病原微生物标本采集规范课件

临床微生物学·培训病原微生物标本采集规范依据WS/T640—2026临床微生物学检验标本的采集和转运标准2026年课件导览01标准与原则规范依据与采集总要求02血液标本采集血培养全流程规范操作03呼吸道标本采集痰标本质量判定与留取04尿液标本采集清洁中段尿规范留取05其他标本与转运特殊标本处理与安全转运06质量控制与改进检验前质控与持续改进标准与原则标本质量决定检验结果规范依据与采集总原则01采集规范的标准依据现行有效依据为WS/T640—2026本标准为临床微生物学检验标本采集与转运的通用规范，适用于各级医疗机构开展检验工作。当前处于标准实施过渡期，应提前更新标本采集手册与操作流程关键时间节点3项发布2026年5月25日实施2026年11月1日替代WS/T640—2018，为首次修订适用范围3项对象各级医疗机构领域临床微生物学检验覆盖涵盖细菌学、真菌学和病毒学标准基本信息2项名称临床微生物学检验标本的采集和转运标准起草单位北京大学人民医院、中日友好医院、中国科学技术大学附属第一医院等新版标准关键更新更新集中在

特殊人群、分子诊断与血液标本

三大方向新版标准更新集中于特殊人群、分子诊断与血液标本三大方向标本检验新增内容病毒学检验项目选择与标本转运要求分子诊断标本的采集、转运和保存规定孕妇、婴幼儿和儿童、免疫受损者等特殊群体采集要求脑脊液和血液等无菌体液标本微生物检验优先级更改内容血培养适应证及采集套数不同体重婴幼儿、儿童血培养推荐采血量标本采集五大原则核心原则可概括为

早、快、准、足、净早疾病早期、抗菌药物使用前采集原则·内涵快采集后尽快送检，减少病原失活原则·内涵准采集部位贴近病变部位原则·内涵足标本量满足检测项目需求原则·内涵净无菌操作，避免外源污染原则·内涵采集前应明确检验目的，不同检测方法对标本量与处理方式要求不同采样人员须经培训，熟悉标本类型、采集部位、时机与职业暴露处置血液标本采集采血时机与血量是关键血培养全流程规范操作02血培养价值与采血指征血培养是血流感染检测的

金标准抓住采血指征与最佳时机，是提高血培养阳性率的关键。采血指征出现其一即可考虑发热（≥38℃）或低温（≤36℃）寒战白细胞增多或粒细胞减少血小板减少昏迷、多器官衰竭最佳采集时机把握采血黄金窗口怀疑血流感染应在

抗菌药物使用前

采集寒战或体温高峰前

30至60分钟

采血阳性率最高已用药者仍可采血，须在

申请单注明用药信息皮肤消毒与接种顺序污染控制的第一道关口在皮肤消毒1第一步消毒75%酒精棉签由内向外擦拭作用

30秒2第二步消毒碘酊或洗必泰按同法消毒作用

30秒3第三步消毒75%酒精脱碘待自然干燥消毒剂未干透禁止穿刺，消毒后

禁止触碰穿刺点血培养瓶橡皮塞须用

酒精消毒

后再注入血液注入顺序采血方式先注入后注入蝶翼针采血需氧瓶厌氧瓶注射器采血厌氧瓶需氧瓶采血量与采集套数采血量不足是假阴性的首要原因成人每套（需氧瓶加厌氧瓶）共约

20毫升不同穿刺部位采集

2～3套，单套诊断意义很低采血量从2毫升增至20毫升，阳性率增加

30%～50%，每增1毫升约升

3%～5%儿童采血量一般不超过全血量的

1%污染控制与送检保存理想消毒条件下仍有3%～5%的血培养混有污染菌严格区分污染与感染，规范送检路径污染→感染判断→送检→培养污染判断逻辑3项常见污染菌凝固酶阴性葡萄球菌、棒状杆菌、痤疮丙酸杆菌判断感染依据两次不同部位培养出同一菌、无菌部位标本同菌、48小时内快速生长采血禁忌禁止常规从留置导管采血；怀疑导管相关血流感染时，需同步采集导管血与外周血各一套送检与保存3项送检时限采集后

2小时内

送实验室，常温避光保存保存禁忌切忌放入冰箱冷藏或冷冻，低温可能抑制细菌生长培养监测实验室

35～37℃

培养监测

5～7天，免疫低下者可延长至

14天呼吸道标本采集合格标本才有培养意义痰标本质量判定与留取03痰标本价值与采集指征痰是医院微生物标本中占比最多的一类痰标本无创、易采集，是下呼吸道感染病原学诊断最常用的标本，培养结果与采集是否规范直接相关痰标本价值无创易采集最常用标本用于下呼吸道感染病原学诊断培养结果相关培养结果与采集规范直接相关采集指征出现其一即可考虑咳嗽咳痰，痰液呈脓性、血性、铁锈色或胶冻样咯血呼吸困难，呼吸急促或哮喘，伴胸痛发热伴白细胞增高，中性粒细胞或炎症指标升高胸部影像学提示感染可能痰标本规范留取方法自然咳痰以

晨痰

为佳规范留取三步法

准备·咳出·收集

全程操作要点1留取前准备清水漱口

3次，去除食物残渣与口腔杂菌避免牙膏与药用漱口水；佩戴假牙者提前取下›2咳出深部痰深呼吸并屏息片刻，从肺深部剧烈咳嗽同时呼气咳痰困难者用雾化吸入辅助，或用

3%～5%

氯化钠溶液诱导小儿用压舌板刺激或轻叩胸骨柄上方诱发咳痰›3收集与送检标本量宜

3～5毫升，咳入无菌杯并拧紧杯盖昏迷、重症或疑厌氧菌感染者，可采用支气管镜等有创采集法合格痰标本判定标准不合格痰没有培养意义合格标准判定判定维度合格标准鳞状上皮细胞＜10个／低倍视野白细胞＞25个／低倍视野白细胞与鳞状上皮比值＞2.5性状干酪痰、血痰或黏液痰鳞状上皮细胞＞10个／低倍视野提示受口咽部菌群污染，应重新采集水样或泡沫痰多以唾液及鼻咽分泌物为主，属不合格标本涂片出现食物残渣、灰尘颗粒提示采集不规范痰标本送检与致病菌判断采集后2小时内

送检，怀疑苛养菌感染者室温放置不超1小时纵轴为对数刻度，取材越远离口咽部，致病菌判断阈值越低保存时限不能及时送检者置4℃冰箱保存，但不超过24小时（疑肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等苛养菌除外）。判定标准连续分离到相同细菌且浓度在10的5至6次方，连续两次以上也可判为致病菌。尿液标本采集清洁中段尿是核心清洁中段尿规范留取04清洁中段尿留取方法疑尿路感染应采集

清洁中段尿采集清洁中段尿，避免污染确保检验准确清洁准备用肥皂与清水清洗双手，温水擦洗尿道口及周围。女性应由前向后清洁，减少肠道细菌污染。正确排尿晨起首次尿为佳，先排出前段尿液以冲洗尿道。接取中段尿

10～20毫升于无菌容器。无菌收集使用医院提供的无菌尿杯，勿用普通水瓶。容器盖内面朝上放置，避免手指触碰容器内壁。留尿时机与送检要求晨尿经肾脏浓缩，阳性检出率更高正确留尿与及时送检，是结果准确的前提01标本采集留取规范留取时机：一般取清晨首次尿；6小时以上未解小便亦可留取。尿量要求：留取10毫升以上，约占尿管容量的三分之二。容器要求：无菌、密封、无防腐剂。02标本处理送检时限采集后30分钟内送检，高温环境下20分钟内完成。无法立即送检者暂存4℃冰箱，冷藏不超过2小时。运送途中保持容器直立，避免剧烈摇晃与倒置。尿培养诊断标准与特殊人群清洁中段尿菌落计数≥10⁵CFU／毫升

常提示泌尿系统感染多次检出同一细菌可视为病原菌疑为尿道炎时仍应采集清洁中段尿，而非前段尿多次检出同一细菌同一细菌经多次培养持续检出，可视为病原菌，提示存在泌尿系统感染。疑为尿道炎时的采集疑为尿道炎时仍应采集清洁中段尿，而非前段尿，以保证培养结果的可靠性。特殊人群采集婴幼儿（未如厕训练）推荐导管导尿或耻骨上膀胱穿刺，污染率低6月龄以上婴儿可用尿袋采集法女性月经期不宜做此检查24小时尿标本不得混入大便及阴道分泌物其他标本与转运特殊标本特殊处理特殊标本处理与安全转运05厌氧菌与真菌标本采集特殊标本须隔绝干扰因素，保持病原活性采集要点厌氧菌·隔绝氧气真菌·避免冲洗交界处送检01标本类型厌氧菌标本需隔绝氧气，使用专用厌氧转运瓶。或用注射器排尽空气后密封送检。暴露于空气中不超过15分钟。02标本类型真菌标本组织标本避免用生理盐水冲洗，以免抑制真菌生长，直接置于无菌容器。指甲、毛发等先经酒精清洁表面。取病变与正常组织交界处送检。病毒与分枝杆菌标本采集采集工具与转运介质的选择直接影响检出率采集工具与转运介质的选择直接影响检出率，规范操作是结果可靠的前提。01采集要点病毒学标本使用合成纤维拭子，避免棉签抑制病毒。鼻咽拭子插入鼻咽部旋转停留10秒。立即置于病毒转运液中冷藏送检，避免反复冻融。02采集要点分枝杆菌标本痰液需连续采集3次，以晨痰为佳。采用防渗漏容器，注明结核可疑。支气管灌洗液可离心浓缩后送检，提高检出率。标本转运时限与保存转运时效直接决定病原检出率标本类型概览5类标本时限覆盖立即送检至

30分钟窗口，保存条件横跨

4℃～35℃。低温保存尿液标本

4℃

冷藏；分子诊断标本采样后

-80℃

保存。恒温运输血培养瓶

35℃

恒温运输，禁止冷藏。转运时限与保存条件执行标准标本类型转运时限与保存条件常规标本运送不超过

2小时脑脊液立即送检血培养瓶35℃

恒温运输，禁止冷藏尿液标本4℃

冷藏保存分子诊断标本采样后

-80℃

不超过

30分钟转运与检测要点转运培养基用于维持标本在转运期间的完整性，一般不促进增殖肺孢子菌检测疑肺孢子菌感染者，宜选择六胺银染色或分子生物学检测标识管理与生物安全标识不清的标本无法追溯，风险不可控标本标识是样本从采集到检测全流程可追溯的基础，标识要素健全与防护措施到位共同保障检验质量与人员安全。标本标识要素患者信息姓名、性别、年龄或出生日期、病历号标本信息标本类型、采集时间与部位、检测项目安全提示必要的生物安全提示01采样人员须经培训，配备与风险匹配的防护用品02高风险样本采用多层包装系统，按感染性物质运输规定执行03疑似高致病性病原微生物样本，应由具备资质的机构按规定采集与运输质量控制与改进质控节点前移至采样检验前质控与持续改进06检验前质量控制要点分析前质量决定后续检验结果把好采集前核对与标本验收两道关口，从源头锁定检验质量核采集前核对三源一致核对患者腕带、口述姓名及出生日期、病案号双人复读昏迷患者由两名护士双人复读确认可追溯核对信息记录于信息系统，确保可追溯验标本验收信息核对核对标签信息、检查标本量是否达标无菌密封检查容器是否无菌、密封、无污染立即重采不合格标本应立即通知临床重采信息化质控与多部门协作质控需要临床、护理、运送、检验多方协同以信息化手段自动捕获关键数据、实时预警异常，并以误差溯源机制快速定位责任环节，推动多部门协同质控闭环。信息化手段自动捕获采样时间、运送条件等关键数据，实现全过程留痕与监控。异常自动预警对超时、超温等异常自动预警，及时干预风险环节。误差溯源机制建立误差溯源机制，快速定位责任环节，持续改进质量。职责分工临床医师判断采样指征护理人员规范操作采集运送人员控制运送时效检验人员执行验收标准持续改进与标准落地质量改进靠

培训、执行、监测、反馈

闭环标本采集质量改进，以