细胞治疗工艺工程师考试试卷及答案

细胞治疗工艺工程师考试试卷及答案填空题（共10题，每题1分）1.细胞治疗中常用的自体免疫细胞类型包括______和NK细胞。2.细胞培养中，无血清培养基的优点之一是成分______。3.慢病毒载体属于______病毒科。4.细胞冻存液中通常含有______作为保护剂。5.GMP洁净区中，A级区域主要用于______操作。6.台盼蓝染色法用于检测细胞______。7.CAR结构中负责识别肿瘤抗原的部分是______域。8.支原体检测的常用分子生物学方法是______。9.细胞复苏时应将冻存管迅速放入______℃水浴中融化。10.无菌操作的核心是防止______污染。填空题答案：1.CAR-T；2.明确；3.逆转录；4.DMSO；5.无菌制剂灌装；6.活力；7.抗原结合；8.PCR；9.37；10.微生物单项选择题（共10题，每题2分）1.下列哪种病毒载体可整合到宿主细胞基因组？（）A.腺病毒B.慢病毒C.腺相关病毒（AAV）D.单纯疱疹病毒2.细胞培养中维持pH稳定的主要机制是（）A.培养基中的缓冲液与CO₂B.温度控制C.搅拌速度D.渗透压调节3.CAR-T细胞激活常用的试剂是（）A.青霉素B.CD3/CD28抗体C.胎牛血清D.胰蛋白酶4.GMP洁净区中，B级区域的洁净度要求是（）A.优于A级B.与A级相同C.低于A级D.无要求5.台盼蓝染色中，活细胞的颜色是（）A.蓝色B.无色C.红色D.绿色6.细胞冻存的最终保存温度通常是（）A.-20℃B.-80℃C.-196℃D.4℃7.病毒滴度测定的常用方法是（）A.细胞计数法B.TCID₅₀C.流式细胞术D.比浊法8.细胞传代时常用的消化酶是（）A.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.木瓜蛋白酶D.纤维素酶9.内毒素检测的金标准方法是（）A.鲎试剂法B.培养法C.PCR法D.免疫荧光法10.CAR-T治疗B细胞淋巴瘤的常见靶点是（）A.CD3B.CD4C.CD19D.CD20单选题答案：1.B；2.A；3.B；4.C；5.B；6.C；7.B；8.B；9.A；10.C多项选择题（共10题，每题2分）1.细胞治疗产品质量控制的关键项目包括（）A.细胞活力B.细胞纯度C.无菌检查D.内毒素检测E.病毒滴度2.常用的病毒载体类型有（）A.慢病毒B.腺病毒C.腺相关病毒（AAV）D.逆转录病毒E.流感病毒3.细胞冻存的注意事项包括（）A.梯度降温B.直接放入液氮C.冻存液比例适宜D.避免反复冻融E.室温保存4.GMP洁净区的基本要求有（）A.温湿度控制B.压差控制C.定期环境监测D.人员无菌操作培训E.随意进出5.CAR-T细胞制备的关键步骤包括（）A.细胞采集B.细胞激活C.基因转导D.细胞扩增E.质量控制6.细胞培养中的污染类型包括（）A.细菌污染B.真菌污染C.支原体污染D.病毒污染E.交叉污染7.无血清培养基的优点是（）A.避免血清批次差异B.减少污染风险C.成分明确D.成本低E.适用于所有细胞8.细胞复苏的正确步骤是（）A.快速融化B.缓慢融化C.离心去除冻存液D.直接加入培养基E.检测细胞活力9.支原体检测的方法有（）A.PCR法B.培养法C.荧光染色法D.比浊法E.流式细胞术10.细胞治疗的应用领域包括（）A.肿瘤治疗B.自身免疫性疾病C.再生医学D.感染性疾病E.心血管疾病多选题答案：1.ABCDE；2.ABCD；3.ACD；4.ABCD；5.ABCDE；6.ABCDE；7.ABC；8.ACE；9.ABC；10.ABCDE判断题（共10题，每题2分）1.慢病毒载体可整合到宿主细胞基因组中。（）2.细胞冻存时可直接将冻存管放入液氮。（）3.CAR-T细胞治疗通常不需要HLA配型。（）4.GMP洁净区中A级的洁净度高于B级。（）5.台盼蓝染色阳性的细胞是活细胞。（）6.无血清培养基不含任何动物来源成分。（）7.病毒滴度越高，转导效率一定越高。（）8.细胞传代次数越多，细胞活力必然越低。（）9.鲎试剂法是内毒素检测的金标准。（）10.细胞治疗产品需经过中试放大才能进入临床试验。（）判断题答案：1.√；2.×；3.√；4.√；5.×；6.√；7.×；8.×；9.√；10.√简答题（共4题，每题5分）1.简述CAR-T细胞制备的基本流程。答案：CAR-T制备流程包括：①细胞采集：分离患者外周血单核细胞；②激活：用CD3/CD28抗体或磁珠激活T细胞；③转导：通过慢病毒载体导入CAR基因；④扩增：在专用培养基中培养至足量；⑤纯化：去除杂质细胞及残留试剂；⑥质控：检测活力、纯度、无菌性等；⑦冻存：合格细胞冻存备用。全程需遵循GMP规范，确保安全有效。2.细胞培养中常见污染类型及预防措施。答案：常见污染类型：细菌（培养基浑浊、pH下降）、真菌（菌丝/孢子）、支原体（隐形污染）、病毒（细胞病变）。预防措施：严格无菌操作；使用无菌试剂；定期消毒培养环境；细胞来源检测；定期支原体筛查；避免交叉污染。3.慢病毒载体在细胞治疗中的优势。答案：慢病毒载体优势：①整合性：稳定整合到宿主基因组，长期表达；②转导效率高：适用于分裂/非分裂细胞；③安全性：自我失活设计降低复制风险；④容量适中：容纳约8kb基因片段；⑤临床成熟：广泛用于CAR-T，安全性和有效性经验证。4.简述GMP对细胞治疗工艺的基本要求。答案：GMP要求：①人员：专业培训合格；②设施：洁净区符合等级，设备定期校准；③工艺：制定SOP，关键步骤验证；④质控：全程监测细胞指标；⑤文件：完整可追溯记录；⑥物料：合格供应商，物料检验；⑦偏差：及时处理并纠正。讨论题（共2题，每题5分）1.讨论细胞治疗产品规模化生产的主要挑战及解决策略。答案：挑战：扩增效率低、批次差异大、成本高、质控难。策略：优化无血清培养基提高扩增效率；引入自动化反应器减少误差；推动试剂国产化降成本；建立CQA体系实时监测质量；制定标准化SOP确保稳定生产。2.讨