药物鉴别试验教案紫外红外色谱

药学理论教学药物鉴别试验紫外光谱·红外光谱·色谱法汇报时间：2026课程导览四大教学模块·建立方法体系框架01光谱

鉴别紫外与红外的结构识别02色谱

鉴别薄层与柱色谱的分离比对03化学

鉴别官能团反应确证身份04药典

趋势从显色走向联用技术光谱鉴别结构决定光谱，光谱反推结构01药物鉴别试验紫外光谱基于电子跃迁识别结构原理：电子跃迁分子中电子从低能级跃迁到高能级时，吸收特定波长的光，波长范围为

100–400nm；分子对不同波长的吸收具有选择性，由此形成吸收曲线。波长分区近紫外区200–400nm常用的光谱检测区间远紫外区10–200nm处于常规检测之外两个核心参数λmax定性依据由分子结构决定：含共轭体系的化合物（芳环、共轭双键）在紫外区呈现特征吸收。吸光度A定量依据遵循朗伯-比尔定律，与样品浓度成正比，为定量分析提供依据。同一基团电子跃迁类型不同，吸收峰位置随之改变——这是紫外光谱用于结构推断的化学基础紫外光谱·电子跃迁·朗伯-比尔定律04/16药物鉴别试验紫外光谱灵敏便捷应用于筛查STEP01吸收指纹每种化合物都有特定的紫外吸收曲线，混合物中也能凭特征峰识别目标成分。STEP02比对流程先用标准品建立标准吸收曲线，再测待测药品光谱——吸光度值与波长位置匹配，即可初步判断为同种化合物。STEP03核心优势灵敏度高，可检测极低浓度目标物，适合微量或稀释样品；操作简便快速，广泛用于大规模初步筛查。STEP04延伸应用比较不同酸碱性与温度条件下的光谱差异，可进一步验证药物身份与稳定性；同时用于纯度判定、杂质检测与合成过程监控。紫外光谱·红外光谱·色谱法05/16红外光谱鉴别红外特征峰锁定官能团红外光谱以波数（cm⁻¹）为横坐标、吸光度为纵坐标，吸收峰对应分子中特定化学键或基团的振动。同一基团的振动频率总落在固定区域，查对峰位即可锁定官能团。官能团区与指纹区官能团区4000–1300cm⁻¹指纹区1300–400cm⁻¹1羟基νO-H游离态

3640–3610cm⁻¹多聚体3500–3200cm⁻¹2羰基νC=O酮约

1715cm⁻¹醛约1725cm⁻¹，羧酸1740–1650cm⁻¹3碳碳双键νC=C约1650cm⁻¹4碳氮三键νC≡N2260–2215cm⁻¹5C-O伸缩振动1300–1000cm⁻¹6苯环C-H面外变形910–665cm⁻¹，可判断取代类型红外图谱犹如分子的身份证明，比对特征峰即可完成药物结构确证。红外光谱·官能团区4000–1300cm⁻¹·指纹区1300–400cm⁻¹06/16色谱鉴别分离是鉴别的第一步02薄层色谱法薄层色谱以吸附差异实现分离分离本质吸附色谱——组分对吸附剂吸附力不同，展开剂流经时反复吸附与解吸附：吸附力弱者快、强者慢，最终形成分离斑点。四步操作01制板1

份固定相+3

份水研磨调匀，涂布

0.2–0.3mm，110℃

烘干

30

分钟02点样基线距底边

2.0cm，点样直径

2–4mm，点间距离

1.5–2.0cm，不可损伤薄层表面03展开一般上行

8–15cm，展开剂不得没过原点04检出与对照物比对，用于鉴别、杂质检查或含量测定整个过程简便、成本低，适合药物快速定性鉴别薄层色谱法·分离原理与操作流程08/16薄层色谱鉴别Rf值是薄层鉴别的核心指标判定逻辑同一药物在相同条件下薄层色谱行为相同。供试品与对照品同板点样、展开、显色后，主斑点位置和颜色一致即判为同一药物。Rf比移值斑点位置由比移值定量描述。Rf值差异越大，分离度越好，是TLC定性鉴别的核心指标。葡萄糖酸钙实例1供试品与对照品各

5μL

点于同一硅胶G板2展开剂：乙醇-水-浓氨溶液-乙酸乙酯（50:30:10:10）3展开晾干后

110℃

加热，喷钼酸铵-硫酸铈试液显色4要求主斑点位置和颜色相同可见光下有颜色日光检视有荧光365nm

紫外灯观察无色硅胶GF254板在

254nm

下借荧光猝灭呈现暗斑薄层色谱法·Rf值·葡萄糖酸钙鉴别实例09/16色谱分析法气相与液相色谱各有适用边界GC

气相色谱惰性气体为流动相，要求样品易挥发、热稳定适用分子量<1000、沸点<500℃，覆盖有机物

15%–20%性能柱长数米至数十米，灵敏度可达

10⁻⁹–10⁻¹³g检测器氢火焰离子化、热导、电子捕获LC

液相色谱液体为流动相，样品无需气化适用高沸点、难挥发、热不稳定、分子量1000–2000覆盖分子量>400的有机物中

75%–80%

可用HPLC分析检测器柱长几十至几百毫米；紫外、荧光、示差折光两者基于分配系数差异分离，相辅相成，共同覆盖药物分析主要需求。气相色谱（GC）·液相色谱（LC/HPLC）·选型对比10/16化学鉴别官能团是药物的化学指纹03药物鉴别试验·化学法官能团反应以颜色与相变定性判据一反应前后须有

颜色变化判据二或

相的变化——气体放出、沉淀生成或溶解、分层状态改变烃类烯烃KMnO₄

氧化使紫色褪去；Br₂/CCl₄

亲电加成使红棕色褪去末端炔烃银氨溶液生成白色炔银沉淀；铜氨溶液生成棕红色炔铜沉淀醛酮类Schiff试剂醛显紫红色，加硫酸后不消失者为甲醛NaHSO₃醛和脂肪族甲基酮生成白色晶体银镜反应检出还原性醛醇与相关官能团Lucas试剂（ZnCl₂-盐酸）反应速度

叔醇＞仲醇＞伯醇羟肟酸铁试验酰卤、酯、酰胺显红至紫色高碘酸试验专一检出邻二醇，生成白色

AgIO₃

沉淀这些反应构成药物化学定性鉴别的基础工具箱官能团鉴别·颜色变化与相变化定性反应12/16药物鉴别试验高频药物鉴别反应直击考点芳酸类丙磺舒直接与三氯化铁显色；阿司匹林须先水解生成水杨酸，再与Fe³⁺配位显色。巴比妥类酰亚胺结构遇银盐生成白色沉淀，遇铜盐显紫色；硫喷妥钠含硫代羰基，铜盐反应呈绿色。生物碱类吗啡与甲醛硫酸呈紫堇色，与铁氰化钾呈普鲁士蓝色。胺类与磺胺类题眼

是芳香伯胺：普鲁卡因、磺胺甲噁唑、磺胺嘧啶可直接重氮化，含量测定用亚硝酸钠滴定法；对乙酰氨基酚须先水解释放对氨基酚才能重氮化。杂环类异烟肼与氨制硝酸银生成银镜；硝苯地平与氢氧化钠特征反应；氯丙嗪被硝酸氧化呈色；地西泮遇硫酸在紫外下显黄绿色荧光。高频鉴别反应·官能团与试剂的对应关系13/16药典趋势从显色反应走向光谱色谱联用042025年版药典·典型品种修订药典推动鉴别方法走向绿色专属性核心转向减少有毒有害试剂，提升方法专属性典型修订山梨酸钾删双键与紫外鉴别新增

液相鉴别胆固醇删化学与薄层鉴别新增

气相和红外鉴别聚山梨酯系列删化学鉴别新增

气相和红外鉴别羟苯乙酯钠/羟苯丙酯钠删化学鉴别新增

红外鉴别石蜡删硫化氢排放鉴别项新增

红外鉴别配套推进转化

ICHQ系列指导原则修订

9101分析方法验证指导原则引入分析