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文档简介
2026年动物合成模拟题目及答案一、单项选择题(每题1分,共10分)1.下列基因编辑系统中,来源于细菌适应性免疫应答的是?A.锌指核酸酶(ZFN)B.转录激活因子样效应物核酸酶(TALEN)C.CRISPR/Cas9D.Cre/loxP重组系统2.体细胞核移植制备克隆动物时,常用作核受体的卵母细胞处于哪一时期?A.生发泡期(GV期)B.第一次减数分裂中期(MⅠ期)C.第二次减数分裂中期(MⅡ期)D.原核期3.下列有关狭义遗传力h2A.hB.h2C.h2D.h24.动物实验伦理中的“3R原则”不包括下列哪一项?A.替代(Replacement)B.减少(Reduction)C.优化(Refinement)D.繁殖(Reproduction)5.原核显微注射法制备转基因动物的主要缺陷是?A.无法获得转基因个体B.外源基因随机整合,插入拷贝数和位点不可控制C.不能用于牛、羊等大家畜D.比体细胞核移植更昂贵6.下列关于降低CRISPR/Cas9脱靶效应的说法,正确的是?A.脱靶突变无法检测,无需关注B.PAM序列越常见,脱靶风险越低C.设计高特异性sgRNA并选用高保真Cas9变体可降低脱靶风险D.脱靶只影响细胞,不会影响后代7.全基因组选择与传统标记辅助选择相比,最大的优势是?A.只需要一个与QTL连锁的标记B.利用全基因组标记效应,可同时捕获大量微效基因效应,提高选择准确性C.不需要统计模型和参考群体D.只能用于高遗传力性状8.动物合成生物学中“生物零件(BioBrick)”的设计理念主要借鉴了?A.建筑学的结构力学B.工程学的模块化、标准化思想C.法学的制度设计D.化学中的理想气体模型9.下列关于动物表达载体基本组成的叙述,错误的是?A.需要复制起始位点B.需要选择标记基因C.需要启动子和终止子D.必须含有逆转录酶基因10.关于胚胎干细胞和诱导多能干细胞(iPSCs),下列说法正确的是?A.胚胎干细胞只能分化为某一特定组织细胞B.成体干细胞具有发育全能性C.胚胎干细胞具有自我更新能力和多向分化潜能D.诱导多能干细胞不需要外源转录因子即可获得二、多项选择题(每题2分,共20分)1.下列可产生DNA双链断裂的基因组定点编辑工具包括?A.锌指核酸酶(ZFN)B.转录激活因子样效应物核酸酶(TALEN)C.CRISPR/Cas9D.RNA干扰(RNAi)2.生产转基因动物的常用技术途径包括?A.原核显微注射法B.逆转录病毒/慢病毒载体法C.体细胞核移植法D.胚胎干细胞介导法(主要适用于小鼠)3.影响体细胞核移植克隆效率的因素包括?A.供体细胞类型和细胞周期B.卵母细胞来源与质量C.重构胚的激活和体外培养条件D.代孕母体妊娠环境4.关于CRISPR/Cas9靶位点DNA双链断裂修复方式的叙述,正确的是?A.非同源末端连接(NHEJ)通常造成小片段插入或缺失B.同源定向修复(HDR)可以引入供体模板序列C.NHEJ修复常被用于基因敲除D.HDR修复效率通常高于NHEJ5.下列属于常用DNA分子标记的有?A.RFLPB.SSRC.SNPD.AFLP6.满足哈代—温伯格平衡的理想群体需要具备哪些条件?A.群体规模足够大B.个体间随机交配C.无突变、无选择D.无迁入迁出7.动物实验伦理中“3R原则”的内涵包括?A.减少(Reduction)B.替代(Replacement)C.优化(Refinement)D.修复(Repair)8.实施全基因组选择通常需要具备哪些条件?A.覆盖全基因组的高密度SNP标记B.具有表型和基因型信息的参考群体C.合适的遗传评估统计模型D.仅依赖一个主效基因的标记效应9.动物合成生物学中用于精细调控基因表达的元件或策略包括?A.诱导型启动子B.核糖体开关(riboswitch)C.转录因子回路D.光遗传学调控系统10.基因编辑动物产业化前通常需要评估?A.编辑准确性和脱靶风险B.对动物健康和福利的影响C.作为食品时的安全性与致敏性D.遗传稳定性和生态环境影响三、判断题(每题1分,共10分)1.基因编辑动物一定属于转基因动物。2.体细胞核移植克隆动物的核基因组来源于供体细胞,线粒体基因组主要来源于卵母细胞。3.遗传力越高的性状,表型选择越有效。4.理想哈代—温伯格平衡群体中,等位基因频率和基因型频率在没有突变、选择、迁移和遗传漂变等条件下逐代保持不变。5.sgRNA与靶序列互补即可,PAM序列可有可无。6.胚胎干细胞具有自我更新能力和分化为多种细胞类型的潜力。7.基因编辑动物即使不引入外源基因,也应当进行脱靶分析和安全评价。8.合成生物学中的“设计—构建—测试—学习”(DBTL)循环是工程化改造生物系统的重要方法论。9.全基因组选择依赖所有标记效应,不需要高密度标记。10.表观遗传修饰不能跨代遗传,其影响只限于当代个体。四、名词解释(每题5分,共20分)1.基因敲入(geneknock-in)2.体细胞核移植(SCNT)3.全基因组选择(genomicselection)4.合成生物学(syntheticbiology)五、简答题(每题5分,共10分)1.简述CRISPR/Cas9定点基因编辑的基本原理。2.简述分子标记辅助选择(MAS)的基本流程。六、综合分析题(每题15分,共30分)1.猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)由PRRSV引起,是影响养猪业的重要疫病。研究表明,猪巨噬细胞表面受体蛋白CD163的SRCR5结构域是PRRSV入侵所必需的。某团队计划通过基因编辑技术敲除CD163的SRCR5编码序列,培育抗PRRSV种猪。请回答下列问题:(1)选择一种合适的基因编辑系统,并简述其工作原理。(4分)(2)设计一条获得纯合敲除CD163SRCR5基因编辑猪的核心技术路线。(7分)(3)该类基因编辑猪产业化前需要进行哪些安全性评估?(4分)2.某奶牛场对产奶量性状进行遗传评估。已知该性状的表型方差VP=40,加性遗传方差VA=10,显性遗传方差(1)计算广义遗传力H2和狭义遗传力h(2)若使用覆盖全基因组的5万个SNP标记进行基因组选择,该类标记可解释全部加性遗传方差的96%。估算基因组遗传力hG(3)除遗传力外,再写出两个影响产奶量育种值估计准确性的因素,并简要说明理由。(4分)H狭义遗传力:h(2)基因组遗传力:h基因组选择在奶牛育种中的优势:①用高密度标记估计所有染色体片段的效应,同时捕获大量微效QTL,提高低遗传力性状的选择准确性;②候选公牛可在幼年采样并测定基因型,无需等待女儿表型,显著缩短世代间隔;③结合基因组关系矩阵可减少系谱误差,更准确地控制近交速率;④对限性性状和难以测定的性状(如产奶量)可实现早期选择,降低育种成本。(3)影响育种值估计准确性的因素及理由:①表型信息量:表型记录数越多、可靠性越高,育种值估计越准确;②遗传评估模型:模型若能正确拟合固定效应、随机效应和关系矩阵,可减少估计偏差;③参考群体规模与代表性:参考群越大、与候选群体亲缘关系越近,标记效应估计越稳定;④标记密度与连锁不平衡水平:密度越高、基因组覆盖越广,能捕获的遗传方差越大。参考答案与解析一、单项选择题1.答案:C解析:CRISPR/Cas9源自细菌和古菌抵御外源核酸的适应性免疫系统;ZFN、TALEN依赖人工改造的DNA结合蛋白,Cre/loxP则用于位点特异性重组。2.答案:C解析:MⅡ期卵母细胞胞质成熟,支持供体核重编程的能力最强,是体细胞核移植的标准受体。GV期、MⅠ期均未完全成熟,原核期不用于去核受体。3.答案:B解析:VGVP4.答案:D解析:3R指减少、替代、优化,不包含繁殖。5.答案:B解析:原核注射可在多种动物中应用,但外源DNA通常随机整合、拷贝数可变,容易造成位置效应和表达不稳定。6.答案:C解析:脱靶可通过全基因组测序等方法检测;NGG型PAM在基因组中广泛存在,选择高特异性sgRNA和高保真Cas9变体可显著降低脱靶风险。编辑发生在生殖细胞或胚胎时可遗传给后代。7.答案:B解析:全基因组选择假定所有标记都可能与QTL连锁,通过估计全基因组标记效应预测基因组育种值,对微效多基因控制的低遗传力性状同样有效。8.答案:B解析:合成生物学借鉴工程学“标准化、模块化、解耦化”的理念,将DNA片段设计为可互换的生物零件,以实现可预测的基因线路构建。9.答案:D解析:复制起始位点、选择标记、启动子、终止子或加尾信号是通用元件。逆转录酶基因仅存在于反转录病毒载体等特定载体中,并非表达载体必需。10.答案:C解析:成体干细胞多为多能或单能干细胞,不具有发育全能性;iPSCs通常借助外源转录因子(如Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc)将体细胞重编程为多能状态。二、多项选择题1.答案:ABC解析:ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9均可在靶位点产生双链断裂。RNAi在转录后水平沉默基因,不产生DNA双链断裂。2.答案:ABCD解析:四种方法均已成功用于转基因动物生产。原核注射和体细胞核移植适用于多种哺乳动物,慢病毒载体法效率较高,胚胎干细胞法在小鼠中应用广泛。3.答案:ABCD解析:克隆受供核细胞状态、卵胞质重编程能力、重构胚激活、胚胎体外发育及母体妊娠环境等综合因素影响,因此总体效率仍较低。4.答案:ABC解析:多数细胞中NHEJ占主导,启动快且易错,可导致移码实现敲除;HDR需要同源模板,效率通常低于NHEJ。5.答案:ABCD解析:四种标记分别基于酶切位点、重复序列长度、单核苷酸变异和扩增片段长度多态性,广泛应用于遗传图谱构建、QTL定位和分子育种。6.答案:ABCD解析:遗传漂变、非随机交配、突变、选择、基因流均会改变等位基因频率,破坏哈代—温伯格平衡。7.答案:ABC解析:3R指减少使用动物数量、寻找替代方法、优化实验设计和操作以减轻动物痛苦,不包含“修复”。8.答案:ABC解析:全基因组选择通过参考群体估计所有标记效应,再由统计模型计算基因组育种值;若只关注单一主效QTL,属于标记辅助选择而非全基因组选择。9.答案:ABCD解析:以上均是合成生物学中实现时空特异性、剂量依赖性基因表达调控的常用手段。10.答案:ABCD解析:产业化评估强调分子特征、健康表型、食品安全、遗传稳定、环境释放风险等多维信息。三、判断题1.答案:错误解析:若只对内源基因进行敲除或碱基替换、未整合外源DNA,通常不属于传统意义上的转基因动物。2.答案:正确3.答案:正确解析:遗传力高意味着表型差异中可遗传的加性效应占比大,依据表型选择通常能获得较大的遗传进展。4.答案:正确5.答案:错误解析:SpCas9靶向识别需要同时存在PAM(5'-NGG-3'),否则即使sgRNA与靶序列互补也不能有效切割。6.答案:正确7.答案:正确8.答案:正确9.答案:错误解析:全基因组选择需要高密度标记覆盖全基因组,以捕获标记与QTL之间的连锁不平衡信息。10.答案:错误解析:部分DNA甲基化和组蛋白修饰等表观标记可通过配子传递给后代,形成跨代遗传效应。四、名词解释1.答案:将外源基因、报告基因或特定突变序列精准插入基因组目标位点的遗传操作。与随机整合不同,基因敲入依赖同源重组或CRISPR/Cas9介导的HDR修复,可实现对基因组的定点改造。2.答案:将供体体细胞的细胞核植入去核的卵母细胞中,经重构胚激活、体外培养和胚胎移植,产生核基因组与供体细胞一致后代的技术,又称体细胞克隆。3.答案:利用覆盖全基因组的高密度SNP标记或序列数据,基于参考群体估计所有标记效应,进而预测候选个体基因组育种值的育种方法。它不依赖少数显著QTL,适用于微效多基因控制的数量性状。4.答案:以工程学“标准化、模块化、可预测”思想为指导,通过设计、改造和重构生物系统(如基因回路、代谢通路和基因组),使细胞获得新功能或优化原有功能的生物学分支。五、简答题1.答案:(1)根据靶位点设计并合成与靶序列互补的sgRNA;(2)sgRNA与Cas9蛋白组装为核糖核蛋白复合物;(3)复合物在基因组中搜索并识别含PAM(5'-NGG-3')的靶序列;(4)Cas9切割靶DNA,产生双链断裂;(5)细胞启动修复:NHEJ造成小片段缺失或插入,进而实现基因敲除;存在同源供体模板时,可通过HDR完成精确插入或替换。2.答案:(1)利用连锁分析或关联分析,筛选与目标基因或QTL紧密连锁的分子标记;(2)在育种群体中提取DNA并进行标记基因型检测;(3)结
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