2026年病理染色操作管理规范测试题及答案

2026年病理染色操作管理规范测试题及答案一、第一部分试题1.1单项选择题（共15题，每题2分，共30分）1.常规HE染色所用10%中性福尔马林固定液，其甲醛实际浓度范围为◦A.10%~12%◦B.3.7%~4.0%◦C.20%~25%◦D.40%~45%2.常规石蜡包埋组织HE染色的标准切片厚度为◦A.1~2μm◦B.3~5μm◦C.8~10μm◦D.15~20μm3.病理科染色操作区的生物安全防护等级应为◦A.BSL-1◦B.BSL-2◦C.BSL-3◦D.BSL-44.常规HE染色捞片时，展片水温应控制在◦A.30~35℃◦B.45~50℃◦C.60~65℃◦D.70~75℃5.HE染色分化步骤常用的盐酸乙醇溶液中，盐酸浓度为◦A.0.5%~1%◦B.5%~10%◦C.20%~25%◦D.36%~38%6.抗酸染色主要用于检测的病原体是◦A.金黄色葡萄球菌◦B.结核分枝杆菌◦C.白色念珠菌◦D.乙型肝炎病毒7.免疫组化染色中，最常用的柠檬酸盐抗原修复缓冲液pH值为◦A.4.0◦B.6.0◦C.7.4◦D.9.08.常规冰冻切片染色前，丙酮固定的时长为◦A.10~20s◦B.5~10min◦C.30~60min◦D.12~24h9.操作二甲苯等挥发性有毒有机溶剂时，必须在以下哪种设施内进行◦A.普通实验台◦B.超净工作台◦C.通风橱◦D.生物安全柜10.HE染色中，苏木素主要对细胞的哪个结构着色■A.细胞质■B.细胞核■C.细胞膜■D.细胞外基质11.免疫组化DAB显色时，正确的操作方式是■A.固定显色10min后直接终止■B.显微镜下观察，阳性信号清晰且背景无明显着色时终止■C.显色30s必须终止，避免背景着色■D.室温放置过夜后再观察结果12.以下哪种染色废液属于剧毒类危险废物，必须单独收集、双人双锁管理■A.伊红废液■B.苏木素废液■C.DAB废液■D.乙醇废液13.HE染色合格片的核质对比度应达到■A.胞核紫蓝色、胞质粉红色，分界清晰■B.胞核粉红色、胞质紫蓝色，分界清晰■C.胞核与胞质均为淡紫色■D.胞核与胞质均为深红色14.染色试剂储存要求中，4℃冷藏试剂的温度波动范围不得超过■A.±1℃■B.±2℃■C.±5℃■D.±10℃15.病理染色操作人员生物安全培训的频次要求为■A.每半年至少1次■B.每年至少1次■C.每2年至少1次■D.每3年至少1次1.2多项选择题（共10题，每题3分，共30分，多选、少选、错选均不得分）1.HE染色出现胞核着色过浅的常见原因包括◦A.组织固定不充分◦B.苏木素染液氧化失效◦C.盐酸乙醇分化时间过长◦D.返蓝时间不足2.病理染色操作区必须配备的个人防护用品包括◦A.丁腈手套◦B.防毒半面罩（活性炭滤芯）◦C.护目镜◦D.防水围裙3.以下属于常规特殊染色类型的有◦A.Masson三色染色◦B.PAS糖原染色◦C.网织纤维染色◦D.抗酸染色4.免疫组化染色前预处理步骤包括◦A.切片烤片（60℃，2h）◦B.脱蜡水化◦C.抗原修复◦D.内源性过氧化物酶封闭5.二甲苯发生少量泄漏（≤500mL）时，正确的处置步骤包括◦A.立即停止操作，关闭附近热源◦B.开窗通风，开启防爆排风装置◦C.用沙土或惰性吸附材料覆盖吸附◦D.用自来水直接冲洗排入下水道6.染色室内质量控制的常规措施包括◦A.每批次染色设置阳性/阴性对照片◦B.每月抽检不少于10%的染色切片进行质量评分◦C.每季度对染液有效性进行验证◦D.试剂开封/配制后标注日期、效期及责任人7.以下关于染色试剂管理的说法正确的有◦A.易燃试剂（乙醇、二甲苯）存放于防爆柜，最大储存量不超过50L◦B.有毒试剂（DAB、苦味酸）实行双人双锁管理◦C.染液使用前必须过滤，避免沉渣污染切片◦D.过期试剂可继续使用，只要染色效果无明显差异8.HE染色常见的人工伪影包括◦A.组织折痕◦B.切片掉片◦C.封片气泡◦D.染料沉渣9.免疫组化染色背景过高的常见原因有◦A.一抗浓度过高◦B.一抗孵育时间过长◦C.血清封闭不充分◦D.洗涤不充分10.病理科危险废物的处置要求包括■A.分类收集于专用防渗漏容器■B.粘贴清晰的危险废物标识■C.交由具备危废处置资质的机构统一处理■D.少量低浓度废液可直接排入市政管网1.3判断题（共10题，每题1分，共10分）1.脱蜡不彻底会导致染色不均匀、胞核着色浅，是HE染色最常见的不合格原因之一。2.染色产生的乙醇废液可直接倒入实验室下水道，用大量清水稀释即可。3.免疫组化染色的阳性对照片与待测切片必须同批次染色，否则质控结果无效。4.冰冻切片新鲜组织不需要固定，可直接进行染色。5.苏木素染液使用时间越长，染色能力越强，因此不需要定期更换。6.捞片时水温超过55℃可能导致组织细胞扩散、脱片，禁止使用。7.操作DAB显色试剂时，必须佩戴双层手套，皮肤接触后应立即用大量清水冲洗。8.所有特殊染色试剂均需室温储存，禁止冷藏。9.封片用盖玻片规格应略大于组织块，避免组织边缘溢出盖玻片范围。10.新入职染色操作人员可直接独立上岗，不需要进行岗前培训及考核。1.4简答题（共2题，每题10分，共20分）1.请简述常规石蜡切片HE染色的完整操作流程，及各核心步骤的控制参数（试剂、时长、温度）。2.请简述HE染色出现切片大面积掉片的3种核心原因，及对应的预防/处置措施。1.5实操案例分析题（共1题，10分）某三甲医院病理科当日完成120张常规HE染色切片，质检发现32张切片存在不同程度掉片，28张切片胞核普遍着色偏淡，17张切片表面可见黑色染料沉渣。请分析该批次染色异常的可能原因，并给出可落地的整改措施。二、第二部分参考答案2.1单项选择题答案1.B2.B3.B4.B5.A6.B7.B8.B9.C10.B11.B12.C13.A14.B15.B2.2多项选择题答案1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.ABCD5.ABC6.ABCD7.ABC8.ABCD9.ABCD10.ABC2.3判断题答案1.√2.×3.√4.×5.×6.√7.√8.×9.√10.×2.4简答题参考答案2.4.1常规石蜡切片HE染色流程及核心参数（满分10分）步骤序号操作内容核心参数分值1脱蜡二甲苯Ⅰ10min、二甲苯Ⅱ10min，室温（25℃±2℃）1分2水化100%乙醇Ⅰ5min→100%乙醇Ⅱ5min→95%乙醇Ⅰ3min→95%乙醇Ⅱ3min→80%乙醇2min→70%乙醇2min→流水冲洗1min2分3苏木素染色Harri苏木素染液5min±2min，室温1分4分化1%盐酸乙醇3~5s，镜下控制核染色深度1分5返蓝流水冲洗5~10min，或40℃温水促蓝1min1分6伊红染色0.5%伊红乙醇溶液2min±1min1分7脱水70%乙醇30s→80%乙醇30s→95%乙醇Ⅰ1min→95%乙醇Ⅱ1min→100%乙醇Ⅰ2min→100%乙醇Ⅱ2min1分8透明二甲苯Ⅰ5min、二甲苯Ⅱ5min1分9封片中性树胶封固，盖玻片匹配组织大小，无气泡1分2.4.2HE染色大面积掉片的原因及处置措施（满分10分）•原因1：载玻片未涂防脱剂或防脱剂失效（2分）◦处置措施：新载玻片使用前必须均匀涂抹0.01%多聚赖氨酸防脱剂，37℃烘干后使用；防脱剂储存于4℃，有效期3个月，过期禁止使用（1分）•原因2：烤片温度不足或时长不够（2分）◦处置措施：捞片后必须60℃烤片2h以上，或56℃烤片过夜；当日未染色的切片需存放于4℃冰箱，染色前复烤30min（1分）•原因3：组织固定不良、脱水过度导致组织脆化（2分）◦处置措施：手术标本离体后30min内放入10%中性福尔马林固定，固定时间6~72h；脱水梯度设置合理，100%乙醇总时长不超过30min（2分）2.5实操案例分析题参考答案（满分10分）2.5.1异常原因分析（4分，答出4点即可得满分）1.掉片原因：①载玻片防脱剂涂布不合格；②烤片时长不足1h；③捞片水温超过55℃导致组织脱附2.胞核着色浅原因：①苏木素染液使用超过1个月未更换，氧化失效；②脱蜡不彻底，二甲苯使用超过300张切片未更换；③分化时间过长3.染料沉渣原因：苏木素染液使用前未过滤，染液内氧化形成的苏木素红沉渣附着于切片表面2.5.2整改措施（6分，答出6点即可得满分）1.立即停用当前批次二甲苯、苏木素染液，更换新配制试剂；更换前苏木素染液必须用定性滤纸过滤2次2.对未出报告的120张切片全部重新染色，重新染色前复烤切片60℃、2h3.载玻片防脱剂涂布操作纳入每日班前检查，由染色组组长每日抽检10张空白载玻片4.建立试剂使用登记制度，记录每缸试剂的启用日期、处理切片数量，达到阈值（二甲苯300张/缸、苏木素500张/缸）必须更换5.捞片水温每日开工前用温度计校准，控制