丹参检验规范

丹参检验规范1范围本规范规定了丹参药材检验的基本要求、检验项目、方法操作规范、结果判定及检验记录要求，适用于丹参药材的原料进厂检验、中间品检测及成品放行检验环节，涵盖野生及人工种植丹参，也可作为中药饮片炮制、提取物生产过程中丹参原料质量控制的参考依据。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。《中华人民共和国药典》2025年版一部《中药饮片质量标准通则》《药用植物及制剂外经贸绿色行业标准》《实验室质量控制规范食品理化检测》《中药有害残留物限量制定指导原则》3术语与定义3.1丹参为唇形科植物丹参SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根和根茎。春、秋二季采挖，除去泥沙，干燥。栽培品种植周期通常为1-2年，以秋季采挖者有效成分含量更高。3.2丹参酮类指丹参中脂溶性菲醌类化合物的总称，主要包括丹参酮Ⅱ_A、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ等，为丹参活血通经、祛瘀止痛功效的主要物质基础。3.3丹酚酸类指丹参中水溶性酚酸类化合物的总称，主要包括丹酚酸B、迷迭香酸、原儿茶醛等，是丹参抗心肌缺血、抗氧化作用的核心活性成分。4取样规范4.1取样前准备取样人员需佩戴洁净的一次性手套、口罩及工作服，准备干燥、洁净的不锈钢取样器、样品袋、取样标签及取样记录单。取样前确认待检批次丹参的采购合同、产地证明、采收时间记录等文件信息与货物标识一致，核对批次号、总件数、重量等信息，避免错取样、漏取样。4.2取样量计算同批次药材总件数不足5件的，逐件取样；5-99件的，随机抽取5件取样；100-1000件的，按5%比例取样；超过1000件的，超过部分按1%比例取样。每件取样量不少于100g，最终总取样量不少于检验所需量的3倍，其中1/3供实验室检验使用，1/3供复核检验使用，1/3作为留样保存，留样期不少于药材有效期后1年，无有效期的留样期不少于3年。4.3取样操作取样时从每件药材的上、中、下三个部位分别取样，避免仅抽取表面样品。将抽取的样品混合均匀后，采用四分法缩分至所需量，装入密封样品袋，贴上取样标签，注明药材名称、批次、产地、取样日期、取样人、总件数、取样件数等信息。取样过程中避免样品受潮、污染，若发现药材有明显霉变、虫蛀、结块等异常情况，单独取样并做好异常记录。5性状检验5.1外观形态取待检样品10g，平铺于白色瓷盘内，自然光下观察：本品根茎短粗，顶端有时残留茎基。根数条，长圆柱形，略弯曲，有的分枝并具须状细根，长10-20cm，直径0.3-1cm。栽培品较粗壮，直径可达1.5cm，表面红棕色或暗棕红色，粗糙，具纵皱纹。老根外皮疏松，多显紫棕色，常呈鳞片状剥落。质硬而脆，断面疏松，有裂隙或略平整而致密，皮部棕红色，木部灰黄色或紫褐色，导管束黄白色，呈放射状排列。气微，味微苦涩。5.2性状异常判定若出现以下情况判定为性状不合格：表面呈黑褐色或明显霉变，有虫蛀孔洞或虫粪残留；断面木质部发黑、发黏，有酸败异味；直径小于0.2cm的细根占比超过30%；掺杂泥沙、石块、非药用部位等杂质超过总重量的3%。6鉴别检验6.1显微鉴别取本品粉末1g，置载玻片上，滴加三氯化铁试液1-2滴，放置片刻后置显微镜下观察：石细胞类圆形、类三角形、类长方形或不规则形，直径20-65μm，壁较厚，有的胞腔内含黄棕色物。木纤维多为纤维管胞，长梭形，末端斜尖或钝圆，直径12-27μm，具缘纹孔点状，纹孔斜裂缝状或十字形，孔沟稀疏。网纹导管和具缘纹孔导管直径10-50μm。木栓细胞黄棕色，表面观类方形或多角形，壁稍厚，弯曲或平直，含红棕色色素。淀粉粒类圆形或椭圆形，直径2-10μm，脐点裂缝状。6.2薄层色谱鉴别取本品粉末0.5g，加甲醇20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹参对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。再取丹参酮Ⅱ_A对照品、丹酚酸B对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（6:4:8:1:4）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。喷以1%三氯化铁乙醇溶液，丹酚酸B斑点显蓝黑色。7检查项检验7.1水分照水分测定法（烘干法）测定：取供试品粉末约2g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5mm，精密称定，打开瓶盖在100-105℃干燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量，不得超过13.0%。7.2总灰分取供试品粉末约3g，置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量，缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500-600℃，使完全灰化并至恒重。根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量，不得超过10.0%。7.3酸不溶性灰分取上述总灰分残渣，在坩埚中加入稀盐酸约10ml，用表面皿覆盖坩埚，置水浴上加热10分钟，表面皿用热水5ml冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚内的残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移置同一坩埚中，干燥，炽灼至恒重。根据残渣重量，计算供试品中酸不溶性灰分的含量，不得超过3.0%。7.4重金属及有害元素照铅、镉、砷、汞、铜测定法（原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法）测定：铅不得过5mg/kg，镉不得过1mg/kg，砷不得过2mg/kg，汞不得过0.2mg/kg，铜不得过20mg/kg。对于出口用丹参药材，需额外检测铬含量，不得过2mg/kg。7.5农药残留量照农药残留量测定法测定：有机氯类农药总残留量不得过0.1mg/kg，其中六六六（总BHC）不得过0.05mg/kg，滴滴涕（总DDT）不得过0.05mg/kg，五氯硝基苯不得过0.01mg/kg；有机磷类农药总残留量不得过0.5mg/kg；拟除虫菊酯类农药总残留量不得过0.2mg/kg。禁止检出甲胺磷、对硫磷、甲基对硫磷、久效磷、磷胺等国家禁用农药。7.6二氧化硫残留量照二氧化硫残留量测定法（酸碱滴定法）测定：取供试品粉末约10g，精密称定，置两颈圆底烧瓶中，加水300-400ml和6mol/L盐酸溶液10ml，加热蒸馏，用250ml锥形瓶加1%过氧化氢溶液20ml作为吸收液，收集馏出液约150ml，用氢氧化钠滴定液（0.01mol/L）滴定。计算二氧化硫残留量，不得过150mg/kg。7.7黄曲霉毒素照黄曲霉毒素测定法（高效液相色谱法-柱后衍生法）测定：取供试品粉末约15g，照标准规定的方法提取、净化后测定，本品每1000g含黄曲霉毒素B₁不得过5μg，黄曲霉毒素B₁、B₂、G₁、G₂总量不得过10μg。存放时间超过6个月的丹参原料每批次必须检测黄曲霉毒素。8浸出物测定8.1水溶性浸出物照水溶性浸出物测定法项下的冷浸法测定：取供试品粉末约4g，精密称定，置250-300ml的锥形瓶中，精密加水100ml，密塞，冷浸，前6小时内时时振摇，再静置18小时，用干燥滤器迅速滤过，精密量取续滤液20ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。除另有规定外，本品水溶性浸出物不得少于35.0%。8.2醇溶性浸出物照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定，用乙醇作溶剂：取供试品粉末约2g，精密称定，置100-250ml的锥形瓶中，精密加乙醇50-100ml，密塞，称定重量，静置1小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取续滤液25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。本品醇溶性浸出物不得少于15.0%。9含量测定9.1丹参酮类照高效液相色谱法测定：色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.02%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为270nm。理论板数按丹参酮Ⅱ_A峰计算应不低于2000。时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）0-15604015-2060→8040→2020-25802025-3080→6020→4030-356040对照品溶液的制备：取丹参酮Ⅱ_A对照品、隐丹参酮对照品、丹参酮Ⅰ对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含丹参酮Ⅱ_A16μg、隐丹参酮8μg、丹参酮Ⅰ8μg的混合溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品粉末（过三号筛）约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品按干燥品计算，含丹参酮Ⅱ_A（C₁₉H₁₈O₃）、隐丹参酮（C₁₉H₂₀O₃）和丹参酮Ⅰ（C₁₈H₁₂O₃）的总量不得少于0.25%。其中丹参酮Ⅱ_A含量不得少于0.15%。9.2丹酚酸B照高效液相色谱法测定：色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为286nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于3000。时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）0-1010→3090→7010-20307020-3030→4070→6030-4040→1060→9040-451090对照品溶液的制备：取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加75%甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品粉末（过三号筛）约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品按干燥品计算，含丹酚酸B（C₃₆H₃₀O₁₆）不得少于3.0%。用于生产丹参提取物的原料，丹酚酸B含量不得少于5.0%。10检验结果判定与复检10.1结果判定所有检验项目均符合本规范要求的，判定为合格批次；有任意一项不符合要求的，判定为不合格批次。不合格批次不得用于生产，由质量部门出具不合格通知书，移交采购部门做退货或销毁处理。10.2复检规则当检验人员或供货方对检验结果有异议时，可在收到检验结果通知书之日起7个工作日内提出复检申请。复检由实验室另一名检验人员使用留存的样品进行检验，也可送第三方检验机构进行仲裁检验。复检结果为最终判定结果，复检费用由申请方承担，但若原检验结果确有错误，检验费用由实验室承担。11检验记录与报告11.1检验记录检验过程中及时、准确填写检验记录，记录内容包括样品信息、检验日期、检验环境温湿度、仪器设备型号及编号、试剂批号、检验操作过程、原始数据、计算公式、检验结果、检验人签字、复核人签字等。检验记录不得涂改，如需更正，应在更正处划线并签名及注明更正日期，确保原始数据可追溯。11.2检验报告检验完成后出具检验报告，报告内容包括样品名称、批次、产地、收样日期、检验日期、检验项目、标准要求、检验结果、单项判定、总判定、检验人签字、审核人签字、质量负责人签字、检验机构盖章等。检验报告一式三份，一份交采购部门，一份交生产部门，一份由质量部门存档，保