大补阴丸检验规范

大补阴丸检验规范1范围本规范规定了大补阴丸的质量要求、检验方法、检验规则、标签、包装、运输和贮存等内容，适用于大补阴丸的原料检验、中间产品检验及成品检验全过程，可作为药品生产企业质量控制部门、第三方药品检验机构及药品监管部门开展大补阴丸质量评价的技术依据。本规范覆盖的大补阴丸剂型包括水蜜丸、大蜜丸两种常用剂型，其他衍生剂型可参照本规范相关条款结合剂型特点补充检验项目。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。《中华人民共和国药典》2025年版一部《药品生产质量管理规范》（2010年修订）《中药成方制剂检验通则》《药用辅料质量标准》《药品包装材料与容器国家标准》3处方与制法3.1处方熟地黄120g、知母（盐炒）80g、黄柏（盐炒）80g、龟甲（醋制）120g、猪脊髓160g。3.2制法以上五味，熟地黄、黄柏、龟甲、知母粉碎成粗粉，猪脊髓置沸水中略煮，除去外皮，与上述粗粉拌匀，干燥，粉碎成细粉，过100目筛，混匀。每100g粉末加炼蜜10~20g与适量的水泛丸，干燥，制成水蜜丸；或加炼蜜80~100g制成大蜜丸，即得。4性状4.1水蜜丸本品为深棕黑色的水蜜丸，气微香，味苦、微甜带涩。表面应光滑圆整，无粘连、无裂缝、无霉变、无虫蛀，色泽均匀一致。4.2大蜜丸本品为黑褐色的大蜜丸，气微香，味甜、微苦、涩。丸形圆整，软硬适中，无皱缩、无空心、无异物，表面无返砂现象。5鉴别5.1显微鉴别取本品，置显微镜下观察：薄壁组织灰棕色至黑棕色，细胞多皱缩，内含棕色核状物（熟地黄）。纤维束鲜黄色，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维，含晶细胞的壁木化增厚（黄柏）。不规则块片灰黄色，表面有微细纹理或孔隙（龟甲）。草酸钙针晶成束或散在，长26~110μm（知母）。5.2薄层色谱鉴别-黄柏取本品水蜜丸2g，研碎；或取大蜜丸3g，剪碎，加硅藻土2g，研匀，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至5ml，作为供试品溶液。另取黄柏对照药材0.1g，加甲醇10ml，同法制成对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液（12:6:3:3:1）为展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。5.3薄层色谱鉴别-知母取本品水蜜丸3g，研碎；或取大蜜丸5g，剪碎，加硅藻土3g，研匀，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加盐酸2ml，加热回流1小时，浓缩至约5ml，加水10ml，用石油醚（60~90℃）振摇提取2次，每次10ml，合并石油醚液，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取知母皂苷元对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（9:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。5.4薄层色谱鉴别-熟地黄取本品水蜜丸5g，研碎；或取大蜜丸7g，剪碎，加硅藻土4g，研匀，加甲醇50ml，超声处理40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取熟地黄对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚（60~90℃）-乙酸乙酯（1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。6检查6.1水分水蜜丸照水分测定法（通则0832第二法）测定，不得过12.0%；大蜜丸照水分测定法（通则0832第一法）测定，不得过15.0%。6.2重量差异按丸剂重量差异检查法（通则0108）检查，应符合规定。取供试品10丸为1份，共取10份，分别称定重量，每份重量与标示重量相比较，超出重量差异限度的不得多于2份，并不得有1份超出限度1倍。标示装量为每袋5g以上至50g的水蜜丸，其装量差异限度为±5%；每丸重9g的大蜜丸，重量差异限度为±6%。6.3溶散时限水蜜丸照溶散时限检查法（通则0921）检查，应在1小时内全部溶散并通过筛网，如有少量细小颗粒未通过筛网但已软化无硬心，可判为符合规定。大蜜丸不检查溶散时限。6.4微生物限度照微生物限度检查法（通则1105、通则1106、通则1107）检查，需氧菌总数不得过10^4cfu/g，霉菌和酵母菌总数不得过10^2cfu/g，不得检出大肠埃希菌；耐胆盐革兰阴性菌不得过10^2cfu/g；沙门菌不得检出。6.5重金属及有害元素照铅、镉、砷、汞、铜测定法（通则2321）测定，铅不得过5mg/kg，镉不得过0.3mg/kg，砷不得过2mg/kg，汞不得过0.2mg/kg，铜不得过20mg/kg。6.6黄曲霉毒素照黄曲霉毒素测定法（通则2351）测定，每1000g样品中黄曲霉毒素B1不得过5μg，黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2总量不得过10μg。6.7其他应符合丸剂项下有关的各项规定（通则0108），包括外观、装量、微生物限度等通用要求，无虫蛀、霉变、结块等异常现象。7含量测定7.1黄柏的盐酸小檗碱含量测定照高效液相色谱法（通则0512）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%磷酸溶液（50:50）（每100ml加十二烷基磺酸钠0.1g）为流动相；检测波长为345nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于4000。对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含40μg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品水蜜丸适量，研细，取约0.5g，精密称定；或取重量差异项下的大蜜丸，剪碎，取约0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）45分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品含黄柏以盐酸小檗碱（C20H17NO4·HCl）计，水蜜丸每1g不得少于2.0mg；大蜜丸每1g不得少于1.2mg。7.2知母的知母皂苷BⅡ含量测定照高效液相色谱法（通则0512）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（25:75）为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按知母皂苷BⅡ峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备取知母皂苷BⅡ对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品水蜜丸适量，研细，取约2g，精密称定；或取大蜜丸约3g，精密称定，加硅藻土2g，研匀，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，蒸干，残渣加水10ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次15ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液10~20μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。本品含知母以知母皂苷BⅡ（C45H76O19）计，水蜜丸每1g不得少于1.5mg；大蜜丸每1g不得少于0.9mg。8检验规则8.1批次划分大补阴丸以同一批原料药在同一连续生产周期内生产的均质产品为一批，每批产品产量水蜜丸不得超过10万袋，大蜜丸不得超过5万丸。8.2抽样每批产品按《药品抽样指导原则》进行抽样，抽样数量应满足全项检验所需量的3倍，其中1/3用于检验，1/3用于复验，1/3作为留样。成品抽样应从不同生产时段、不同包装部位随机抽取，中间产品抽样应在制丸、干燥、包装等关键工序节点分别取样。8.3出厂检验每批产品出厂前须经生产企业质量检验部门按本规范进行全项检验，检验项目包括性状、鉴别、水分、重量差异、溶散时限（水蜜丸）、含量测定，全部项目合格后方可出具检验报告书并放行出厂。8.4型式检验有下列情况之一时，应进行型式检验，检验项目为规范规定的全部项目：新产品投产前的试生产阶段；生产工艺发生重大变更，可能影响产品质量时；原材料产地或供应商发生变更时；停产6个月以上恢复生产时；国家药品监督管理部门提出型式检验要求时；正常生产时每3年进行一次型式检验。8.5复验规则检验结果不合格时，应重新从双倍数量的包装单元中抽样进行复验，复验结果仍不合格的，判该批产品为不合格品。涉及微生物限度、重金属及有害元素等安全性指标不合格的，不得进行复验，直接判定为不合格。9标签、包装、运输与贮存9.1标签产品标签应符合《药品说明书和标签管理规定》要求，标注药品通用名称、成份、性状、功能主治、规格、用法用量、不良反应、禁忌、注意事项、贮藏、生产日期、产品批号、有效期、批准文号、生产企业等信息。水蜜丸每袋规格标注为6g/袋，大蜜丸每丸规格标注为9g/丸。9.2包装内包装采用药用复合膜袋（水蜜丸）或药用铝塑泡罩包装（大蜜丸），应符合《药品包装用材料、容器管理办法》要求，封口严密，无泄漏、无破损。外包装采用瓦楞纸箱，箱内附产