2026年基因工程药品生产工知识题库(附答案)

一、单选题(只有一个正确答案)1.基因工程药品生产中，核心酶切工具通常是限制性核酸内A.大肠杆菌B.感染7.在CHO细胞(中国仓鼠卵巢细胞)中表达人胰岛素时，需要将人胰岛素基因连细胞)中高效表达。的目的是?10.检测基因工程药品中是否残留大肠杆菌内毒素(脂多糖)的方法是?入?A.金属螯合层析基团的柱子)吸附带负电的核酸，从而去除DNA。19.关于基因工程药品的“杂质”,下列哪项不属于工艺杂质?B.游离链霉素留);抗原性序列错误(如错误折叠导致的构象改变)属于质量问题，而非工艺杂A.水生产管理的?A.准确性原则22.细胞冻存时，DMSO(二甲基亚砜)的主要作用是?A.作为营养物质B.多聚赖氨酸29.基因工程药品生产中，为了防止基因污染，通常会对工作场所进行物理隔离，包括设置?解析：酵母菌(如毕赤酵母)系统表达真核蛋白具有较高的糖31.关于GMP(药品生产质量管理规范),其核心思想是?A.预防为主32.在基因工程药品生产中，HCP(宿主细胞蛋白)含量通常要求控制在多少以下?33.用于检测DNA连接酶活性的方法是?34.单克隆抗体药物属于?解析：单克隆抗体由免疫球蛋白构成，分子量较大(>50kDa),属于大分子生物解析：Q柱(Q代表Quternar解析：生产重组蛋白药品时，如果使用带有致病性抗原(如某38.冷冻干燥(冻干)技术的主要目的是?A.4C冷藏解析：加速稳定性试验通常在40C±2C和75%RH条件下进行，通过短时间内检解析：上样缓冲液中低浓度咪唑(通常10-50mM)的目的是竞争性抑制非特异性C.动物细胞C.清除率A.免疫B淋巴细胞B.骨髓瘤细胞C.吞噬细胞D.融合剂(如PEG)B.溶氧量C.内毒素(热原)或支原体检测A.100级B.10000级(万级)C.100000级(十万级)解析：基因工程药品(如注射剂)生产环境要求较高，一般生低于100000级(十万级),关键操作区域可达到万级或更高级别。物质是?A.还原剂C.粗分纯化(如沉淀、初步层析)解析：粗分纯化(如盐析、有机溶剂沉淀)成本低、通量大，C.湿热试验解析：稳定性研究旨在通过极端条件(高温、高湿、光照)模A.脱盐柱层析B.低pH病毒灭活处理解析：脱盐柱层析(如透析、凝胶过滤)主要改变离子强度和A.口服给药酶抑制),是基因工程药品特有的活性标定方法。C.涡轮桨解析：涡轮桨(如Rushton桨)具有强烈的径向流，剪切力适中，混合效率高，B.酵母菌(毕赤酵母或酿酒酵母)数是?解析：根据中国GMP标准，D级洁净区对应100000级(10万级)的空气洁净度A.设置防火墙B.物理灭活(如高温高压灭菌)C.设置密码62.基因工程药品原液(MasterCellBank,MCB)制备时，细胞库的冻存温度通常解析：细胞库冻存于液氮蒸汽相中(通常-150C°至-196C),以获得最佳的长期B.悬浮培养C.终止子解析：抗性标记基因(如氨苄青霉素抗性基因)使宿主细胞在含有该抗生素的培养稳定剂是?D.聚乙二醇通常不低于?解析：无菌药品的生产区洁净度要求极高，核心区域通常需达到100级(层流环境)。68.在基因工程药品的放行检验中，关于效价(或比活性)的检测，通常要求样品原因是?长密度(如细胞数、生物质)的标准方法。72.基因工程药品生产车间的HVAC系统(暖通空调),其主要作用不包括?解析：HVAC系统主要控制微环境参数(温湿度、洁净度、压差),车间内pH值解析：HEK293细胞(人胚胎肾细胞)常被用于干A.“该药品无副作用”B.“请空腹服用”体细胞的?A.节省用水C.质粒拷贝数测定A.真核细胞解析：许多重组蛋白(如抗体)在表达后位于细胞内，必须通B.运载体(质粒)A.核酸分子量A.疏水作用层析介质围广，是大多数基因工程蛋白纯化流程中的第一步(捕获阶段)。A.输入的工艺变量气流组织(如单向流)、不同区域压差控制(如洁净区高于非洁净区)来防止交叉含量，纯度指标通常要求达到95%以上(如RP-HPLC图谱中主峰面积占比)。B.必须完全隔绝氧气低温(如2-8C)保存，部分甚至需要冻干后超低温保存。否表达了目的蛋白(无论是否正确折叠)。解析：抗原性是指外来物质(如重组蛋白)刺激机体产生免疫B.停止生长期(衰退期)累),导致生长速率下降，这是收获重组蛋白的最佳时机。A.抗生素解析：在包涵体复性过程中，必须加入还原剂(如DTT、β-巯基乙醇)以拆分错A.糖类(如蔗糖、海藻糖)A.低于1%级),以确保人体耐受性。A.胰岛素A.关键质量属性例如搅拌桨的直径(影响混合但通常不直接影响蛋白质量)。解析：内毒素(脂多糖)是革兰氏阴性菌细胞壁成分，活性极B.发酵罐解析：贮存条件(如2-8C°、避光、低温)是为了确保药物在货架期内保持其理化二、多选题(有2个以上正确答案)解析：细胞工程包括细胞融合(如单克隆抗体)、动物细胞培养(如疫苗生产)和植物细胞培养(如次生代谢产物)等方法。原核细胞培养属于发酵工程范畴，不属解析：A级(10级)是最高洁净度级别，主要关注悬浮粒子和活微生物数；100级(ISO7级)洁净度低于A级，通常用于更广泛的区域，如B级背景下的A级A.蛋白质纯度C.蛋白质活性C.培养基解析：搅拌桨设计影响氧传质和混合；转速控制剪切力；需要精确控制参数；密封B.温度清等)以维持生长和表达。A.蛋白AD.硅胶C.水系统(如02溶解消耗碱),因此需要综合考虑。D.β-actin启动子C.扩大培养D.成品分装B.化学指标(含量、有关物质)C.活性指标(比活性)C.清洁验证靠性)、清洁验证(防止交叉污染)及分析方法确认。解析：尾气处理涉及过滤除菌(阻挡微生物)、活性炭吸附(有害气体)和压力平衡(防止倒吸或超压)。20.下列哪些属于基因工程药品的辅料?A.甘露醇B.聚山梨酯80C.硅胶管A.温度C.湿度解析：大多数蛋白药物需冷链储存(低温);部分需避光储存；一A.优化上样量B.使用保护剂(如甘氨酸)C.外源病毒解析：生物工厂的三废主要指生产过程中产生的废液、废气(滤材等);实验室废纸不属于生产三废。27.关于基因工程药品的冻干工艺(冷冻干燥),以下说法正确的有?B.需要升华干燥(一次干燥)C.需要解析干燥(二次干燥)解析：冻干过程包括预冻、一次干燥(除冰)和二次干燥(除水)。高温烘烤并非B.盐溶液(如NaCl)C.有机溶剂(如乙醇)A.水冲洗料；盐溶液用于洗脱目标蛋白(属于洗脱步骤，也A.批号A.需要在洁净环境进行B.洗涤C.浓缩C.光照解析：稳定性试验通常包括高温、高湿、光照(强制降解试C.设备台账A.微生物超标C.TOC(总有机碳)超标B.反应器解析：偶氮胶带法主要用于检测过滤芯的完整性(气泡点等)C.质量标准A.质粒载体和控制?A.温度排气速度(涉及CO2交换和气体通量)是控制环境气体分压的重要参数。C.霉菌产生的毒素不属于热原质D.内毒素在130C下性质稳定，加热不易破坏毒素耐热，必须在260C°以上干热2小时或250C以上湿热30分钟才能破坏，因D.沉淀的pH值C.病毒检查包括需氧菌、厌氧菌(细菌)、霉菌和酵母菌。病毒检查通常A.含量测定50.关于重组DNA技术中的“限制性内切酶”,以下描述正确的是?A.能识别特定的DNA序列并切割B.来源通常为微生物解析：ProteinA特异性结合抗体Fc段，需控制pH环境。低pH(如3.0)可破坏54.关于基因工程药品的“安全评估”,以下内容正确的有?解析：安全性评估关注生物安全(外源基因稳定性、免疫原性)和环境安全(防止55.在原核生物(如大肠杆菌)中表达真核蛋白时，常遇到的翻译后修饰问题包括?解析：原核细胞缺乏内质网和高尔基体，因此无法进行真核蛋白特有的糖基化修饰。二硫键和蛋白质折叠在细胞质中可能遇到氧化环境限制，需特殊处理。C.底物浓度胞处于生长期还是生产期，底物浓度(如碳氮比)影响代谢A.液体疫苗通常需冷藏(2-8C)生物活性物质(如生长因子)通常需低温冷冻保存。一次性容器(如一次性生物反解析：佐剂(如弗氏佐剂)用于动物免疫接种，目的是增强免B.肽图谱C.等电点聚焦D.铝塑组合包装(泡罩)适用于注射剂解析：防扩散主要靠物理隔绝(负压、负压排气过滤)、人员防护(隔离衣)。气A.纯度(电泳法或HPLC)B.活性(比活力)65.关于基因工程药品生产中的“交叉污染”,以下预防措施有效的有?B.加速试验(如40C/75%RH)C.低温试验(如5C)C.滤网拦截 69.基因工程药品(如蛋白药物)的“活性残留”检查通常涉及哪些方面?解析：生产过程中可能引入细胞毒素(如博来霉素)、蛋白酶(用于裂解或降解)、乙醇(用作有机溶剂)等，需检测残留。金属离子通常不直接作为活性B.标签上必须注明“禁忌症”书(说明书归入最小包装)上，标签直接接触药品，内容应精简。71.在哺乳动物细胞培养(如CHO细胞)中，以下哪些是关键的培养基成分?A.葡萄糖解析：补料分批旨在维持细胞生长，避免碳源过高抑制生长(A.核酸酶消化80.在生物反应器(发酵罐)中，下列哪些因素需要实时监控和调节?A.温度体)。常用方法包括物理灭活(如加热)、化学灭活(如加甲醛或含氯制剂)和微B.亲和层析(AC)解析：亲和层析(利用特异性配体)、离子交换层析(利用电荷差异)和反相层析 的检测?A.安全性检测异性检测通常指针对重组蛋白抗原表位的检测(如特异性抗体),虽然HCP检测A.载体蛋白(如人血清白蛋白)85.对于抗体类基因工程药品(如单克隆抗体),通常使用的提取工艺步骤包括?A.醇沉或蛋白A/G亲和层析B.酶切去除Fc片段3.在生物反应器运行期间，溶解氧(DO)浓度是一个重要的控制参数，必须保持解析：醛基化(如戊二醛交联)通过引入醛基与蛋白质氨基酸解析：发酵培养基通常采用实消法(实罐灭菌),但培养基中的某些缓冲盐或特定11.重组蛋白质药物(如胰岛素)在进行放大生产时，可以随意改变发酵罐的体积解析：放大生产必须遵循放大原则(如通气量、搅拌功率、溶氧传质系数的模拟),13.核酸类药物(如干扰素)的纯化工艺中，通常不使用乙醇沉淀作为纯化手段。解析：乙醇沉淀(盐析)是核酸纯化中经典的富集和纯化手段19.工艺用水(如注射用水)的储罐应设置呼吸器，且呼吸器应安装高效空气过滤解析：离子交换层析是基于电荷作用，降低盐浓度(离子强度解析：大多数生物制品(特别是冻干制剂)需要保存于特定的温度条件(如2-8C),因此其有效期标注需注明保存条件(如：2-8C°保存，24个月)。毒素(热原)。26.原液(粗品)经过一系列下游工艺(纯化、精制)后，杂质含量必须降低到检导原则规定的限度标准(如HCP<100ppm),而非绝对零值。解析：抗生素抗性基因本身不表达蛋白质(或表达量极低且不造成免疫问题),真正需要关注的是宿主细胞蛋白(HCP),而非抗性基因序列。解析：基因工程疫苗(如酵母表达或CHO细胞表达)是当前的主流生产方式，而基化),哺乳动物细胞具备最完善的翻译后修饰能力，解析：滤膜必须在使用前进行完整性测试(如泡点法、水扩散法),确认无孔洞或解析：重金属离子(如铅、镉)具有毒性，生物反应器中若含有重金属，反而会抑39.换液操作(更换培养基)可以显著延长高密度细胞培养的寿命。解析：基因工程药品属于生物制品，生物制品(包括基因工程解析：载体上的复制原点(复制起点)是DNA复制起始的关键序列，决定了载体解析：大多数蛋白质(包括胰岛素)在翻译后需要经过加工(如切除信号肽、形成解析：蛋白A亲和层析主要用于纯化免疫球蛋白(如抗体),而不是去除HCP。解析：杀菌灭活工序的目的是破坏(失活)发酵液中重组生物体的活性，同时尽量保留目标产物(如抗原、酶)的活性，而不是杀死所有微生物。解析：芽孢具有极强的抗热性，必须使用高温(如121C高压蒸汽)并保持足够时解析：含菌废水在排放前通常需要经过灭活处理(如加入化学试剂或紫外线),但解析：许多病毒灭活工艺(如低pH值处理)对pH值极其敏感，pH值的轻微变冷却至适宜温度(通常25-30C°左右)接入。解析：融合蛋白纯化后，通常使用特定的蛋白酶(如凝血酶、解析：纯化后的粗品通常需要进行制剂化处理