NGF 诱导神经分化的经典模型 PC-12半贴壁怎么养_第1页
NGF 诱导神经分化的经典模型 PC-12半贴壁怎么养_第2页
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文档简介

NGF诱导神经分化的经典模型PC-12,半贴壁怎么养研究神经生长因子(NGF)、神经元分化或者神经保护的同学,PC-12是经典到不能再经典的模型。它是大鼠嗜铬细胞瘤来源,用NGF一诱导就能长出神经突起,变成神经元样细胞。PC-12(未分化)是大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞,来自可移植的雄性大鼠。它表达NGF受体,NGF可诱导其产生神经表型;不合成肾上腺素。是研究神经元分化、神经退行和神经保护的经典模型。细胞背景与来源来源:大鼠,肾上腺嗜铬细胞瘤。半贴壁生长,成簇聚集,有部分悬浮细胞;贴壁很弱。应用场景与研究价值神经元分化:NGF诱导长出神经突起、建立神经表型,研究分化机制。神经退行/保护:神经保护剂筛选、氧化应激与凋亡研究。分泌/递质:儿茶酚胺等神经递质合成与释放研究。培养特性与注意事项培养基:RPMI1640+15%马血清(HS)+5%FBS+1%双抗——马血清是维持未分化状态的关键,别省。环境37℃、5%CO2、饱和湿度。生长较快,培养基消耗快,变黄及时换液。传代不用胰酶:吸走上清留2-3mL,轻吹细胞面把细胞吹下来,900rpm离心3-5min,重悬分瓶,吹打要轻。冻存:92%FBS+8%DMSO,程序降温盒-80℃过夜转液氮。复苏:37℃水浴2min内,150g离心2min。生物安全:BSL-1。注意:贴壁很弱,运输震荡、低温、试剂过冷、室温放太久都可能导致回缩脱落,放回培养箱静置多能恢复;对血清要求高,尤其马血清品质直接影响未分化状态。相关产品PC-12的马血清体系和吹打传代对新手有门槛,体系统一会稳很多。尚恩生物(SUNNCELL)有PC-12(未分化)现货(货号SNL-419),配套专用培养基

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