白血病疫分型

会计学1白血病免疫分型应用目的:确定淋巴系病变的起源和分化程度;鉴别反应性与克隆性淋巴细胞增生性疾病;确定髓系白血病各亚型;对形态学分类不明细胞进行定性;诊断急性未分化型白血病;诊断急性混合细胞白血病;诊断微小残留白血病或白血病浸润;判断白血病/淋巴瘤预后。

第1页/共34页流式细胞术(FlowCytometry):对高速流过检测区的单个细胞或生物颗粒进行多参数、快速分析（或分选)的一种技术。

第2页/共34页第3页/共34页数据显示方式:单参数直方图

双参数二维点图等高图二维密度图三维图第4页/共34页单参数直方图双参数点图第5页/共34页荧光素FITC(异硫氰酸荧光素)：530nm（绿)PE（藻红蛋白)：575nm（橙黄)PI(碘化丙啶)：620nm（橙红)PerCP(多甲藻黄素叶绿素蛋白)：675nm（深红)APC(别藻兰蛋白)：660nm（红)第6页/共34页检测物:细胞表面、胞浆或胞核抗原性物质第7页/共34页CD（clusterofdifferentiation)：1982年起将别同一分化抗原的来自不同实验室的单克隆抗体归为一个分化群，并进行流水编号。一个CD相关抗体可包含多个克隆号。其他非CD系列抗原：如TCR、HLA等第8页/共34页正常血细胞中的抗原表达特点系列保守性.1时序性.2抗原表达量的模式化.3第9页/共34页干细胞嗜碱性细胞嗜酸性细胞红系巨核系粒单核系粒系单核系第10页/共34页CD36

CD71

CD235aCD41

CD42a/b

CD61CD4

CD11b

CD14CD64

HLA-DRCD36CD15

CD71

CD16(TDT

CD7)CD34

CD117CD13

CD33CD38

MPO定向髓系干细胞CD34

CD13CD33

CD117MPO抗原刺激干细胞前B前B静止期BPro-BALL

Pre-BALLCLL/SLL免疫母细胞浆细胞样淋巴细胞大B细胞淋巴瘤淋巴浆细胞淋巴瘤外套细胞滤泡区母细胞中心母细胞中心细胞边缘带细胞浆细胞套细胞

伯基特

大B细淋巴瘤

淋巴瘤

胞淋巴瘤骨髓瘤TDT+

Common-BALLTDT+TDT+CD34+cCD79a+CD19+CD34+cCD79a+CD34±cCD79a+CD19+CD10±CD19+CD20+cμ-CD20

±CD10+cμ-CD10±cμ+CD5+

CD19+CD20

CD22+

CD23+

sIg+

FMC7-CD38CD138CD56cIgCD19-CD45-边缘带淋巴瘤CD22+CD5-CD10-CD23-滤泡淋巴瘤CD22+CD10+FMC7+CD23±bcl-2+CD5-CD19+

CD20+CD22+

CD38+IgM++

sIg++CD22+CD10+sIg+CD34-TDT-CD5+CD22+sIg+FMC7+Cyclin

D1+CD23-CD22+bcl-6+CD10

±CD5

±CD30

±第11页/共34页干细胞胸腺Ⅱ期胸腺Ⅰ期TDT+CD34+CD2cCD3CD7CD71TDT+CD34±CD1aCD2cCD3CD7CD4CD8胸腺Ⅲ期TDT+CD2

CD3

CD5

CD7CD4/CD8TCRPrecursor-T

ALL成熟T细胞各分化群第12页/共34页造血细胞在其分化、发育过程中,细胞膜、细胞浆或胞核抗原的有无、表达强弱与血细胞的分化发育阶段密切相关,表现出与细胞系列及其分化程度相关的特性。

第13页/共34页白血病细胞中的抗原表达特点表达模式基本与相应阶段正常细胞相似，还具有以下特点:跨系表达.1时相混乱.2抗原表达量的改变.3第14页/共34页免疫分型四种急性白血病单表型急性白血病表达某一个系列抗原为主的急性白血病双表型/双克隆急性白血病未分化型急性白血病第15页/共34页各系急性白血病重要抗原指标急性淋巴细胞白血病(AL).1敏感性B-ALL:特异性CD19100%非特异cCD79a99%特异T-ALL:CD7100%非特异cCD3100%特异第16页/共34页急性髓细胞白血病(AML).2表达率特异性CD1370%非特异CD3370%非特异CD11770%特异cMPO70%特异第17页/共34页错译表达（Ly+AML，My+ALL)：白血病细胞表达非本系细胞抗原标志物，具有预后意义。

第18页/共34页ALL第19页/共34页CD13,CD33t(9;22)t(15;17),或RAR+,t(11;17)AMLCD2+,DR- M3CD2+,DR+M4EoCD19+inv(16)或t(16;16)M0

t(9:22)多见M2t(8;21)TdT+,

CD7+见于M0CD56+M5/M4双表型急性白血病记分系统B系T系髓系cMPO2cCD3TCRαβ1TCRγδCD2CD5CD117CD130.5CD8TdTCD7CD33CD14CD15分值

cCD79aCD22cIgMCD19CD10CD20TdTCD24CD64第20页/共34页部分慢性B淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型CD5CD10CD19CD22CD23HLA-DRFMC7SIgCD11cCLL+-++/-++-++/-PLL--++-+++-MCL+-/+++-+++-HCL--++-++++FCL-+++-/+++/-+-MZL--++-++++/-LPL--++-/++-/+注:HCLCD103+CD25+第21页/共34页部分慢性T淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型CD2CD3CD5CD7CD4CD8CD25CD56CD57T-CLL/PLL+++++/--/+-T-LGL+++/-+/--+--/++NK-LGL+---+/--+-ATL+++-++第22页/共34页肝脾γδT细胞淋巴瘤:CD2+CD3+CD7+ TCRγδ+ CD16+/-CD56+/-CD8-/+CD4-TCRαβ-

标本种类:怀疑含有病变细胞的组织或体液，如外周血、骨髓、胸腹水、脑脊液、淋巴结等。标本要求:细胞有活性，最好不要超过48h。

第23页/共34页光散射特征与细胞形态的关系第24页/共34页淋巴单核粒细胞CD45CD45M4/M5M

3正常白血病L1~3,

M0~2

M6,

M7TSSCSSCMM非造血来源细胞CD45在免疫分型中的应用意义原始第25页/共34页嗜碱嗜酸正常骨髓第26页/共34页AML-M1AML-M2AML-M3AML-M4/M5第27页/共