实验室生物安全与鼠疫菌株管理课件

BIOSAFETYTRAINING实验室生物安全与鼠疫菌株管理等级·保藏·防护·应急日期2026年10月课程导览01认识风险鼠疫危害与生物安全形势02等级标准四级实验室划分与法规依据03菌株管理保藏领用与运输规范04防护操作个人防护装备与操作规程05应急处置暴露泄漏与废弃物处理06责任落地制度培训与自查闭环SECTION认识风险看不见的敌人，最需要看得见的敬畏鼠疫是甲类传染病，实验室操作容不得半点侥幸01甲类传染病的严峻现实鼠疫是《中华人民共和国传染病防治法》规定的

甲类传染病由鼠疫耶尔森菌引起的自然疫源性疾病，历史上曾发生3次世界鼠疫大流行国际检疫传染病病原属性与历史危害2项鼠疫耶尔森菌由鼠疫耶尔森菌引起，属于自然疫源性疾病世界鼠疫大流行历史上曾发生3次世界鼠疫大流行，新中国成立前后曾有严重暴发现实风险与国际管控2项传播风险全球范围内仍存在传播风险，我国内蒙古、青藏高原等地曾有散发病例国际检疫传染病鼠疫为国际检疫传染病，世界卫生组织要求对病例实行零延迟报告病原学特征与灭活条件双重认知鼠疫耶尔森菌危害明确，但灭活条件同样清晰可控病原学特征3项分类鉴定革兰阴性杆菌，属肠杆菌科，1894年由耶尔森首次分离毒力因子携带多种毒力因子：F1抗原抗吞噬、V/W抗原抑制免疫反应双相生长宿主体内37℃与环境26℃下代谢活性不同灭活条件3项环境敏感性耐冷、怕热、怕干燥、怕强光热力灭活55至60℃加热可灭活化学与光敏灭活含氯消毒剂、酒精、紫外线均可灭活三种临床分型对比主要传播途径：跳蚤叮咬、接触染疫动物、吸入肺鼠疫患者飞沫临床分型主要表现未经治疗致死率腺鼠疫淋巴结肿痛，可发展为败血症50%至60%肺鼠疫咳嗽、血痰、胸痛，可飞沫人传人24小时内接近100%败血型鼠疫全身广泛出血、休克极高临床分型对比高致病性病原体的防护底线明确鼠疫耶尔森菌的高致病属性与防护底线，为后续标准学习铺垫鼠疫耶尔森菌属第一类病原微生物，未灭活实验须在BSL-3及以上实验室开展风险途径气溶胶传播实验室感染的主要风险途径严格受控相关操作须严格受控进行培训要求40学时每年生物安全培训不少于实验室人员须每年完成规定学时的生物安全培训上岗条件误解仅参加培训即可上岗↓纠正真相考核合格方可上岗必须通过考核SECTION等级标准等级不是标签，而是生命的防护线四级防护体系，每一级都对应明确的操作边界02四级生物安全实验室体系生物安全实验室按防护水平分为四级，等级越高，防护要求越严ABSL-1至ABSL-4动物生物安全实验室以

ABSL-1至ABSL-4

对应表示BSL-1基础实验室处理对健康成人无致病性的微生物BSL-2中等防护处理中等危害病原体，配备生物安全柜与高压灭菌器BSL-3高等级防护处理经气溶胶传播的高致病病原体，设缓冲间与定向气流BSL-4最高防护等级独立建筑结构、Ⅲ级生物安全柜、正压防护服负压与定向气流控制负压取值上限对比等级越高负压越强BSL-2-10PaBSL-3-25PaBSL-4-30Pa等级越高，负压绝对值越大气流单向流动要求越严格实验室环境技术指标指标BSL-2BSL-3BSL-4换气次数（次每小时）8至1010至1510至15温度（摄氏度）18至2720至2620至25相对湿度（百分比）30至6530至6030至60噪声（分贝）不超过60不超过60不超过60三级以上实验室换气与温湿度控制更严。环境指标是实验室防护能力的重要组成，三级以上实验室对温湿度与换气控制更为严格。备案管理与法规依据国家对病原微生物实行分类管理，对实验室实行分级管理备案管理要点4项备案层级一级、二级实验室向设区市级卫健部门备案；三级、四级须经省级初审后报国家卫健委批准备案材料平面布局图、管理制度、人员资质证明、风险评估报告审查时限20个工作日变更要求备案信息变更须30日内重新备案，每年提交生物安全自查报告SECTION菌株管理菌株管理无小事，一管一锁皆责任从保藏方法到双人双锁，全流程可追溯03菌种保藏方法对比保藏方法保存温度保存效果冷冻干燥法零下30摄氏度20年存活率可达

98.46%低温冷冻法零下30或70摄氏度加30%甘油脑心浸液，效果与零下70摄氏度相当斜面加液体石蜡零下4摄氏度小肠结肠炎耶尔森菌可存活

21年

以上长期保藏首选冷冻干燥法，低温冷冻法更适用于基层实验室法保藏方法适用要点冷冻干燥零下30摄氏度，20年存活率

98.46%低温冷冻零下30或70摄氏度，效果相当加液体石蜡零下4摄氏度，可存活

21年

以上鼠疫菌株储存规范菌株储存的两条刚性底线：双人双锁

与

24小时限时灭菌冰柜存储病原微生物样本须置于零下80摄氏度专用冰柜，加装双锁并记录使用日志双人双锁实行双人双锁管理，领用须登记用途、数量及使用人限时灭菌使用后剩余样本须在24小时内灭菌处理，不可长期存放接收核对样本接收时双人核对名称、编号、浓度与送检信息，检查容器密封性菌种保藏质量控制标准国家卫健委·2026年6月

发布标准号

WS/T900-2026将于2026年12月1日实施干燥工艺冷冻干燥提升菌株长期存活率脱水冻干保护低温保存低温存储低温保存维持生物学特性稳定-80℃液氮培养基优化培养基配方培养基优化保障保藏质量可控配方质控菌种运输与样本管理运输高致病性菌（毒）种或样本，应以陆路运输为主菌（毒）种运输管理要求3项容器密封符合防水、防破损、防外泄、耐高低温、耐高压要求危险标识容器或包装材料应印有规定的生物危险标识提前对接涉及鼠疫耶尔森菌检测的机构应提前联系实验室，获取样本采集、包装与运输指导SECTION防护操作防护装备是屏障，规范操作才是底线穿戴有序、脱卸有法，每一步都不能省04个人防护装备分级选择按实验室等级说明防护装备配置差异，强调分级适配原则分级适配原则防护装备按实验室等级分级适配，等级越高防护越严实验室等级防护配置实验室等级防护装备配置BSL-2一次性防护服、N95口罩、防穿刺手套、护目镜BSL-3正压防护服、独立呼吸装置防护装备选用标准口罩分级普通外科口罩基础防护，N95或KN95过滤95%以上颗粒物防护服须防穿刺耐酸碱，潮湿或破损须立即更换穿戴与脱卸标准流程穿戴有序，脱卸有法，每一步都不能省穿戴顺序按标准流程顺序穿戴，不可跳跃内层手套›连体防护服›防护靴套N95口罩›护目镜›外层手套防护面屏脱卸原则卷脱原则遵循

由外向内卷脱，每脱除一件装备后均需手部消毒指定缓冲区脱卸在指定缓冲区进行，污染装备装入双层医疗废物袋回收管理所有个人防护装备不得穿离实验区域，用后立即放入专用回收袋实验室核心操作规程禁令是底线，设备是保障操作禁令禁止口吸移液，禁止在实验区饮食或存放个人物品。锐器使用后立即放入专用容器，避免意外刺伤。涉及气溶胶的操作必须在生物安全柜内进行。设备管理生物安全柜每日开机运行至少15分钟，检查通风系统与紫外灯是否正常。台面每日用含氯消毒剂擦拭2次。实验室准入与人员资质持证上岗，分区准入，培训合格方可独立操作人员资质操作人员须持有有效的生物安全操作证书，证书等级须与工作区域安全级别匹配。严禁无证上岗进入高致病性病原体实验室。门禁与培训实行严格门禁管理，不同等级区域配备独立门禁卡。新员工入职首周接受生物安全周专项培训，考核合格方可独立操作。SECTION应急处置应急不是预案里的文字，而是肌肉里的记忆暴露、泄漏、废弃物，每一环都有标准动作05职业暴露应急处置暴露处置的黄金动作：冲洗、上报、记录01皮肤接触立即冲洗消毒立即用流动清水冲洗

15分钟再用

0.5%碘伏消毒01·溅入眼睛立即用洗眼器冲洗眼部暴露应急使用洗眼器持续冲洗

10分钟02·上报与记录上报并留痕追溯责任与闭环立即上报实验室负责人，判断是否需接种疫苗或预防用药详细记录暴露事件细节，以备追溯样本泄漏处理流程两类泄漏，两条处置路径，核心是先控制、再清理、后验证液体泄漏液体泄漏处置佩戴双层手套用吸水纸覆盖泄漏区倒入含氯消毒剂，覆盖超出泄漏区5厘米静置30分钟后清理双层手套含氯消毒剂30分钟气溶胶泄漏气溶胶泄漏处置立即关闭实验室通风系统人员撤离后开启紫外线消毒2小时通风换气后再进入封闭可能造成扩散的场所高致病性材料专人看管，不得随意移动通风系统紫外线消毒2小时废弃物分类与消毒废弃物处置有标准，每一类都有专属容器与消毒参数感染性废物高压灭菌双层黄色垃圾袋封装经

121摄氏度

高压灭菌

30分钟损伤性废物警示标志投入防刺穿锐器盒高压灭菌后贴上

警示标志化学性废物双人双锁单独存放于

红色容器剧毒类执行

双人双锁SECTION责任落地安全不是一次培训，而是每一天的习惯制度、培训、自查，让规范真正落地06组织管理与职责分工生物安全责任到岗到人，科室主任是本科室第一责任人领导小组组织统筹成立鼠疫防控及生物安全管理领导小组，主管领导任组长感染管理科规范监管负责制定修订规范、组织培训、登记报告与追踪调查科室主任第一责任承担本科室生物安全第一责任，落实日常管理检验科标本管控负责标本规范采集、运输与保存，配备紧急洗眼装置及急救箱培训与考核制度每年生物安全培训不少于

40学时

，考核合格方可上岗培训内容覆盖生物安全基础理论、应急处理流程及法律法规定期专项培训定期组织鼠疫防控知识及生物安全防护培训健康档案管理建立职业