2024病理技术中级考试真题

2024病理技术中级考试真题第一单元基础知识选择题（每道题下面有A、B、C、D、E五个备选答案，请从中选择一个最佳答案，共20题）1.常规10%中性福尔马林固定液中，甲醛的实际质量体积浓度为A.1%B.4%C.10%D.20%E.40%答案：B解析：市售甲醛原液为甲醛体积分数37%~40%的水溶液，通常按40%计算。10%中性福尔马林固定液由40%甲醛原液与pH7.2~7.4的磷酸盐缓冲液按1:9比例混合配制，因此甲醛的终浓度为4%，是病理组织常规固定的首选固定液，对细胞核、细胞质结构保存效果好，中性环境可减少抗原损失，适用于HE染色、免疫组化及分子病理检测。2.病理常规石蜡切片的标准厚度为A.1~2μmB.2~3μmC.4~5μmD.8~10μmE.15~20μm答案：C解析：常规石蜡切片厚度为4~5μm，过薄会导致细胞结构显示不清，过厚会造成细胞重叠，影响病理诊断准确性。特殊标本需调整切片厚度：肾穿刺活检标本切片厚度为2μm，便于观察肾小球基底膜；淋巴结等细胞密集组织可切至3μm，减少细胞重叠；脂肪组织可适当加厚至6~8μm，避免切片碎裂。3.苏木精-伊红（HE）染色中，苏木精染液的媒染剂是A.无水乙醇B.硫酸铝钾C.碘酸钠D.甘油E.冰醋酸答案：B解析：苏木精本身无染色能力，需与媒染剂结合形成色素-媒染剂复合物后，才能与组织中的核酸、蛋白质等成分结合显色。常用的媒染剂为硫酸铝钾（明矾），可与苏木精氧化生成的苏木红结合，使细胞核染成蓝紫色。碘酸钠为氧化剂，加速苏木精氧化为苏木红；甘油可延缓染液氧化变质，延长使用寿命；冰醋酸用于调节染液pH值，增强染色选择性。4.免疫组织化学染色中，高压蒸汽抗原热修复的常用参数为A.100℃，5minB.110℃，10minC.121℃，10~15minD.132℃，5minE.121℃，30min答案：C解析：抗原热修复的原理是通过高温打开甲醛固定导致的蛋白交联，暴露被遮蔽的抗原决定簇。高压蒸汽修复法是常用的高效修复方法，参数为121℃、101kPa，维持10~15min，修复液常用pH6.0的枸橼酸盐缓冲液，适用于绝大多数核抗原、胞质抗原的修复。修复时间过短会导致抗原暴露不充分，阳性表达减弱；时间过长会导致组织脱落、抗原破坏，非特异性染色增强。5.术中快速冷冻病理诊断的常规切片厚度为A.2~3μmB.4~5μmC.5~8μmD.10~12μmE.15~20μm答案：C解析：冷冻切片依靠低温使组织内水分结冰、组织变硬后进行切片，由于冷冻组织硬度低于石蜡包埋组织，常规切片厚度略厚于石蜡切片，为5~8μm。切片过薄易产生断裂、褶皱，过厚会导致细胞重叠，均会影响诊断准确性。特殊组织如脑组织可适当调整厚度至8~10μm。6.病理科感染性医疗废物的专用包装物颜色为A.黑色B.蓝色C.黄色D.红色E.绿色答案：C解析：根据《医疗废物管理条例》《医疗卫生机构医疗废物管理办法》规定，感染性医疗废物使用黄色专用包装袋或容器，表面需印刷感染性废物警示标识。病理性废物（如手术切除的组织、病理标本剩余物等）属于感染性废物范畴，需按要求封装后交由有资质的医疗废物处置机构集中处理。黑色包装袋用于生活垃圾，红色用于放射性废物，蓝色用于可回收医疗用品。7.显示组织中网状纤维的经典染色方法是A.过碘酸-希夫（PAS）染色B.Gomori银染色法C.苏丹Ⅲ染色D.普鲁士蓝染色E.抗酸染色答案：B解析：网状纤维的主要成分为Ⅲ型胶原蛋白，表面包被有糖蛋白，可与银氨溶液结合形成银复合物，经还原剂还原后显示为黑色，即具有嗜银性。Gomori银染色法是显示网状纤维的经典方法，主要用于观察组织网状支架的结构完整性，辅助诊断肿瘤的组织来源、浸润范围及转移情况。PAS染色显示糖原、中性黏多糖；苏丹Ⅲ染色显示中性脂肪；普鲁士蓝染色显示含铁血黄素；抗酸染色显示抗酸杆菌（如结核分枝杆菌）。8.核酸分子杂交技术中，双链DNA变性的常用温度为A.55℃B.65℃C.75℃D.95℃E.105℃答案：D解析：DNA变性是指双链DNA在高温、酸碱或变性剂作用下，碱基对之间的氢键断裂，双链解开为单链的过程。实验室常用的热变性温度为95℃，维持5~10min可使绝大多数双链DNA完全变性。变性温度与DNA中G+C碱基含量相关，G+C含量越高，变性温度越高，通常比解链温度（Tm）高5~10℃。9.免疫荧光直接法的核心特点是A.用荧光素标记特异性一抗B.用荧光素标记二抗C.一种标记抗体可检测多种抗原D.敏感性高于间接法E.非特异性染色多见答案：A解析：免疫荧光直接法是将荧光素直接标记在特异性一抗上，抗体与组织中的靶抗原结合后，可直接在荧光显微镜下观察荧光信号。其优点是操作简便、特异性高、非特异性染色少；缺点是敏感性低于间接法，一种荧光标记抗体只能检测一种抗原，灵活性差。间接法是用荧光素标记二抗，通过一抗的桥接作用放大信号，敏感性更高，且一种二抗可匹配多种一抗，应用更广泛。10.石蜡包埋组织常规脱水的梯度乙醇顺序为A.50%→60%→70%→80%→90%→无水乙醇B.70%→80%→90%→95%→无水乙醇C.30%→50%→70%→90%→无水乙醇D.无水乙醇→95%→90%→80%→70%E.70%→85%→95%→无水乙醇答案：B解析：组织脱水是用乙醇逐步置换组织中的水分，为后续透明、浸蜡步骤做准备。常规脱水采用梯度乙醇由低浓度到高浓度的顺序，避免组织骤然收缩导致形态破坏，常用顺序为70%乙醇→80%乙醇→90%乙醇→95%乙醇→无水乙醇，其中无水乙醇需更换2~3次，确保水分完全脱除。对于质地脆弱的组织（如脑组织、胚胎组织），可从50%或60%乙醇开始脱水，减少组织收缩损伤。11.根据《病理科建设与管理指南（试行）》，常规病理蜡块、切片的最低保存期限为A.5年B.10年C.15年D.20年E.30年答案：E解析：《病理科建设与管理指南（试行）》明确规定，常规病理蜡块、切片的保存期限不少于30年，细胞学涂片保存期限不少于15年，病理检查报告单及相关申请资料保存期限不少于15年。涉及医疗纠纷、疑难病例的蜡块、切片需延长保存期限或永久保存。12.标准聚合酶链反应（PCR）的基本反应步骤不包括A.变性B.退火C.延伸D.扩增产物分析E.逆转录答案：E解析：标准PCR的基本反应为三步循环：①变性：95℃高温下使双链模板DNA解开为单链；②退火（复性）：温度降至引物的Tm值附近（通常55~60℃），引物与单链DNA模板的互补序列结合；③延伸：72℃下TaqDNA聚合酶催化脱氧核苷酸沿5’→3’方向合成新的DNA链。三步为一个循环，重复25~40个循环实现DNA的指数级扩增。逆转录是逆转录PCR（RT-PCR）的特有步骤，用于将RNA逆转录为cDNA后再进行扩增，不属于标准PCR的基本步骤。13.EDTA脱钙液的脱钙作用机制是A.强酸溶解钙盐B.螯合组织中的钙离子C.酶解骨基质蛋白D.软化纤维结缔组织E.溶解骨矿物质结晶答案：B解析：EDTA（乙二胺四乙酸）是一种氨基多羧酸类螯合剂，可与钙离子形成稳定的可溶性螯合物，从而使骨、牙齿等钙化组织中的钙盐逐步溶解，达到脱钙目的。EDTA脱钙的优点是对组织形态、抗原性及核酸保存效果好，适用于免疫组化、分子病理检测的骨组织标本；缺点是脱钙速度慢，脱钙时间通常为数天至数周，需定期更换脱钙液。酸性脱钙液（如硝酸、盐酸）的作用机制是酸溶解钙盐，脱钙速度快，但对组织抗原和核酸破坏较大。14.病理科常规HE染色中，分化液的主要成分是A.盐酸乙醇B.醋酸乙醇C.甲醛乙醇D.苏木精乙醇E.伊红乙醇答案：A解析：HE染色的分化步骤是用酸性分化液去除组织中多余的苏木精结合物，同时使细胞质的背景染色脱除，让核染色更清晰。常用的分化液为1%盐酸乙醇，即1ml浓盐酸加入99ml70%乙醇中配制而成。分化时间需根据染液新旧、组织类型调整，通常数秒至数十秒，以细胞核染色清晰、细胞质无色为准。15.免疫组化染色中，内源性过氧化物酶封闭常用的试剂是A.3%过氧化氢溶液B.10%福尔马林溶液C.5%牛血清白蛋白D.0.1%TritonX-100E.5%正常山羊血清答案：A解析：内源性过氧化物酶广泛存在于红细胞、粒细胞、巨噬细胞及部分组织细胞中，会与酶标抗体的辣根过氧化物酶（HRP）反应，导致非特异性染色。3%过氧化氢溶液可灭活内源性过氧化物酶的活性，是常用的封闭试剂，封闭时间通常为10~15min。5%牛血清白蛋白、正常山羊血清用于封闭非特异性抗体结合位点；0.1%TritonX-100用于增加细胞膜通透性，促进抗体进入细胞内。16.冷冻切片时，组织块最适宜的冷冻温度为A.-5~0℃B.-10~-5℃C.-20~-15℃D.-40~-30℃E.-80℃以下答案：C解析：冷冻切片时，组织块的温度需控制在适宜范围，温度过高会导致组织太软，无法切出完整薄片；温度过低会导致组织太脆，切片易碎裂。常规组织最适宜的冷冻温度为-20~-15℃，脂肪组织温度需更低，通常为-25~-20℃，脑组织可适当调高至-18~-15℃。17.显示糖原的首选特殊染色方法是A.Gomori银染色B.PAS染色C.苏丹Ⅲ染色D.阿尔辛蓝染色E.普鲁士蓝染色答案：B解析：过碘酸-希夫（PAS）染色的原理是过碘酸可氧化糖类物质的1,2-乙二醇基，生成醛基，醛基与希夫试剂反应生成紫红色产物。糖原是PAS染色的阳性反应物质之一，且经淀粉酶消化后PAS反应转为阴性，可用于明确糖原的存在。PAS染色还可显示中性黏多糖、糖蛋白、真菌细胞壁等成分。18.石蜡组织脱水、透明、浸蜡过程中，透明剂的作用是A.置换组织中的水分B.置换组织中的乙醇C.溶解组织中的脂肪D.使组织变硬E.固定组织形态答案：B解析：透明剂的作用是置换组织中的乙醇，因为乙醇与石蜡不能互溶，需用既能与乙醇互溶、又能溶解石蜡的透明剂作为中介，使石蜡能够顺利渗入组织内部。常用的透明剂为二甲苯，透明时间根据组织类型、大小调整，通常为30~60min。透明后的组织呈半透明状，因此称为透明步骤。19.细胞学涂片常用的固定方法是A.浸入法B.滴加法C.喷雾法D.熏蒸法E.微波法答案：A解析：细胞学涂片常用的固定方法为浸入法，即将涂片直接放入固定液中固定，固定液常用95%乙醇或醋酸-乙醇固定液，固定时间为15~30min。浸入法固定速度快，细胞固定充分，形态保存好。喷雾法适用于大规模筛查的细胞学涂片，操作简便，但固定效果略差于浸入法。20.病理技术室内质控的核心目的是A.提高技术人员操作水平B.保证检测结果的准确性和重复性C.减少试剂成本D.应对上级检查E.缩短检测周期答案：B解析：室内质控是由实验室工作人员采用一系列方法，连续评价本实验室工作的可靠性，确定报告是否可发出的过程。病理技术室内质控的核心目的是保证病理检测结果的准确性和重复性，及时发现检测过程中的误差，采取纠正措施，确保病理诊断的可靠性。B1型题（以下提供若干组考题，每组考题共用在考题前列出的A、B、C、D、E五个备选答案，请从中选择一个与问题关系最密切的答案，某个备选答案可能被选择一次、多次或不被选择，共5组10题）（1~2题共用备选答案）A.甲醛B.乙醇C.丙酮D.戊二醛E.苦味酸1.电镜标本固定的首选固定液是2.免疫组化冷冻切片常用的固定液是答案：1.D2.C解析：1.戊二醛对细胞超微结构（如细胞膜、细胞器、细胞核膜等）的保存效果远优于甲醛，是电镜标本固定的首选固定液，常用浓度为2.5%，常与锇酸联合进行双重固定，进一步提升超微结构的保存质量。2.丙酮固定速度快，对细胞内抗原的保存效果好，且能增加细胞膜通透性，是免疫组化、免疫荧光冷冻切片及细胞涂片常用的固定液，固定时间通常为5~10min，避免长时间固定导致抗原丢失。（3~4题共用备选答案）A.细胞核染成蓝色B.细胞质染成粉红色C.中性脂肪染成橘红色D.网状纤维染成黑色E.含铁血黄素染成蓝色3.苏丹Ⅲ染色的阳性结果是4.普鲁士蓝染色的阳性结果是答案：3.C4.E解析：3.苏丹Ⅲ是脂溶性偶氮染料，可溶于中性脂肪、类固醇等脂质内，使组织中的脂滴染成橘红色，常用于证明脂肪变性、脂肪肉瘤、淋巴管瘤等含脂质的病变，染色需使用冷冻切片，避免石蜡切片过程中的有机溶剂溶解脂肪。4.普鲁士蓝染色又称亚铁氰化钾法，含铁血黄素中的三价铁离子在酸性环境下与亚铁氰化钾反应，生成蓝色的亚铁氰化铁沉淀，用于检测组织内的含铁血黄素，辅助诊断陈旧性出血、血色病、含铁血黄素沉积症等疾病。（5~6题共用备选答案）A.2μmB.4μmC.8μmD.20μmE.50μm5.肾穿刺活检标本的常规石蜡切片厚度为6.脂肪组织的常规石蜡切片厚度为答案：5.A6.C解析：5.肾穿刺活检标本需要清晰观察肾小球基底膜、系膜区等细微结构，常规切片厚度为2μm，过厚会导致肾小球细胞重叠，影响肾炎分型、肾病诊断的准确性。6.脂肪组织由大量脂肪细胞构成，细胞内充满脂滴，石蜡切片过程中脂滴被溶解，细胞结构较脆弱，切片过薄易产生碎裂、空洞，因此常规厚度调整为6~8μm，保证切片完整性。（7~8题共用备选答案）A.二甲苯B.无水乙醇C.甲醛D.苏木精E.中性树胶7.石蜡切片脱蜡常用的试剂是8.病理切片封片常用的封固剂是答案：7.A8.E解析：7.二甲苯是常用的有机溶剂，可溶解石蜡，用于石蜡切片的脱蜡步骤，脱蜡时间根据室温调整，通常为5~10min，脱蜡彻底是保证染色质量的前提。8.中性树胶是病理切片常用的封固剂，折射率与玻璃接近，封片后可使切片透明，便于显微镜观察，且中性树胶性质稳定，可长期保存切片，不褪色、不变质。（9~10题共用备选答案）A.抗原修复B.内源性过氧化物酶封闭C.非特异性位点封闭D.一抗孵育E.显色反应9.免疫组化染色中，3%过氧化氢溶液的作用是10.免疫组化染色中，正常山羊血清的作用是答案：9.B10.C解析：9.3%过氧化氢溶液可灭活组织中内源性过氧化物酶的活性，避免其与辣根过氧化物酶标记的抗体发生非特异性反应，减少背景染色。10.正常山羊血清可封闭组织中Fc受体等非特异性抗体结合位点，减少一抗的非特异性结合，降低背景染色，提高染色的信噪比。第二单元相关专业知识A2型题（每道题是以一个小病例或场景出现的，其下面都有A、B、C、D、E五个备选答案，请从中选择一个最佳答案，共10题）1.某病理科接收1例胃镜活检标本，大小约0.2cm×0.2cm×0.1cm，脱水前最适宜的预处理方式是A.直接放入脱水盒B.用擦镜纸包裹后放入脱水盒C.用琼脂预包埋后放入脱水盒D.用明胶包埋后放入脱水盒E.碾碎后放入脱水盒答案：B解析：微小活检标本（如胃镜、支气管镜、鼻咽镜活检标本）体积小，脱水过程中易丢失或被水流冲散，需用擦镜纸或专用滤纸包裹后放入脱水盒，包埋时再将组织取出，保证标本完整。琼脂预包埋多用于更微小的标本（如细胞块、穿刺标本碎屑），操作相对复杂，不是常规微小活检标本的首选预处理方式。2.技术人员进行HE染色时，发现所有切片均出现片状淡染区，核质均着色不良，最可能的原因是A.苏木精染液过期B.脱蜡不彻底C.分化时间过长D.伊红染液浓度过低E.脱水不彻底答案：B解析：脱蜡不彻底时，石蜡残留的区域染液无法与组织结合，会出现片状的淡染区，核质均不着色或着色浅。苏木精染液过期会导致细胞核整体染色淡，不会出现片状分布；分化时间过长会导致核染色淡，但细胞质可正常红染，且为整体表现，无片状淡染；伊红浓度过低仅会导致细胞质染色淡，不影响核染色；脱水不彻底会导致切片透明差，整体发灰，无片状淡染区。3.某患者因股骨下段肿物行手术切除，标本为带皮质骨的肿物，大小约5cm×4cm×3cm，需进行常规病理检查，脱钙前最适宜的处理是A.直接放入脱钙液B.固定48h后锯成0.5cm厚的骨片再脱钙C.先脱钙再固定D.用生理盐水浸泡后脱钙E.煮沸后脱钙答案：B解析：骨组织脱钙前需充分固定，通常固定48h以上，使组织形态稳定，避免脱钙过程中组织自溶。较大的骨组织需先锯成厚度不超过0.5cm的骨片，增大脱钙液与组织的接触面积，加快脱钙速度，保证脱钙均匀。脱钙前需充分固定，不能先脱钙后固定，否则会导致组织形态破坏。4.某病理科开展免疫组化室内质控，使用已知阳性的扁桃体组织作为质控片，本次实验质控片的CD20染色仅部分B细胞阳性，其余区域无信号，最不可能的原因是A.一抗孵育时试剂未覆盖组织B.抗原修复不充分C.一抗浓度过低D.显色时间不足E.封闭时间过长答案：E解析：封闭液的作用是封闭非特异性结合位点，适当延长封闭时间可减少背景染色，不会导致阳性信号减弱或缺失。一抗未覆盖组织、抗原修复不充分、一抗浓度过低、显色时间不足均会导致阳性信号减弱或部分区域无信号。5.技术人员在进行冷冻切片时，发现组织切片出现大量褶皱，最可能的原因是A.组织温度过低B.组织温度过高C.切片刀不锋利D.展片温度过低E.防卷板位置不当答案：E解析：防卷板是冷冻切片机上用于引导切片展开的部件，位置过高或过低都会导致切片无法顺利展开，出现褶皱。组织温度过低会导致切片碎裂、呈碎屑状；组织温度过高会导致切片黏附、不成形；切片刀不锋利会导致切片厚薄不均、有缺口；展片温度过低会导致展片困难，但不是切片褶皱的主要原因。6.某实验室进行PCR检测，结果出现非特异性扩增条带，最可能的原因是A.引物特异性差B.模板量过高C.退火温度过高D.循环次数过少E.dNTP浓度过低答案：A解析：引物特异性差是导致PCR非特异性扩增的最常见原因，引物与模板的非特异性位点结合，会扩增出非目的片段。模板量过高可能会增加非特异性扩增的概率，但不是最主要原因；退火温度过高会降低引物与模板的结合效率，减少非特异性扩增；循环次数过少会导致扩增产物量不足；dNTP浓度过低会导致扩增效率低，产物量少。7.某细胞学涂片进行巴氏染色时，发现角化细胞胞质染成橘黄色，中层细胞胞质染成淡蓝色，该染色结果符合巴氏染色的哪一级分类A.Ⅰ级B.Ⅱ级C.Ⅲ级D.Ⅳ级E.Ⅴ级答案：A解析：巴氏染色的特点是多色性，分化成熟的鳞状上皮角化细胞胞质染成粉红色或橘黄