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152023-12-29发布本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会(SAM/TC1I15主要试剂与材料5.1.1次氯酸钠。5.1.3硫酸链霉素(500mg/mL)。2灭菌20min。6.1.1病原菌的分离约0.5cm×0.5cm的小组织块,用75%酒精和1%次6.1.2病原菌的纯化6.3.2.1引物CRTGGATCTTRTCRTCSACC-3')以及镰刀菌PHO序列引物Fusphoo-f(5'-ATGCARGGYATYGTHGT-3')和Fusphoo-r(5'-ACRTTRGTRGCATCCTTRGWRGART-3')进行PC聚类分析结果表明,以ITS序列构建的系统发育树中,菌株与NCBI数据库中的三线镰刀菌(JX989827.1)、燕麦镰刀菌(KX058547.1)、锐顶镰刀菌(MT557673.1)聚为同一类,见附录A中的图A.5。以fRPB2序列构建的系统发育树见附录A中的图A.6。以PHO序列构建的系统发育树中,菌株与NCBI数据库中的锐顶镰刀菌(KJ200247.1)聚于同一类,见附录A中的图A.7。选取形态特征与F.acuminatum形态特征相符且PCR检测鉴定阳性的分离菌株,在绿豆培养基上培养接种发病的苜蓿根部再做病原菌分离、培养,观察是否与F.acuminatum的形态特征一致,并对分离菌相符,PCR扩增鉴定为F.acuminatum,且苜蓿致病性测试的分34(资料性)取样取样清洗分离涂板56图A.5系统发育树—ITS序列图A.6系统发育树—fPRB2序列Fusa
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