外泌体非编码RNA在肝纤维化中的作用及机制

外泌体非编码RNA在肝纤维化中的作用及机制细胞间通讯·肝星状细胞活化·诊断与治疗靶点2026年内容导览01纤维化与外泌体病理核心与通讯载体02外泌体miRNA双向调控肝星状细胞03外泌体lncRNA信号通路与诊断标志物04circRNA与前沿突破环状结构与核蛋白转运05转化前景从机制走向临床干预01纤维化与外泌体肝星状细胞活化是纤维化的核心事件肝星状细胞活化是纤维化核心HSC活化由此成为解析外泌体ncRNA作用的落脚点。肝纤维化是慢性肝损伤后修复失衡的结果，核心特征是ECM过度沉积。病理本质肝纤维化是慢性肝损伤后修复失衡的结果，核心特征是ECM过度沉积。细胞主角健康肝脏中，肝星状细胞（HSC）静息储脂、维持结构；受损后活化为肌成纤维细胞，大量分泌胶原，成为纤维化的主要效应细胞。数据链条发达国家约45%死亡率与器官纤维化相关超过80%肝细胞癌发生于纤维化或肝硬化背景外泌体装载三类非编码RNA外泌体是直径30-150纳米的膜性囊泡，由多泡体与质膜融合后释放，包裹RNA与蛋白质以反映供体细胞状态。lncRNA由

RNA聚合酶II

转录，装载途径多样，涉及RNA结合蛋白、外泌体膜蛋白或鞘磷脂酶。circRNA由前体mRNA反向剪接形成共价闭合环状结构，装载机制与lncRNA相似。三类ncRNA装载特征miRNA经

Ago2、TARBP2

等RNA结合蛋白选择性装载，在转录后水平调控基因表达。02外泌体miRNA同一载体，促纤维化与抗纤维化并存miR-381-3p靶向Klf6促纤维化“沉默一个抗纤维化因子，足以放大整条活化通路。”“沉默一个抗纤维化因子，足以放大整条活化通路。”现状慢性胆汁淤积中，胆管细胞外泌体携带

miR-381-3p，靶向抑制转录因子

Klf6，单向放大HSC活化信号。证据链胆管结扎模型→超速离心分离大胆管细胞外泌体→鉴定标志蛋白

CD63

与

TSG101。功能验证TGF-β诱导的HSC模型中，外泌体显著上调

α-SMA、CollagenI、Acta2、Loxl2。靶点验证miRNA微阵列筛选+双荧光素酶报告实验，确认

miR-381-3p

与

Klf6

直接结合。miR-223-3p调控线粒体自噬抑活化科学问题与证据链问题一抗纤维化方向BMSC-exosomes递送

miR-223-3p，靶向

HMGCS1

并调控线粒体自噬，抑制TGF-β诱导的HSC活化并促进凋亡。问题二实验证据5ng/mLTGF-β处理12小时显著激活JS-1细胞，上调

miR-223-3p

并激活

p-PINK1、p-Parkin、p-ULK1、LC3B

等自噬关键蛋白；BMSC-exosomes干预使miR-223-3p回落至正常水平，逆转自噬过度激活。问题三靶标验证结果HMGCS1

是miR-223-3p的直接靶点，证实外泌体miRNA同样可作为抗纤维化工具，同一载体具备双向调控潜力。Let7b与miR-23a-3p揭示双重身份抗纤维化一侧脐带间充质干细胞外泌体经芯片筛选与定量PCR鉴定，Let7b

被确认为抑制HSC活化的关键分子，同时携带14-3-3ζ与谷胱甘肽过氧化物酶-1协同作用。促癌转化一侧活化HSC分泌富含

miR-23a-3p

的外泌体递送至肝细胞，靶向抑制DUSP5，解除对ERK通路的负向调控，驱动恶性转化。两条证据线指向同一结论：外泌体miRNA的功能方向，取决于装载内容与来源细胞状态。外泌体miRNA的功能方向，取决于装载内容与来源细胞状态03外泌体lncRNA从信号通路到血浆标志物MALAT1经β-catenin激活HSC01表达定位纤维化肝组织中与Wnt/β-catenin信号共定位Lnc-MALAT1在纤维化肝组织中表达增强，与胶原蛋白I、α-SMA及Wnt/β-catenin信号蛋白（β-catenin、cyclinD1、c-myc）共同定位。02临床证据血浆外泌体Lnc-MALAT1具潜在诊断价值60例患者组vs46例对照组肝纤维化患者血浆外泌体Lnc-MALAT1水平显著高于对照组，曲线下面积分析提示其可作为潜在诊断标志物，尤其适用于高度肝纤维化判别。03机制链条TGF-β1诱导的促纤维化作用依赖MALAT1TGF-β1促进LX-2中Lnc-MALAT1表达→其促纤维化作用可被Lnc-MALAT1的

siRNA

消除→MALAT1是HSC活化的常见介质，Wnt/β-catenin

通路为关键下游HULC、PVT1、MEG3与ZFAS1的格局促纤维化一方2项HULCNAFLD模型纤维化组织中高表达；抑制其表达可减轻MAPK信号通路活性、改善肝纤维化、减少肝细胞凋亡PVT1活化HSC与纤维化肝组织中表达上调；耗竭后抑制HSC活化与体内胶原积累促纤维化保护性一方2项MEG3纤维化肝脏与TGF-β1诱导的HSC中表达下调，提示抗纤维化作用ZFAS1温州医科大学附属第一医院首次揭示其下调带来抗纤维化作用，国内外尚无同类报道保护性异质性作用网络四个分子、两种方向，共同构成lncRNA在肝纤维化中的异质性作用网络。双向调控04circRNA与前沿突破环状结构的稳定性与核蛋白外泌体转运circRNA的环状结构优势结构基础反向剪接形成共价闭合环，抗核酸外切酶降解，稳定性显著强于线性RNA。三种作用方式miRNA海绵转录调节因子蛋白质模板外泌体中的优势闭环结构使circRNA在递送过程中更耐受降解，具备稳定载体潜力。circMTO1证据肝癌组织中表达下调；海绵吸附

miRNA-9

并上调

p21，抑制肿瘤生长。提示其在纤维化—肝癌转化中可能双向调控NAT10外泌体转运新机制载荷边界外泌体研究正从经典ncRNA向核蛋白扩展脂毒性应激上游触发→ZDHHC23棕榈酰化膜亲和·分选改变→NAT10核转位入外泌体装载·分泌→递送至肝星状细胞靶细胞摄取→ac4C稳定Ddr2mRNA放大促纤维化信号来源南华大学肖新华团队，《Hepatology》，影响因子

18.0干预闭环肝细胞靶向

GalNAc-siNat10

特异性沉默Nat10，兼具改善代谢紊乱与抗纤维化双重潜力05转化前景从分子机制走向无细胞治疗诊断标志物与无细胞治疗诊断端：血清外泌体ncRNA可区分纤维化程度；治疗端：MSC外泌体替代干细胞移植。诊断端血清外泌体标志物血浆外泌体

Lnc-MALAT1

等区分纤维化程度应用血清外泌体

lncRNA/miRNA

早期诊断标志物治疗端无细胞治疗概述低毒性/低免疫原性/高生物相容性潜力脂肪MSC调节

HSC

自噬抗肝纤维化骨髓MSC抑制

肝细胞凋亡抗急性肝损伤对比移植更可控递送平台：规避成瘤/免疫排斥，保留旁分泌外泌体ncRNA为肝纤维化诊疗提供更安全、更可控的转化路径。VS中药载体与R-loop新方向外泌体ncRNA为多途径、多靶点临床干预提供可扩展技术框架。从RNA-DNA杂交结构角度解释中药成分的抗纤维化作用中药载体外泌体靶向运输中药有效成分，显著提高抗肝纤维化疗效。内源调