高级别生物安全实验室废物收集、包装和处置专家共识

高级别生物安全实验室废物收集、包装和处置专家共识【摘要】在高级别生物安全实验室中进行实验活动会产生多种实验污染物和实验废物，这给标准化收集、包装和处置带来了显著挑战。在国家卫生健康委员会科教司的支持下，中国医药生物技术协会生物安全分会在北京召开了高级别生物安全实验室废物收集、包装和处置共性问题专家研讨会，与会专家对实验室废物（包括污染物和废弃物）的分类、收集、包装、临时储存及处置的原则和技术方法等问题进行了充分研讨。与会专家依据国际和国内已有的标准、规范和通用操作，就实验室废物的分类、收集、包装和临时储存等相关技术措施和管理模式形成了专家共识。【关键词】高级别生物安全实验室；实验废物；收集；包装；处置；暂存高级别生物安全实验室在实验活动中产生的废物种类较多，包括菌（毒）种培养物、感染性样本、防护用品、锐器、动物尸体及组织、实验耗材和实验废液等。规范收集和处置实验室废物是实验室生物安全风险控制的重要环节。目前在实际工作中，各实验室由于实验活动不同产生的实验室废物种类和数量不尽相同，在实验室废物收集、包装和处置的实施环节存在差异，为降低实验室废物在收集、包装和处置各环节处理不当造成的风险，亟需建立规范性的实验室废物分类和处置规程，以规范和提高实验室废物收集、包装和处置的能力和体系建设。本专家共识的研讨框架主要包括五个部分：①实验室废物的定义和分类；②实验室废物收集和包装要求；③实验室废物消毒/灭菌的处置原则和方法；④实验室废物的暂存、运输和溯源管理；⑤现场评审核查关注的要点。1实验室废物的定义和分类实验室废物按物理形态分为固体废物、液体废物和气体废物，在高级别生物安全实验室中有毒有害的挥发性化学试剂的使用量小，且这些有毒气体会经实验室排风系统中的高效滤毒装置吸附处置后排出实验室，生物安全风险相对较低。因此，本共识将重点聚焦于高级别生物安全实验室（包括生物安全三级实验室和生物安全四级实验室）产生的固体和液体废物的安全无害化处置，也适用于基础生物安全实验室（包括生物安全一级实验室和生物安全二级实验室）产生的实验室废物的收集、包装和处置。1.1定义1.1.1实验室污染物实验室污染物是指生物安全实验室在实验活动中产生的丧失原有利用价值的实验材料，以及被病原微生物污染的固体和液体废物。1.1.2实验室废弃物实验室废弃物是指科研、教学、检测等实验室日常在实验活动中产生的丧失原有利用价值或虽未丧失利用价值但被废弃的、不合格的、过期失效的固体和液体等废物。1.1.3高风险废物高风险废物是指高级别生物安全实验室内产生的、含有活的高致病性病原微生物的实验材料，或被其污染的实验器材、一次性人员防护用品等，以及少量的化学试剂和放射性废物。1.1.4消毒采用化学和（或）物理方法，杀灭或清除环境中和物体上的病原微生物，使其达到无害化的处理。1.1.5灭菌杀灭或清除物品上一切微生物的处理。1.2分类在高级别生物安全实验室的实验活动中，产生的实验室废物除了感染性废物、损伤性废物、病理性废物外，也会产生少量化学性、放射性、麻醉性等相关废物，实验室废物分类可参见表1。为便于实验室规范收集和安全处置各类实验室废物，依据其潜在的生物风险、污染程度、物理化学性质等进行如下分类。1.2.1未污染物品实验室辅助工作区产生的未污染的试剂和耗材，以及防护用品的外包装/纸、容器和器材等。1.2.2一次性使用的实验室污染物和废弃物实验活动中产生的不可回收再使用的实验室污染物和废弃物，包括但不限于冻存管、离心管、移液器尖头吸管、培养瓶、培养皿、垫巾、动物饲料和垫料等实验耗材，被污染的个人防护用品（包括一次性的防护服、口罩、手套、鞋套）以及设施和防护设备中的耗材（如高效空气粒子过滤器）等。1.2.3可重复使用的实验室污染物和废弃物实验活动中产生的可回收再使用的实验室污染物和废弃物，包括但不限于动物笼具、胶鞋、特种用途的手套、内层棉质工作服等。1.2.4污染的锐器实验活动中使用过的利器和锐器，操作不慎可能伤害实验人员，包括但不限于移液器尖头吸管、针头、注射器、刀片、剪刀、玻片等。1.2.5感染性废液实验活动中产生的含病原微生物的培养液、菌（毒）种保存液，以及感染动物血液或其他体液等废液。1.2.6感染性动物尸体或组织实验活动中使用过的感染动物的组织、器官、尸体，以及来自传染病病人的组织样本等实验材料。1.2.7化学性废物（固体/液体）实验活动中使用过的或过期的化学试剂和消毒剂以及麻醉剂等，按《危险废物贮存污染控制标准》处理。1.2.8放射性废物实验活动中使用过的含有放射性核素或被放射性核素污染的实验物品等，应依据《放射性废物管理条例》分类管理。2实验室废物收集和包装要求2.1收集的原则和频率实验室产生的废物应干湿（固液）分离、分类收集、原位处置。收集容器和包装应完整无破损，防止泄漏和交叉污染，应张贴明确的、可追溯的标识信息。操作人员必须经过相关的生物安全培训并考核合格，穿戴适当的个体防护装备后方可执行相关操作。收集频率应根据实验室废物的风险高低来确定，如防护区内产生的高风险废物应即产即收，当次实验结束清场时应全部收集并打包，妥善处置，防止发生意外事故；辅助工作区内产生的废物尽量在24h内收集，以维持工作环境的清洁和卫生。2.2包装容器的选择实验室应根据废物的种类、数量、消毒/灭菌处理方式等选用相应的包装器材。包装材料需符合相关要求，应耐高温高压、具有良好的物理特性（透气性、抗张强度、抗撕裂性、耐破度）和密封性。针对化学性废物和放射性废物等特殊实验室废物，包装容器需具备耐腐蚀或辐射隔离性能，避免发生化学反应或放射物泄漏。2.3包装的要求实验室废物包装应遵循不超装、不泄漏、有标识的原则。⑴装载量不得超过包装袋或容器的3/4。⑵防护区内产生的废物应采用双层包装，确保运输过程中不会泄漏；辅助工作区产生的未污染物品，可采用单层包装。⑶需高压蒸汽灭菌的实验室废物应采用有效的封口方式，实验室废物在高压蒸汽灭菌前，袋口采用三角对折后贴上高压蒸汽灭菌胶带，或用尼龙扎带扎口，扎口应留有空隙，易于气体交换和物品充分受热。⑷高压蒸汽灭菌或消毒剂消毒后的实验室废物放入医疗废物专用包装袋，采用鹅颈结方式打包，包装袋或盛装容器外表面应有警示标识，并贴上中文标签。⑸为了便于区分不同类型的实验室废物，实验室在消毒/灭菌前可按废物种类采用不同颜色的包装袋或使用不同颜色的标签标识。不同类型实验室废物消毒/灭菌前包装要求参见表2。2.4包装方式的消毒/灭菌验证应对实验室废物的装载打包方式进行消毒/灭菌验证，并关注如下要点：⑴离心管、冻存管、密封盒等密封容器需将容器盖子旋松或打开；⑵收集液体时体积建议最大不超过10L，以便保证灭菌效果，同时也能适当减小泄漏时向周围扩散的风险；大体积溶液灭菌时，温度探头应置于最难达到灭菌温度的位置（如最大液体包装的中心）；⑶动物尸体打包需提前在最大体积、蒸汽最难穿透的部位预留出放置移动温度探头的位置，以确保灭菌时探头不易移动错位；⑷经动物残体处理系统（如采样碱水解，需经验证灭菌效果）处理后的动物残渣和产生的油水，可采取相应的包装方式后处置；⑸不可高压蒸汽灭菌的化学性或放射性废物，应采取适宜的方法原位消毒，经验证或评估无污染后，对其包装容器表面消毒后打包传递至防护区外，按相关要求进一步处置；⑹未经污染的试剂瓶、剩余消毒剂可按未污染物品打包处理。2.5高风险废物收集要求2.5.1菌（毒）种及培养物建议在生物安全柜内采用有效的化学消毒剂进行原位消毒，双层包装后再高压蒸汽灭菌处理，并记录和标注菌（毒）种名称、数量、处理人、日期等信息。2.5.2锐器直接放入利器盒，禁止二次分拣。2.5.3动物尸体或组织双层包装，少量的动物尸体可以暂存于防护区低温冰箱中，待收集到一定数量后高压蒸汽灭菌处理。包装袋表面需标注动物种类、数量等信息。2.5.4化学性或放射性废弃物放置于专用容器中，标注特殊标识及物质名称、腐蚀性或放射性等信息。2.5.5设施设备中的一次性耗材实验室送排风系统和生物安全防护设备（如生物安全柜、独立通风笼具、负压解剖台等）的高效空气粒子过滤器在更换前进行原位消毒，并验证消毒效果。消毒后的过滤器应小心拆卸，严密包装，清晰标记，再进行高压蒸汽灭菌处置。2.5.6其他高风险废弃物根据具体特性进行收集和包装。2.6标识信息的要求2.6.1内部标识实验室废物内部标识上应有废物种类和数量等信息，记录污染的病原微生物名称、污染物种类、数量、处理人、日期等信息。2.6.2外部标识实验室废物的包装袋或利器盒外表面有生物危害警示标识，并贴上中文标签，符合《医疗废物专用包装袋、容器和警示标志标准》（HJ421）和《危险废物识别标志设置技术规范》（HJ1276）相关的规定。3实验室废物消毒/灭菌的处置原则和方法3.1处置原则3.1.1安全高效在选择消毒/灭菌方法时应考虑方法的安全性和有效性，以及对消毒/灭菌对象的适用性，将消毒/灭菌过程中造成的损失降到最低，避免对实验人员造成次生伤害。3.1.2经济环保应考虑成本效益高、对环境无污染或污染小的消毒方法，应尽可能在达到消毒效果的前提下减少消毒剂的使用量以及对环境的影响。3.1.3操作便捷处理方法应简便易行，便于实验人员执行，减少操作的复杂性，确保处理过程的高效和准确。3.1.4符合法规和标准的要求严格遵循国家及地方的相关法规和标准，选用的消毒产品应具备合格有效的消毒产品卫生许可证，确保废物处理的合法性和有效性。3.2时机选择实验室废物消毒/灭菌时有即时、清场、阶段、终末、紧急五种场景。⑴即时消毒/灭菌：实验过程中，实验物品、工作台面等被污染，或认为存在潜在污染风险时，应立即对可能污染的物品和工作台面进行消毒。⑵清场消毒/灭菌：每次实验结束后，应对生物安全柜及使用过的实验耗材、菌（毒）种及其培养物、仪器设备等物品进行清场消毒。⑶阶段消毒/灭菌：实验室应定期对实验室所有的操作台面/地面、设备表面进行消毒处理。间隔时间根据实验活动情况确定，一般1~3个月为宜。阶段消毒频次应基于风险评估，对于高频活动或高风险操作区域可适当增加频次。⑷终末消毒/灭菌：实验室出现环境污染、变更操作的病原微生物、实验室停用、进出仪器设备或外部人员需要检修维护设施、接受外部机构评审等情况时，应对实验室进行终末消毒。⑸紧急消毒/灭菌：当发生病原微生物溢洒、动物逃逸和关键设备故障等安全事件后，应根据紧急状态或事件性质，有针对性地采取相应消毒/灭菌措施。3.3方法选择实验室废物消毒/灭菌措施可采用物理和化学的方法。物理消毒/灭菌方法主要有高压蒸汽灭菌、干热灭菌、紫外线消毒和过滤除菌法等；化学消毒/灭菌方法主要采用化学消毒剂处理污染物达到无害化的目的。表3列举了实验室废物灭菌/消毒的方法，供实验室选择参考。3.4消毒/灭菌效果验证及监测在实验室废物处理过程中，涉及到的消毒剂或消毒灭菌设备，应定期监测其关键的化学或物理指标，以验证其消毒/灭菌效果从而确保处理流程安全有效。以压力蒸汽灭菌器为例阐述消毒/灭菌验证及监测的要求。3.4.1物理监测通过监测温度、压力、时间等物理参数，实时评估灭菌设备的运行状态，确保其在规定的参数范围内稳定运行，从而保障灭菌过程的有效性。3.4.2化学监测⑴B-D测试包：每3个月使用B-D测试包对压力蒸汽灭菌器进行检测，以验证灭菌器的冷空气排除效果。B-D测试包水平放于压力蒸汽灭菌器内靠近排气口处。⑵化学指示胶带：通过观察粘贴于待灭菌物品包外的化学指示胶带的颜色变化，指示物品是否经过灭菌处理。将化学指示胶带粘贴于每袋待灭菌物品包外，经一个灭菌周期后，观察其颜色的改变。参照《小型压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测方法和评价要求》（GB/T30690—2014）中的5.1.2“化学指示胶带”执行。⑶化学指示卡：将化学指示卡放置于待灭菌物品的代表性位置（大包和最难灭菌物品包中央）灭菌后通过观察其颜色的变化，验证灭菌过程是否达到预期效果。参照《小型压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测方法和评价要求》（GB/T30690—2014）中的5.1.3“化学指示卡（剂）”执行。⑷不同类型的压力蒸汽灭菌器对化学指示物的要求：对于无移动温度探头的压力蒸汽灭菌器，化学指示卡是必不可少的监测工具。对于有移动温度探头的压力蒸汽灭菌器，主要通过温度探头监测灭菌效果，化学指示胶带可作为物品是否经过灭菌处理的辅助指示。3.4.3生物监测实验室根据具体情况，确定生物监测的频次，建议至少每半年利用嗜热脂肪芽孢杆菌（ATCC7953）进行1次生物监测。产生频率和风险较高的废物，宜增加生物监测频次。相关操作、参数可参照《消毒器械灭菌效果评价方法》（GB15981—2021）中的4.1“压力蒸汽灭菌器灭菌效果鉴定试验”、《小型压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测方法和评价要求》（GB/T30690—2014）中的4.3“生物验证”和《大型压力蒸汽灭菌器技术要求》（GB8599—2023）中的6.4.2“生物指示物的杀灭试验”的规定执行。4实验室废物的暂存、运输和溯源管理4.1实验室废物暂存4.1.1消毒/灭菌前的实验室废物暂存⑴暂存时间：实验室产生的废物应及时处理，暂存时间应不超过48h，动物尸体如无法及时处理，暂存于防护区低温冰箱中一般不超过7d。⑵暂存地点：灭菌/消毒前的废物应放置在防护区内。如当天需高压蒸汽灭菌处理的，建议放在压力蒸汽灭菌器附近且人员流动较少的固定位置；如当天不能灭菌处理的物品，应密闭保存，防止泄漏。暂存区域应设置明显标识和警示标志，暂存的废物应有专人负责，建立台账。4.1.2消毒/灭菌后的实验室废物暂存⑴暂存时间：消毒/灭菌后的废物应尽量做到日产日清。如不能做到日产日清，暂存时间一般不超过7d。⑵暂存地点：实验室应设置固定暂存间或贮存柜放置消毒/灭菌后的废物。暂存区域应通风良好（温度宜<25℃），同时应设有防鼠、防蚊蝇、防蟑螂、防泄漏、防盗等措施，严禁无关人员进入，有条件的实验室可以设置在线监控；暂存间或贮存柜应有专人负责管理，应配备应急物资（包括个人防护用品、消毒剂、处理污染物工具等卫生洁具等），定期清洁和消毒；建立废物暂存台账，记录废物的种类、数量、暂存、转运等信息；暂存间内应张贴“禁止吸烟、饮食”警示标识，暂存间外明显处应张贴环境保护图形标志和专用医疗废物警示标识。4.2运输规范4.2.1消毒/灭菌前的实验室内转运指消毒/灭菌处理前的实验室废物在防护区内的转运，如从核心间至压力蒸汽灭菌器区域的转运。实验室防护区内转运，根据需要选择合适的运输工具，可将双层包装的废物置于转运箱内或带有护栏的推车上进行转运。转运过程中操作人员穿戴适当个体防护装备，熟悉处置流程，避免废物包装破裂和泄漏，运输工具使用后应清洁和消毒。4.2.2消毒/灭菌后的建筑内转运指消毒/灭菌处理后的实验室废物在实验室所在建筑内的转运，如从压力蒸汽灭菌器区域转运至实验室废物暂存间。消毒/灭菌后的废物应使用周转箱（桶）和带有护栏的推车转运，周转箱（桶）应符合HJ421的规定，装载量不得超过包装容器的3/4。应设置固定的转运路线，避免与人员密集和实验区域交叉，如需使用电梯进行转运，原则上不得使用人员电梯，应使用货梯、专用转运通道或楼梯。转运时与建筑内其他部门协调好转运时间，避开人流量大的时段进行转运。实验室应有专人负责转运，转运人员应穿戴实验室工作服，熟悉处置流程。交接时，接收方应当检查包装物及容器的标识、标签及封口是否符合要求，双方签字确认，不得将不符合要求的实验室废物运送至暂存间。4.2.3单位内建筑间转运指消毒/灭菌处理后的实验室废物在实验室所在建筑内至单位指定暂存点之间的转运，如从单位楼栋内暂存间（点）至单位集中暂存间（点）之间的转运。在单位内建筑物间的转运可使用密闭且防渗漏的推车、专用电动危废转运车等转运工具。其他转运要求参考4.2.2。4.2.4移交第三方处置公司转运指从废物暂存间（点）交至第三方废物处置公司，交接时，接收方应当检查包装物及容器的标识、标签及封口是否符合要求，双方签字确认，不得将不符合要求的实验室废物移交给第三方处置公司。4.3实验室废物溯源管理4.3.1登记信息的完整性建立完善的实验室废物溯源登记制度，登记信息包括以下内容：⑴源头产生和暂存环节：记录废物的类型、产生的时间、重量、病原微生物的种类、灭菌的方式、实验室名称、处理人、废物的暂存点、暂存时间（包括转入及转出时间）等信息；⑵运输和交接环节：记录交接废物的详细信息，包括废物种类、独立包装的数量、总重量、转运时发生的特殊情况（如有）、交接时间、地点、交接双方签字确认。最后，废物交由有资质的处置公司处理，获取《危废转移联单》等凭证。4.3.2全流程追踪要求建立纸质或电子台账，记录每批废物的产生、收集、包装、消毒/灭菌、暂存、运输到最终处置的情况，并定期归档。有条件的单位，建议使用电子溯源系统（如二维码扫码登记），通过在废物包装上粘贴二维码或电子标签等方式，实现信息实时采集和上传。台帐及记录应至少保存3年，危险废物电子转移联单数据应当在信息系统中至少保存10年。5现场评审核查关注的要点5.1合规性审查要点⑴高级别生物安全实验室的实验室废物应按《医疗废物管理条例》和《医疗废物分类目录（2021年版）》的规定要求进行分类收集、包装、转运与处置。⑵实验室废物应分类处置，且各级包装满足相关要求。⑶实验室设立单位应与具备相应资质的第三方处置公司签订有效的废物处置协议。⑷实验室废物处置相关的制度和支持性体系文件完整，包括管理要求、程序文件、SOP和应急预案等；相关制度和文件应经实验室设立单位审批发布。⑸年度培训计划和培训考核记录完整，培训考核内容应涵盖废物分类、包装、转运、灭菌操作及意外泄漏应急处置等。⑹废物暂存间设置和暂存状态符合相关要求，定期清洁和消毒。⑺实验室废物的运输应符合国家相关规定，包括包装、标识的要求，以及提供必要的文件资料。5.2现场操作的规范性审查要点⑴现场考察人员对不同类型实验室废物处置操作的规范性，废物的分类、包装等是否正确以及管理要求和SOP的一致性。⑵实验室废物处置人员个体防护装备的选择应基于风险评估，且个体防护装备的选用、穿戴、脱卸满足废物处置风险防控的要求。⑶模拟不同类型意外事件/事故的现场应急处置操作，包括锐器刺伤、废液泄漏、压力蒸汽灭菌器故障等演练且应符合应急预案的要求。5.3相关记录核查要点5.3.1压力蒸汽灭菌器使用和性能校验记录⑴温度传感器、压力表和安全阀的年度校准证明；⑵核查校准报告的详细内容，包括校准机构的资质、校准方法、校准数据等；⑶压力蒸汽灭菌器的温度、压力、灭菌时间等物理参数记录；生物验证测试记录并留存检测批次、菌种、时间、结果等关键信息；⑷B-D测试记录，监测频次是否满足实验活动需求；⑸日常使用维护记录，包括维护频率、维护内容以及故障处置情况等。5.3.2其他消毒灭菌设备（污水消毒设备、动物残体处理系统、气（汽）体消毒设备等）使用和性能记录评审现场核查要求参见《实验室设备生物安全性能评价技术规范》（RB/T199—2015）。5.3.3实验室废物处置记录及台账管理重点核查记录表格中各要素设置的完整性和记录填写的规范性。核对联单上的各项信息，转运单据存档与标签内容完整性，包括废物的种类、数量、交接时间、交接人等，确保实验室废物处置的可追溯性。5.3.4日常监督审查记录重点核查实验室及其所在单位以及外部机构监督审查的频率、内容、发现的问题以及整改措施和记录等；是否建立实验室废物处置自查制度，以及是否实施日常的监督计划、有无执行记录和改进措施等。参考文献[1]StateAdministrationforMarketRegulation;NationalStandardizationAdministration.GB/T41962—2022Technicalspecificationofstoragedevicesforlaboratorywaste[S].Beijing:ChinaStandardsPress,2022.(inChinese)国家市场监督管理总局,国家标准化管理委员会.GB/T41962—2022实验室废弃物存储装置技术规范[S].北京:中国标准出版社,2022.[2]StateAdministrationforMarketRegulation;NationalStandardizationAdministration.GB/T19633.1—2024Packagingforterminallysterilizedmedicaldevices—Part1:requirementsformaterials,sterilebarriersystemsandpackagingsystems[S].Beijing:ChinaStandardsPress,2024.(inChinese)国家市场监督管理总局,国家标准化管理委员会.GB/T19633.1—2024最终灭菌医疗器械包装第1部分:材料、无菌屏障系统和包装系统的要求[S].北京:中国标准出版社,2024.[3]MinistryofHealthofthePeople'sRepublicofChina.Technicalspecificationofdisinfection(2002)[Z].2002-02-09.(inChinese)中华人民共和国卫生部.消毒技术规范(2002年版)[Z].2002-02-09.[4]NationalCertificationandAccreditationAdministration.RB/T199—2015Technicalcodeforevaluatingbiosafetyperformanceoflaboratoryequipment[S].2015.(inChinese)国家认证认可监督管理委员会.RB/T199—2015实验室设备生物安全性能评价技术规范[S].2015.[5]MinistryofHealthofthePeople'sRepublicofChina.WS/T367—2012Regulationofdisinfectiontechniqueinhealthcaresettings[S].2012.(inChinese)中华人民共和国卫生部.WS/T367—2012医疗机构消毒技术规范[S].2012.[6]WorldHealthOrganization.Laboratorybiosafetymanual,4thedition[M].Geneva:WorldHealthOrganization,2020.[7]StateAdministrationforMarketRegulation;NationalStandardizationAdministration.GB/T15981—2021Evaluatingmethodfortheefficacyofsterilizationfordisinfectionequipment[S].Beijing:ChinaStandardsPress,2021.(inChinese)国家市场监督管理总局,国家标准化管理委员会.GB/T15981—2021消毒器械灭菌效果评价方法[S].北京:中国标准出版社,2021.[8]GeneralAdministrationofQualitySupervision,InspectionandQuarantineofthePeople'sRepublicofChina;NationalStandardizationAdministration.GB/T30690—2014Monitoringrequirementsandevaluationofsterilizationeffectofsmallsteamsterilizer[S].Beijing:ChinaStandardsPress,2014.(inChinese)中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局,国家标准化管理委员会.GB/T30690—2014小型压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测方法和评价要求[S].北京:中国标准出版社,2014.[9]StateAdministrationforMarketRegulati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