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文档简介

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（一)筛选菌株原理

人为提供有助于目的菌株的条件（涉及营养、温度、pH等)，同时克制或制止其它微生物生长。

在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时克制或制止其它种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。提示:研究思路筛选菌株的原理:自然界中寻找办法:根据目的菌株对生存环境的规定，到对应环境中去寻找。实验室筛选办法:人为提供有助于目的菌株生长的条件，同时克制或制止其它微生物生长。知识统计1（二)统计菌落数目原理

运用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数。

统计菌落数目的理论根据是:当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一种菌落，来源于样品稀释液中的一种活菌。

恰当的稀释度是成功地统计菌落数目的核心。为了确保成果精确，普通将几个稀释度下的菌液都涂布在平板上，培养后再选择菌落数在30～300的平板进行计数。测定微生物数量的常用方法：知识统计2活菌计数法（接种办法稀释涂布平板法)显微镜直接计数法（统计菌落数，30-300)（三)设置对照

1、对照实验是指除了被测试的条件外，其它条件都相似的实验。满足该条件的称为对照组，未满足该条件的称为实验组。2.设立对照的目的：排除实验组中非测试因素对实验成果的影响，提高实验成果的可信度。

设立对照的思路介绍判断培养基中与否有杂菌污染:将未接种的培养基同时进行培养。判断选择培养基与否含有筛选作用:完全培养基（营养成分齐全或尿素培养基被混入其它含氮物质)接种后培养观察菌落（种类)数目。

一、实验设计

阅读教材23～25页"实验设计”和"操作提示”等两个内容，请根据教材提供的三个资料、样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图及"操作提示”的有关问题，自行设计一种《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》这样的一种实验。配制土壤溶液系列稀释涂布平板与培养菌落计数实验设计1.实验名称某样品土壤中细菌的分离与计数2.实验目的（略)3.材料用品（略)4.操作环节（1)土壤取样（2)样品稀释涂布

（3)微生物的培养与观察

（4)细菌的计数

二、成果分析与评价1.培养物中与否有杂菌污染以及选择培养基与否筛选出菌落

对照的培养皿在培养过程中没有菌落生长,阐明培养基没有被杂菌污染。牛肉膏培养基的菌落数目明显不不大于选择培养基的数目,阐明选择培养基已筛选出某些菌落。2.样品的稀释操作与否成功

如果得到了2个或2个以上菌落数目在30～300的平板,则阐明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数。3.重复组的成果与否一致

如果各位同窗选用的是同一种土样,统计的成果应当靠近。如果成果相差太远,则需要从各项操作过程中去分析、寻找可能的因素。三、课题延伸

能分解尿素的细菌的鉴定鉴定的原理:

细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，会使培养基的pH升高。鉴定办法:

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红批示剂，运用此培养基进行细菌培养，观察培养基的颜色变化。知识统计3分解尿素的细菌鉴定：鉴定的原理：鉴定方法：细菌合成的脲酶

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