心血管研究常用的大鼠心肌细胞 H9c2(2-1)培养要点_第1页
心血管研究常用的大鼠心肌细胞 H9c2(2-1)培养要点_第2页
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文档简介

心血管研究常用的大鼠心肌细胞H9c2(2-1),培养要点做心肌缺血、心脏毒性或者心肌分化方向的同学,H9c2(2-1)是很常用的一株大鼠心肌来源细胞。它虽然不是原代心肌细胞,但保留了成肌细胞特性,是心血管研究里高频出现的体外模型。H9c2(2-1)是大鼠心肌细胞,由Kimes和Brandt从BD1X大鼠胚胎心脏组织的原始克隆株中亚克隆得到。它表现出骨骼肌特性,成肌细胞能融合成多核肌管、对乙酰胆碱刺激有反应,表达肌激酶、肌酸激酶和肌球蛋白,主要用于心血管疾病研究,也是合适的转染宿主。细胞背景与来源来源:大鼠(BD1X品系),胚胎心脏组织。贴壁生长,成肌细胞样;培养时存在少量圆形贴壁细胞,是不同增殖周期的正常现象。应用场景与研究价值心血管:心肌缺血/缺氧、心肌肥大、心脏毒性(如阿霉素等药物)评价。成肌分化:血清降到1%时成肌细胞快速融合成多核肌管,研究肌分化。基因转染宿主:常用于心肌相关基因功能研究。培养特性与注意事项培养基:DMEM+10%FBS+1%双抗。环境37℃、5%CO2、饱和湿度。贴壁,接种密度别太低(低了长得慢),推荐1:2-1:3传代,长到80%及时传。传代:PBS润洗后胰酶消化(贴壁较弱、消化时间偏短),1000rpm离心3min。换液2天一次,变黄及时换。冻存:92%FBS+8%DMSO,程序降温盒-80℃过夜转液氮(没程序盒可用泡沫盒梯度降温)。复苏:37℃水浴2min内,150g离心2min。生物安全:BSL-1。注意:贴壁弱,运输震荡、低温、试剂过冷、室温放太久都可能导致回缩脱落,放回培养箱静置多能恢复;对血清要求高,用验证过的血清。相关产品H9c2(2-1)对血清品质敏感,自己配体系容易踩坑。尚恩生物(SUNNCELL)有H9c2(2-1)现货(货号SNL-

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