左归丸检验规范

左归丸检验规范1范围本规范规定了左归丸的质量检验要求、检验方法、检验规则及包装、标签、贮藏等方面的技术要求。本规范适用于左归丸的原料检验、中间产品检验、成品检验及监督抽检等全流程质量控制环节，生产企业、药品检验机构及相关监管部门开展左归丸质量管控工作时可参照本规范执行。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。《中华人民共和国药典》2025年版一部《药品生产质量管理规范》（2010年修订）《中药成方制剂质量标准制定技术指导原则》《中药制剂微生物限度检查法标准操作规程》《药品包装材料与容器管理办法》3处方与制法3.1处方熟地黄240g、菟丝子120g、牛膝90g、龟板胶120g、鹿角胶120g、山药120g、山茱萸120g、枸杞子120g。以上八味，粉碎成细粉，过筛，混匀。每100g粉末加炼蜜30～40g与适量的水泛丸，干燥，制成水蜜丸；或加炼蜜80～90g制成小蜜丸或大蜜丸，即得。3.2制法要求原料药材应符合《中华人民共和国药典》2025年版相应品种项下的规定，其中熟地黄应符合酒炖或酒蒸品的质量要求，山茱萸应去核使用，鹿角胶、龟板胶应检查烊化速度及不溶物含量。粉碎工序应采用低温粉碎技术，控制粉碎过程温度不超过40℃，避免挥发性成分及热敏性有效成分损失。泛丸或制丸过程应控制环境相对湿度在45%～65%，干燥温度控制在60℃以下，水分含量不得超过15.0%。4性状4.1水蜜丸本品为棕黑色的水蜜丸，气微腥，味甜、微酸。表面应光滑圆整，大小均匀，无粘连、裂缝、凹陷及色斑，手捻有适当硬度，受潮后不得出现霉变、虫蛀及结块现象。4.2小蜜丸本品为棕褐色至黑褐色的小蜜丸，气微香，味甜、微涩。质地柔软，切开后断面色泽均匀，无异物、硬芯及空心，每10丸重量应在1.2g～1.5g范围内，重量差异限度不得超过±5%。4.3大蜜丸本品为黑褐色的大蜜丸，气微香，味甜、微酸、涩。每丸重9g，表面应细腻滋润，无皱皮、麻点，蜡皮包装应完整无破损，切开后断面无可见异物，无反砂、发黏现象。5鉴别5.1显微鉴别取本品，置显微镜下观察：薄壁组织灰棕色至黑棕色，细胞多皱缩，内含棕色核状物（熟地黄）。草酸钙针晶束存在于黏液细胞中，长80～240μm，针晶直径2～8μm（山药）。果皮表皮细胞橙黄色，表面观类多角形，垂周壁连珠状增厚（山茱萸）。种皮石细胞淡黄色，壁波状弯曲，胞腔含棕色物（枸杞子）。种皮栅状细胞2列，内列较外列长，有光辉带（菟丝子）。骨组织碎片淡灰黄色，有不规则的纹理及孔隙，骨陷窝呈类圆形或梭形（鹿角胶）。不规则块片灰黄色，表面有微细纹理或孔隙（龟板胶）。草酸钙砂晶存在于薄壁细胞中，有时含晶细胞连接成行（牛膝）。5.2薄层色谱鉴别取本品水蜜丸5g，研细；或取小蜜丸、大蜜丸10g，剪碎，加硅藻土5g，研匀，加乙醚50ml，加热回流1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯-甲酸（15:5:1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。另取山茱萸对照药材1g，加乙醚30ml，加热回流1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液与对照药材溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（12:4:0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。6检查6.1水分照水分测定法（通则0832）测定：水蜜丸不得过12.0%，小蜜丸和大蜜丸不得过15.0%。测定时应至少取3份平行样品，每份样品取样量约2g，粉碎后采用烘干法测定，干燥温度为105℃，干燥时间至恒重，计算平均值作为测定结果。6.2重量差异按丸剂重量差异检查法（通则0108）检查，应符合下表规定：|类型|平均重量|重量差异限度||------------|----------------|--------------||水蜜丸|0.1g以下至0.1g|±10%||水蜜丸|0.1g以上至0.3g|±8%||水蜜丸|0.3g以上至1g|±7%||小蜜丸|1.5g以下|±6%||大蜜丸|9g|±5%|超出重量差异限度的不得多于2份，并不得有1份超出限度1倍。6.3溶散时限照崩解时限检查法（通则0921）检查，水蜜丸应在1小时内全部溶散，小蜜丸应在2小时内全部溶散，大蜜丸不检查溶散时限。以吊篮法测定时，水温控制在37℃±1℃，每间隔5分钟观察一次溶散情况，如有少量细小颗粒未通过筛网但已软化无硬芯者，可判为符合规定。6.4微生物限度照非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法（通则1107）和控制菌检查法（通则1106）及非无菌药品微生物限度标准（通则1108）检查，应符合以下规定：需氧菌总数每1g不得过10⁴cfu，霉菌和酵母菌总数每1g不得过10²cfu，不得检出大肠埃希菌，耐胆盐革兰阴性菌每1g不得过10²cfu，沙门菌不得检出。6.5重金属及有害元素照铅、镉、砷、汞、铜测定法（通则2321）测定，本品含铅不得过5mg/kg，镉不得过0.3mg/kg，砷不得过2mg/kg，汞不得过0.2mg/kg，铜不得过20mg/kg。采用电感耦合等离子体质谱法测定时，样品前处理采用微波消解法，消解后赶酸至近干，用2%硝酸定容后测定，同时做空白试验及加样回收试验，回收率应在80%～120%范围内。6.6农药残留量照农药残留量测定法（通则2341）测定，本品含总六六六（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC之和）不得过0.2mg/kg，总滴滴涕（pp'-DDE、pp'-DDD、op'-DDT、pp'-DDT之和）不得过0.2mg/kg，五氯硝基苯不得过0.1mg/kg。如有其他禁用农药检出，应符合《中药中农药残留限量标准》的相关规定。7含量测定7.1马钱苷测定（山茱萸指标成分）照高效液相色谱法（通则0512）测定。色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（15:85）为流动相；检测波长为240nm。理论板数按马钱苷峰计算应不低于4000。对照品溶液的制备：取马钱苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品水蜜丸，研细，取约0.5g，精密称定；或取小蜜丸，剪碎，取约1g，精密称定，或取重量差异项下的大蜜丸，剪碎，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品含山茱萸以马钱苷（C₁₇H₂₆O₁₀）计，水蜜丸每1g不得少于0.8mg，小蜜丸每1g不得少于0.5mg，大蜜丸每丸不得少于4.5mg。7.2毛蕊花糖苷测定（熟地黄指标成分）照高效液相色谱法（通则0512）测定。色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%醋酸溶液（18:82）为流动相；检测波长为334nm。理论板数按毛蕊花糖苷峰计算应不低于5000。对照品溶液的制备：取毛蕊花糖苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品水蜜丸研细，取约2g，精密称定；或取小蜜丸约3g，精密称定，大蜜丸约3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品含熟地黄以毛蕊花糖苷（C₂₉H₃₆O₁₅）计，水蜜丸每1g不得少于0.15mg，小蜜丸每1g不得少于0.1mg，大蜜丸每丸不得少于0.9mg。7.3多糖含量测定采用苯酚-硫酸法测定总多糖含量。对照品溶液制备：精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品适量，加水制成每1ml含0.1mg的溶液。标准曲线制备：精密量取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml，分别置具塞试管中，加水至2.0ml，各精密加入5%苯酚溶液1ml，摇匀，迅速加入硫酸5ml，摇匀，置沸水浴中加热15分钟，取出，置冰浴中冷却5分钟，以相应试剂为空白，照紫外-可见分光光度法（通则0401），在490nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。供试品溶液制备：取本品细粉约0.5g，精密称定，加石油醚（60～90℃）50ml回流脱脂2次，每次1小时，滤过，药渣挥干溶剂，加水80ml，加热回流提取2次，每次1小时，合并滤液，浓缩至约20ml，加乙醇使含醇量达80%，静置24小时，滤过，沉淀用80%乙醇洗涤3次，加热水溶解并转移至100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密量取1ml，按标准曲线制备项下方法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中葡萄糖的含量，计算，即得。本品含总多糖以葡萄糖计，每1g不得少于20mg。8检验规则8.1批次划分同一批原料、同一生产班次、同一工艺条件下连续生产的产品为一个批次，不同批次产品应分别检验，批次号应包含生产日期、生产线编号等信息，便于追溯。8.2取样每批产品按万分之三的比例随机取样，取样量不得少于全项检验所需用量的3倍，其中1/3供检验用，1/3供复验用，1/3留样观察，留样保存期应不少于产品有效期后1年。取样时应记录产品批号、生产日期、取样日期、取样地点、取样量、取样人等信息，取样过程应避免污染及样品变质。8.3出厂检验每批产品出厂前应进行全项检验，检验项目包括性状、鉴别、水分、重量差异、溶散时限、微生物限度、马钱苷含量、毛蕊花糖苷含量，检验合格并出具检验报告书后方可出厂。如有一项不合格，应重新加倍取样进行复检，复检仍不合格的，判定为不合格产品，不得出厂。8.4型式检验每年至少进行一次型式检验，检验项目包括本规范规定的全部检验项目，当出现生产工艺重大变更、原料产地或供应商变更、产品质量出现异常波动、国家药品监管部门提出型式检验要求等情况时，也应进行型式检验。型式检验不合格的，应暂停生产，排查原因并整改完成后方可恢复生产。8.5复验当检验结果存在争议时，可申请复验，复验应使用留样样品，由双方认可的第三方药品检验机构进行，复验结果为最终判定依据。若留样样品已变质或超过保存期，不再受理复验申请。9包装、标签、贮藏9.1包装内包装采用药用聚丙烯塑料瓶或药用铝塑复合膜，包装材料应符合国家药品包装材料标准，不得与药品发生相互作用，密封性应符合要求，经跌落试验、密封性试验合格后方可使用。大蜜丸可采用蜡壳或铝塑泡罩包装，每丸独立包装。外包装采用瓦楞纸箱，每箱重量不得超过25kg，箱内应放置产品合格证，标明产品名称、批号、生产日期、生产企业等信息。9.2标签产品标签应符合《药品说明书和标签管理规定》的要求，标明药品通用名称、成分、性状、功能主治、规格