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测探针选自序列如SEQIDNO.9至SEQIDN测引物对选自序列如SEQIDNO.1至SEQID本发明能够实现β239.根据权利要求8所述的检测试剂盒，其特征在于，所述P所述β地中海贫血标准对照为包含β珠蛋白基因的野生型质粒或者正常人基因组所述β地中海贫血阴性对照为1xTEbuffer溶液或者水。II654；7172；；I1；26；17；4％～珠蛋白链合成轻微减少。/56[0032]在本申请的一些实施方式中，所述PCR反应液中的正向引物和与之配对的反向引[0034]所述β地中海贫血标准对照为包含β珠蛋白基因的野生型质粒或者正常人基因；；；；；；789[0091]本申请方法使用多色熔解曲线分析技术(MulticolorMeltingCurveAnalysis,荧光能量共振转移(fluorescenceresonanceenergytransfer,FRET)使得荧光信号较[0120]在本申请的一些实施方式中，所述PCR反应液中的正向引物和与之配对的反应引[0127]将第三方面中所述的试剂盒中的所述PCR反应液与所述酶试剂进行混合离心，配；；；；；；[0140]本申请实施例的引物对和探针设计原理图参见图19：不对称PCR是用不等量的一[0141]本申请结合不对称PCR以及探针熔解曲线分析法，随后进行低温到高温的熔解曲_71_72_41_42_I_1_26_1728HGVS命名12345678[0153]扩增引物的长度为16bp～35bp的寡核苷酸链，Tm为50℃~70℃,GC含量30%~[0169]5’CAATCTACTCCCAGGAGCAG_3’_71_72[0172]荧光探针的长度为16bp～35bp的寡核苷酸链，Tm为50℃~80℃,GC含量40%~[0202]DNA样本(≥1ng/μL)、HBB标准对照、HBB阴性对照对应的反应管数量分别为8管[0203]将PCR薄壁反应管转移至PCR扩增区。本发明中使用的扩增仪器是上海宏石的[0210]在荧光PCR熔解曲线分析结果中：DNA样本与HBB标准对照在各通道熔解峰的Tm值指代CD17位点的野生型样本熔解曲线峰，“5_1”指代CD17位点的杂合型样本熔解曲线峰，[0220]参照上述表3中反应体系和表4中反应程序，采用表6所示的对照引物对和对照探

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