强的固定能力，能迅速穿透组织，使蛋白质凝固，保存细胞形态结构良好。甲醛固定液渗透速度较快，固定后组织收缩不明显，可与石蜡互溶，常用于光镜观察，而电镜观察通常选用戊二醛等固定剂。70.【参考答案】A【解析】高温高压法是免疫组织化学染色中最常用的抗原修复方法之一，通过高温高压处理使组织中的抗原表位暴露，增强染色效果。该方法操作简便，适用范围广，尤其适用于甲醛固定石蜡切片。有机溶剂法适用于脂类物质检测；酶消化法也可用于抗原修复但效率相对较低。71.【参考答案】C【解析】Masson三色染色是一种常用的结缔组织染色方法，可将胶原纤维染成蓝色或绿色，肌纤维、角质和红细胞染成红色，细胞核染成黑色，主要用于显示胶原纤维的分布和增生情况，常用于肝纤维化、心肌瘢痕等病变的观察。72.【参考答案】B【解析】10%中性缓冲甲醛是最常用的病理标本固定液，其pH值接近中性，可防止组织因酸性或碱性过强而发生人为改变，固定效果好，适用于大多数组织的固定，能较好地保存组织形态和抗原性，便于后续切片和染色观察。73.【参考答案】C【解析】病理切片脱蜡是切片复染前的重要步骤，组织块需完全浸入二甲苯中以确保石蜡彻底溶解。二甲苯一般不建议多次重复使用，以免影响脱蜡效果；脱蜡时间应适中，过长可能导致组织收缩；乙醇用于水化而非脱蜡；必须彻底脱蜡后才能进行染色。74.【参考答案】C【解析】PAS染色（过碘酸雪夫染色）主要用于显示组织中的糖原和黏多糖等含糖物质。过碘酸将糖原中的乙二醇基氧化为醛基，醛基与雪夫试剂反应生成紫红色化合物，该方法常用于肾小球基底膜、基底膜、糖原累积病等的观察。75.【参考答案】B【解析】冷冻切片制作时，切片室的温度一般控制在-15℃至-20℃，此温度范围可使组织保持适当的硬度，既不易碎裂又便于切出完整薄片。温度过低组织变脆易碎，温度过高则组织偏软不易切片，需要根据组织类型和含水量适当调整。76.【参考答案】B【解析】分化液的主要作用是去除组织中未与目标物质结合的多余染料，使背景清晰、染色对比度增强。常用的分化液为酸性酒精，通过控制分化时间可调节染色的深浅，分化不足会导致背景过深，分化过度则可能使染色过浅甚至褪色。77.【参考答案】D【解析】组织固定时间应根据组织块的大小和厚度适当调整，小组织块固定时间可适当缩短，一般以固定液穿透组织为准。固定时间过短可能导致固定不充分，过长则可能引起组织过硬或抗原丢失。固定时间对后续染色和免疫组化效果均有影响。78.【参考答案】C【解析】银染色法是利用银盐与组织中的某些成分结合后经还原形成黑色金属银沉淀的方法，主要用于显示网状纤维。网状纤维由Ⅲ型胶原构成，纤细且分布广泛，银染色后呈黑色，背景常染为黄色或浅红色，便于在显微镜下观察。79.【参考答案】C【解析】非特异性背景着色是免疫组化常见问题，内源性酶未充分封闭是最可能的原因。人体组织中如肝脏、肾脏等含有丰富的过氧化物酶，如未用合适的封闭剂（如过氧化氢）处理，会导致显色剂被非特异性激活而产生背景着色。此外，一抗浓度过高也可导致非特异性染色。80.【参考答案】B【解析】病理标本标记应在固定前完成，标记内容应包括患者姓名、病历号、标本名称等信息，以便追溯和核对。标记位置应选择在不影响诊断的部位，通常使用防水记号笔标记在容器外壁或标本袋上，确保标记清晰持久且与申请单信息一致。81.【参考答案】C【解析】透明度检查是在透明环节之后进行的，目的是确认组织中的脱水剂（乙醇）已被完全置换为石蜡，组织呈半透明状态表明石蜡已充分渗透，可进行包埋。若透明度不佳，说明透明不彻底，需重新透明处理，否则会影响切片质量和染色效果。82.【参考答案】B【解析】苏木精染液使用一段时间后会出现老化现象，产生沉淀，使用前需用滤纸过滤去除沉淀，以保证染色效果。老化染液的染色能力可能下降，但经过过滤处理后仍可继续使用。若染液表面形成浮膜应去除，染色效果明显变差时应重新配制新液。83.【参考答案】A【解析】中性树胶是病理切片封片时最常用的封固剂，具有良好的透明度、黏合性和耐久性，可使切片长期保存。使用时滴加适量树胶于盖玻片边缘，轻轻盖上盖玻片，避免产生气泡。石蜡用于包埋；乙醇用于脱水；甲醛用于固定；二甲苯用