CN119491023A 一种基因修饰增强脐带间充质干细胞旁分泌功能的方法及其应用 （北京再生世纪生物科技有限公司）_第1页
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开发区科创六街88号院7号楼1单元一种基因修饰增强脐带间充质干细胞旁分本发明公开了一种基因修饰增强脐带间充述的氧敏感序列包括缺氧反应元件HRE和缺氧诱2所述的氧敏感序列包括缺氧反应元件HRE和缺氧诱导因子HIF_1α增强子4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的间充质干细胞为脐带间充质干细6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤13.权利要求12所述的基因修饰的间充质干细胞在制备治疗缺血性心脑血管疾病的药3[0002]脐带间充质干细胞(UmbilicalCordMesenchymalStemCells,UC_MSCs)是从新[0006]本发明的目的是提供一种基因修饰增强脐带间充质干细胞旁分泌功能的方法及将目标基因与氧敏感序列连接后通过载体导入到间充质4[0012]具体地，所述的HRE序列和HIF_1α增强子序列两端包含EcoRI和BamHI限制性内切[0018](3)将酶切后的序列通过连接酶插入到载体中，转染到感受态细胞中进行慢病毒[0039]具体地，步骤(4)中培养间充质干细胞的培养基包括但不限于DMEM/F12培养基、5[0040]进一步地，步骤(4)中培养间充质干细胞的培养基为DMEM/F12培养基(含10%血管疾病的药物中的应用。6株基因库_国家典型培养物保藏中心(BioVectorNTCCInc.)；组织氧浓度敏感型启动子[0080]慢病毒包装过程如下：将构建好的pLenti_HRE_Enhancer_VEGF_IRES_GFP质粒、psPAX2质粒和pMD2.G质粒(1:1:1)共转染到HEK293T细胞中。通过测序确认HRE和增强子序列正确插入到pLenti_CMV_VEGF_IRE7[0086]先准备转染混合物，取1mL无血清DMEM/F12培养基，加入适量慢病毒颗粒(MOI=8[0101]行为学测试，术后第7天和第14天，进行神经功能缺损评分(Neurological骤参照文献(陈艳明等.VEGF和CD31在皮肤鳞癌中的表达,中国实

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